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(c)含有非Mg2+的二价阳离子(d)酶切反应时酶浓度过低

14.关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有()不太恰当

15.在长模板链的指导下引物延伸合成长的DNA互补链时应选用()

(a)T4DNA聚合酶(b)Klenow酶.

(c)大肠杆菌DNA聚合酶I(d)T7DNA聚合酶

16.末端转移酶是合成酶类,()

(a)作用时不需要模板

(b)在Ca2+的存在下,可以在突出的3,末端延长DNA链

(c)在Ca2+的存在下,可以在隐蔽的3,末端延长DNA链

(d)上述说法有两种是正确的

17.在基因工程中,可用碱性磷酸酶()

(a)防止DNA的自身环化(b)同多核苷酸激酶一起进行DNA的5,末端标记

(c)制备突出的3,末端(d)上述说法都正确

18.下列酶中,除()外都具有磷酸酶的活性

(a)λ核酸外切酶(b)外切酶Ⅲ(c)单核苷酸激酶(d)碱性磷酸酶

19.下列哪一种酶作用时需要引物?

(a)限制酶(b)末端转移酶(c)反转录酶(d)DNA连接酶

20.S1核酸酶的功能是()

(a)切割双链的DNA(b)切割单链的RNA(c)切割发夹环(d)以上有两项是正确的

21.Klenow酶与DNA聚合酶相比,前者丧失了()的活性。

(a)5,--3,合成酶,(b)3,--5,外切酶(c)5,---3,外切酶(d)转移酶

22下面关于松弛型质粒(relaxedplasmid)性质的描述中,()是不正确的

(a)质粒的复制只受本身的遗传结构的控制,而不受染色体复制机制的制约,因而有较多的拷贝数

(b)可以在氯霉素作用下进行扩增

(c)通常带有抗药性标记

(d)同严紧型质粒融合后,杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子

23.基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的,真正的天然质粒载体很少,在下列载体中只有()被视为用作基因工程载体的天然质粒载体

(a)pBR322(b)pSCl01(c)pUBll0(d)pUCl8

24.下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大?

(a)质粒(b)黏粒(c)酵母人工染色体(YAC)(d)噬菌体(e)cDNA表达载体

25.松弛型质粒:

(a)在寄主细胞中拷贝数较多(b)可用氯霉素扩增

(c)一般没有选择标记(d)上述(a)、(b)两项正确

26.ColEl是惟一用作基因工程载体的自然质粒,这种质粒:

(a)是松弛复制型(b)具有,四环素抗性

(c)能被氯霉素扩增(d)能产生肠杆菌素

27.同一种质粒DNA,以三种不同的形式存在,电泳时,它们的迁移速率是:

(a)OCDNA>

SCDNA>

LDNA(b)SCDNA>

LDNA>

OCDNA

(c)LDNA>

OCDNA>

SCDNA(d)SCDNA>

LDNA

28.pBR322是一种改造型的质粒,含有两个抗性基因,其中四环素抗性基因来自:

(a)ColEl(b)Ri质粒(c)pSCl01(d)pUCl8

29.关于穿梭质粒载体,下面哪一种说法最正确?

(a)在不同的宿主中具有不同的复制机制

(b)在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点

(c)在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶

(d)在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率

30.能够用来克隆32kb以下大小的外源片段的质粒载体是()

(a)charomid(b)plasmid(C)cosmid(d)phagemid

31.第一个作为重组DNA载体的质粒是()

32.Ti质粒:

(a)可从农杆菌转到植物细胞中(b)作为双链DNA被转移

(c)在植物中导致肿瘤(d)介导冠瘿碱的合成,作为细菌的营养物和植物的生长激素

(e)需要细菌的vir基因帮助转移(f)在植物细胞中作为染色体外质粒

33.黏粒(cosmid)是一种人工建造的载体,()

(a)它具有COS位点,因而可进行体外包装(b)它具有质粒DNA的复制特性

(c)进入受体细胞后,可引起裂解反应(d)进入受体细胞后,可引起溶源化反应

34.有两种确定核酸中核苷酸序列的方法:

化学序列分析法(Maxam-Glbert)和酶学序列分析法(Sanger)。

酶学测序法的基本原理/优点是:

(a)碱基与特殊染料间不同的相互作用

(b)一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止

(c)限制性位点与DNA末端标记的相关性

(d)可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序

(e)反应是DNA特异的,RNA不会带来干扰。

这样既减少纯化步骤,也节约了开支。

35.关于cDNA的最正确的说法是:

(a)同mRNA互补的单链DNA(b)同mRNA互补的双链DNA

(c)以mRNA为模板合成的双链DNA(d)以上都正确

36.用碱法分离质粒DNA时,染色体DNA之所以可以被除去,是因为:

(a)染色体DNA断成了碎片(b)染色体DNA分子量大,而不能释放

(c)染色体变性后来不及复性(d)染色体未同蛋白质分开而沉淀

37.关于碱解法分离质粒DNA,下面哪一种说法不正确?

(a)溶液I的作用是悬浮菌体

(b)溶液Ⅱ的作用是使DNA变性

(c)溶液Ⅲ的作用是使DNA复性

(d)质粒DNA分子小,所以没有变性,染色体变性后不能复性

38.Clark做了一个有趣的实验,发现TaqDNA聚合酶可以不需要模板,在双链DNA的末端加一个碱基,主要是加()

(a)dGTP(b)dATP(c)dCTP(d)dTTP

39.根据构建方法的不同,基因文库分为基因组文库、cDNA文库等。

在下列文库中,()属cDNA文库

(a)YAC文库(b)MAC文库(c)扣减文库(d)BAC文库

40.下面关于多克隆位点(multipleclonesite,MCS)的描述,不正确的—句是()

(a)仅位于质粒载体中(b)具有多种酶的识别序列

(c)不同酶的识别序列可以有重叠(d)一般是人工合成后添加到载体中

41.在cDNA技术中,所形成的发夹环可用()

(a)限制性内切核酸酶切除(b)用3¹

外切核酸酶切除

(c)用S1核酸酶切除(d)用5¹

42.在DNA的酶切反应系统中,通常:

(a)用SSC缓冲液(b)加入Mg2+作辅助因子

(c)加入BSA等保护剂(d)上述说法中,有两项是正确的

43.黏性末端连接法,不仅操作方便,而且()

(a)产生新切点(b)易于回收外源片段(c)载体不易环化(d)影响外源基因的表达

44.在下列表型中,()是基因工程上理想的受体菌表型

(a)r+m+rec*(b)r-m-rec-(C)r-m-rec+(d)r+m+rec-

45.关于DNA接头在基因工程中的作用,下列说法中哪一项不正确?

(a)给外源DNA添加适当的切点(b)人工构建载体

(c)调整外源基因的可读框(d)增加调控元件

46.cDNA文库包括该种生物的()

(a)某些蛋白质的结构基因(b)所有蛋白质的结构基因

(c)所有结构基因(d)内含子和调控区

47.下列关于建立cDNA文库的叙述中,哪一项是错误的?

(a)从特定组织或细胞中提取DNA或RNA

(b)用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA

(c)以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA

(d)新合成的双链DNA甲基化

48.下列对黏性末端连接法的评价中,哪一项是不正确的?

(a)操作方便(b)易于回收片段

(c)易于定向重组(d)载体易于自身环化,降低重组率

49.关于感受态细胞性质的描述,下面哪一种说法不正确?

(功具有可诱导性(b)具有可转移性

(c)细菌生长的任何时期都可以出现(d)不同细菌出现感受态的比例是不同的

50.下面关于用T4多核苷酸激酶标记5'

端制备探针的描述中()是不正确的。

(a)既能标记DNA,又能标记RNA

(b)既能标记双链DNA又能标记单链DNA

(c)只能标记突出的5'

端不能标记其他类型末端

(d)DNA或RNA必须有5'

-OH的存在

51.Southem印迹的DNA探针()杂交。

(a)只与完全相同的片段

(b)可与任何含有相同序列的DNA片段

(c)可与任何含有互补序列的DNA片段’.

(d)可与用某些限制性内切核酸酶切成的DNA片段

(e)以上都是

52.用下列方法进行重组体的筛选,只有()说明外源基因进行了表达。

(a)Southem印迹杂交(b)Northem印迹杂交

(c)Western印迹(d)原位菌落杂交

53.下列哪一个不是Southern印迹法的步骤?

(a)用限制酶消化DNA(b)DNA与载体的连接

(c)用凝胶电泳分离DNA片段(d)DNA片段转移至硝酸纤维素膜上

(e)用一个标记的探针与膜杂交

54.报告基因()

(a)以其易于分析的编码序列代替感兴趣基因的编码序列

(b)以其易于分析的启动子区代替感兴趣基因的启动子区

(c)能用于检测启动子的活性

(d)能用于确定启动子何时何处有活性

55.在利用lacZ失活的显色反应筛选法中,IPTG的作用是()

(a)诱导宿主的α肽的合成(b)诱导宿主的ω肽的合成

(c)作为酶的作用底物(d)作为显色反应的指示剂

56.切口移位是指在()作用下,使()带上放射性标记。

(a)DNA聚合酶I,RNA(b)DNA聚合酶I,DNA

(c)DNA聚合酶Ⅲ,RNA(d)DNA聚合酶Ⅲ,DNA

57.用于核酸分子杂交的探针可以是放射性标记的()

(a)DNA(b)RNA(c)抗体(d)抗原

58.Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段,而Northern印迹则是:

(a)用RNA探针检测DNA片段(b)用RNA探针检测RNA片段

(c)用DNA探针检测RNA片段(d)用DNA探针检测蛋白质片段

59.用免疫化学法筛选重组体的原理是()

(a)根据外源基因的表达(b)根据载体基因的表达

(c)根据mRNA同DNA的杂交(d)根据DNA同DNA的杂交

60.随机引物标记探针,下列各项中哪一项是不正确的?

(a)双链DNA、单链DNA、RNA都是可以标记的

(b)不需要用DnaseI预处理

(c)反应时可用Klenow酶

(d)反应时可用DNA聚合酶1

61.在切口移位标记DNA探针时只能使用()

(a)Klenow酶(b)DNA聚合酶I(c)DNA聚合酶Ⅱ(d)DNA聚合酶Ⅲ

62.要对一双链的DNA分子进行3¹

末端标记,可用()

(a)Klenow酶(b)DNA聚合酶I(c)T4DNA聚合酶(d)T7DNA聚合酶

答案:

1.c;

2.c;

3.b;

4.b5.b,C,d,e;

6.c;

7.b;

8.d;

9.d;

10.B;

11.d;

12.a;

13.d;

14.b15.d;

16.c;

17.a,b;

18.a;

19.c;

20.d;

21.c;

22.C;

23.b;

24.C;

25.d;

26.a,C,d;

27.b;

28.c;

29.b;

30.a;

31.c;

32.a,c,d,e,33.a,b,c;

34.b;

35.c;

36.c;

37.d;

38.b;

39.c;

40.a;

41.c;

42.a,b,c;

43.b;

44.b;

45.d;

46.a;

47.a;

48.c;

49.c;

50.b;

51.c;

52.c;

53.b;

54.a,c,d;

55.a;

56.b;

57.a,b;

58.c;

59.a;

60.d;

61.b;

62.c;

1、基因工程操作的三大基本元件是【】

I供体II受体III载体IV抗体V配体

AI+II+III

BI+III+IV

CII+III+IV

DII+IV+V

EIII+IV+V

2、根据当今生命科学理论,基因工程的用途是【】

I分离纯化基因II大量生产生物分子III构建新型物种IV提高基因重组效率

BI+II+IV

CI+III+IV

DII+III+IV

EI+II+III+IV

3、基因工程的三大理论基石是【】

A经典遗传学、细胞生物学、微生物学

B分子遗传学、分子生物学、生化工程学

C动物学、植物学、微生物学

D生物化学、生化工程学、化学工程学

E生理学、仿生学、免疫学

4、根据基因工程的定义,下列各名词中不能替代基因工程的是【】

A基因诱变

B分子克隆

CDNA重组

D遗传工程

E基因无性繁殖

5、基因工程的单元操作顺序是【】

A增,转,检,切,接

B切,接,转,增,检

C接,转,增,检,切

D检,切,接,增,转

E切,接,增,转,检

6、基因工程作为一种技术诞生于【】

A上世纪50年代初

B上世纪60年代初

C上世纪70年代初

D上世纪80年代初

E上世纪90年代初

7、利用基因工程扩增基因是依据【】

A基因定向重排

B强化启动基因

C增强子重组

DSD顺序的存在

E载体自主复制

8、下列有关基因的叙述,错误的是【】

A蛋白质是基因表达的唯一产物

B基因是DNA链上具有编码功能的片段

C基因也可以是RNA

D基因突变不一定导致其表达产物改变结构

E基因具有方向性

9、限制性核酸内切酶是由细菌产生的,其生理意义是【】

A修复自身的遗传缺陷

B促进自身的基因重组

C强化自身的核酸代谢

D提高自身的防御能力

E补充自身的核苷酸消耗

10、天然PstI限制性内切酶的来源是【】

ABacillusamyloliquefaciens

BEscherichiacoli

CHaemophilusinfluenzae

DProvidenciastuartii

EStreptomyceslividans

11、下列五个DNA片段中含有回文结构的是【】

AGAAACTGCTTTGAC

BGAAACTGGAAACTG

CGAAACTGGTCAAAG

DGAAACTGCAGTTTC

EGAAACTGCAGAAAG

12、T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起,其底物的关键基团是【】

A2'

-OH和5'

-P

B2'

-OH和3'

C3'

-OH和2'

D3'

E5'

-P

13、下列有关连接反应的叙述,错误的是【】

A连接反应的最佳温度为37℃

B连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%

C连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mM

D连接酶通常应过量2-5倍

EDTT可以维持连接酶的结构

14、若将含有5'

末端4碱基突出的外源DNA片段插入到含有3'

末端4碱基突出的载体质粒上,又必须保证连接区域的碱基对数目既不增加也不减少,则需用的工具酶是【】

IT4-DNA聚合酶IIKlenowIIIT4-DNA连接酶IV碱性磷酸单酯酶

AIII

BI+III

CII+III

DI+II+III

15、提高重组率的方法包括【】

I加大外源DNA与载体的分子之比II载体分子除磷III连接酶过量IV延长连接反应时间

AI+II

BI+II+III

CI+III+IV

DII+III+IV

16、下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中,错误的是【】

A大肠杆菌-繁殖迅速

B枯草杆菌-分泌机制健全

C链霉菌-遗传稳定

D酵母菌-表达产物具有真核性

E动物细胞-具有完善的蛋白质糖基化功能

17、基因工程的受体细胞必须具备【】

I限制性缺陷II营养缺陷III感染寄生缺陷

AI

BI+II

CI+III

DII+III

EI+II+III

18、克隆菌扩增的目的是【】

I增殖外源基因拷贝II表达标记基因III表达外源基因

19、载体的功能是【】

I运送外源基因高效进入受体细胞II为外源基因提供复制能力III为外源基因提供整合能力

20、下列有关质粒分子生物学的叙述,错误的是【】

A质粒是共价环状的双链DNA分子

B天然质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列

C质粒在宿主细胞内能独立于染色体DNA自主复制

D松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增

E质粒并非其宿主细胞生长所必需

21、带有多个不同种复制起始区的质粒是【】

A穿梭质粒

B表达质粒

C探针质粒

D整合质粒

E多拷贝质粒

22、多聚接头(Polylinker)指的是【】

A含有多种限制性内切酶识别及切割顺序的人工DNA片段

B含有多种复制起始区的人工DNA片段

C含有多种SD顺序的人工DNA片段

D含有多种启动基因的人工DNA片段

E含有多种特定密码子的人工DNA片段

23、载体质粒pBR325共有三个选择性标记:

Apr、Tcr、Cmr。

它们分别含有一个单一酶切位点:

PstI、SphI和EcoRI。

若将一外源基因取代此载体上不含Cmr标记基因的PstI-SphI限制性DNA片段,那么用于转化子和重组子筛选的试剂应是【】

AAp

BTc

CCm

DAp+Tc

EAp+Cm

24、经抗药性遗传标记法筛选出的转化体中,往往会出现无载体或无重组DNA分子的菌落,其原因很可能是【】

A标记基因发生突变

B载体或重组分子不稳定

C载体或重组分子整合入受体染色体中

D载体空载

E筛选药物诱导受体细胞产生抗性

25、鸟枪法克隆目的基因的第一步是随机或非随机切割外源DNA,其方法有【】

I超声波处理II酶解III机械搅拌

26、强化基因转录的元件是【】

A密码子

B复制子

C启动子

D内含子

E外显子

27、pIJ486是链霉菌的启动子探针质粒(如下图所示),其中neo和tsr分别为新霉素和硫链丝菌素的抗性基因。

为了准确克隆和筛选具有启动子活性的外源DNA片段,最为理想的插入位点应是【】

 

28、酶切法鉴定重组体时,最常用的方法是:

(D)

A.用多种限制性酶将其切出

B.用S1核酸酶将其切出

C.用DNA酶将其切出

D.用重组时的限制性酶将其切出

E.用其它限制性酶将其切出

29、免疫印迹法筛选重组体的原理是:

(E)

A.根据载体抗性基因的表达

B.根据载体报告基因的表达

C.根据DNA与DNA的杂交

D.根据DNA与mRNA的杂交

E.根据外源基因的表达

30、关于PCR扩增停滞的原因有很多种,但下列各项中()项不是主要原因。

A.底物(模板)过剩

B.dNTP的大量消耗

C.产物的聚集

D.非特异性产物的竞争性抑制

31、有关PCR的描述下列哪项正确:

(ABC)

A.polym

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