湖南农大生科院微生物复习资料Word文档格式.docx
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以及以菌产沼气等生物能源技术。
5.简述科特法则
是证明某微生物是某疾病病原菌的四项要求
1.在患病动物中存在可疑病原有机体，而健康动物中没有；
2.可疑有机体可从患病动物体内分离并能进行分离纯培养；
3.纯培养中的可疑有机体细胞，能引起健康动物发病；
4.可疑有机体可被再次分离，并且和最初分离的有机体完全一致。
6.论述微生物学与人类实践的关系
原核微生物
1、通常链霉菌可通过以下方式进行繁殖：
（B）
A、出芽繁殖B、分生孢子
2、Bacillussubtilis在生长发育的一定时期能形成：
（B）
A、孢囊B、芽孢C、伴孢晶体D、子实体
3、下列微生物属于原核微生物的是：
（A）
A、细菌B、霉菌D、酵母菌D、单细胞藻类
4、自然界中分离到的细菌，形态各种各样，其中种类最多的是：
（D）
A、球菌B、螺旋菌C、放线菌D、杆菌
5、细菌细胞中的P素贮藏颗粒是：
A、羧酶体B、淀粉粒D、异染粒
6、放线菌的菌体呈分枝丝状体，因此它是一种：
（C）
A、多细胞的真核微生物B、单细胞真核微生物
C、多核的原核微生物D、无壁的原核微生物
7、在细菌细胞中能量代谢场所是：
（A）
A、细胞膜B、线粒体C、核蛋白体D、质粒
8、细菌芽孢抗热性强是因为含有：
A、聚–ß
-羟基丁酸B、2,6-吡啶二羧酸
9、G+细菌细胞壁结构为一层，含的特有成分是：
C）
A、脂多糖B、脂蛋白C、磷壁酸D、核蛋白
10、革兰氏阴性细菌细胞壁中的特有成分是：
（D）
A、肽聚糖B、磷壁酸C、脂蛋白D、脂多糖
11、细菌的芽孢是：
A、一种繁殖方式B、细菌生长发育的一个阶段
12、Escherichia细菌的鞭毛着生位置是：
A、偏端单生C、偏端丛生D、周生鞭毛
13、枝原体的细胞特点是：
（C）
C、无细胞壁的原核微生物
14、蓝细菌中进行光合作用的场所是：
A、羧酶体B、类囊体C、藻胆蛋白体
15、下列微生物中能通过细菌滤器，并营专性寄生的是：
A、苏云金杆菌B、蛭弧菌C、衣原体
16、下列细菌中能产芽孢的种是：
A、BacillussubtilisB、Staphlococcusaureus
二．填空题
1、脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁__外壁__层的主要成分，它由0-特异侧链；
核心多糖；
类脂A三部分构成。
2、测定细菌、放线菌的大小，一般以_微米_为单位，而测定病毒的大小则以纳米_为单位。
3、芽孢是芽孢细菌在生长发育过程中形成的特殊的___休眠___细胞形态，有利于细菌渡过__恶劣环境__。
它是由细菌营养细胞中_部分原生质浓缩失水_而成。
4、放线菌个体为__分枝丝状___体，根据菌丝在固体培养基上生长的情况，可以分为_基内菌丝；
气生菌丝；
孢子丝
5、好氧性芽孢杆菌的芽孢直径多数不超过菌体宽度，梭菌的芽孢多数比菌体宽度___大___，呈___鼓槌状或梭状_________。
6、细菌细胞除基本结构外，还有诸如_鞭毛；
芽孢；
荚膜和粘液等特殊结构。
25、抗生素的产生菌主要是__放线___菌类，其中50%以上是由___链霉___菌属微生物产生的。
26、革兰氏阳性细菌细胞壁独有的化学成分是_磷壁酸_，而革兰氏阴性细菌细胞壁独有的化学成分是__脂多糖___。
30、脂多糖是革兰氏__阴性___细菌细胞壁____外壁___层的主要化学成分。
31、革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌两者细胞壁在组成成分上主要差异为前者__磷壁酸___含量高，后者_脂类___含量高。
32、蓝细菌区别于其他微生物的一个重要特征是细胞内含有___光合色素___，能进行__产氧光合___作用。
但它仍属于_原___核微生物。
33、放线菌菌落形状一般为__圆形_____，表面呈__干燥细致的粉末状或茸毛状____、而霉菌菌落表面常呈__绒毛状或棉絮状______，霉菌菌落如呈粉末状者__不及__放线菌细腻致密。
34、放线菌对国民经济的重要性，在于它们是__抗生素____的主要产生菌，许多临床和生产上有使用价值的抗生素如_链霉素；
氯霉素；
井岗霉素；
土霉素（四环素，红霉素，卡那霉素）_等等都由放线菌产生。
35、用溶菌酶处理G+细菌获得的去壁完全的球状体，称为_原生质体_。
37、肽聚糖双糖亚单位是由_N-乙酰葡萄糖胺；
N-乙酰胞壁酸_，_N-乙酰胞壁酸上的四肽链_和肽间桥_组成。
38、在液体培养基中，放线菌常以__菌丝断裂后的片断形成新的菌丝体的方式繁殖，工业上的__液体发酵____就是利用这一方式进行增殖的。
17.G-细菌染色是红色，G+细菌染色是紫色。
18.三域学说包括的三域为：
古菌域（Archaea）、细菌域（Bacteria）和真核生物域（Eucarya）
三、名词解释
1.基内菌丝
生长在固体培养基内，主要功能为吸收营养物，故亦称营养菌丝。
2.气生菌丝
由基内菌丝长出培养基外伸向空间的菌丝称为气生菌丝。
3.菌落
细菌在固体培养基上生长发育，几天即可由一个或几个细胞分裂繁殖聚集在一起形成肉眼可见的群体，称为细菌群落
4.菌苔
细菌在固体培养基接种线上由母细胞繁殖长成的一片密集的具有一定形态结构特征的细菌菌落。
5.L型细菌
指那些实验室或诉诸体内通过自主突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺损菌株。
四、问答题
1.在无电子显微镜的情况下，用哪些方法来判断某种细菌是否属于有鞭毛的菌?
（1）通过特殊的鞭毛染色法,使鞭毛加粗后在光学显微镜下可见；
（2）在暗视野中观察悬滴标本中细菌运动情况
（3）在固体培养基中穿刺接种某一细菌，如果在其穿刺线周围有混浊的扩散区，说明该菌具有扩散能力,即可推测其存在着鞭毛，反之则无鞭毛
2.试举三个实例来说明，即使不用显微镜也可证明在我们的日常生活和环境中，到处有细菌活动着。
夏天饭菜变馊；
低浓度黄酒变酸；
湖泊的富营养化
3.试论放线菌与对人类实践的密切关系。
放线菌与人类的关系极其密切，绝大多数属于有益菌，对人类健康的贡献尤为突出。
至今已报道过的近万种抗生素中，约70%有放线菌产生，近年来筛选到得许多新的生化药物多数是放线菌的此生代谢产物，包括抗癌剂、酶抑制剂、抗寄生虫剂、免疫抑制剂和农用杀虫剂等。
放线菌还是许多酶，微生物等的产生菌。
弗兰克氏菌属对非豆科植物的共生固氮具有重大作用。
此外，放线菌的甾体转化，石油脱蜡和污水处理中也有重要作用。
由于许多放线菌具有极强的分解纤维素、石蜡、角蛋白、琼脂和橡胶等的能力，故他们在环境保护、提高土壤肥力和自然界物质循环中起着重大作用。
只有少数放线菌能引起人和动植物病害。
4.革兰氏染色的原理及操作过程：
原理：
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；
而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
而阳细菌则仍然保留最初的紫色。
操作过程：
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：
1）涂片固定。
2）将玻片置于玻片搁架上，加草酸铵结晶紫染色液染色，倾去染色液，用自来水小心的冲洗。
3）加碘液覆盖涂面染约1到2分钟，水洗
4）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，重复2到3次立即水洗以终止脱色。
5）加沙黄染色液染2到3分钟后，自来水冲洗。
用吸水纸轻轻吸干。
干燥，镜检
5.芽孢染色的基本方法与原理。
细菌的芽孢具有厚而致密的壁，透性低，不易着色，若用一般的染色法只能是菌体着色而芽孢不着色，芽孢染色法就是根据芽孢既难以染色而一旦染色后又难以脱色这一特点而设计的，所有的芽孢染色法都基于同一个准则：
除了用着色力强的燃料外，还需要加热，以促使芽孢着色，再使菌体脱色，而芽孢上的染料则难以渗出，故让保留原来的颜色，然后用对比度强的染料队菌体进行复染，使菌体和芽孢呈现出不同的颜色，因而能更明显的衬托出芽孢，便于观察。
方法：
1）制备菌液：
加1到2滴自来水与小试管中，用接种环从斜面上挑取2到3环的菌苔于试管中并充分打匀，制成浓稠的菌液。
2）加染色液：
加5%孔雀绿染色液2到3滴于小试管中，用接种环搅拌使染色液与菌液充分混合
3）加热：
将次试管浸浴在沸水浴中加热15到20分钟
4）涂片：
用接种环从使馆底部挑取数环菌液于洁净的玻片上。
并涂成薄膜。
5）固定：
将玻片通过微火3次
6）脱色：
用水洗，直至流出的水没有孔雀绿颜色为止
7）复染：
加沙黄染色液，染2~3分钟后，倾去染色液，不用水洗，直接用吸水纸吸干
8）镜检：
用油镜观察
结果，芽孢为绿色，菌体为红色。
6.试论平板直接计数法的基本原理、实验操作
答：
先将待测的微生物样品按比例的作一系列的稀释（通常为10倍系列稀释法），在吸取一定量某几个稀释度的菌悬液于无菌培养皿中（或凝固的无菌平板培养基的表面），再及时倒入融化且冷却至45°
C左右的培养基，立即充分摇匀，水平静置待凝。
经培养后将各平板中记得的菌落数的平均值换算成单位容积的含菌量，在乘以样品的稀释倍数，即可测得原始菌样中的单位容积所含的活细胞数。
实验操作：
1：
融化培养基：
先将牛肉膏胨琼脂培养基加热融化，并置50°
恒温水浴锅中保温备用。
2：
编号：
取6~8只无菌试管编号，在取10套无菌培养皿以此编号，各稀释浓度做3个重复测定平板，留下一个平板做空白对照。
3：
分装稀释液：
以无菌操作法5毫升移液管分别精确吸取4.5ml无菌水于上述各编号试管中。
4：
稀释菌液：
将菌液进行梯度稀释
5：
转移菌液：
分别用1ml无菌移液管精确吸取10ˉ410ˉ510ˉ6稀释菌液各0.2ml，加至相应编号的无菌培养皿中
6：
倒培养基液：
菌液移入培养皿后立即倒上融化并冷却至50°
左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（导入量12到15ml）
7：
摇匀平板：
将平板快速的前后左右轻轻的晃动或者顺时针或者逆时针摇匀，待均匀的分布后静置待凝。
8：
倒置培养：
待完全凝固后，置于37°
恒温箱中培养
9：
培养48小时后取出平板，选出菌落数在30到300个/皿范围内的各皿，计算每皿的菌落数并记录结果
10：
清洗器皿：
将计数后的平板在沸水浴中煮5~10分钟后清洗晾干。
7、芽孢为什么具有较强的抗逆性?
芽孢的含水量低,特别是自由水远低于营养细胞,使核酸和蛋白质不易变性。
芽孢的酶组成型与细胞的酶组成型有差别,芽孢只含有少量酶,并处于不活跃状态。
含有2,6-吡啶二羧酸。
芽孢壁厚。
芽孢中含硫氨基酸高。
8、细菌的芽孢有何实践重要性？
芽孢的有无在细菌鉴定中是一项重要的形态指标。
芽孢的有无有利于这类菌种的筛选和保藏。
由于芽孢有很强的耐热性和其他抗性，因此是否能杀灭一些代表菌的芽孢就成了衡量各种消毒灭菌措施的主要指标。
9、试述细菌荚膜与生产实践的关系？
有利的一面，可从荚膜中提取胞外多糖，用于石油开采，印染，食品等工业中；
在污水生物处理中可利用产生菌胶团的细菌分解和吸附有害物质。
不利的一面，常使糖厂的糖液、牛乳、酒类、饮料、面包等食品发粘变质。
10、比较原生质体，球状体，L型细菌和支原体的异同。
原生质体：
在人工条件下用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制细胞壁的合成后,所留下的仅由细胞膜包裹的脆弱细胞,一般由G+菌形成。
球状体：
用人工方法去壁不完全所留下的部分，一般由G-所形成。
L型：
在某些环境条件下自发突变形成无细胞壁的缺壁细菌。
支原体：
自然界长期进化中形成的无细胞壁的细菌。
真核微生物
1.毛霉Mucor和根霉（Rhizopus）的无性繁殖产生（A）。
A.内生的孢囊孢子B.外生的厚垣孢子
2.青霉（Penicillium）和曲霉（Aspergillus）的无性繁殖产生（B）。
A.外生的孢囊孢子B.外生的分生孢子
3.指出错误的回答，真菌的有性孢子有：
（B）。
A.卵孢子B.孢囊孢子C.子囊孢子D.担孢子
4.酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae）的无性繁殖是：
（B）。
A.裂殖B.芽殖C.假菌丝繁殖D.子囊孢子繁殖
5.酿酒酵母菌的有性孢子是：
（B）。
A.卵孢子B.子囊孢子C.担孢子D.无有性孢子
6.蘑菇（Agaricus）的有性孢子是：
（A）。
A.外生的担孢子B.外生的分生孢子
7.子囊孢子总是：
A.单倍体B.二倍体C.a或b兼有
8.指出错误的回答，担孢子是：
A.单倍体B.大多数都是内生的
9.酵母菌在分类上属于：
（C）。
A.子囊菌亚门B.担子菌亚门
C.子囊菌亚门和担子菌亚门D.接合菌亚门
10.寄生真菌靠吸器吸收养料，吸器存在于：
（D）。
A.寄主体外表上B.寄主细胞外表上
C.寄主细胞间隙中D.寄主细胞里面
11.指出正确的回答，在真菌有性生殖中，两配子囊交配后可产生：
A.粉孢子B.子囊孢子C.接合孢子
D.子囊孢子或接合孢子
12.指出错误的回答，曲霉菌的形态结构有：
（D）。
A.足细胞B.分生孢子梗C.小梗D.副枝
13.酵母菌细胞壁中含有：
A.甘露聚糖B.葡聚糖C.A和BD.几丁质
14.在担子菌亚门真菌中，担孢子的形成在（A）后。
A.体细胞配合B.锁状联合的形成
C.产囊丝钩的形成D.减数分裂
二、填空题
1.真菌的有性孢子种类有_卵孢子，接合孢子，子囊孢子和担孢子
2.酵母菌的无性繁殖方式主要有_芽殖和裂殖。
3.构成丝状真菌营养体的基本单位是_菌丝_。
4.丝状真菌的无隔菌丝是由_单个_细胞组成，有隔菌丝是由_多个细胞组成。
5.真菌菌丝有两种类型，低等真菌的菌丝是_无横隔膜的菌丝_，高等真菌的菌丝是_有横隔膜的菌丝
6.真菌生长在基质内的菌丝叫_基内菌丝_，其功能主要是_吸收营养物质_，伸出基质外的菌丝叫_气生菌丝_，其功能主要是_转化成繁殖菌丝产生孢子_。
7.真菌子囊果的种类有_闭囊壳，子囊壳和子囊盘_三种。
8.真菌菌丝的变态体有厚垣孢子，吸器，菌环和菌网，附着枝和附着胞，匍匐枝和假根，菌核，子座，菌索等。
9.在农业生产中，利用真菌生产出的杀虫农药有_白僵菌等_。
10、丝状真菌细胞壁主要成分是几丁质，酵母菌细胞壁的主要成分是葡聚糖和甘露聚糖
1.分生孢子
一些真菌在进行无性繁殖时，在菌丝分枝顶端的产孢细胞（或分生孢子梗）上分割或缢缩而形成的单个或成串的孢子。
2.匍匐枝（匍匐菌丝）
毛霉目的一些真菌，在基质上形成一种节段的跳跃菌丝。
3.同宗配合
某些真菌，其有性生殖发生在同一个菌体中，是一种自身可孕的结合方式。
4.锁状联合
在某些担子菌的次生菌丝上，在菌丝细胞隔膜处外面，形成的一种桥接状的菌丝结构
5.半知菌
一些真菌个体发育时没有或没有被发现有性阶段，只有无性阶段，对这类真菌，人类只了解其生活史中的一半，故叫半知菌。
1.试述霉属与人类实践的密切关系
霉属在自然界中分布非常广泛，与人类关系密切，在食品加工中具有重要作用。
此外，霉属在土壤中的有机质分解中起着重要的作用。
在农业生产上，有些霉可寄生于昆虫的体内，使昆虫致病并死亡。
因此可用于害虫的防治。
但是，霉菌也有对人类有害的一面，许多霉菌可引起农产品、纺织品和其他工业产品的发霉。
由于被霉菌污染使食品发生腐败变质。
此外，有些霉菌可产生毒素，使人畜生病中毒。
2.试述血球板技术的基本原理与方法
将经过适当稀释的菌悬液（或孢子悬液）放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数。
由于计数室的容积是一定的（0．1mm2），所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。
由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和，故又称为总菌计数法。
血球计数板，计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上16或25，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数。
病毒与亚病毒
1.病毒的大小以（B）为单位量度。
A.mB.nmC.mm
2.E.coliT4噬菌体的典型外形是：
A.球形B.蝌蚪形C.杆状D.丝状
3.病毒壳体的组成成份是：
A.核酸B.蛋白质C.多糖D.脂类
4.病毒囊膜的组成成分是：
A.脂类B.多糖C.蛋白质
5.病毒含有的核酸通常是：
A.DNA和RNAB.DNA或RNAC.DNAD.RNA
6.最先发现病毒的是：
A.巴斯德B.柯赫C.伊万诺夫斯基D.吕文虎
7.CPV是（B）
A.颗粒体病毒B.质多角体病毒C.核多角体病毒
8.噬菌体是专性寄生于（A）的寄生物。
A.细菌B.酵母菌C.霉菌
9.病毒的分类目前以（C）为主。
A.寄主B.形态C.核酸
10.最先提纯的结晶病毒是：
A.烟草花叶病毒B.痘苗病毒C.疱疹病毒D.流感病毒
11.在溶源细胞中，原噬菌体以（C）状态存在于宿主细胞中。
A.游离于细胞质中B.缺陷噬菌体C.插入寄主染色体
12.溶原性细菌对（C）具有免疫性。
A.所有噬菌体B.部分噬菌体C.外来同源噬菌体D.其它噬菌体
1烈性噬菌体入侵寄主的过程可分为_吸附，侵入，复制，组装，释放等五个阶段。
.
2.TMV病毒粒子的形状为_杆状_，所含核酸为__ssRNA。
3.T4噬菌体感染寄主细胞依靠尾鞘收缩将__核酸（DNA）注入寄主细胞。
4.一种病毒只含一种核酸，即__DNA或__RNA；
植物病毒多为__RNA病毒；
噬菌体多为__DNA病毒。
5.组成壳体的壳粒基本上有两种排列方式：
DNA病毒一般为_二十面对称，RNA病毒一般为螺旋对称。
6.病毒结晶含有_蛋白质_和核酸__两种成分.
7.烈性噬菌体以_核酸复制_进行繁殖，从生长曲线上可以将其分为潜伏期，裂解期（突破期），平稳期（最大量期）等三个时期。
8.朊病毒是__羊骚痒症因子，它是一种_只有侵染性蛋白质_的病毒。
9.病毒同__细胞生物之间的最主要区别是：
病毒侵入细胞后，向寄主细胞提供_遗传_物质，利用寄主细胞的合成_系统进行复制_。
10.卫星病毒是依赖_辅助病毒_进行复制的一种小的_RNA_病毒
四、名词解释
1.噬菌斑在双层平板固体培养基上，释放出的噬菌体引起平板上的菌苔点性感染，在感染点上进行反复的侵染裂解形成透明斑，称噬菌斑.
2.噬菌体是侵染细菌，放线菌的病毒，具有一般病毒的特征。
3.温和噬菌体有些噬菌体在侵入细菌后，并不像烈性噬菌体那样立即大量复制繁殖，而是将它们的核酸整合在寄主染色体上，同寄主细胞同步复制，并传给子代细胞，寄主细胞不裂解，这类噬菌体称为温和噬菌体。
4.烈性噬菌体噬菌体侵入细菌后，在细胞内进行复制，产生大量新的噬菌体粒子，并导致宿主迅速裂解的噬菌体。
5.原噬菌体，整合在溶源细胞染色体上的噬菌体核酸称为原噬菌体，或前噬菌体。
6.类病毒，是含有侵染性RNA分子，没有蛋白质外壳的一类植物病毒。
7.一步生长曲线，以培养时间为横坐标，噬菌斑数为纵坐标所绘制的曲线，用以测定噬菌体侵染和成熟病毒体释放的时间间隔，并用以估计每个被侵染的细胞释放出来的噬菌体粒子数量的生长曲线称为一步生长曲线。
微生物营养
1、大多数微生物的营养类型属于：
A.光能自养B.光能异养C.化能自养D.化能异养
2、蓝细菌的营养类型属于：
（A）
A．光能自养B.光能异养C．化能自养D.化能异养
3、碳素营养物质的主要功能是：
A.构成细胞物质B.提供能量C.A，B两者
4、占微生物细胞总重量70%-90%以上的细胞组分是：
A.碳素物质B.氮素物质C.水
5、能用分子氮作氮源的微生物有：
A.酵母菌B.蓝细菌C.苏云金杆菌
6、腐生型微生物的特征是：
A.以死的有机物作营养物质
B.以有生命活性的有机物作营养物质
C.A，B两者
7、自养型微生物和异养型微生物的主要差别是：
A.所需能源物质不同
B.所需碳源不同
C.所需氮源不同
8、基团转位和主动运输的主要差别是：
A.运输中需要各种载体参与
B.需要消耗能量
C.改变了被运输物质的化学结构
9、单纯扩散和促进扩散的主要区别是：
（C）
A.物质运输的浓度梯度不同
B.前者不需能量，后者需要能量
C.前者
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