酶免疫技术试题.docx
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酶免疫技术
[单项选择题]
1、斑点免疫层析试验最常用的栽体材料是（）
A.乙酸纤维素膜B.尼龙膜
C.滤纸
D.硝酸纤维素膜
E.玻璃纤维膜
参考答案：
D
参考解析：
斑点免疫层析试验以硝酸纤维素为载体，利用微孔滤膜的毛细管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，犹如层析一般。
考点：
斑点免疫渗滤试验
[单项选择题]
2、ELISA板包被后，最常用的封闭物质是（）
A.人白蛋白
B.人球蛋白
C.牛血清白蛋白
D.牛血清球蛋白
E.鼠白蛋白
参考答案：
C
参考解析：
将抗原或抗体固相化的过程称为包被。
由于载体的不同，包被的方法也不同。
如以聚苯乙烯ELISA板为载体，通常将抗原或抗体溶于缓冲液（最常用的为pH9.6的碳酸缓冲液）中，加于ELISA板孔中在4℃过夜，经清洗后即可应用。
如果包被液中的蛋白质浓度过低，固相载体表面有能被此蛋白质完全覆盖，其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面，最后产生非特异性显色而导致本底偏高。
在这种情况下，如在包被后再用1％～5％牛血清白蛋白包被一次，可以消除这种干扰。
这一过程称为封闭。
包被好的ELISA板在低温可放置一段时间而不失去其免疫活性。
考点：
免疫吸附剂
[单项选择题]
3、均相酶免疫测定不具有的特点是（）
A.常用于半抗原和小分子的检测
B.操作简便，易于自动化
C.不易受样品中的内源性酶的干扰
D.酶与抗原结合后仍保留酶和抗原的活性E.灵敏度不及异相酶免测定
参考答案：
C
参考解析：
均相酶免疫测定是将半抗原或小分子抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与晦结合制成酶标记物，酶与抗原（半抗原）结合后仍保留酶和抗原（半抗原）的活性。
均相酶免疫测定操作简便、快速、适合于自动化，应用广泛，不仅可检测药物、激素、毒品、兴奋剂等半抗原或小分子抗原，也可测定大分子蛋白质、病毒及细胞性抗原成分。
最大缺点是易受样品中非特异的内源性酶、酶抑制药及交叉反应物的干扰，而且由于采用竞争性结合分析原理，灵敏度不及异相酶免测定。
考点：
均相酶免疫测定
[单项选择题]
4、制作ELISA载体材料最常用的物质是（）
A.聚氯乙烯
B.聚苯乙烯
C.硝酸纤维素膜
D.尼龙膜
E.磁性微粒
参考答案：
B
参考解析：
酶免疫技术的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。
最常用的固相载体物质是聚苯乙烯。
因其具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。
而且聚苯乙烯为塑料，可制成各种形式，在测定过程中，它作为载体和容器，不参与化学反应，加之它的价格低廉，所以被普遍采用。
考点：
固相载体
[单项选择题]
5、下列有关酶增强免疫测定技术（EMIT）的叙述中，错误的是（）
A.半抗原与酶结合后同时保留半抗原与酶的活性
B.属于竞争性抗原抗体反应
C.EMIT是一种均相酶免疫技术
D.若标本中的待测半抗原少，则游离的酶标半抗原就多
E.标本中待测抗原的量与酶的量呈正比
参考答案：
D
[单项选择题]
6、关于ELISA的底物OPD的特点哪一条不正确（）
A.具有致癌性
B.灵敏度高
C.比色方便
D.配成应用液后稳定性好
E.与酶反应后显橙黄色
参考答案：
D
[单项选择题]
7、患者HBsAg（+）、HBeAg（+）、抗－Hbe（－）、抗－HBcIgM（+）、抗－HBs（－），正确的判断是（）
A.急性乙型肝炎
B.慢性乙型肝炎
C.慢性迁延性肝炎
D.乙肝恢复期
E.慢性活动性肝炎
参考答案：
A
[单项选择题]
8、HRP的供氢体是（）
A.TMB
B.H2O2
C.小分子醇过氧化物
D.尿素过氧化物
E.以上都不是
参考答案：
A
[单项选择题]
9、ELISA中最常用的酶是（）
A.葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶
B.β－半乳糖苷酶和辣根过氧化物酶
C.葡萄糖氧化酶和碱性磷酸酶
D.脲酶和碱性磷酸酶
E.辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶
参考答案：
E
[单项选择题]
10、ELISA间接法通常用来检测（）
A.抗体
B.抗原
C.免疫复合物
D.抗抗体
E.半抗原
参考答案：
A[单项选择题]
11、酶扩大免疫测定技术是最早取得实际应用的何种酶免疫测定方法（）
A.均相酶免疫测定
B.异相酶免疫测定
C.固相酶免疫测定
D.液相酶免疫测定
E.固相－液相酶免疫测定
参考答案：
A
[单项选择题]
12、为消除非特异性显色导致的本底偏高，酶免疫技术中将抗原抗体包被后需再进行封闭的是（）A.15％～25％牛血清白蛋白B.10％～15％牛血清白蛋白C.10％牛血清白蛋白D.1％～10％牛血清白蛋白E.1％～5％牛血清白蛋白
参考答案：
E
[单项选择题]
13、制备酶标记物的交联剂的反应基团至少应有（）A.5个B.4个C.3个D.2个E.1
个
参考答案：
D
[单项选择题]
14、酶免疫技术用于样品中物质的定量测定（EIA）是基于（）
A.酶标记物参与免疫反应
B.酶催化免疫反应，复合物中酶活性与样品测值呈正比
C.含酶标记物的免疫复合物中的酶可催化底物成色，其色泽与待测物量相关
D.固相化技术的应用，使结合和游离的酶标记物能有效的分离
E.酶与抗原或抗体的特异结合
参考答案：
C
参考解析：
酶免疫技术是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析[单项选择题]
15、比色分析中符号C表示（）
A.吸光度
B.电流
C.透光系数
D.透光度
E.溶液浓度
参考答案：
E
参考解析：
C表示浓度。
[单项选择题]
16、酶免疫技术中最佳工作浓度的选定常采用（）
A.抗原稀释法
B.抗体稀释法
C.酶标记物稀释法
D.棋盘滴定法
E.A+B
参考答案：
D
参考解析：
最佳工作浓度的选择通常通过将抗体、抗原作一系列的稀释，即棋盘滴定。
[单项选择题]
17、下述哪一种酶联免疫吸附实验方法最常用于抗原测定（）
A.间接法ELISA
B.反向间接法ELISA
C.竞争法ELISA
D.双抗体夹心法ELISA
E.捕获法
参考答案：
D
[单项选择题]
18、ELISA不可应用于下列哪一方面检测（）
A.病原体的检测
B.抗体的检测
C.肿瘤标志物的检测
D.基因的检测
E.抗原的检测
参考答案：
D
参考解析：
ELISA技术应用广泛，几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可以检测，但不用于基因检测[单项选择题]
19、反应结束时，对照管的成色最强，此情况常见于哪种ELISA（）
A.双抗体夹心法ELISA
B.竞争法ELISA
C.间接法ELISA
D.捕获法ELISA
E.ABS-ELISA
法
参考答案：
B
参考解析：
竞争法ELISA的原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与同相抗原结合。
标本中抗体量越多，结合在固相上的酶标抗体愈少，因此阳性反应呈色浅于阴性反应。
[单项选择题]
20、如果标本中存在NaN可能会导致（）
A.假阴性
B.假阳性
C.灵敏度增加
D.特异性增加
E.临界值下降
参考答案：
A
[单项选择题]
21、酶标板用抗原包被后要进行封闭的主要原因是（）
A.使抗原固化到聚苯乙烯板上
B.增加酶标板的稳定性
C.保护包被抗原的免疫活性
D.防止非特异反应
E.使酶的工作浓度最佳
参考答案：
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[单项选择题]
22、患者，男，40岁。
乏力、食欲缺乏半个月。
查体：
肝于肋缘下1cm，脾侧位可及。
HBsAg（+）、HBeAg（+）、抗-HBe（-）、抗-HBclgM（+）、抗-HBs（-）。
疑似诊断为（）
A.急性乙型肝炎
B.慢性乙型肝炎
C.慢性迁延性肝炎
D.乙肝恢复期
E.慢性活动性肝炎
参考答案：
A
参考解析：
HBsAg（+）表示体内感染了HBV的特异性标志；HBeAg（+）表示患者血液有感染性；抗-HBcIgM（+）提示新近HBV感染并有病毒增殖，有助于诊断急性乙型肝炎。
故选择A。
[单项选择题]
23、关于ELISA竞争法正确的是（）
A.用于检测抗原
B.被检测物与酶标记物的免疫活性各不相同
C.被测物多则标记物被结合的机会少
D.测定管的颜色比对照管的淡表示被测物量少
E.只用于检测抗体
参考答案：
C
[单项选择题]
24、艾滋病病毒检测的确证试验通常采用何种检测方法（）
A.化学发光法
B.免疫印迹法
C.ELISA
D.斑点免疫渗滤试验
E.斑点-ELISA
法
参考答案：
B
[单项选择题]
25、ELISA技术中，最常用来检测抗原的方法是（）
A.双抗体夹心法
B.竞争法
C.捕获法
D.间接法
E.应用生物素和亲和素的ELISA
参考答案：
A
[单项选择题]
26、间接免疫荧光和ELISA检测用已知抗原检测未知抗体，有关抗体正确的是（）
A.第1抗体为羊抗人免疫球蛋白
B.第2抗体为人免疫球蛋白
C.第1抗体为兔抗人免疫球蛋白
D.第1抗体为人免疫球蛋白，第2抗体为羊抗人免疫球蛋白
E.第1抗体为人免疫球蛋白，第2抗体为荧光或酶标记的羊／兔抗人免疫球蛋白
参考答案：
E
[单项选择题]
27、ELISA法检测抗-HBc，其操作原理为（）
A.双抗体夹心法
B.双位点一步法
C.间接法
D.竞争法
E.捕获法
参考答案：
D
[单项选择题]
28、ELISA试验时易造成空白值增高的原因主要来自于（）
A.保温时间短
B.加样不准
C.洗涤不彻底
D.比色误差
E.包被不好
参考答案：
C
[单项选择题]
29、ELISA试验中将HRP酶结合到抗原或抗体的方法是（）
A.凝胶过滤
B.离子交换层析
C.亲和层析
D.戊二醛交联
E.共价结合
参考答案：
D
[单项选择题]
30、患者，男，36岁。
HBsAg阳性5年，ALT反复增高2年，经治疗可恢复。
近2个月来乏力、食欲减退。
体检：
巩膜无黄染，未见肝掌及蜘蛛痣。
肝于肋缘下1cm，脾侧位可及。
实验室检查：
ALT420U/L，HBsAg（+）。
诊断：
慢性乙型肝炎。
患者接受干扰素治疗。
选择以下观察疗效的最佳指标（）
A.HBeAg（-）、HBV-DNA（+）
B.HBeAg（-）、HBV-DNA（-）
C.HBeAg（+）、HBV-DNA（-）
D.HBsAg（+）、抗-HBe（+）
E.HBsAg（+）、抗-HBc（+）
参考答案：
B
参考解析：
乙型肝炎病程超过半年，体征及肝功能异常符合慢性乙型肝炎诊断。
HBeAg及HBV-DNA转阴或明显减少为治疗有效。
[单项选择题]
31、检测IgM抗体最常用的酶联免疫吸附试验类型是（）
A.间接法
B.捕获法
C.竞争法
D.双抗原夹心法
E.间接法
参考答案：
B
参考解析：
血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。
因此测定IgM抗体多用捕获法，先将所有血清IgM（包括特异性IgM和非特异性IgM）同定在固相上，在去除IgG后再测定特异性IgM。
[单项选择题]
32、以下各种ELISA技术中，待测孔（管）最后显色的颜色深浅与标本中待测物质呈负相关的是（）
A.双抗体夹心法
B.双位点一步法
C.间接法
D.竞争法
E.捕获法
参考答案：
D
参考解析：
竞争法参考管中由于结合的酶标抗原最多，故颜色最深。
参考管颜色深度与待测管颜色深度之差，代表受检标本抗原的量。
待测管颜色越淡，表示标本中抗原含量越多。
其他都是正相关。
[单项选择题]
33、以下哪一种复合物的形成属于间接法ELISA免疫反应结果（）
A.固相抗原-抗体-酶标二抗
B.固相抗体-抗原-酶标抗体
C.固相二抗-IgM抗原-酶标抗体
D.固相抗体-酶标抗原
E.固相抗体-抗原-抗体-酶标抗体
参考答案：
A
参考解析：
间接法是检测抗体常用的方法。
其原理为利用酶标记的抗抗体（抗人免疫球蛋白抗体）以检测与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法。
[单项选择题]
34、检测HBV血清学标志物最常用的方法为（）
A.免疫荧光法
B.ELISA
C.中和试验
D.免疫印迹试验
E.放射免疫法
参考答案：
B
参考解析：
目前在国内的临床实验室中最常用的是酶联免疫吸附试验（ELISA）。
ELISA灵敏度高、特异性强、简便快速、成本低。
[单项选择题]
35、在双位点ELISA实验时，造成抗原测值低于实际含量的常见原因是（）
A.固相抗体过多
B.反应时间不够
C.标记抗体过多
D.待测物过浓
E.酶的活性过高
参考答案：
D
参考解析：
钩状效应是指由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象，其中抗体过量叫做前带效应，抗原过量叫做后带效应。
抗原抗体特异性反应时，生成结合物的量与反应物的浓度有关。
无论在一定量的抗体中加入不同量的抗原或在一定量的抗原中加入不同量的抗体，均可发现只有在两者分子比例合适时才出现最强的抗原一抗体反应。
[单项选择题]
36、关于斑点-ELISA说法哪一项不正确（）
A.以吸附蛋白能力很强的硝酸纤维膜为载体
B.底物经酶反应后形成有色沉淀，使固相膜染色
C.斑点-ELISA灵敏度高，测得效价常高于常规ELISA
D.操作简便
E.斑点-ELISA可同时获得对多种疾病的诊断结果
参考答案：
C
参考解析：
斑点-ELISA的原理与常规ELISA相同，不同之处在于斑点-ELISA采用的固相载体为对蛋白质具有很强吸附力的硝酸纤维素膜，故检测灵敏度高，是普通ELISA的6～8倍。
如果膜上同定多种抗原，可同时检测多种抗体。
[单项选择题]
37、酶联免疫吸附试验（ELISA）中应用最多的底物是（）
A.邻苯二胺（OPD.B.四甲基联苯胺（TMB.
C.ABTS
D.对硝基苯磷酸酯（p-NPP）
E.以上都不是
参考答案：
B
参考解析：
邻苯二胺灵敏度高，比色方便，是ELISA中应用最早的底物，但稳定性差，反应过程需要避光，还具有致癌性；四甲基联苯胺稳定性好，反应无需避光，没有致突变作用，是目前应用最广泛的底物，但是水溶性差。
[单项选择题]
38、下列哪项不是血药浓度免疫学测定的技术（）
A.化学发光免疫测定
B.免疫电泳法
C.放射免疫法
D.荧光免疫法
E.酶免疫法
参考答案：
B
参考解析：
药物多数分子量很小，为半抗原。
免疫电泳的方法不够灵敏，不适于测定半抗原。
[单项选择题]
39、选择ELISA的标记用酶，下面哪一项特性是不需要的（）
A.具有可与抗原、抗体结合的基团
B.标记抗原后，酶活性保持稳定
C.当酶标抗原与抗体结合后酶活性可出现激活或抑制
D.酶催化底物反应后生成的信号易于测定、重复性好
E.酶的稳定性、可溶性好
参考答案：
C
参考解析：
选择ELISA的标记用酶，保证标记抗原后，酶活性保持稳定。
[单项选择题]
40、酶免疫技术中的酶结合物是指（）
A.酶标记抗原
B.酶标记抗体
C.酶标记抗原或抗体
D.结合在固相载体上的酶
E.酶与底物的结合
参考答案：
C
参考解析：
酶结合物是指用酶标记后的抗原或抗体。
[单项选择题]
41、用ELISA双抗体夹心法检测抗原A时，固相载体的包被物是（）
A.酶标记A抗体
B.未标记的抗A抗体
C.未标记抗原A
D.酶标抗球蛋白抗体
E.酶标记抗原A
参考答案：
B
参考解析：
ELISA法中双抗体夹心法的固相载体包被物是未标记的抗待测抗原的抗体。
[单项选择题]
42、下列对血清中酶活力的测定的描述哪一项是错误的（）
A.可测定产物生成量
B.可测定底物消耗量
C.需最适pH
D.需最适温度
E.与底物浓度无关
参考答案：
E
参考解析：
酶促反应中需要最适
pH、温度及过量的底物，反应速度可用一定时间内产物生成量或底物消耗量来反映。
[单项选择题]
43、下列说法不正确的是（）
A.邻苯二胺为在ELISA中应用最多的底物
B.一般采用四甲基联苯胺作为AP的底物
C.AP系统的敏感性一般高于应用HRP系统
D.β－半乳糖苷酸的底物常用4－甲基伞基－β－d半乳糖苷
E.AP较难得到高纯度制剂，稳定性较HRP低，价格较HRP高，制备酶结合物时得率也较HRP低等原因
参考答案：
B
[单项选择题]
44、酶免疫技术中选定最佳工作浓度常采用（）
A.抗体稀释法
B.抗原稀释法
C.酶标记物稀释法
D.棋盘滴定法
E.A+B
参考答案：
D[单项选择题]
45、酶免疫技术中的酶结合物指的是（）
A.酶标记抗体
B.酶标记抗原
C.酶标记抗原或抗体
D.结合在固相载体上的酶
E.酶与底物的结合
参考答案：
C
[单项选择题]
46、在ELISA中，不是ELISA的反应过程，但却是决定试验成败的关键的是（）
A.温育
B.洗涤
C.加样
D.结果判断
E.做阴阳性对照
参考答案：
B
[单项选择题]
47、下列有关血清中酶活力测定的说法有误的是（）
A.可测定底物消耗量
B.可测定产物生成量
C.需最适pH
D.需最适温度
E.与底物浓度无关
参考答案：
E
[单项选择题]
48、利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体的方法，通常称为（）
A.双抗体夹心法
B.双位点一步法
C.间接法
D.竞争法
E.捕获法
参考答案：
C
参考解析：
间接法是检测抗体最常用的方法，其原理是利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，只要更换不同的固相抗原，就可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。
[单项选择题]
49、免疫渗滤试验衍生于（）
A.免疫扩散试验
B.免疫层析试验
C.免疫印迹试验
D.dot－ELISA
E.RIA
参考答案：
D
[单项选择题]
50、最常用于IgM测定的ELISA方法是（）
A.双抗体夹心法
B.间接法
C.竞争法
D.捕获法
E.dot－ELISA
法
参考答案：
D
[单项选择题]
51、关于ELISA的固相载体论述有误的是（）
A.最常用的是聚苯乙烯微量反应板
B.每一批号的聚苯乙烯在使用前需检查其性能
C.聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯低
D.阳性和阴性标本测定结果差别最大者是最适用载体
E.微孔滤膜也可作固相载体
参考答案：
C
[单项选择题]
52、用ELISA双抗体夹心法检测血清中甲胎蛋白（AFP）应选择的固相包被物是（）
A.已知AFP
B.酶标记AFP
C.抗AFP抗体
D.酶标记抗AFP抗体
E.待检血清
参考答案：
C
[单项选择题]
53、HRP（用于标记）的RZ值应大于（）A.3.0B.3.1C.3.2D.3.3E.3.4
参考答案：
A
参考解析：
用于酶免疫技术的HRP，其RZ值应大于3.0。
RZ值与酶活性无关。
[单项选择题]
54、ELISA双抗体夹心法（）
A.将酶标记特异抗体用于检测抗原
B.先将待测抗原包被于固相载体
C.标记一种抗体可检测多种抗原
D.能用于半抗原的测定
E.将酶标记抗抗体用于抗原检测
参考答案：
A
[单项选择题]
55、一个亲和素分子可以结合几个生物素分子（）A.1个B.2个C.3个D.4个E.5
个
参考答案：
D
[单项选择题]
56、ABC法中的桥是指（）
A.生物素
B.亲和素
C.生物素化的抗体
D.与生物素结合的酶
E.三抗
参考答案：
B
[单项选择题]
57、与双抗体夹心法相比，ELISA间接法的主要优点是（）
A.有较大的放大作用
B.减少了操作步骤C.减少了冲洗次数
D.可以用一种酶标抗体检测各种与抗原相应的抗体
E.缩短反应时间
参考答案：
D
[单项选择题]
58、均相酶免疫测定的优点不包括（）
A.多用于小分子激素和半抗原的测定
B.勿需分离游离的酶标抗原
C.易于自动化分析
D.不易受样品中非特异的内源酶的干扰
E.灵敏度可达10－9mol／L
参考答案：
D
[单项选择题]
59、钩状效应是指用ELISA一步法测定标本中待测抗原时，抗原浓度过（），实测值偏（）的现象，极易造成假阴性（）
A.低，高
B.高，高
C.高，低
D.低，低
E.高，不变
参考答案：
C
参考解析：
在ELISA一步法测定中，应注意钩状效应，类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。
当标本中待测抗原浓度相当高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，所得结果将低于实际含量。
钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。
考点：
酶联免疫吸附试验方法类型及反应原理
[单项选择题]
60、ELISA试验中最常用的标记酶是（）
A.AST
B.HRP
C.ACP
D.LDH
E.ALT
参考答案：
B
参考解析：
在ELISA中，常用的酶为辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。
应
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