中国农科院分子生物学考博试题资料下载.pdf

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3.当条件转为正常的时候，有stpT基因编码的酶催化作用下，迅速降解ppGpp，应急应答反应停止。

3.DescribethemechanismsoftranspositionforTn10indetail（16,530）.T10的转座属于非复制型转座。

转座单元作为实体，直接从一个位点转到另一个位点，并且是保守的。

在转座酶的作用下，TN10释放，同时，靶序列上造成交错断裂，然后转座子与单链末短结合，填补缺口后接完成了转座。

4.Trytodistinguishmethylatedandnonmethylatedplease（21347）?

5.WhatreactioncanexplainAgrobacteriuminfectionsucceedsonlyonwoundedplants（P594,Cha18）?

6.TrytoexplainthepropertiesofthemonomericG-proteinviaexampleplease（suchasRasorRan）（RasP929,RanP257（8）,EF-TuP164（6）,RanP982）?

7.Whatproteinsaregiventhroughprocessingofretroviralgenes?

（17,555）主要产生三种蛋白：

Gap多聚蛋白质，Pol多聚蛋白质和Env多聚蛋白质。

其中，前两种由全长mRNA翻译而成，而后者是病毒通过剪接产生一种亚基因组的信使RNA，然后将其翻译成Env产物。

gap基因产物组成病毒颗粒的核蛋白核心，pol基因产物的主要功能是核酸合成和重组，而env基因的主要是编码病毒颗粒的外壳蛋白。

8.HowtoinitiateeachOkazakifragment?

（14，444）DNA的复制时半不连续的方式合成的。

在DNA的合成是从N端-C端合成的，然而，DNA的双链的方向刚好相反。

所以，前导链在复制过程中可以连续复制，而后随链的复制要从N端-C端，必须一段一段的复制，这些一段一段的复制片断就叫冈崎片断。

9.Whatisconjugation?

（13）Conjugationisaprocessinwhichtwocellscomeincontactandexchangegeneticmaterial.Inbacteria,DNAistransferredfromadonortoarecipientcell.Inprotozoa,DNApassesfromeachcelltotheother.接合是两个细胞相互交流交换遗传物质的一个过程。

在细菌的接合是DNA从供体菌到受体菌。

原生动物中的接合是DNA从一个细胞转到另一个细胞。

10.Howtochange（form）thestateoflysisandlysogenyforphage（indetail）?

（12，395）答：

当细菌生长在丰富培养基上时，降解c蛋白的宿主蛋白酶是有活性的，于是PRE的作用被停止，不能通过PRE使基因c合成阻抑物：

另外，此时Cro蛋白在OR3处结合，停止了在PRM处开始的溶源维持回路，也不能合成阻抑物。

即这时候Cro蛋白占据了操纵子，所以，此时噬菌体进入裂解周期。

当细菌处于饥饿状态时，降解c蛋白的宿主蛋白酶是没有活性的，于是，c蛋白通过PRE使基因c合成阻抑物：

另外，Cro蛋白在OR1和OL1处结合，这样立即伴随着阻抑物在在OR2和OL2处的协同结合，从而关闭了Cro蛋白的合成并开始了经由PRM进行阻抑物的合成。

即这个时候阻抑物占据了操纵基因，所以噬菌体进入溶源化。

11.GivetheexampletodescribeRNAinterference（RNAiandmicroRNAetc）.（11）答：

利用RNAi技术研究p53基因表达。

以质粒为载体，介导体外合成具有与p53基因目的区域同源的DNA片段，通过脂质体将携带此片段的质粒载体导入肿瘤细胞，利用质粒载体U6-RNA启动子不断在体内产生21-23nt的siRNA,在体内，它被组装成无活性的蛋白复合体，即RNA诱导的沉默复合体，在APT作用下，双链siRNA解链成单链RNA，在它的指导下，核酸酶识别并切割与siRNA互补的P53基因，使表达量下降或者失去，达到沉默的作用，从而研究其功能。

12.Attenuation（衰减作用）canbecontrolledbywhat（indetails）?

（10，360）答：

衰减作用可以被翻译所控制。

色氨酸操纵子的前导区有一个由14个密码子组成的可读框，其中包含编码色氨酸的两个密码子。

当存在色氨酸时候，前导序列被翻译，使得衰减子形成法家结构，这个发夹结构引起转录终止。

当不存在色氨酸的时候，核糖体停在色氨酸密码子处，衰减子的二级结构阻止了发夹结构的生成，转录得以继续。

13.Howdoesglucoseinhibitthetranscription（bycAMP,CAP）?

（10，11，344）答：

细菌对各种潜在的碳源具有潜在的偏好，当葡萄糖作为一种可以用的能量来源时相对其他糖类，它被优先利用。

当大肠杆菌培养基中发现葡萄糖和乳糖的时候，葡萄糖优先进入细胞，使单糖磷酸转移酶系统（PTS）中的蛋白质AGlc脱磷酸化，然后它结合乳糖通透酶，乳糖不能进入细胞，于是阻抑物关闭操纵子。

蛋白质AGlc脱磷酸化导致腺甘酸环化酶活性降低，于是控制大肠杆菌操纵子的激活剂CAP蛋白失去作用，不能激活转录。

从而抑制了转录。

14.Toillustratecascade（因子）.（9）答：

因子和核心酶共同组成全酶，在转录的时候起催化作用。

转录开始的时候因子和核心酶共同作用，识别并催化转录，转录进行8-9个碱基的时候，因子脱离全酶。

因子有多种类型：

70，普通通用因子；

S，张力28F，鞭毛基因的表达；

32，热激基因的转录；

E，热激；

54，氮的利用15.HowdoesPfactorwork?

（9）答：

P因子是大肠杆菌的一种基本蛋白质，只在终止阶段发挥作用，由6个相同亚基组成。

亚基具有一个RNA结合域和ATP水解域。

它作为RNA聚合酶的辅助因子行使其功能。

P因子最初结合到RNA终止子上游一个伸展的单链区，然后发挥它的ATP酶活性以提供在RNA上滑动的能量，沿RNA伸展的方向滑动直到RNA-DNA杂合的终止子区域，然后发挥解螺旋的作用，使双链体结构解开。

16.Describethecomponentsofthetransloconandtheirfunctions.（8）答：

Atransloconisadiscretestructureinamembranethatformsachannelthroughwhich（hydrophilic）proteinsmaypass.易位子是镶嵌在内质网等膜性结构内的一种水溶性跨膜通道。

它帮助跨膜蛋白通过脂质双层膜结构。

它主要成分是Sec61复合体，它包括三种跨膜蛋白。

17.GivetheexampletodescribesuppressortRNAscompetewithwild-typetRNAsthathavethesameanticodontoreadthecorrespondingcodon（s）.（7，206）答：

野生型翻译的时候，蛋白质的翻译终止于UAG终止密码子，然而，琥珀抑制子tRNA能够与释放因子竞争性的识别终止子UAG密码子，使蛋白质的合成通过终止子继续阅读。

18.DescribeEukaryoticinitiation.（6）1.40s小亚基结合到mRNA的5帽子结构eIF-2Met-tRNAiGTP形成三元复合体，与游离的小亚基结合形成43s复合体，与mRNA的5帽子结构结合。

2.40s小亚基在mRNA上移动，找到起始密码子eIF1和eIF1A辅助43s起使复合体扫描mRNA直到AUG起始密码子，然后eIF2和eIF3释放。

3.40s小亚基与60s大亚基结合eIF5B的作用下，介导60s亚基与复合体结合形成可以延伸的核糖体。

19.HowtoseparatesatelliteDNA?

对DNA进行密度梯度离心，即因子中大部分DNA形成连续的片断群，这一片断群形成一个较宽的峰，以基因组平均GC含量相对应的浮力密度位置为中心，称为主带；

在不同密度值处看到另外一个或多个较小的峰，就是卫星DNA。

另外，利用复性杂交的方法，也可以分离出来。

20.WhichtestdisplaysMendeliansegregationatthelevelofDNAmarkerfragments.

（2）1.RFLPRestrictionFragmentLengthPolymorphism-限制性片段长度多态性，是指用某种限制性内切酶切割来自不同个体的基因组DNA或某个基因，会得到不同长度的DNA片段，表明在这种被切割的来自不同个体的DNA分子上内切酶的识别序列有差异。

2.AFLPAmplifiedFragmentLengthPolymorphism-扩增片段长度多态性，相对与RFLP而言,在AFLP分析中显示多态性的DNA片段不是由于限制性内切酶酶切基因组DNA而产生,而是通过DNA多聚酶链式反应扩增基因组DNA模板而产生的。

由于不同物种或品种的基因组DNA序列差异很大，在复制特定的DNA序列时所需要的引物核苷酸序列也不同，同一引物可能使某一品种的DNA片段得以复制，而在另一品种中可能无法诱导。

如此将引物所诱导复制的特定DNA片段采用PCR技术扩增，再进行电泳分离，就可以区分出不同物种或品种之间的多态性。

3.RAPDRandomAmplifiedPolymorphismDNA-RAPD随机扩增多态性DNA。

实际上RAPD是一种特殊形式的AFLP，区别在于扩增多态性DNA所用的引物是随机的，而不是专一的。

RAPD所用的一系列引物序列各不相同，但对于任一一对特定引物，它同基因组DNA序列的结合又是特定的。

用一组引物（20-40个）在基因组全序列上扫描可以获得基因组多态性丰富的信息。

如果引物长度为10个碱基，排列方式有44.STMS（Sequence-taggedmicrosatellites）：

通常又称为SSR，也可称为SSRP（SimpleSequenceRepeatPolymorphisms）基本原理:

引物根据与微卫星重复序列两翼的特定短序列设计，用来扩增重复序列本身。

由于重复的长度变化极大，所以这是检测多态性的一种有效方法。

SCAR（Sequence-characterizedamplifiedregions）SCAR标记是在RAPD技术的基础上发展起来的。

其基本步骤是：

先作RAPD分析，然后把目标RAPD片段（如与某目的基因连锁的RAPD片段）进行克隆和测序，根据原RAPD片段两末端的序列设计特定引物（一般比RAPD引物长，通常24个碱基），再进行PCR特异扩增，这样就可把与原RAPD片段相对应的单一位点鉴定出来。

这样的位点就称为SCAR。

SCAR比RAPD和其它利用随机引物的方法在基因定位和作图中的应用更好，因为它有更高的可重复性（原因是使用的引物长），标记是共显性遗传的5.CAPS（Cleavedamplifiedpolymorphicsequence）CAPS技术又可称为PCR-RFLP。

所用的PCR引物是针对特定的位点而设计的。

先进行PCR扩增，然后将PCR扩增产物用限制性内切酶酶切，再用琼脂糖凝胶电泳将DNA片段分开，用EB染色，观察。

与RFLP技术一样，CAPS技术检测的多态性其实是酶切片段大小的差异。

在酶切前进行PCR产物检测，其多态性称为ALP。

6.SNP单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，缩写SNP）技术同一位点的不同等位基因之间常常只有一个或几个核苷酸的差异，因此在分子水平上对单个核苷酸的差异进行检测是很有意义的。

目前SNP作为一种新的分子标记，已有2000多个标记定位于人类染色体上，在植物上也在进行开发研究。

可在胶上也可不在胶上就能检测出SNP，但检测SNP的最佳方法是新近发展起来的DNA芯片技术