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高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷含量
【编者按】：
医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果
的论说性文章。
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高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷含量
作者：
钱平,贾云,刘志辉,钱芳
【摘要】目的建立高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷含量的方法。
方法色谱
柱：
SupelcoODSC18（4.6mm250mm,5流动相：
甲醇-水（20∶80）;柱温：
25℃;流速：
1.0mL/min;检测波长：
210nm。
结果苦杏仁苷峰分离良好,苦杏仁苷浓度在0.06613～
4.232g间线性关系良好,r=1.0000,平均回收率为95.91%（RSD=2.29%）。
结论本方法准
确、可靠,可用于郁李仁中苦杏仁苷的含量测定。
1
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【关键词】郁李仁;苦杏仁苷;高效液相色谱法;含量测定
Abstract：
ObjectiveToestablishaHPLCmethodforthedeterminationofamygdalinin
SemenPruni.MethodsTheanalyticalcolumnwasSupelcoODSC18column（4.6mm250
mm,5m）,withmethanol-water（20∶80）asmobilephase.Theflowratewas1.0mL/min,
andthedetectionwavelengthwas210nm.ResultsThelinearrangeforamygdalinwas0.066
13～4.232g（r=1.0000）.Theaveragerecoverywas95.91%（RSD=2.29%）.ConclusionThe
methodisaccurateandreliable,andcanbeusedinthedeterminationofamygdalininSemen
Pruni.
Keywords：
SemenPruni;amygdalin;HPLC;contentdetermination
郁李仁为蔷薇科植物欧李PrunushumilisBge.、郁李PrunusjaponicaThunb.或长柄扁
桃PrunuspedunculataMaxim.的干燥成熟种子,前二者习称小李仁,后者习称大李仁,
具有润燥滑肠、下气、利水的功效[1]。
苦杏仁苷为郁李仁的主要成分之一,2005年版
《中华人民共和国药典》在该药材含量测定项下采用银量法测定,但银量法属于间接测
定方法,影响因素多,而目前采用其他方法对郁李仁进行含量测定的报道较少。
笔者采用
高效液相色谱（HPLC）法直接测定郁李仁中苦杏仁苷的含量,方法准确、可靠,为郁李仁中
苦杏仁苷的含量测定提供了依据和参考。
1仪器与试药
2
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1.1仪器
Waters515泵高效液相色谱仪,Waters2487紫外检测器,ZW色谱柱,恒温箱（中国科学
院大连化物所）,Empower色谱工作站,Agilent手动进样器（20十万分之一电子分析天平
（BP-211D型,德国Sartorius）;Cary50紫外分光光度计（美国瓦里安）。
1.2试药
苦杏仁苷对照品（中国药品生物制品检定所,批号110820-200403）;郁李仁药材购自安
徽亳州药材市场,经鉴定分别为蔷薇科植物郁李和长柄扁桃的干燥成熟种子。
乙腈为色
谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：
SupelcoODSC18（4.6mm250mm,5流动相：
甲醇-水（20∶80）;柱温：
25℃;
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流速：
1.0mL/min;检测波长：
210nm,进样量：
20L。
色谱图见图1。
2.2对照品溶液的制备
精密称取经五氧化二磷减压干燥12h的苦杏仁苷对照品42.32mg,置10mL量瓶中,
用70%甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得苦杏仁苷4.232mg/mL的对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备
取郁李仁粗粉0.3g,精密称定,置具塞三角烧瓶中,加石油醚（60～90℃）50mL,回流提
取1h,过滤,以石油醚分3次洗涤滤渣及容器,每次10mL,弃去石油醚液,滤纸及滤渣挥干
溶剂,置原容器中,精密加入70%甲醇溶液50mL,精密称定,回流提取1h,放冷至室温,再
称重,用70%甲醇补足失重,抽滤,精密量取续滤液5mL置10mL量瓶中,以70%甲醇稀
释至刻度,以0.45m滤膜滤过,取续滤液即得。
2.4线性关系考察
精密量取苦杏仁苷对照品溶液1mL置10mL量瓶中,用70%甲醇稀释至刻度,再依次
稀释,制得含苦杏仁苷211.6、105.8、52.9、26.45、13.225、6.6125、3.30625g/mL的
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对照品溶液。
分别精密吸取各20L进样测定,以峰面积积分值对浓度进行回归分析,得
苦杏仁苷回归方程为：
Y=22645X+10860,r=1.0000;苦杏仁苷线性范围为0.06613～
4.232g。
2.5精密度试验
精密吸取同一供试品溶液重复进样6次,测得苦杏仁苷峰面积积分值的RSD=0.86%。
2.6重复性试验
取同一批次样品6份,按2.3项下方法制备供试品溶液,按照2.1项下色谱条件测定,
结果苦杏仁苷的平均含量为3.16%,RSD=1.35%。
2.7稳定性试验
tips:
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【编者按】：
医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果
的论说性文章。
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求，解决您在论文写作中的难题。
高效液相色谱法测定乳增宁胶囊中淫羊藿苷含量
【摘要】目的建立乳增宁胶囊中淫羊藿苷含量的测定方法。
方法采用高效液相色
谱法,色谱柱为HypersilODSC18（4.6mm250mm,5m）,流动相为甲醇-水（70∶30）,检测
波长275nm,流速为1.0mL/min。
结果淫羊藿苷在0.105～0.840g范围内,进样量与峰
面积呈良好的线性关系（r=0.9998）,平均回收率为100.5%,RSD=1.14%（n=6）。
结论该方
法简便快捷,重复性好,可作为乳增宁胶囊中淫羊藿苷含量的测定方法。
【关键词】淫羊藿苷;乳增宁胶囊;高效液相色谱法;含量测定
Abstract：
ObjectiveTodevelopamethodfordeterminingthecontentoficariinin
RuzengningCapsules.MethodsAHPLCmethodwassetuptowithHypersilODSC18（4.6
mm250mm,5m）column,andmethanol-water（70︰30）asmobilephase,theUVdetection
wavelengthwas275nmandtheflowratewas1.0mL/min.ResultThecalibrationcurvewas
showedgoodlinearity（r=0.9998）withintherangeof0.105～0.840gandtheaverage
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recoverywas99.5%,RSDwas1.27%（n=6）.ConclusionThemethodissimpleandrapid,and
withgoodreproducibilityforthedeterminationoficariininRuzengningCapsules.
Keywords：
icariin;RuzengningCapsules;HPLC;contentdetermination
乳增宁胶囊由艾叶、淫羊藿、柴胡、川楝子、天门冬、土贝母6味药材经加工制备
而成,具有疏肝解郁、调理冲任的功效,临床上用于肝郁气滞型及冲任失调型的乳腺增生
等的治疗[1]。
本试验参考文献[2-3]的方法,以高效液相色谱（HPLC）法测定乳增宁胶囊中
淫羊藿苷的含量,拟建立简便快捷、专属性和重复性均较好的含量测定方法。
1仪器与试药
日本岛津LC-10ATvp型高效液相色谱仪;SPD-20Avp型紫外检测器;KQ-100DB型数
控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
淫羊藿苷对照品（中国药品生物制品检定
所提供,批号110737-200312）;乳增宁胶囊（市售,批号分别为070901、080301、080302、
080303）。
甲醇为色谱纯;其他试剂为分析纯。
2方法与结果
7
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2.1色谱条件
色谱柱：
HypersilODSC18（4.6mm250mm,5流动相：
甲醇-水（70︰30）;检测波长：
275nm;流速：
1.0mL/min;柱温：
（30.01）℃;保留时间：
约为10min;进样量：
20理论塔
板数按淫羊藿苷计应不低于2000。
2.2对照品溶液的制备
精密称取淫羊藿苷对照品适量,置棕色量瓶中,加甲醇制成每1mL含25g的溶液,即
得。
2.3供试品溶液的制备
取本品装量差异项下的本品内容物,研细,混匀,精密称定约0.5g,置50mL棕色量瓶中,
加入70%乙醇约40mL,超声处理20min（功率100W,频率40kHz）,取出,放冷,加70%乙
醇稀释至刻度,摇匀,静置,用0.45m微孔滤膜过滤,取续滤液,即得。
2.4空白试验
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取处方项下除淫羊藿以外的其余药材,按供试品溶液的制备方法制备阴性溶液,按上述
色谱条件分析。
在与对照品的相应位置上,无明显其他峰出现。
见图1。
2.5线性范围考察
配制52.5g/mL的淫羊藿苷对照品溶液。
分别精密吸取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0mL
转移至10mL棕色量瓶中,用甲醇定容。
分别精密吸取上述溶液各20L进样。
以淫羊藿
苷对照品量为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程为：
Y=1.288
106X-3479.602,r=0.9998。
结果表明,淫羊藿苷对照品在0.105～0.840g范围与峰面积呈
良好的线性关系。
2.6精密度试验
取同一对照品溶液重复进样6次,测定,淫羊藿苷平均峰面积为722
896,RSD=0.41%（n=6）,结果表明精密度良好。
2.7重复性试验
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取同一供试品溶液于配制后0、2、4、6、8、10、24h测定,计算峰面积RSD=1.11%,
表明供试品溶液在24h内稳定。
2.8加样回收率试验
精密称取已知含量的同一批次（批号080121）郁李仁粉末6份,每份约0.15g,脱脂后分
别精密加入4.232mg/mL的苦杏仁苷对照品溶液1mL,依法制备供试品溶液并测定。
结
果见表1。
表1加样回收率试验结果（略）
2.9样品含量测定
分别测定了小李仁、大李仁药材各3批,采用外标法计算苦杏仁苷的含量,结果符合要
求。
表2样品中苦杏仁苷含量测定结果（略）
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3讨论
本研究试验了多种流动相比例和流速[2-6],采用甲醇-水（20∶80）作为流动相,苦杏仁苷
峰能较好分离,且出峰时间适当;水相中加入缓冲盐或酸对测定结果无明显影响,故水相选
择纯水;色谱柱柱温设定25、35、40℃对分析结果无明显影响,故柱温设为25℃。
由于郁李仁中含有大量的油脂,如不除去测定时易引起干扰,且连续测定含油脂样品还
可能引起色谱柱柱效降低,故提取前应先脱脂;文献报道[7]和本次试验结果均表明石油醚
脱脂效果优于乙醚,故选择石油醚作为脱脂溶剂。
苦杏仁苷易被苦杏仁苷酶水解,故一般
测定时采用甲醇为提取溶剂,但甲醇提取液直接进行测定时,苦杏仁苷峰前拖尾现象严重,
改用70%甲醇为提取溶剂时,峰形有很大改善,理论塔板数增加近1倍。
比较了不同时间
回流和超声提取效果,结果回流1h可将苦杏仁苷提取完全,效果优于超声提取。
2005年版《中华人民共和国药典》在郁李仁含量测定项下采用的是银量法,其原理是
用硝酸银滴定苦杏仁苷水解产生的氢氰酸来计算含量,苦杏仁苷的水解程度对结果影响
较大,且在判断滴定终点时不同操作人员之间存在较大误差;采用HPLC法可直接测定药
材中苦杏仁苷含量,结果客观准确,方法可靠。
【参考文献】
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仅供参阅！
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医药卫生栏目
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