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微生物技能考核标准

显微镜的使用与维护

班级:

姓名:

学号:

一、实操部分(80分)

序号

内容

评分标准

分值

得分

1

准备(满分10分)

材料准备充分,中途不得取用非操作台材料

5

显微镜取用姿势准确,安放位置合理

5

2

低倍镜使用(满分25分)

插上电源,打开光源,用拇指与中指移动旋转器(切忌手持物镜移动

5

使低倍镜对准镜台的通光孔,放置载玻片,标本中间对准通光孔,并用压片夹夹好

5

调节焦距,从一侧瞧着向上调节载物台,粗准焦螺旋调节物镜与载物台至最小距离处

5

双眼视目镜,调节粗准焦螺旋至有模糊的像,然后调节细准焦螺旋至清晰的像,二者不得来回交替使用,且光线强弱适宜(2分)。

10

3

高倍镜使用(满分10分)

将观察对象调至视野中央,转动转换器至高倍镜,防止撞到玻片

5

调节细准焦螺旋至清晰的像,光线调节至强弱适宜

10

4

油镜的使用(15分)

转动转换器,使高倍镜头离开通光孔,在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢转动油镜,在转换油镜时,从侧面水平注视镜头与玻片的距离,使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。

5

如果不出现物象或者目标不理想要重找,在加油区之外重找时应按:

低倍→高倍→油镜程序。

在加油区内重找应按:

低倍→油镜程序,不得经高倍镜,以免油沾污镜头(3分),至调出清晰的像。

10

擦拭目镜与物镜上的油污,擦镜纸、二甲苯、(0、5)擦拭方法均要正确

(1)

15

取下玻片,拔下电源,关上开关,载物台调至最大距离处,物镜八字摆开,罩上防尘罩,并认真填写使用记录。

5

5

计时

不得超过5分钟,超过者倒扣分,最多扣5分

简单染色评分标准

班级:

姓名:

学号:

序号

考核项目

评分要素

配分

评分标准

检验结果

得分

备注

1

准备(10分)

着装整洁;实验用物齐全适用,放置合理

10

少选多选1件扣5分

2

制片(40分)

无菌操作取菌

20

无菌操作正确规范,错1处扣5分,涂片区域圆形,直径1cm左右

3

干燥固定

5

不可过热、固定操作的规范性,错1处扣2分

4

染色、水洗

15

染液滴加的量;染色时间,水洗操作的规范性,错1处扣5分

5

镜检(35分)

显微镜的预备

5

显微镜的检查;正确放置打开光源,光路对准,错1处扣2分

6

涂片镜检

10

低倍到高倍,到油镜,物镜的转换;物象调节,错1处扣2分

7

镜检结果

15

菌体分布均匀,密度合适,明暗合适,对比度合适。

错1处扣3分

8

显微镜的整理

5

镜头的擦拭;物镜的“八字形”转换;将载物台降到最低,错1处扣2分

9

其她(5分)

清理用物,环境卫生

5

清扫实验台及收拾产生垃圾,少1环节扣1分

10

时间(10分)

操作时间

15

要求10分钟内完成,每超过1分钟,扣5分。

总分

制备无菌平板评分标准(时间5分钟)

班级:

姓名:

学号:

项目

考核内容

分值

评分细则

扣分

备注

得分

准备(10分)

物品准备、摆放及酒精擦拭

8

物品摆放合理、酒精擦手正确,材料准备齐全,得8分

中途不得取用任何物品,取1次扣4分

摆放的物品影响操作,扣2分

取菌前未用酒精擦拭,扣2分

贴标签(培养皿)

2

贴标签且位置合理,得2分

每漏贴一个,扣1分

每错贴一个,扣1分

三角瓶操作(15)

开塞、瓶口灭菌、持法、盖塞

15

三角瓶操作正确,得15分

未灼烧,开塞不正确,塞子放置不正确,均扣5分

盖塞前瓶口与塞子不灼烧,均扣5分

三角瓶的瓶口开口处位置不对,扣5分

以上几项合计最多扣15分

倒平板

(40分)

加培养基(培养皿持法、加入量、污染皿壁、混匀、)

40

正确(单手持皿,平端,两指自如开合皿盖,另一只手持培养基瓶),平板效果优秀,得40分

培养基温度不适宜,皿盖上方水汽过多,扣5分

平板未铺全或高于培养皿高的2/3,一个扣5分,

培养基污染皿壁,一个扣10分

三角瓶口接触平皿,一个扣5分

培养基倾斜,一个扣5分

培养基有凝块、不透明,一个扣5分

无菌操作(15)

酒精灯附近区操作

15

在酒精灯无菌区操作,得15分

所有开口处均应在酒精灯无菌区,出无菌区1次扣5分

操作情况(10分)

操作熟练程度

10

熟练,得10分

较熟练,得8分

一般,得6分

不熟练,得0分

无菌检查(10分)

培养48h,有无微生物生长

10

无杂菌生长,且平板无开裂,无干枯部位,得10分

培养皿有杂菌,每个扣5分

平板开裂,共扣5分

平板干枯,共扣5分

血球计数板计数(时间:

30min)

班级:

姓名:

学号:

项目

考核内容

分值

考核记录(以"√"表示)

备注

得分

准备(3分)

物品摆放及酒精擦手

0、5

物品摆放合理、酒精擦手正确,得0、5分

摆放的物品影响操作,扣0、5分

取菌前未用酒精擦手,扣0、5分

显微镜的取用

0、5

显微镜的取用与摆放方式准确,得0、5分

取用与摆放方式不正确,扣0、5分

血球计数板的放置与检查

1

正确放置血球计数板于载物台上,得1分

没用压片夹夹住,扣0、5分

没有放在计数区内,扣0、5分

1

进行检查或经清洗后确定清洁,得1分

没有进行检查扣1分

清洗后干燥方法不合理,扣1分

加样(2分)

添加酵母菌悬液于血球计数板上

2

能够正确添加酵母菌悬液2分

加样前未摇匀菌悬液扣1分

未用滤纸吸除多余菌液扣0、5分

盖好玻片后有气泡扣1、5分

显微镜调节(3分)

调整显微镜找到血球计数板上计数网格

3

40倍镜下找到最左上角的大网格,并将显微镜调清晰,给监考老师瞧,得3分

未从低倍到高倍转换,扣0、5分

未给监考老师瞧扣2、5分

未找到最左上角的大网格扣2分

找到最左上角的大网格但不清晰扣1分。

计数(2分)

准确计数,并写出原始数据

2分

准确计数,并写出原始数据,得2分

没有原始数据,扣2分

数据不准确,扣1分

原始数据不合理,扣1分

计算,报告(6分)

计算公式、过程

4

准确计算,得出菌悬液浓度,得4分

数据处理过程不正确,扣4分

数据处理结果不正确,扣4分

数据不合理,扣1分

报告结果规范、正确

2

报告清楚、准确、无涂改,得2分

结果报告不准确,扣0、5分

报告填写每改1次,扣0、5分

清洗(2分)

血球计数板清洗,归位

2

血球计数板清洗,并干燥归位2分

清洗方法不正确,扣1分

干燥方法不合理,扣1分

未将血球计数板归位,扣1分

文明操作(2分)

实验后台面整理,设备归位

2

整理,得2分

显微镜未整理,扣1分

台面未整理,扣1分

血球计数板损坏,扣2分

盖玻片损坏,扣0、5分

完成时间(0分)

共用(     )分钟

开始:

     

结束:

     

0

提前,不加分不扣分

按时,不加分不扣分

超时:

每超1分钟,扣1分(最多扣5分)

合计

平板划线分离考核标准

班级:

姓名:

学号:

序号

项目

内容

满分(100分)

评分细则

扣分

总分

1

实验前的准备

准备全所需的所有实验材料

15分

3

材料准备充分,中途取用物品扣3分

 

 

贴标签

4

未贴扣4分,贴错扣2分;信息不完整扣2分

酒精棉球擦拭手与工作台面

4分

未擦拭扣4分

擦手不彻底最多2分

擦台面不彻底最多2分

接种针的灼烧就是否彻底,拿法就是否科学

4分

灼烧不彻底,最多扣3分

接种环拿法不对,扣1分

未灼烧4分

2

从试管中取样接入培养皿中

试管中取菌(15分)

50分

3

试管口未灼烧,扣3分

 

2

持塞手法不正确,扣2分

3

接种环未冷却,扣3分

4

塞塞子时未灼烧塞子与管口,扣4分

3

试管口离开无菌区,扣3分

手法就是否标准(5分)

1

持平板的手法不当扣1分

4

开口过大扣4分

分区接种(30)

5

有离开5cm酒精灯无菌区1次扣2分,最多扣5分

 

离开无菌区10cm以上一次扣5分

5

划完1区未灼烧,扣5分

5

灼烧完未冷却,扣5分

5

单手旋转平板,有明显的分区操作

10

划破平板,最多扣10分

3

接种完毕,台面的处理以及培养等

台面的整理:

酒精灯熄灭,各试验器材归位(4分)

10分

1分

熄灭方式不对,扣1分

 

 

3分

未归位,扣3分;未整理,扣2分

未带走垃圾,扣2分。

最多扣3分

 

置入培养箱中倒置培养,以及最适培养温度的设置(4分)

4分

未倒置,扣2分

 

 

培养温度与时间写在标签上,未注明扣2分

完成实验,酒精棉球擦拭手或者洗手(2分)

2分

未擦拭手或洗手1

 

 

4

结果检查

分离效果

20分

10分

10个以上单菌落,少1个扣1分

 

 

分区效果

5分

无明显分区,只有一个区,扣5分

平板无菌落区按占的比例扣分

污染情况

5分

有其她杂菌污染,扣5分

5

用时

5

 5分钟,超过1分钟扣1分

 

平板涂布分离考核标准(20min)

班级:

姓名:

学号:

项目

考核内容

分值

考核记录(扣分)

备注

得分

准备(10分)

物品摆放及酒精擦手

5

物品准备合适,不多不少,得3分

物品摆放合理、酒精擦手正确,得2分

摆放的物品影响操作,扣1分

取菌前未用酒精擦手,扣1分

编号(试管、培养皿),贴标签

5

都编号且正确,得5分

每漏编(贴)一个,扣1分

每错编一个,扣1分;标签信息不全,一个扣1分

样品稀释

(30分)

样品混匀(原始样品、稀释样品)

10

进行且操作正确(平摇样品瓶、手心震摇试管),得10分

原始样品没有混匀,扣2分

稀释样品没有混匀,一个扣2分

手心震摇试管时没塞塞子,扣2分

移液过程其她问题,一次扣2分

吸管或移液器使用(打开方式、取液、调节液面、放液、稀释顺序)

10

吸管或移液器使用正确,得5分

打开吸管包扎纸时手碰到管尖至吸管的1/3处,一次扣2分;枪头盒每取一次都要迅速盖上,注意无菌操作,未盖一次扣2分

放液时若吸管(或移液器)外壁碰到试管口却没有灼烧试管口,一次扣2分

吸取刻度不准确,一次扣2分

稀释时将移取过高浓度菌液的吸管插入到低浓度试管中,一次扣2分

移液过程中液体流滴在试管外面,一次扣2分

试管、三角瓶操作(开塞、管口灭菌、持法、盖塞)

10

试管三角瓶操作正确,得10分

菌种试管三角瓶开塞未灼烧,扣2分

开塞不正确,一次扣2分

盖塞不正确,一次扣2分

持法不正确,一次扣2分

盖塞未灼烧,扣2分

平板涂布(25分)

加样

5

操作正确,得5分

将移取过高浓度菌液的吸管插入到低浓度试管中进行接种,一次扣1分

吸管外壁碰到培养皿壁,一次扣1分

漏接培养皿,一个扣1分

试管被污染,每根扣1分

涂布

10

涂布棒使用正确,涂布效果好,得10分

涂布棒上酒精未灼烧彻底,扣2分

涂布棒未冷却,一次扣2分

涂布方法不对,扣2分

涂布使平板破,扣4分

单手持皿,平端,两指自如开合皿盖,错误扣2分

酒精灯附近区操作

3

在酒精灯附近区操作,得3分

未在酒精灯附近区操作,扣3分

空白

4

进行,得4分

未进行,一个扣2分

操作熟练程度

3

熟练,得3分

较熟练,得2分

一般,得1分

不熟练,得0分

培养(3分)

培养

3

正确培养,得3分

培养时未翻转培养皿,一个扣2分

将培养时间与培养温度写在标签上,错误或漏写均扣1分

文明操作

(2分)

实验后台面整理

1

整理,得1分

未整理,扣1分

器皿破损

1

未破损,得1分

破损,扣1分

完成时间(0)

共用(     )分钟

开始:

     

结束:

     

0

提前,不加分不扣分

按时,不加分不扣分

超时:

每超1分钟,扣1分(最多扣5分)

合计

结果观察

结果判断(30分)

培养结果观察

10

菌落无片状,空白无菌落,得10分

有10个以上单菌落,少一个扣1分

空白平板有菌落,一个平板扣5分

精密度

极差与平均值之比(%)

(以计数平板进行计算)

12

≤10%

得12分

10~15%

得9分

15~20%

得6分

20~30%

得3分

>30%

得0分

准确度

(以计数平板进行计算)

8

≤10%

得8分

10~20%

得4分

20~30%

得2分

>30%

得0分

培养基的制备与灭菌

班级:

姓名:

学号:

项目

考核内容

分值

考核记录(扣分)

备注

得分

题目

配制50mL牛肉膏蛋白胨培养基,全部分装入试管中,灭菌完毕摆斜面

准备(10分)

药品准备

2

药品齐全,类别准确

天平准备

4

水平,干净

其她

4

操作所需所有物品,均齐全合适

计算(5分)

准确

5

所有物品均计算准确,且称量准确

称量(25分)

加水

3

加水量适宜

顺序准确

2

按照配方顺序加入样品

方法正确

5

牛肉膏的称取方法正确

5

蛋白胨迅速,不至潮解

操作文明

10

不得有药品撒入天平中,一次扣5分

溶解与

定容(10)

药品溶解

5

按顺序溶解样品,不糊不溢

准确定容至要求的体积

5

体积准确,定容方法准确

调节pH(10分)

调制要求值

5

pH试纸使用准确

5

调节准确,不过量,不回调

分装(15分)

分装试管,将所有培养基分装完

5

装量适宜,过大或过小一支扣1分

5

分装时培养基沾染在试管口上,一支1分

5

分装过程培养基凝固

灭菌(5分)

高压蒸汽灭菌

5

温度时间设定合适,写在标签上

灭菌锅使用熟练

摆斜面5分

摆接种斜面

5

长短适宜

表面整齐

熟练程度(5分)

操作熟练程度

5

熟练,得5分

较熟练,得3分

一般,得2分

不熟练,得0分

文明操作

(5分)

实验后台面整理

3

整理,得3分

未整理,扣3分

器皿破损

2

未破损,得2分

破损,扣2分

完成时间(5)

共用(     )分钟

开始:

     

结束:

     

0

提前,不加分不扣分

按时,不加分不扣分

超时:

每超1分钟,扣1分(最多扣5分)

合计

高压蒸汽灭菌锅的使用与维护

班级:

姓名:

学号:

序号

内容

分值

评分标准

扣分与备注

得分

1

材料准备

5

所需菌种、材料齐全,中途无任务新增材料

操作准备

5

水量适宜、物品摆放合适

10

加盖方式正确,各旋钮调节适当

2

灭菌

5

放气方法准确,时间恰当

旋钮调节

15

灭菌过程中各旋钮调节准确

压力旋钮

5

设置改变压力旋钮,方式准确

3

灭菌结束

5

灭菌结束,各旋钮与开关调节恰当,维护方法准确

4

故障处理

10

在灭菌过程中随机提出问题,

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