HPLC法测定维生素B1片含量资料下载.pdf

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柱温：

25。

结果：

维生素B，线性范周为O，41懈-243嵋d，平均回收半为999，船D为04（n=6）。

结论：

方击可靠，简单可行，为控制维生素B片的内在质量提供了科学依据。

关键词维生素B片；

维生素B；

HPLC中图分类号：

1：

19272文献标识码：

A文章编号：

1（108-049X（2007）11一11564）2维生素B是维生素类药，适用于维生素B1缺乏的预防和治疗，也用于周围神经炎、消化不良的辅助治疗。

中国药典）2005年版二部收载的维生素B。

及制荆含量测定的方法为紫外分光光度法，影响因素较多，专属性不强。

本文参考中国药典2000年版二部2004年增补率”o维生素B，片含量测定方法，建立了HPLC法测定维生素B，片含量。

1仪器和试药日本岛津LC-2010ctrr高效液相色谱仪。

AEL-200电子天平。

维生素B对照品（中国药品生物制品检定所，批号：

10016199801），维生素B，片（市场抽验样品），乙腈为色谱纯水为高纯水，三乙胺为分析纯。

2方法与结果21色谱条件与系统适用性试验色谱柱：

Krom酗ilclB（250millx46mm，5m）；

乙腈-水-三乙胺（8：

03）（内古5l庚烷磺酸钠用磷酸凋pH至35）：

流速：

10m卜rain；

检测波长：

215nm；

25；

进样量：

20出。

理论板数按维生素B：

峰计算不低于2000，各组分间的分离度符合要求。

见图1。

1尸号亍亏币CA维生索BI对照品B维生寮B1样品c空白辅料1维生索B图1ItPLC色谱图22线性关系考察精密称取维生素B对照品约25nlg，置25“量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液分别精密量取贮备液10,2030，4050，60llll置50打d量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，分别进样，各20山，记录色谱图。

以峰面积为纵坐标（Y），以对照品进样量为横坐标（x，回归方程为：

Y=347251239407，r=O9999；

表职维生索B】在04t一243懈范围内线性关系良好。

23空白辅料的影响取不合维生索B的空白辅料样品，按供试品溶液的制备方法制备空白辅料溶液，按上述色谱条件，进样测定。

结果表明辅料对维生素B，的测定无任何影响，见图1。

24精密度和重复试验取维生素B对照溶液重复进样5次，测得维生素B峰面积RSD为03（n=5）。

取样品6份，分别测定含量，平均含量为标示量的992RSD为04（n=6）。

25稳定性试验取含量测定项下的供试品溶液，在室温下放置0，24，6，g。

10。

12h弼法测定，删得维生素B，峰面积Re,D为08。

26加样曰牧率试验精密称取已知含量的样品6份，精密加入维生素B对照品，按照27样品测定项下供试品溶液制备方法处理，依上述色谱条件，测定维生素B1，计算回收聿平均回归率999及RSD04（n=6）27样品剥定取3个批号样品各20片，精密称定，研细，分别精密称取适量（约相当于维生素B10mg），置100lIll量瓶中，加水溶解并稀释至刻度作为供试品溶液。

另精密称取维生素B，对照品约lomg，同法配制成对照品溶液。

按上述色谱条件进样测定。

与药典标准取供试品溶液和对照溶液各精密加苯酚二磺酸试液2ml，摇匀，静置15rain，加水10ml。

置冰浴中冷却，缓缓加浓氰溶液8ral，加水至刻度，摇匀，照分参考文献1陈新谦金有豫汤光新缩药糟学M第坫版北京：

人民卫生出版社21103692翟晓醯，颐斌注射用头孢他定，头孢曲橙钠与二羟丙茶碱注射液在4种精，J疗液中配伍后的稳定性J】中国药师26025

（1）-29303刘建红吴民俾朝辉等头孢他定与5种常用犄潦配伍的稳定性J】中国医院药学杂志，200020（11）：

696（2007旬l“收稿姗州-02修回）万方数据中国药师一2007年第10卷第11期ChinaPharmacist2007，V0110No11环孢素血药浓度检测方法扬希才（济南市中心医院济南250013）关键词环孢素；

血药浓度；

检测方法中圄分类号：

R97文献标识码：

10084M9X（2007）11-1157dJ2环孢素（cyclosporineA，CsA）是一种高效免疫抑制药，临床广泛用于器官移植。

由于CsA的药物动力学个体差异大，其血药浓度与疗效及毒性密切相燕”1，故监测全血中CsA的血药浓度已成为临床使用CsA的常规医疗项目。

现就几种常用检测方法综述如下。

1荧光偏振法（FPIA）FPIA法是根据荧光偏摄原理建立的一种免疫分析方法”J，克服了RIA存在的环境污染和辐射伤害的却点具有自动化程度高样品需求量少，重现性好，速度快等优点。

但FPIA法所需的TDx仪目前只有少数医院拥有且使用的试剂盒价格昂贵，有效期短，若检测样品少，极易造成不必要的浪费，因此该法更适用于批量检测。

根据应用单抗或多抗试剂盒FPIA分特异性和非特异性两种，也称单克隆法和多克隆法。

前者较后者专属性更强，并已逐渐成为全血中CSA浓度监测的重要方法。

2高效毛细管电泳法（HPCE）HPCE法是以高压电场为驱动力以毛细管为分离通道依据样品中各组分之问的淌度和分配行为的差异而实现分离的一类液相分离技术。

与HPLC相比更适合分析太分子样品，基奉不存在柱污染，分析速度快，分离效率高，操作模式多。

范国荣等”1以胶束电动毛细管色谱（MECC）为分离模式，优选了电泳操作参数，建立了适合器官移植手术环抱素、硫唑嘌呤、泼尼松三联用药系统的分离方法为临床用药监测与体内药物相互作用研究提供了简便，快速，有效的测试手段。

3放射免疫涪（RIA）RIA法是一种通过比活度（speCifiCactivity）高的示踪物观察抗原与抗体结台反应产物来定量微量物质的一种分析方法。

RIA法包括非特异性多克隆抗体法、特异性和非特异性单克隆抗体法，标记物有3H和”5I。

优点是操作简便、快速、经济、灵敏度高、适合于大批量样品测定。

但其测定结果的准确性及稳定性不如HPLC法和FPIA法，测定试剂的半衰期短，每次测定都要做标准曲线，测定单个样品的成本较高。

且有多种代谢物和抗体发生程度不同的交叉反应故检测浓度一般高于HPLC法23倍或更高。

RIA在现有血药浓度测定方法中灵敏度最高但存在操作不能完全自动化应用中存在同位素污染技辐射伤害等缺点。

该法实际用于测定全血中CsA血药浓度的报道很少”o。

4受体结合法（RBA）行为学、电生理和药理学研究表明，很多活性药物通过直接与受体反应产生疗效。

疗效强弱与药物和受体结合位点盼亲和力大小有关。

RBA就是基于这样的理论应用于药物分析，具有快速、简便、高度灵敏和专一性强的特点适用于临床CsA全血浓度的测定”61。

咀该方法目前尚未推广应用。

5高效液相色谱法（HPLC）HPLC已广泛应用于全血中CsA药物维度的浏定。

由于CsA约有60分布在红细胞中，所以测定全血中CsA浓度时需对样品进行溶血预处理，一般采用氢氧化钠、氟化钠或十二烷基硫酸钠破坏红细胞，再用有机溶剂进行萃取。

萃取方法分单步和多步萃取法，萃取剂有乙醚、石油醚一乙醚（70：

30）、正己烷一正庚烷（50：

50）、叔丁基甲醚、正己烷等。

亦有采用SPE固相萃取桂萃取的方法。

多步萃取法国内外报道最多单步萃取法和固相萃取的研究和应甩相对较少，但经过优化实验条件后，单步萃取法较其他两种方法具有操作简便、省时、实验成本低的优点。

在色谱柱的选择上，由于CsA的脂溶性多采用反相色谱柱。

反相色谱柱种类很多，使用时要求各不相同，采用C8柱分析如Novaparkc。

B柱”1，柱温一般要求在65以上，有时甚至要求7l，在这种条件下，容易缩短柱的使用寿命。

内标大部分选择以与CsA结构相近的CsD或CsC为内标，实验成本较高，而尚伟刚”1___。

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P一光光度法，在405rB波长处分别测定吸光度的计算比较，结果见表l。

表1药典标准法与改进法测定结果（标示量n=33讨论流动相采用乙腈一永-三乙胺（15：

85：

03）（内舍5mmol庚烷磺酸钠用稠PH至35）为流动相，发现溶剂峰宵干扰，主成分峰与溶剂峰分不开。

经试验用乙腈一水一三乙胺（8：

03）（内$-5mmol庚烷磺酸钠，调pH935）为流动相，分离效果好。

参考文献l中国药典S2e05年版二部62中国药典S2000年版=部2呻4年增朴奉128（2007d）115收穑2007|35-21修回）万方数据HPLC法测定维生素B1片含量HPLC法测定维生素B1片含量作者：

田雁玉作者单位：

南阳市食品药品检验所,河南南阳,473061刊名：

中国药师英文刊名：

CHINAPHARMACIST年，卷（期）：

2007,10（11）参考文献（2条）参考文献（2条）1.中华人民共和国药典（二部）20052.中华人民共和国药典（二部）2004本文读者也读过（10条）本文读者也读过（10条）1.林奇泗.李娟.陈美林.孙成艳.张莹.LINQisi.LIJuan.CHENMeilin.SUNChengyan.ZHANGYing异烟肼片含量测定方法的比较期刊论文-中国民族民间医药2009,18（24）2.禹学军.钱红君.YuXuejun.QianHongjun高效液相色谱法测定注射用甲硫氨酸维B1中维生素B1含量期刊论文-中国药业2008,17（4）3.申颖.申和平.ShenYing.ShenHe-pingHPLC法测定谷维素双维B片中维生素B1和维生素B6的含量期刊论文-中国药品标准2009,10（4）4.张江清.ZHANGJiang-qing高效液相色谱法测定异烟肼片的含量期刊论文-海峡药学2005,17

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（1）7.魏如远维生素B1、B2、思密达保留灌肠治疗腹泻60例期刊论文-医学理论与实践2005,18（8）8.马德发.王红鑫.徐桂杰维生素B1片和维生素B6片含量均匀度考查期刊论文-中国药师2001,4（3）9.唐庆华.QinghuaTang维生素E软胶囊含量测定的新方法期刊论文-生命科学仪器2005,3（5）10.石晓.叶曼红.ShiXiao.YeManhong气相色谱法测定益康胶囊中维生素E含量期刊论文-中国药业2006,15（8）本文链接：

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