高效液相色谱法同时测定蜜饯中5 种常见食品添加剂.docx
《高效液相色谱法同时测定蜜饯中5 种常见食品添加剂.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高效液相色谱法同时测定蜜饯中5 种常见食品添加剂.docx（10页珍藏版）》请在冰点文库上搜索。
高效液相色谱法同时测定蜜饯中5种常见食品添加剂
高效液相色谱法同时测定蜜饯中5种常见食品添加剂
汪 辉,曹小彦Ξ,陈利国,黄秀明
（长沙市食品质量安全监督检测中心,长沙410013
摘 要:
建立同时测定蜜饯中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸的反
相高效液相色谱法,用于监测蜜饯产品,提高时效性。
安赛蜜、苯甲酸、山梨
酸、糖精钠、脱氢乙酸分别在112~100μgΠmL、012~100μgΠmL、111~100
μgΠmL、612~140μgΠmL和217~100μgΠmL浓度范围内线性良好,相关系数分别
为019997、019999、019996、019998和019993,检出限分别为15、112、18、50和
20ng;平均回收率均在95%以上,相对标准偏差均小于218%。
此法样品处理简
便易行,适于同时测定蜜饯中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸。
关键词:
高效液相色谱;蜜饯;食品添加剂;甜味剂;防腐剂
中图分类号:
O657.7 文献标识码:
A 文章编号:
100020720（2007112119204
蜜饯是我国传统休闲食品,深受广大消费者喜爱。
近年来市场上的蜜饯品种和数量均有明显的增长。
蜜饯主要分为六大类:
蜜饯类、果脯类、凉果类、话果类、果丹（饼类、果糕类。
槟榔作为湖南特产之一,加工程序与传统蜜饯相似,具有健齿、消除口腔异味、提神提气、去寒气、助消化、解酒等功效,有“绿色口香糖”之称。
但蜜饯和槟榔产品质量问题也较突出,无论是从地区性的产品抽捡结果或省、市甚至国家级的抽捡结果,其产品合格率都不高,不合格原因主要是超范围或超量使用食品添加剂[1]。
蜜饯中常用的食品添加剂主要有糖精钠（SA、乙酰磺胺酸钾（安赛蜜,AK、苯甲酸（BA、山梨酸（SOA和脱氢乙酸（DHA。
目前,测定食品中防腐剂和甜味剂的方法主要有:
薄层色谱法（TLC[2]、高效液相色谱法（HPLC[3~6]、气相色谱法（GC[7,8]等。
其中以HPLC法最为常用。
但大多数分析方法只能测定上述物质中的1种或少数2~3种,能够同时测定3种以上物质的方法较少,尤其是上述几种添加剂与脱氢乙酸同时检出的方法甚少。
因此找到一种准确、快速测定蜜饯中食品添加剂的方法是有必要的。
本文建立了同时测定蜜饯中上述5种食品添加剂含量的反相高效液相色谱法。
此法操作简便、快速、灵敏、准确,样品处理简便易行,用于监测蜜饯中食品添加剂,保护消费者的健康。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
岛津LC210AVP型（双泵高效液相色谱仪配紫外检测器和柱温箱,超声处理器;TU21900双光束紫外可见分光光度计;超纯水处理器;安赛蜜（纯度99%,迪马公司;苯甲酸和糖精钠（均为110mgΠmL,国家标准物质研究中心;山梨酸（纯度99%国家标准物质研究中心;脱氢乙酸（纯度99%,乙酸铵（纯度≥98%和甲醇（HPLC专用（均购于国药集团化学试剂有限公司。
1.2 色谱条件
色谱柱为DiamonsilC
18
色谱柱（150mm×4.6mmi.d.,5μm;柱温为40℃;流速为1mLΠmin;流动相为V（0.02molΠL乙酸铵∶V（甲醇=95∶5;检测波长为230nm;进样量20μL。
1.3 标准溶液的配制
准确称取安赛蜜、山梨酸、脱氢乙酸对照品各100mg于100mL容量瓶中,加水溶解并稀释至
Ξ收稿日期:
2006211210;修订日期:
2007201215作者简介:
汪 辉（1983-,男,助理工程师
刻度,摇匀,作为混合标准贮备溶液。
苯甲酸和糖精钠均为110mgΠmL。
1.4 标准曲线的制备
分别吸取110mgΠmL安赛蜜、山梨酸、脱氢乙酸混合标准贮备溶液,110mgΠmL苯甲酸标准溶液,110mgΠmL糖精钠标准溶液011、012、013、014、015、016mL,分别置于10mL容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,经0145μm的水系滤膜过滤,按色谱条件进行测试（见图1。
以各组分峰面积为纵坐标,质量浓度为横坐标,绘制标准曲线
。
图1 标准溶液的色谱图
Fig.1 Chromatogramofastandardsolution
1-安赛蜜;2-苯甲酸;3-山梨酸;4-糖精钠;5-脱氢
乙酸
1.5 样品处理
取粉碎均匀的样品1.0g,准确至0.0001g,
加入适量的超纯水超声1h,定容至100mL。
取上
清液,经0.45μ
m的水系滤膜过滤,测定滤液中各组分得色谱图（见图2。
2 结果与讨论2.1 色谱条件的选择
2.1.1 检测波长的选择 用紫外可见分光光度计
在190~400nm之间对各组分的标准溶液进行光谱扫描,吸收光谱如图3。
从图中可以看出,安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸的最大吸收波长分别为226.0、224.5、253.5、201.5、230.0nm。
5个组分中有3个组分在230nm处有较高的灵敏度,由于流动相在低于210nm的波长下背景的紫外吸收较高,253nm处其它4个组分几乎无吸收,故选择中间波长230nm为检测波长
。
图2 样品的色谱图
Fig.2 Chromatogramofasample
1-安赛蜜;2-苯甲酸;3-山梨酸;4-糖精钠;5-脱氢
乙酸
图3 标准溶液的光谱图
Fig.3 Absorptionspectaofthestandardsolution1-安赛蜜;2-苯甲酸;3-山梨酸;4-糖精钠;5-脱氢
乙酸
2.1.2 流动相的优化 对不同流动相进行了多次
实验,最后确定按不同比例进行实验,结果发现
当V（0.02molΠL乙酸铵∶V（甲醇=95∶5时,5种物质能够完全分离。
苯甲酸和山梨酸的pKa值分
别为4.19和4.76[9]
表明这两种物质在酸性条件下能够很好地分离出来,安赛蜜和糖精钠在酸性流动相也能一一分离出,但脱氢乙酸在酸性流动相中分离效果不佳,峰形拖尾很严重,尤其当pH<4.0时,脱氢乙酸不出峰。
因此最后选择不调pH,使其在乙酸铵本身的弱酸性条件下,将这5种物质一一分离出来,分离度≥1.5,且峰形尖锐,无拖尾现象。
2.2 线性范围与检出限
在实验条件下,用峰面积比对质量浓度绘制曲线,所有分析物在其之间均具有良好的线性关
系,以基线噪声3倍峰面积对应的安赛蜜、苯甲
酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸作为检出限,回归
方程式及相关系数均列于表1。
表1 回归方程、线性范围及其检出限
Tab.1 Regressionequations,linearrangesanddetectionlimitsofSA,AK,BA,SOA,DHA组分回归方程式线性范围ρΠ（μgΠmLr检出限Πng
安赛蜜A=3.23ρ-7925.41.2~1000.999715
苯甲酸A=3.51ρ+3421.30.2~1000.99991.2
山梨酸A=5.79ρ+5926.81.1~1000.999618
糖精钠A=2.24ρ+6120.46.2~1400.999850
脱氢乙酸A=7.09ρ+2903.82.7~1000.999320
2.3 精密度实验
取5种组分的混合标准样品做精密度实验,按上述色谱条件及实验方法对中间质量浓度0103mgΠmL的标准样品进行测定,重复进样10次,RSD均在1.0%~2.8%之间,说明该方法具有较高的精密度。
2.4 标准加入回收实验
采用加标测定回收率。
取同一蜜饯样品6份,分别加入一定量的5种混合标准使用液。
测定结果（见表2,已去本底值表明,平均回收率基本在95%以上,完全可以满足分析方法的要求。
2.5 样品测定
用上述方法对市售的几种蜜饯类食品进行了测定,并与传统方法进行了比较。
传统方法中,安赛蜜按GBΠT5009.14022003方法进行测定,苯甲酸、山梨酸按GBΠT5009.2922003方法进行测定,糖精钠按GBΠT5009.2822003方法进行测定,脱氢乙酸采用HPLC法[10]进行测定。
测定结果见表3。
其结果表明,上述方法同时测定蜜饯中5种常见添加剂与用传统方法对照,测定的结果是基本吻合的,具有很好的一致性。
由此可见,用上述方法同时测定蜜饯中5种常见添加剂是一种行之有效的方法,同时,也可以应用于其它食品中的添加剂测定。
表2 标准加入回收率（n=10
Tab.2 RecoveriesofSA,AK,BA,SOA,DHA
组分
添加量
mΠmg
实测值
mΠmg
回收率
Π%
平均回收率
Π%安赛蜜0.1000.093593.5
0.2000.191295.696.1
0.4000.396899.2
苯甲酸0.1000.095395.3
0.2000.197698.897.6
0.4000.197498.7
山梨酸0.1000.096396.3
0.2000.2022101.198.9
0.4000.396899.2
糖精钠0.1000.097397.3
0.2000.197498.798.8
0.4000.4012100.3
脱氢乙酸0.1000.095395.3
0.2000.192296.195.9
0.4000.384896.2
表3 样品测定结果（n=6
Tab.3 Determinationresultsofsamples
样品编号样品名称
测定值wΠ（gΠkg
安赛蜜
本法
传统
方法
苯甲酸
本法
传统
方法
山梨酸
本法
传统
方法
糖精钠
本法
传统
方法
脱氢乙酸
本法
传统
方法
1槟榔1.021.010.160.172.172.154.374.381.231.252话梅2.052.020.110.110.630.621.081.081.531.533蜜金桔2.432.400.270.260.530.541.691.700.690.704白糖杨梅1.751.750.100.101.731.731.221.210.500.525苹果脯2.332.310.350.342.882.860.350.351.661.696柠檬李2.372.350.130.120.540.550.990.980.350.357山楂糕3.2123.170.320.331.021.030.430.440.991.01
参考文献
[1] 沙纪辉,陈松青,薛洪弟等.海峡预防医学杂志,
2006,13（2:
56
[2] 王 萍.环境与健康杂志,1997,14（4:
171
[3] 聂西度,谢华林,彭书萍等.分析化学学报,2005,
21（2:
231
[4] SureshChandraRastogi,ClausZachariae,JeanneD
Johansenetal.JChromatogrA,2004,1031:
315
[5] AMYJaber,HAAlSherife,MMAlOmarietal.J
PharmaceutandBiomedAnal,2004,36:
341[6] JDvoraka,RHajkova,LMatysovaetal.JPharmaceut
andBiomedAnal,2004,36:
625
[7] MGonzalez,MGallego,MValcarcel.JChromatogrA,
1998,823:
321
[8] 庞楠楠,迪丽努尔・马力克,牛 蓓.分析试验室,
2005,24（3:
48
[9] 陈青川,于文莲,王 静.色谱,2001,19（2:
106
[10] 中国食品添加剂生产应用工业协会.食品添加剂分
析检验手册.北京:
中国轻工业出版社,1999.317
Simultaneousdeterminationoffivefamiliarfoodadditivesinsuccadebyhighperformanceliquidchromatography
WANGHui,CAOXiao2yan3,CHENLi2guoandHUANGXiu2ming（ChangshaCenterofSupervision&InspectiononFoodQualitySafety,Changsha410013,FenxiShiyanshi,2007,26（11:
119~122
Abstract:
EstablishingahighperformanceliquidchromatographicmethodwithphotodiodearraydetectorfordeterminingthecontentsofSA,AK,BA,SOAandDHAinsuccade,whichwasusedfordetectingsuccadeproduction,improvingtime2efficiencyandsafeguardingthehealthofconsumers.Thelinearwere112~100μgΠmL（r=019997forSA,012~100μgΠmL（r=019999forAK,112~100μgΠmL（r=019996forBA,612~140μgΠmL（r=019998forSOAand217~100μgΠmL（r=019993forDHA,respectively.DetectionlimitsofSA,AK,BA,SOAandDHAwere15,1.2,18,50and20ngrespectively.Theaveragerecoveriesofthesecomponentswereabove95%andtheprecisionwaslessthan218%.Themethodwassimple,rapid,sensitive,accurateandthedisposalofsamplesaresimple,convenientandfeasible,whichwassuitableforthedeterminationofSA,AK,BA,SOAandDHAinsuccade.
Keywords:
High2performanceliquidchromatography;Succade;Foodadditive;Sweetener;Preservative
升级会员 