医院检验科门诊常规检查作业指导书.docx
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医院检验科门诊常规检查作业指导书
作
业
指
导
书
如皋三院医院检验科
目录
采集末梢血(MYCH/DL-5-SC-01)------------------------------------------------1
采集静脉血(MYCH/DL-5-SC-02)------------------------------------------------2
尿沉渣检查(MYCH/DL-5-SC-03)------------------------------------------------5
尿液化学成份检查(MYCH/DL-5-SC-04)-----------------------------------------10
粪便常规(MYCH/DL-5-SC-05)-------------------------------------------------14
粪便隐血试验(MYCH/DL-5-SC-06)---------------------------------------------16
尿液蛋白定性(磺柳酸法)(MYCH/DL-5-SC-07)-----------------------------------19
尿液蛋白定性(加热醋酸法)(MYCH/DL-5-SC-08)---------------------------------20
尿本周氏蛋白定性(MYCH/DL-5-SC-09)-----------------------------------------22
尿液HCG定性(MYCH/DL-5-SC-10)---------------------------------------------24
RBC(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-11)----------------------------------------------25
Hb(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-12)-----------------------------------------------29
MCV(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-13)----------------------------------------------33
MCH(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-14)----------------------------------------------34
MCHC(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-15)---------------------------------------------36
RDW(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-16)----------------------------------------------37
WBC(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-17)----------------------------------------------39
WBC分类(三分群)(MYCH/DL-5-SC-18)-----------------------------------------43
ABO血型鉴定(MYCH/DL-5-SC-19)---------------------------------------------46
PLT(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-20)----------------------------------------------49
脑脊液常规(MYCH/DL-5-SC-21)-----------------------------------------------51
浆膜腔积液常规(MYCH/DL-5-SC-22)-------------------------------------------55
阴道分泌物常规(MYCH/DL-5-SC-23)-------------------------------------------57
前列腺常规(MYCH/DL-5-SC-24)-----------------------------------------------59
WBC(手工法)(MYCH/DL-5-SC-25)----------------------------------------------60
PLT(手工法)(MYCH/DL-5-SC-26)----------------------------------------------62
幽门螺杆菌抗体检测(MYCH/DL-5-SC-27)---------------------------------------64
精液常规(MYCH/DL-5-SC-28)-------------------------------------------------68
采集末梢血
1.采集部位:
受检者中指或无名指指尖腹内侧,婴、幼儿可采集拇指、脚趾或脚跟内、外侧缘,采集部位的皮肤应该完整,不能有烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症。
2.采集方法:
轻轻按摩采集部位,使采集部位自然充血。
将皮肤消毒液均匀喷洒于采集部位,1-3分钟后,左手拇指和食指固定采集部位,右手持一次性消毒采血针,自指尖腹内侧迅速刺入,立即拔出采血针。
血液自然流出后,用消毒纸巾擦去第一滴血液,血液自然流出(不能自然流出时,在采集部位两侧轻轻挤压)并成滴,用一次性微量吸管采集约30μl血液(检查项目增加,采集血液量增加)。
血液采集完成后,用消毒纸巾压住穿刺部位,嘱咐受检者按压约10分钟。
用将20μl刻度线以外的血液加到干净玻片上用于制作血液涂片,用干净纸巾沿一次性微量吸管管口方向擦净管外,将吸管插入盛有稀释液的离心管底部,慢慢排出管内血液,用上层液体洗净管内余血,盖紧管盖,轻轻颠倒混匀。
3.血液涂片的制作:
取血液一滴于载玻片右端,左手持载玻片,右手持推玻片,从血滴前方向后移动,接触血滴,使其沿推玻片下缘散开,推玻片与载玻片保持约30°平面夹角,以平稳的速度将血液向前推进。
血液在载玻片上形成一舌形;厚薄均匀;边缘整齐;头、体、尾明显的血膜。
4.血液涂片的染色
4.1瑞特-吉姆萨染色原理:
酸性染料伊红与细胞中的碱性物质(血红蛋白、嗜酸性颗粒)结合,使其染成红色;碱性染料美蓝或天青与细胞中的酸性物质(核染色质、嗜碱性颗粒、血小板、富含核蛋白的细胞质)结合,使其染成蓝色;中性物质(白细胞核染色质、中性粒细胞颗粒、血小板颗粒区)被染成紫色。
4.2染色试剂:
I液:
瑞特染料、吉姆萨染料、甲醇。
II液:
磷酸盐缓冲液:
pH6.4-6.8
4.3染色方法
4.3.1在干燥血膜的两端化线,防止染液外溢。
4.3.2在干燥血膜上滴加I液数滴,覆盖整个血膜,静置1-2分钟。
4.3.3加II液(约为I液的2倍),混匀后静置5-6分钟。
4.3.4平持血片用流水缓缓冲洗干净,干燥后备用。
5.参考文献
朱立华,主编.临床基础检验学实验指导.北京:
人民卫生出版社,1999,第1版。
寇丽筠,主编.临床基础检验学.北京:
人民卫生出版社,2001,第2版。
采集静脉血
1.准备采血器具
1.1双向采血针:
打开采血针包装,旋下采血针白色盖子,将采血针套进采血器并旋紧,备用。
1.2一次性注射器:
打开一次性注射器包装,不要取下无菌针帽,左手持针头下座,右手持针管,将针头与针管旋紧,使针头斜面对准针管刻度,检查针管有无破损,备用。
2.选择静脉:
受检者取坐位,前臂水平伸直置于枕垫上。
暴露穿刺部位,让受检者穿刺部位上端衣袖保持宽松,选择容易固定,明显可见的肘前静脉。
肘部静脉不明显时,可以用手背静脉或内踝静脉,婴、幼儿可于颈外静脉采血。
3.消毒:
将皮肤消毒液距离穿刺部位皮肤表面5cm处均匀喷雾,喷洒面积不小于3cm2。
4.扎压脉带:
在采血部位之上扎压脉带(不能污染消毒部位),嘱受检者握紧拳头,让静脉充盈暴露。
最好不使用压脉带,非使用不可时,压脉带扎压时间不能过长,穿刺成功后,马上松开压脉带,扎压时间最好不超过半分钟。
5.穿刺采血
5.1一次性注射器穿刺采血:
取下针头无菌帽,以左手拇指固定静脉穿刺部位下端,右手拇指和中指持注射器针筒,食指固定针头下座,针头斜面和针筒刻度向上,沿静脉走向使针头与皮肤成30°角斜行快速刺入皮肤,然后成5°角向前刺破静脉壁进入静脉腔。
见回血后,将针头顺势深入少许,以免采血时针钭滑出,但不可用力深刺,以免穿破静脉造成血肿。
以右手固定注射器,左手松开压脉带,缓缓抽动注射器内芯至所需血量。
5.2双向采血针穿刺采血:
取下针头无菌帽,以左手拇指固定静脉穿刺部位下端,右手拇指和中指持采血器,食指固定针头下座,针头斜面和针筒刻度向上,沿静脉走向使针头与皮肤成30°角斜行快速刺入皮肤,然后成5°角向前刺破静脉壁进入静脉腔。
见回血后,将针头顺势深入少许,以免采血时针钭滑出,但不可用力深刺,以免穿破静脉造成血肿。
以左手固定采血器,右手持真空采血管,将采血针后端针头刺入采血管帽盖,采血管内的真空被破坏,血液流入采血管内,根据需要采足所需血液。
6.止血:
采足所需血液后,嘱受检者松开拳头,用消毒棉签压住穿刺孔,拔出针头,嘱受检者继续按压10-15分钟。
7.放血和混匀:
用注射器采集血液时,拔下针头,取下采血管帽盖,破坏真空,根据要求量将血液注入采血管内,盖紧帽盖,轻轻颠倒4-6次;用双向采血针采集血液时,采足所需血液后,拔出采血管,轻轻颠倒4-6次。
8.注意事项
8.1尽量选择明显暴露静脉穿刺。
当静脉暴露不明显时,可以用左手食指经消毒液消毒后,在受检者采血部位触摸,发现静脉走向后凭借手感的方向与深度进行试探性穿刺。
8.2用一次性注射器采血时,切忌将注射器回推,以免注射器中的空气进入血管形成空气栓塞,造成严重后果。
8.3采血时,若遇受检者发生晕针,应立即拔出针头,让其平卧,休息片刻可以恢复。
发生严重情况时,应立即启动紧急预案。
9.参考文献
朱立华,主编.临床基础检验学实验指导.北京:
人民卫生出版社,1999,第1版。
寇丽筠,主编.临床基础检验学.北京:
人民卫生出版社,2001,第2版。
尿沉渣检查(仪器法)
1.实验原理
UF-50运用了流式细胞和电阻抗的原理。
尿液被稀释和染色后,靠液压作用通过鞘液流动池。
当反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时,它被一种无粒子颗粒的鞘液包围。
然后,每个细胞以单个纵列的形式通过流动池中心(竖直)轴线,在这儿每个尿液细胞将被氩激光光束照射。
每个细胞有不同程度的荧光强度(F1),从染色尿液细胞发出的荧光主要反映细胞的定量特性(如细胞膜、核膜、线粒体、核酸)、散射光强度(测定的是前向角散射光,Fsc,它成比例地反映细胞的大小)和电阻抗的大小(电阻抗电信号主要与细胞的体积成正比)。
仪器正是将这种荧光、散射光和电阻抗的信号转化为电信号,分析这些电信号,才能使得每个尿液标本产生直方图和散射图,然后分析这些图形,即可区分每个细胞并得出每个细胞的形态。
UF-50可定量检测RBC、WBC、管型、上皮细胞、和细菌,还能标记出病理管型、小圆上皮细胞、结晶、酵母细胞、精子、其它、红细胞信息,还可测定总计数和电导率等。
2.样本采集
实验室工作人员必须对病人留取尿液进行正确指导。
建议受检者使用实验室提供的专用样本容器。
不推荐受检者使用自己准备的样本容器,非使用不可时,实验室人员应将样本容器的要求告知受检者。
晨尿:
清晨起床后第一次尿,为较浓缩和酸化的样本,血细胞、上皮细胞及管型等有形成分相对集中且保存较好,便于比较,适于可疑或已知泌尿系统疾病的动态观察和早孕试验。
随机尿:
留取任何时间的尿液,易受饮食、运动、药物等的影响,可致低浓度或病理临界浓度的物质和有形成分漏检,也可出现饮食性糖尿或药物的干扰。
餐后尿:
午餐后2小时留取的尿液,该样本对病理性糖尿和蛋白尿的检出更为敏感。
无论留取任何尿液样本,务必使尿道口保持清洁。
必须有足够的送检尿量(10ml以上)。
3.样本的运送
留取的样本应该在2小时内完成检验,如果样本收集后2小时内无法完成分析,可置2-8℃冷藏,6小时内完成检验;如仅做尿沉渣检查,可在样本中加适量防腐剂(400g/L甲醛溶液,每升尿液加入5ml。
应注意甲醛过量时可与尿素产生沉淀物,干扰显微镜检查)。
4.样本的接收
在接受样本时,实验室工作人员应该检查以下内容:
样本容器是否符合要求;留取样本的时间是否过长;样本是否被污染;样本量是否足够(不少于10ml),在特殊病例不可能达到此要求时如婴幼儿、烧伤、肾衰无尿期等,这些情况应在检验报告单上注明收到的样本量。
5.实验材料
5.1采用Sysmex公司配套试剂。
5.1.1试剂组成:
UF-50专用稀释液(URINOPACK)、清洁剂、鞘液、UF-50专用染液(URINOSEARCH)
5.1.2贮存条件及稳定性:
清洁剂密闭避光保存可稳定半年。
UF-50专用稀释液密闭避光贮存可稳定10个月。
UF-50专用染液密闭避光贮存可稳定8个月。
鞘液密闭避光贮存可稳定12个月
5.2校准品:
由Sysmex公司提供。
质控品:
由Sysmex公司提供,2-8℃密闭避光保存可稳定12个月。
6.仪器设备
6.1仪器
6.1.1仪器名称:
Sysmex尿沉渣分析仪
6.12仪器厂家:
Sysmex公司
6.1.3仪器型号:
SysmexUF-50
6.1.4仪器校准程序:
由厂家提供的校准,具体由厂家工程师操作,满足相关标准。
7.操作步骤
7.1见SysmexUF-50尿沉渣分析仪操作维护规程(编号:
MYCH/DL-5-PM-05)
7.2分析流程:
见图1。
8.结果判断与分析:
UF-50提示REVIEW、UF-50结果与尿干化学结果不相符,均应做显微镜检查。
9.计算方式:
仪器自动计算。
10.参考值范围
白细胞(WBC):
0-25个/ul
红细胞(RBC):
0-25个/ul
小圆上皮细胞(SRC):
0-3个/ul
细菌(BACT):
0-8000个/ul
管型(CAST):
0-2个/ul
病理管型(PathCAST):
0-1个/ul
上皮细胞(EC):
0-20个/ul
精子(SPERM):
0-3个/ul
电导率(CONDCT):
19.8-42.5Ms/cm
结晶(XˊTAL):
0-15个/ul
类酵母细胞(YLC):
0-10个/ul
总粒子数(Total):
0-40000个/ul
11.质量控制:
作标本时同时测定质控品,以2S为警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断分析是否在控。
12.临床意义
12.1红细胞增加,主要见于肾小球肾炎、泌尿系结石、结核或恶性肿瘤、泌尿系血管畸形和出血性疾病等。
利用红细胞信息可了解红细胞形态从而鉴别血尿来源。
12.2白细胞增加,见于泌尿系统感染、结石、结核和肿瘤。
泌尿系感染疾病的尿中往往同时存在白细胞和细菌,因此,检查尿液中白细胞和细菌的存在是诊断泌尿系感染的重要指标。
12.3上皮细胞:
正常尿液中可见少量上皮细胞主要是鳞状上皮细胞和移行上皮细胞;如数量增多,且可见小圆上皮细胞,提示泌尿道有炎症或肾实质损害。
12.4管型:
透明管型可偶见于正常人清晨浓缩尿中;当有轻度或暂时性肾或循环功能改变时,尿内可有少量透明管型;在肾实质性病变如肾小球肾炎时,可见较多的颗粒管型。
红细胞管型的出现常见于急性肾小球肾炎等。
颗粒管型的出现,提示肾单位有淤滞的现象。
脂肪管型的出现,见于慢性肾炎肾病型及类脂性肾病。
在慢性肾功能不全时,尿内出现肾衰竭管型,提示预后不良。
蜡样管型的出现提示肾脏有长期而严重的病变,见于慢性肾小球肾炎的晚期和肾淀粉样变时。
12.5细菌:
主要用于泌尿系细菌感染的诊断。
12.6导电率:
对糖尿病、尿崩症的鉴别诊断、治疗具有十分重要的意义;通过对尿导电率的高低监控,可以预防某些结石疾病的发生,有利于结石疾病的治疗。
13.参考文献
13.1叶应妩、王毓三,等,全国临床检验操作规程,东南大学出版社,第二版,1997,133
13.2丛玉隆,王淑娟,等,今日临床检验学,中国科学技术出版社,第一版,1997,267-275
13.3寇丽筠,主编.临床基础检验学.北京:
人民卫生出版社,2001,第2版。
尿液化学成份测定(试带法)
1.实验原理
1.1空白(校正块):
尿液在试纸上分布的状态和尿液本身的颜色,一般都会给测定结果带来误差,设空白块就是为了排除这些产生误差的因素,各个项目都使用同一块空白块。
1.2pH:
通过pH指示剂(甲基红与溴麝香草酚蓝适量配合)测定4.5-9的范围的pH值,正常人的新鲜尿液pH值在5-7之间。
1.3亚硝酸盐(NIT):
反应依赖于尿中革兰氏阴性菌把硝酸盐还原成亚硝酸盐,亚硝酸盐与对氨基苯砷酸反应生成重氮化合物,重氮化合物再与萘基乙二胺二盐酸结合呈现出桃红色。
1.4葡萄糖(GLU):
根据葡萄糖氧化酶反应原理,葡萄糖氧化酶特异性氧化β-D-葡萄糖,生成葡萄糖醛酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下,是指示剂氧化而呈现蓝色。
1.5蛋白质(PRO):
根据指示剂蛋白误差法原理,蛋白质与染料结合形成复合物产生色变,特别是对白蛋白的反应比对球蛋白、血红蛋白、本-周氏蛋白和粘蛋白更为灵敏。
1.6隐血(BLD):
根据血红蛋白接触活性法原理,通过血红蛋白的类过氧化物酶样作用催化分解过氧化物,使邻联甲苯胺氧化呈色。
1.7尿比重(SG):
利用多聚电解质方法,尿中电解质与聚电解质发生离子交换的原理。
阳离子存在时,多聚物氢离子通过交换释出,使溴百里酚蓝指示剂发生颜色变化,颜色有蓝经过蓝绿最后变成黄色。
1.8胆红素(BIL):
根据偶氮偶合法的原理,2,4-二氯苯胺重氮盐与胆红素进行特异性反应,并与胆红素的浓度相对应产生的颜色。
1.9尿胆原(URO):
根据偶氮结合法的原理,尿胆原在强酸条件下和重氮盐偶联形成胭脂红色素。
1.10酮体(KET):
根据硝普酸钠法原理,硝普酸钠和酮体在碱性条件下相互作用而呈现紫色,特别是乙酰乙酸对此特别灵敏。
1.11白细胞(WBC):
粒细胞胞浆内含有酯酶,这种酶能水解一种3—羟基吡咯酯类底物,释放出酚从而与重氮试剂反应生成紫红色化合物。
1.12维生素C(Vc):
根据Tillman’Reagent原理,Vc将染料有蓝色还原成红色。
本项目的测定目的是为了给使用者提供样本中Vc的含量以判断其可能存在的干扰。
2.样本采集、运送、接收:
同尿沉渣检查(编号:
MYCH/DL-5-SC-03)
3.实验材料
3.1试剂:
采用桂林市医疗电子仪器厂生产的优利特UritestA11A尿试纸条。
2℃-10℃或30℃以下干燥阴凉处保存,可稳定12个月。
3.2校准品:
由桂林市医疗电子仪器厂提供。
3.3质控品:
由长春迪瑞实业有限公司提供,2-8℃保存可稳定12个月。
4.仪器设备:
优利特Uritest-200B尿液分析仪。
由厂家提供的校准,具体由厂家工程师操作,满足相关标准。
5.操作步骤:
见优利特Uritest-200B尿液分析仪操作维护规程(文件编号:
MYCH/DL-5-PM-04)
6.结果的判断与分析:
(不适用)
7.质量控制:
作标本时同时测定质控品,以在质控品结果允许范围内为在控。
8.参考值范围:
pH:
5.0-7.0NIT:
阴性GLU:
阴性PRO:
阴性
BLD:
阴性KET:
阴性BIL:
阴性URO:
阴性或弱阳性WBC:
阴性SG:
1.015-1.025
9.临床意义:
9.1pH降低:
酸中毒、慢性肾小球肾炎、痛风、糖尿病等排酸增加;呼吸性酸中毒,因CO2潴留,尿多呈酸性。
9.2pH升高:
频繁呕吐丢失胃酸、服用重碳酸盐、尿路感染、换气过度及丢失CO2过多的呼吸性碱中毒,尿呈碱性。
9.3比重增高:
尿少时,比重可增高,见于急性肾炎、高热、心功能不全、脱水等;尿量增多同时比重增加,常见于糖尿病。
9.4比重降低:
慢性肾小球肾炎、肾功能不全、尿崩症等。
9.5蛋白阳性:
分为功能性、体位性、病理性蛋白尿;病理性蛋白尿见于肾炎、肾病综合征等。
9.6尿糖阳性:
见于糖尿病、肾性糖尿病、甲状腺机能亢进等。
内服或注射大量葡萄糖及精神激动等也可致阳性反应。
9.7酮体阳性:
严重未治疗的糖尿病酸中毒患者可呈强阳性反应。
妊娠呕吐、长期饥饿、营养不良、剧烈运动后也可呈阳性反应。
9.8胆红素阳性:
肝实质性及阻塞性黄疸时,均可呈阳性反应。
9.9尿胆原阳性:
溶血性疾患及肝实质性病变如肝炎时为阳性。
9.10隐血阳性:
见于各种引起血管内溶血的疾病;血型不合引起急性溶血、阵发性寒冷性或睡眠性Hb尿症;重度烧伤、毒蕈中毒、毒蛇咬伤;自身免疫性溶血性贫血、SLE等。
9.11NIT阳性:
提示有大肠埃希菌感染。
9.12白细胞阳性:
同尿沉渣检查(编号:
MYCH/DL-3-SC-13)
10.方法的局限性:
尿蛋白假阳性用10%磺柳酸确证,尿WBC假阳性用镜检确证。
11.参考文献
11.1叶应妩,王毓三,等,全国临床检验操作规程,第二版,东南大学出版社,1997,118-131
11.2寇丽筠,主编.临床基础检验学.北京:
人民卫生出版社,2001,第2版。
粪便检查
1.一般性状检查
1.1颜色
根据观察所见报告,如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。
正常粪便因粪胆素而呈棕黄色,但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色。
灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疸、胆汁减少或缺乏。
绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时。
红色见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等。
柏油样便见于上消化道出血等。
酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等。
米泔水样见于霍乱。
1.2性状
报告为软、硬、糊状、泡沫样、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘液脓样、有不消化实物等。
正常时为有形软便。
便秘时可见球形硬便。
粘液稀便见于肠壁受刺激或发炎时,如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。
粘液脓性血便多见于细菌痢疾。
酱色粘液(可带脓)便多见于阿米巴痢疾。
稀汁样便可见于急性肠胃炎,大量时见于伪膜性肠炎及隐孢子虫感染。
米泔样便并有大量肠粘膜脱落,见于霍乱、副霍乱等。
扁平带状便:
可能因直肠或肛门匣窄所致。
1.3寄生虫虫体:
蛔虫、饶虫,绦虫节片等较大虫体,肉眼即可分辨。
钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可看到。
服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。
驱绦虫后应仔细寻找有无虫头。
2.粪便的显微镜检查
2.1直接涂片镜检
2.1.1操作步骤
2.1.1.1洁净玻片上加等渗盐水1~2滴,选择粪便的不正常部分,或挑取不同部位的粪便做直接涂片检查。
2.1.1.2最好取大玻片,制成涂片后,应覆以盖片。
涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。
2.1.1.3在涂片中如发现疑似包囊,则在该涂片上加一滴碘液,在高倍镜下仔细鉴别,如仍不能决定时,可取全量粪便浓缩法检查。
2.1.2虫卵的报告方式:
未找到者注明“未找到虫卵”,找到一种报告一种,找到几种报告几种,并在该虫卵后面注明数量若干,以低倍视野计算。
2.1.3注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别,并注意有肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。
若大量出现,则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。
2.1.3细胞中应注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞(直接涂片干后用瑞氏染色)、上皮细胞、巨噬细胞等。
2.1.4夏科—雷登(Charcot-Leyden)结晶:
为无色或浅黄色两端尖而透明具有折光性的菱形结晶,大小不一。
常见于肠道溃烂,尤以阿米巴感染粪便中最易检出。
过敏性腹泻及钩虫病患者粪便中