外周血PBMC的分离文档格式.doc

外周血PBMC的分离文档格式.doc

《外周血PBMC的分离文档格式.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《外周血PBMC的分离文档格式.doc（2页珍藏版）》请在冰点文库上搜索。

1.093

外周血

红细胞

粒细胞

单个核细胞

血小板

淋巴细胞

单核细胞

1.030~1.035

1.075~1.090

Ficoll：

1.077±

0.001

（PBMC）

1.092

1500rpm,20℃,30min

PBMC

红细胞粒细胞

Ficoll

稀释外周血

稀释的血浆、血小板

实验步骤

n1.采血，稀释

（外周血：

稀释液=1：

2）

n2.在离心管中加入Ficoll，沿倾斜的管壁缓缓加入稀释的外周血（Ficoll：

稀释血=1：

n3.18℃，1500r/min，离心30min

n4.轻轻吸取PBMC层移入另一试管中

n5.加足量稀释液充分洗涤，1800r/min离心5min，弃上清。

注意事项

n每毫升外周血液大约可获1×

106单个核细胞

nFicoll应适量，外周血应充分稀释

n温度直接影响到Ficoll的比重和分离效果

n在Ficoll上加入稀释外周血时，应缓慢加，以免冲散界面

n吸取单个核细胞层时，应避免吸出过多的上清液或分层液而导致血小板污染