人体寄生虫学试验指导供本科生使用Word格式文档下载.docx
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学时
实验
1
总论、医学原虫概论
2
溶组织内阿米巴、阴道毛滴虫
疟原虫
疟原虫
(一)
3
线虫概论、钩虫
疟原虫
(二)、弓形虫
4
绦虫概论、猪带绦虫
蛔虫、钩虫
5
吸虫概论、血吸虫
(一)
旋毛虫、鞭虫、蛲虫
6
血吸虫
(二)、医学节肢动物概论
包生绦虫、猪、牛带绦虫
7
并殖吸虫
血吸虫
(一)
8
血吸虫
(二)
蝇、蚊
9
蜱、螨
实验考试
实验一溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)
阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)
一、实验目的要求
1.掌握溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)滋养体(trophozoite)和包囊(cyst)的形态。
2.掌握溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)的生活史(lifecycle)。
3.掌握阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)滋养体(trophozoite)的形态及诊断方法。
4.了解阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)的生活史(lifecycle)及其感染方式。
二、实验内容
㈠示教标本
溶组织内阿米巴滋养体染色标本:
在高倍镜下观察,体积较大,外质(ectoplasm)明显,内质(endoplasm)中常含吞噬的红细胞。
有伪足突起者可能是滋养体(trophozoite)。
在油镜下,经铁苏木素染色后的虫体,细胞质呈灰蓝色,细胞核(nucleus)一个,呈圆形,核仁(nucleolus)常位于中心,核膜内缘有一圈大小相等、排列整齐,染色较深的核周染色质粒(chromatingranules)。
核膜与核仁之间有核丝相连。
内质中被吞噬的红细胞呈黑兰色。
㈡自看标本
1.包囊(cyst):
经铁苏木素染色后,包囊呈圆球形。
细胞质呈灰蓝色,内含1-4个细胞核,分别称单核包囊,双核包囊和四核包囊,核的结构同滋养体,未成熟包囊内的空泡为糖原泡(glycogenvacuole),极少数未成熟包囊内可见到棒状的拟染色体(chromatoidbody);
成熟包囊内有四个核。
2.阴道毛滴虫滋养体染色标本:
用油镜观察,虫体呈梨形或圆形,前端有四根前鞭毛(anteriorflagellum)和一根后鞭毛(recurrentflagellum),后鞭毛(recurrentflagellum)在虫体的一侧与波动膜(undulatingmembrane)外缘相连,细胞核大呈紫红色椭圆形,细胞质呈淡蓝色,轴柱(axostyle)从前向后纵贯虫体,并伸出体后。
3.阴道毛滴虫活滋养体:
取一块载玻片,然后用吸管从人工培养的试管中取一滴培养物,置载玻片上均匀涂开,盖上盖玻片。
用低倍镜找到虫体,再用高倍镜观察,活的虫体无色透明,水滴状,作螺旋式运动,前端鞭毛(anteriorflagellum)不停地摆动,还可见波动膜(undulatingmembrane)振动,有时在虫体前端的中央可见一个椭圆形的细胞核(nucleus)。
三、作业
绘阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)滋养体(trophozoite)染色形态图及溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)包囊(cyst)形态图。
四、思考题
1.造成阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)感染的因素有哪些?
怎样才能降低感染率?
2.怎样发现和确诊滴虫性阴道炎患者?
3.检查溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)滋养体(trophozoite)和包囊(cyst)时,在操作上和形态鉴别上应注意哪些问题?
4.阿米巴痢疾病人和带虫者(cystcarrier)在本病的传播上是否都同样重要?
为什么?
实验二疟原虫㈠(Plasmodium)
掌握间日疟原虫(Plasmodiumvivax)红细胞内期形态特征及被寄生的红细胞变化。
自看标本
间日疟原虫(Plasmodiumvivax)薄血片姬氏染色标本:
先在低倍镜下观察,在红细胞涂布均匀的部分加镜油一滴,在油镜下仔细按顺序观察。
红细胞被染成桔红色,疟原虫胞质被染成天蓝色,核染成紫红色。
但并非任何一个红色或蓝块即为疟原虫。
因为有可能是染料沉渣或其他异物。
区别异物主要是调节显微镜的细调节器,通过它的上下移动,若蓝、红颜色块与红细胞在同一平面,而且具有一定的结构并具有疟色素(malarialpigment)者是疟原虫(Plasmodium)。
反之,则是异物。
当确定为疟原虫(Plasmodium)后,再进一步辨认它为红细胞内期的哪个发育阶段。
被寄生的红细胞有胀大和褪色。
在薄血片中还常见到各种白细胞,应加以区别。
绘间日疟原虫(Plasmodiumvivax)环状体(ringform)、大滋养体(trophozoite)、未成熟裂殖体(immatureschizont)、成熟裂殖体(matureschizont)和雌、雄配子体(femaleandmalegametocyte)形态图。
1.简述间日疟原虫(Plasmodiumvivax)在人体内的发育过程。
2.疟疾(malaria)的症状发作(paroxysm)与疟原虫生活史(lifecycle)有何关系?
3.以间日疟原虫(Plasmodiumvivax)为例,比较输血和被蚊子叮咬引发的疟疾(malaria)有何不同?
4.疟疾贫血的原因有哪些?
实验三疟原虫㈡(Plasmodium)
刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)
1.掌握恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)红内期(erythrocyticstage)环状体(ringform)和配子体(gametocyte)的形态特征。
2.掌握弓形虫滋养体(thetrophozoiteofToxoplasmagondii)的形态特征。
3.了解三日疟原虫(Plasmodiummalariae)和卵形疟原虫(Plasmodiumovale)红细胞内期(erythrocyticstage)的主要形态特征。
㈠示教标本
1.三日疟原虫(Plasmodiummalariae)带状滋养体是三日疟原虫的大滋养体,被寄生的红细胞不胀大,疟原虫的细胞质呈圆形或带状。
滋养体横跨红细胞,细胞质呈蓝色。
细胞核一个,呈紫红色,疟色素(malarialpigment)为深褐色的粗大颗粒。
常沿胞质边缘分布。
2.卵形疟原虫(Plasmodiumovale):
基本形态似间日疟原虫(Plasmodiumvivax)。
被卵形疟原虫寄生的红细胞略胀大,有的细胞变长,边缘成锯齿状;
薛氏点(Schuffner’sdots)较间日疟原虫(Plasmodiumvivax)的粗大,而且出现早,在环状体期(ringform)即出现。
1.恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)环状体(ringform)染色标本:
观察方法同间日疟原虫(Plasmodiumvivax),被恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)寄生的红细胞不胀大、不褪色;
环状体(ringform)小(其直径相当于红细胞直径的1/5),环状体(ringform)常位于红细胞边缘,一个红细胞内常可见到两个以上的环状体(ringform)寄生(重复感染)、环状体(ringform)的环纤细,具有两个核的环状体较常见。
2.恶性疟原虫配子体(gametocyte)染色标本:
配子体寄生的红细胞已被胀破,所以通常见到的配子体(gametocyte)是游离在红细胞之外或旁边仅有红细胞的遗迹。
⑴雄配子体(malegametocyte):
蜡肠形,两端钝圆,细胞质呈蓝色而略带红色,核疏松呈淡红色,位于细胞质中央,疟色素呈黄棕色小杆状,在核的周围分布较多。
⑵雌配子体(femalegametocyte):
新月形、两端尖、细胞质呈蓝色,核结实较小呈深红色,疟色素多位于核的周围。
3.刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)滋养体(trophozoite)染色标本:
油镜下观察虫体呈香蕉形或半月形,一端较尖,另一端较钝圆;
一边较扁平,另一边较弯曲。
细胞核位于虫体中央,呈红色。
绘恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)环状体和雌、雄配子体(femaleandmalegametocyte)及弓形虫滋养体(thetrophozoiteofToxoplasmagondii)形态图。
1.确诊疟疾(malaria)常用什么方法?
采血时间何时最好?
为什么恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)在末梢血液中只能查到环状体(ringform)和配子体(gametocyte)?
2.疟疾(malaria)流行有何特点?
3.常用的抗疟药物有哪些?
4.弓形虫(Toxoplasmagondii)发育的全过程可分为哪几个阶段?
实验四似蚓蛔线虫(蛔虫)(Ascarislumbricoides)
美洲板口线虫(美洲钩虫)(Necatoramericanus)
十二指肠钩口线虫(十二指肠钩虫)(Ancylostomaduodenale)
1.掌握受精蛔虫卵(fertilizedegg)及未受精蛔虫卵(unfertilizedegg)的形态特征。
2.掌握钩虫(hookworm)的生活史(lifecycle)及钩虫卵(hookwormegg)的形态结构。
3.熟悉蛔虫(Ascarislumbricoides)对人的致病性。
1.蛔虫(Ascarislumbricoides)成虫(adult)大体标本:
雌虫(female)大于雄虫,雄虫(male)尾部向腹面弯曲,雌虫则不弯曲。
2.蛔虫(Ascarislumbricoides)成虫解剖标本:
雌虫(female)生殖器官为双管型,雄虫(male)生殖器官为单管型。
3.蛔虫性肠梗阻大体标本。
4.钩虫(hookworm)成虫形态:
经固定后,成虫呈乳白色。
十二指肠钩虫(Ancylostomaduodenale)体态呈“C”形,美洲钩虫(Necatoramericanus)呈“S”形,雄虫尾端具交合伞。
5.钩虫(hookworm)口囊(mouthcapsule):
在十二指肠钩虫(A.duodenale)口囊的腹面两侧可见两对钩齿(hookteeth),而美洲钩虫(N.americanus)只有一对板齿(cuttingplateteeth)。
6.钩虫(hookworm)交合伞(copulatorybursa):
十二指肠钩虫(A.duodenale)交合伞(copulatorybursa)略呈圆形,背辐肋(dorsalrays)由远端分为两支,每支又分为三小支。
美洲钩虫(N.americanus)的交合伞(copulatorybursa)似扇形。
背辐肋(dorsalrays)由基部分为两支,每支远端又分为两小支。
7.病变标本:
在肠壁上能见到许多钩虫利用口囊咬附在肠粘膜上。
㈡自看标本
1.镜下观察受精蛔虫卵及未受精蛔虫卵的形态:
⑴受精蛔虫卵(fertilizedegg):
短椭圆形,棕黄色、卵壳厚(主要是壳质(chitin))。
壳外常有一层波浪状的蛋白质膜。
卵内含有一大而圆的卵细胞,卵壳两端与卵细胞之间具有月牙形间隙。
大小为45-75×
35-50μm,有些虫卵的蛋白质膜脱落,注意与日本血吸虫卵进行区别。
有些虫卵在外界置留过长,卵内的卵细胞已发育成一幼虫。
⑵未受精蛔虫卵(unfertilizedegg):
较狭长,呈长椭圆形、棕黄色、卵壳及蛋白质膜较受精卵薄,卵内含有许多大小不等具有折光性的颗粒,卵的大小为88-94×
39-44μm。
2.镜下观察钩虫卵(hookwormegg)形态:
十二指肠钩虫与美洲钩虫卵在光学显微镜下并无明显差别,大小为56-76×
36-40μm,呈长椭圆形,无色透明,壳薄如细铅笔所描之痕迹,随粪便排出不久的虫卵,内含4-8个卵细胞,如果粪便搁置过久,卵内细胞继续分裂为多个细胞(称桑椹期)甚或发育为幼虫(胚胎期)。
卵细胞与卵壳之间有一定距离的透亮区。
绘高倍镜下的受精和未受精蛔虫卵、钩虫卵形态图。
1.脱蛋白质膜的蛔虫卵易与哪些蠕虫卵相混淆?
2.钩虫感染(hookworminfection)或钩虫病(hookwormdisease)的病原学检查应注意哪些问题?
3.何谓钩蚴性皮炎?
4.比较蛔虫(Ascarislumbricoides)与钩虫(hookworm)生活史的异同。
实验五旋毛形线虫(旋毛虫)(Trichinellaspiralis)
毛首鞭形线虫(鞭虫)(Trichuristrichiura)
蠕形住肠线虫(蛲虫)(Enterobiusvermicularis)
1.掌握旋毛虫(Trichinellaspiralis)幼虫囊包(larvacyst)及鞭虫(Trichuristrichiura)卵(egg)的形态结构。
2.掌握三种线虫(nematode)的生活史(lifecycle)及致病情况。
3.掌握蛲虫(Enterobiusvermicularis)卵的形态特征。
4.熟悉蛲虫病(enterobiasis)的诊断方法。
5.了解旋毛虫病(trichinellosis)的实验诊断。
㈠学生讲解有关蛲虫(Enterobiusvermicularis)的内容
㈡示教标本
1.鞭虫(Trichuristrichiura)成虫标本:
认清其头端和尾端。
虫体呈鞭状,长约30-50mm,雌虫稍长于雄虫,虫体前3/5纤细如丝,后2/5粗如鞭柄,雄虫(male)尾部向腹面弯曲,雌虫(female)尾部直,末端钝圆。
2.蛲虫(Enterobiusvermicularis)卵:
呈不对称椭圆形或肾形,一侧较平,另一侧稍凸,无色透明,壳厚,内含有一蝌蚪期胚胎,虫卵的大小为50-60×
20-30μm。
3.蛲虫(Enterobiusvermicularis)成虫标本:
虫体乳白色,细小似棉线头,雌虫(female)尾端长而细,雄虫(male)尾端向腹面卷曲。
4.操作示范:
透明胶纸法,棉签拭子法。
㈢自看标本
1.镜下观察旋毛虫幼虫囊包(larvacyst)的染色标本(压片或切片)。
其外形呈柠檬形。
囊包纵轴与横纹肌纤维走向一致。
囊壁由增生的纤维组织形成,囊内含1-2条卷曲的旋毛虫幼虫,幼虫头端可见由杆细胞(stichocyte)组成的杆状体(stichosome)结构。
2.镜下观察鞭虫(Trichuristrichiura)卵的形态结构:
该虫卵外形较特殊,呈纺锤形。
黄褐色,卵壳(shell)较厚。
两端各具一透明塞状突起(opercularplug),内含未分裂的卵细胞(ootid)。
虫卵的大小为50-54×
22-23μm。
绘鞭虫卵的形态图。
1.人感染旋毛虫(Trichinellaspiralis)后,旋毛虫在人体内如何移行,对人体造成哪些危害,可出现哪些症状?
2.评述旋毛虫病(trichinellosis)的诊断。
3.为何蛲虫病(enterobiasis)易反复感染?
实验六链状带绦虫(猪带绦虫)(Taeniasolium)
肥胖带绦虫(牛带绦虫)(Taeniasaginata)
细粒棘球绦虫(包生绦虫)(Echinococcusgranulosus)
1.掌握三种带绦虫的生活史(lifecycle)及带绦虫卵(egg)的形态。
2.掌握猪囊尾蚴(cysticercusofTaeniasolium)、牛囊尾蚴(cysticercusofTaeniasaginata)和棘球蚴(hydatidcyst)的形态。
3.了解三种带绦虫所致四种疾病的实验诊断(diagnosis)。
㈠自看标本
1.牛带绦虫(Taeniasaginata)成熟节片(matureproglottid)染色标本:
其形态结构与猪带绦虫(Taeniasolium)的成熟节片(matureproglottid)基本相似,但卵巢(ovary)只分两叶,无中央小叶。
2.猪带绦虫(Taeniasolium)和牛带绦虫(Taeniasaginata)妊娠节片(gravidproglottid)染色标本:
用肉眼或放大镜或低倍镜观察,在妊娠节片(gravidproglottid)内仅见到充满虫卵(egg)的高度分支的子宫(uterus),其他生殖器官退化。
这两种绦虫的妊娠节片(gravidproglottid)鉴别特点为每一侧子宫(uterus)分支数不同,猪带绦虫为7-13支,牛带绦虫为15-30支。
3.头节翻出的猪囊尾蚴(cysticercusofTaeniasolium)压片染色标本:
头节(scolex)呈球形,其上有四个吸盘(suckers)、顶突(rostellum)和小钩(hooklets)。
4.带绦虫卵(egg)形态:
猪、牛带绦虫卵和包生绦虫卵形态相似,在光学显微镜下不易区别。
呈圆球形,棕黄色,卵壳已脱落之虫卵,仅见厚而具放射状条纹的胚膜,卵内含有一具三对小钩的六钩蚴(onchosphere),大小31-43μm。
5.棘球蚴砂(hydatidsand)染色标本:
棘球蚴砂(hydatidsand)包括游离于囊液中的原头蚴(protoscolex)、生发囊(broodcapsule)、小的子囊(daughtercyst)及囊壁碎片。
而染色片于低倍镜下观察以原头蚴(protoscolex)为主,呈椭圆形,具有四个吸盘(suckers),数十个小钩(hooklets)和顶突(rostellum)。
由于吸盘重叠,常仅能见到2个。
1.成虫(adult)标本
⑴猪带绦虫(Taeniasolium)和牛带绦虫(Taeniasaginata)成虫(adult)大体标本:
肉眼观察两种绦虫的形态,可见虫体呈带状、乳白色、背腹扁平、分节,头节(scolex)细小,直径0.6-2毫米,紧接头节(scolex)的为颈部(neck),其后为链体(strobilus)。
猪带绦虫(Taeniasolium)的链体(strobilus)由700-1000个节片(proglottids/segments)组成,牛带绦虫(Taeniasaginata)由1000-2000个节片(proglottids/segments)组成。
接近颈部(neck)的节片(proglottids/segments)宽度大于长度,是幼节(immatureproglottid),其后为成节(matureproglottid)和孕节(gravidproglottid)。
这三种节片(proglottids/segments)是逐渐发育形成的,无绝对分界线。
猪带绦虫(Taeniasolium)长2-4米,牛带绦虫(Taeniasaginata)长4-8米。
⑵猪带绦虫(Taeniasolium)成熟节片(matureproglottid)染色标本:
用低倍镜观察,每一节片内都具有雌、雄生殖器官各一套。
雄性生殖器官包括:
睾丸(testis)数百个、呈滤泡状,分布于节片背面,各发出一根输出管。
输出管汇合成输精管(vasdeferens),开口于节片侧面的生殖孔(genitalpore)。
雌性生殖器官:
在节片后中部有三叶椭圆形色较深的卵巢(ovary)。
其中央一叶较小。
卵巢(ovary)后方呈块状结构的是卵黄腺(vitellinegland)。
节片中央有一棒状的子宫(uterus)。
阴道(vagina)与输精管(vasdeferens)平行,也开口于生殖孔(genitalpore)。
⑶细粒棘球绦虫(Echinococcusgranulosus)成虫(adult)染色标本:
解剖镜下可见,成虫体形较小、仅由4-5节构成,体长2-7mm,除头节(scolex)、颈部(neck)外,链体(strobilus)上的幼节(immatureproglottid)、成节(matureproglottid)、孕节(gravidproglottid)仅各一节。
头节(scolex)上有四个吸盘(suckers)及顶突(rostellum)和小钩(hooklets)。
2.幼虫(larva)标本
⑴猪囊尾蚴(cysticercusofTaeniasolium)大体标本:
头节(scolex)未翻出来的猪囊尾蚴(cysticercusofTaeniasolium),乳白色、黄豆大小、呈椭圆形半透明的囊状物,囊内充满液体,囊内乳白色小点是头节(scolex)。
⑵牛囊尾蚴(cysticercusofTaeniasaginata)头节(scolex)翻出来的压片染色标本:
镜下观察,头节(scolex)呈方形,其上仅有四个吸盘(suckers),无顶突和小钩。
⑶猪囊尾蚴(cysticercusofTaeniasolium)寄生于猪的肌肉的大体标本:
在猪的肌肉组织间隙中可见到大量的猪囊尾蚴(cysticercusofTaeniasolium)。
⑷棘球蚴(hydatidcyst)大体标本:
肉眼观察仅能见整个幼体为一个白色球体,内含棘球蚴液(hydatidfluid)和棘球蚴砂(hydatid