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职称:
副教授
毕业论文(设计)起止时间:
2011年03月——2011年06月
芦荟大黄素金属配合物与牛血清白蛋白的相互作用
摘要:
利用荧光光度法研究了中药有效成分芦荟大黄素与牛清白蛋白的相互作用
机制,求得两者的形成常数,讨论了某些金属离子对其形成常数的影响,
并根据热力学常数确定了它们之间的作用力类型。
关键词:
芦荟大黄素,血清白蛋白,荧光猝灭法
一、引言
芦荟属百合科多年生常绿肉质植物,是大自然赐予人类的仙丹草.现存芦荟有三百多个品种,被广为利用的主要有库拉索芦荟(AloeveraL)、木立芦荟(AArborescens)、好望角芦荟(AferoxMil1)、开普芦荟(AferoxMill),被民间少量应用的有皂质芦荟(Asaponaria)、中华芦荟(Avaravia)、不夜城芦荟(Anobilis)等.芦荟原产地是非洲大陆热带沙漠及地中海沿岸地区,有文字记载的是在3400多年前,在金字塔木乃伊棺木里发现的纸莎草故书上,最早且明确地记载着芦荟的药效。
唐朝中期芦荟传到中国,我国的广东、广西、福建、辽宁等省进行了引种栽培l。
芦荟作为一种天然药用植物,已经拥有几千年的发展历史[1]。
二、国内(外)研究现状
芦荟作为一种天然药用植物,已经拥有几千年的发展历史.尤其在最近几十年,在国外,尤其是少数发达国家,对芦荟的研究和开发利用速度大大加快.其应用范围不仅局限于初级的护肤保湿化妆品、洗涤用品、保健食品、饮料、茶、酒、菜等范围,而且已涉人到医学领域.对人体免疫力的提高、各种胃肠消化道溃疡、便秘、糖尿病、脑心血管疾病、妇科病、皮肤病及一些疑难病症都有明显疗效.近几年,科学家又发现其具有抗癌作用而且对艾滋病有一定的疗效,国际医学论文已发表很多.芦荟的药品、保健品不断推出,芦荟原料及其制品在1997年全世界营业额已突破650亿美元大关(国际芦荟科学协会IASC报道).日本从50年代开始种植芦荟,到了80年代才有芦荟产品问世,而且价格很高.韩国也用了15年左右的时间,才形成规模生产.美国是当今世界上芦荟产业化最发达的国家之一.其最大特点是从种植、加工生产、销售到基础科研实行“一条龙”,使芦荟的产品质量得到很好的控制,还为芦荟产品的开发、应用提供了可靠的理论依据[1]。
1997年,我国芦荟原料及其制品销售总额大约几十亿人民币,其中的一亿元为国内芦荟产品.中国的芦荟种植及产品开发尚处于起步阶段,距世界水平相差甚远,其开发应用潜力很大.1998年,国家科技部在北京召开了第二届中国芦荟产业发展研讨会,指出:
我国未来5—8年内,芦荟产业规模将达1O亿美元,可种植面积6万亩,辽宁沈阳宝岩生物科技发展有限公司芦荟种植园园区占地100亩,建有33栋温室,其深加工多种产品远销国内外。
(1)芦荟大黄素的研究现状
目前,国外芦荟的产业发展十分迅速.国际芦荟科学协会IASC的统计数字显示,1997年全球芦荟原料及制品的年销售额已突破650亿美元.专家预计,未来几年世界范围内的芦荟相关产业的产值将超过上千亿美元.世界各国都争相启动芦荟产业化的进程,而这其中美、日、韩等发达国家的芦荟研究处于世界领先水平。
血清白蛋白是血浆中含量最丰富的载体蛋白,它能和许多内源性物质广泛结合,生物体内还存在着多种微量元素和宏量元素,它们也参与许多重要的生命过程,因此研究药物、金属离子与血清白蛋白的相互作用具有重要的理论意义。
芦荟大黄素作为芦荟的主要药用成分,具有抗菌、消炎杀虫、抗癌等功效。
芦荟大黄素是中药大黄中的有效成分,具有抗菌、泻下作用,临床用作泻药芦荟大黄素的分析方法主要有毛细管电泳法、HPLC法和TLC法,其在非水介质中的电化学研究也见有报道。
王敬政、贺吉香、江崇球[2]利用荧光光度法研究了中药有效成分芦荟大黄素与血清白蛋白的相互作用机制,求得两者的形成常数,讨论了某些金属离子对其形成常数的影响,并根据热力学常数确定了它们之间的作用力类型,利用FÊ
rster非辐射能量转移技术求出了两者的结合位置。
杜金风[3]等人利用荧光猝灭、圆二色谱和分子模拟多种方法对芦荟大黄素与人血白蛋白的相互作用进行了综合性研究.结果表明,AE是HSA的强猝灭剂,结合区域位于蛋白质的位点I即亚结构域IIA中,主要作用力为疏水作用,但同时存在静电作用和氢键。
而且,AE与HSA的结合作用使得HSA的二级结构发生了变化。
吴汉东,史雪岩,李永丹[4]用荧光光谱法研究了在生理pH条件下杀虫剂辛硫磷与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。
结果表明:
辛硫磷对BSA的荧光有较强的猝灭作用,该猝灭属于静态猝灭。
根据猝灭结果求得了不同温度下辛硫磷与牛血清白蛋白结合作用的结合位点数、结合常数及反应热力学参数,并据此确定它们之间主要的相互作用力为疏水作用力。
用同步荧光光谱法探讨了辛硫磷对BSA构象的影响。
(二)芦荟大黄素的应用
1.在日用化妆品中的应用
大黄素具有特殊的化学与生理活性,具有抗衰老、抗紫外线、抗氧化、祛斑、防皱、保湿、防止皮肤粗糙的功效。
因而对多种因素造成的皮肤的老化如皱纹和色素沉着,都有独到的功效[5]。
1.1芦荟具有出众的抗炎效果
皮肤在外界强烈的刺激(如微生物感染、外伤、接触抗原等)下,会表现红肿热痛等不适症状,医学上叫做发炎。
人类早在几千年前就认识到了芦荟的消炎作用。
近年来,日本学者的实验更证明,芦荟对抗原和致敏化合物导致的组胺释放都有强烈的抑制作用,对急性接触性过敏症的治疗非常有效。
国外一些疗效型产品中,还专门以芦荟黏液面膜作为使用化妆品出现过敏反应后的治疗产品使用。
具有抗过敏作用的药物很多,如肾上腺皮质激素类药物(肤轻松、地塞米松等),抗组胺剂(苯海拉明、扑尔敏等),这些产品都因为各种毒副作用而被禁止在化妆品中使用。
但我们可以说,芦荟是目前公认最安全的天然抗过敏药之一。
而在化妆品行业中,最头痛的就是过敏问题。
过敏率过高,将会直接影响产品推广,影响产品的市场占有率,降低人们对该品牌产品的信任度。
化妆品中引起过敏的主要是香精、防腐剂和一些活性成分(如羊毛脂、胎盘提取物、果酸、维甲酸、水杨酸等),而这些又是化妆品中不可缺少的,或是体现化妆品特殊效果和卖点的成分。
在中高档化妆品中,为了降低过敏率,添加抗过敏药物无疑是最好的选择,而作为抗敏成分,芦荟当然是目前首选之—。
1.2芦荟具有良好的伤口愈合效果
接触过芦荟的人都知道,芦荟对各种外伤——割伤、擦伤、烧伤、烫伤、昆虫蛰伤、日光晒伤,都能表现出良好的止痛疗伤效果。
现代医学研究表明,作为民间医药已经有几千年的应用历史的芦荟,确实具有很好的伤口愈合效果。
对化妆品而言,促进伤口愈合有特别的意义:
肌肤暴露在外,很容易受到风吹日晒等伤害,出现微小的伤口。
干燥粗糙、色泽晦暗的皮肤大多与经常出现的细小伤口有关。
芦荟能加速微小伤口的愈合,可以明显改善肌肤外观,使肌肤变得更加细腻、柔软、润泽。
1.3芦荟的防晒效果
很多国内研究表明,芦荟大黄素等蒽醌类物质有很好的紫外吸收作用,据此得出结论,芦荟有防晒效果。
我们对这个有一些不同的看法。
芦荟大黄素等蒽醌类物质本身带有一定的颜色,接触空气更容易氧化而色泽加深。
所以国外的所谓稳定化芦荟,就是将这些不稳定的成分去除之后制得的无色透明的水状产品。
这些产品中的芦荟大黄素含量低至ppm水平,紫外吸收能力所剩无,根本谈不到什么防晒效果。
但是,人体测试表明,添加芦荟的产品确实可以延迟日晒红斑的产生,从而有一定的SPF值表现。
我们认为,这是由于芦荟具有很好的抗炎效果,可以减轻肌肤对日光损伤的炎症反应,从而延迟肌肤产生日晒红斑的时间,表现出一定的防晒效果。
同时,大黄素在化妆品中还有更多的应用,如芦荟的渗透吸收效果、优良的芦荟的保湿功效、神奇的护发效果等等。
2.在医药中的应用
2.1杀菌作用
芦荟是抗菌性很强的物质,能杀灭真菌、霉菌、细菌、病毒等病菌,抑制和消灭病原体的发育繁殖,芦荟抗菌杀菌的病菌类有:
白喉菌、破伤风菌、肺炎菌、乳酸菌、痢疾菌、大肠菌、黑死病菌、霍乱菌以及引发中耳炎、膀胱炎、化脓症、麻疹、狂犬病、小儿麻痹、流行性脑炎等疾病的病菌。
2.2抗炎作用
芦荟的缓基态酶与血管紧张来联合可抵抗炎症。
尤其是芦荟的多糖类可增强人体对疾病的抵抗力,治愈皮肤炎、慢性肾炎、膀胱炎、支气管炎等慢性病症。
2.3湿润美容作用
芦荟多糖和维生素对人体的皮肤有良好的营养、滋润、增白作用。
尤其是青春少女最烦恼的粉刺,芦荟对消除粉刺有很好的效果。
芦荟大黄素等属蒽醌甙物质,这类物质能使头发柔软而有光泽、轻松舒爽,且具有去头屑的作用。
因此,芦荟美容霜、芦荟护肤霜、芦荟染发膏等芦荟化妆品占了欧洲化妆品市场的80%。
2.4健胃下泄作用
芦荟中的芦荟大黄素甙(aloin)、芦荟大黄素(emodin)等有效成分起着增进食欲、大肠缓泄作用。
服用芦荟,能强化胃功能,增强体质,体质衰弱而失去食欲的病危患者,服用芦荟也能恢复食欲。
健康的人,长期服用芦荟和坚持芦荟浴,不仅可以防治各种疾病,而且还能改善体质,增强体力,保持精力旺盛。
健康人体液呈弱碱性,过度劳累或生活紧张等原因会使体液变成酸性,易感染病毒,常用库拉索芦荟会使体液保持碱性,维持健康、不患感冒。
芦荟是古今中外治疗便秘最有效的药物,即使非常严重的便秘,服用芦荟之后,也能在8-12小时内通便,是因为芦荟素成分增加大肠液的分泌,增加脂肪酶的活性,恢复失调的大肠自律神经功能的缘故,并且,不会有任何副作用或药物依赖性。
2.5强心活血作用
芦荟中的异柠檬酸钙等具有强心、促进血液循环、软化硬化动脉、降低胆固醇含量、扩张毛细血管的作用,使血液循环畅通,减少胆固醇值,减轻心脏负担,使血压保持正常,清除血液中的“毒素”。
2.6免疫和再生作用
芦荟素A、创伤激素和聚糖肽甘露(Ke-2)等具有抗病毒感染,促进伤口愈合复原的作用,有消炎杀菌、吸热消肿、软化皮肤、保持细胞活力的功能,凝胶多糖与愈伤酸联合还具有愈合创伤活性,因此,它是一种治疗外伤(出血性外伤、不出血性外伤)不留伤痕的理想药品。
2.7免疫与抗肿瘤作用
芦荟中的粘稠物质多糖类(乙酰化葡甘聚糖、甘露聚糖、乙酰化甘露聚糖、aloemannan、alocutin、alomicin等)具有提高免疫力和抑制、破坏异常细胞的生长的作用,从而达到抗癌目的。
日本芦荟研究专家添田百枝博士在《关于芦荟的抗癌性研究》(1966年发表)的论文中指出:
芦荟中aloemannan、alocutin、alomicin等成分能阻止癌细胞活动。
日本芦荟研究专家铃木郁南博士《芦荟素—A之抗肿瘤活动》的论文中提出了动物实验的卓越疗效。
芦荟中的高分子物质——“芦荟抗原”对于红血球具有凝聚性质,含有能与细胞膜起反应的物质;
芦荟抗癌素—A具有强烈的生理活性,经动物实验确认它具有抗癌作用,能提高人体的抗癌免疫能力,增加NK—细胞,杀死生物内异常细胞一癌细胞等功效。
用芦荟治疗癌症的另一种理论是“自身治愈力”芦荟具有增强人体的自身治愈力,这个事实已被得到证明。
8、解毒作用
芦荟本身无毒无害无副作用,不会产生抗体。
芦荟中的aloetinalomicin等成分具有分解生物体内有害物质的作用,还能消除生物体外部侵入的毒素。
放射线或核放射能治疗癌症过程中会引起的烧伤性皮肤溃疡,有芦荟治疗不仅有解毒、消炎、再生新细胞的作用,还能增加因放射治疗而减少的白血球。
9、抗衰老作用
芦荟中的粘液(mucin,就是蛋白质),是以arboranAB\aloemannan\aloetin等多糖类为核心成分,粘液类物质是防止细胞老化和治疗慢性过敏的重要成分。
粘液素存在于人体的肌肉和胃肠粘膜等处,让组织富有弹性,如果液素不足,肌肉和粘膜就会丧失了弹性而僵硬老化。
构成人体的细胞,如果粘液素不足,细胞就会逐渐衰弱,失去防御病菌、病毒的能力。
另外,粘液素还有壮身、强精作用。
10、镇痛、镇静作用
手指肿痛、牙痛而难以忍受时,在患部贴上芦荟生叶,能消除疼痛,神经痛、痛风、筋肉痛等,内服加外用芦荟,也有镇痛效果。
芦荟还能预防和治疗宿醉、晕车、晕船等。
11、防晒作用
芦荟中的天然蒽醌甙或蒽的衍生物,能吸收紫外线,防止皮肤红、褐斑产生。
12、防虫、防腐作用
芦荟汁液具有很好的消毒、防腐作用。
夏天皮肤上涂上芦荟汁,蚊子不咬。
哥伦比亚人常给小孩脚上抹上芦荟汁,以防止虫害。
芦荟汁喷洒门窗和室内,苍蝇不入,傣族人就是用芦荟汁防止苍蝇进室内的。
13、防臭作用
芦荟具有防止脚、口、腋等体臭的作用。
很早以前,人们就用芦荟来消除体臭。
非洲刚果人打猎时,在身上抹上芦荟汁,以免被动物闻到体臭。
芦荟的奇特功效引起了科学界,特别是医学界的广泛重视,尤其是以美国为代表的西方发达国家,投入了大量的人力、物力、财力研究开发应用芦荟,因而形成了一股“芦荟热”,芦荟发展非常迅速,开发成果利用显著,经济效益巨大,其研究成果不仅用于医疗、美容、食品保健,而且还应用于染料、冶金、纺织、农药、畜牧等领域中,从此芦荟身价百倍。
三、展望
据资料显示[6],美国、日本、韩国等发达国家的芦荟研究处于世界领先水平。
美国是目前开发应用芦荟产品最多的国家,尤其是库拉索芦荟。
其芦荟产业实现了种植、加工、产品、质检、销售的规范化、科学化、标准化和现代化。
日本的芦荟产业仅次于美国,是世界上研究芦荟栽培、育种、开发应用很
发达的国家,尤其是对其特有品种-木立芦荟(A.arborescensMill.)的研究和产业化相当成功。
韩国是世界上近10年来在芦荟研究与应用中发展最快
的国家,芦荟产品的销售额仅次于美国。
同国外相比,我国对芦荟的研究起步较晚,芦荟产业也处于初始阶段,还未形成产业化规模。
由于近些年来有关部门的重视,我国芦荟产业中已涌现出一批初具规模,呈现发展势头的企业。
综合一些芦荟研究专家的报道。
中国芦荟研究及产业化发展方面还存在基础科研薄弱、缺乏创新;
研究队伍严重不足、技术手段落后;
宏观指导和管理的力度不够;
缺乏统一的行政管理和行业标准;
缺乏自己的研究特色和民族品牌;
对芦荟知识的宣传普及力度不够等问题。
相信随着经济的发展,科技水平的提高,在各级政府的重视和大力支持下,加大对芦荟的宣传力度,加深对芦荟的研究开发程度,努力发展自己的芦荟产业,立足国内市场,不断开拓国际市场,使芦荟这种神奇植物能够最大限度的为人类社会服务。
参考文献:
[1]杨侯冬岩,回瑞华,李铁纯.芦荟的研究进展[J].鞍山师范学院学报2002,4(3):
54—59
[2]王敬政,贺吉香,江崇球.芦荟大黄素与血清白蛋白的相互作用[J].分析化学研究报告.2001(7):
782~
784
[3]杜金风,李颖,张岐,姚小军.芦荟大黄素与人血白蛋白的相互作用[J].科学通报,2006,51(26):
2847~2850
[4]吴汉东,史雪岩,李永丹.荧光光谱法研究辛硫磷与牛血清白蛋白的相互作用[J].分析试验室.2009(3):
15~18
[5]
[6]铁军,白海艳,赵芳芳.芦荟的综合利用现状与发展趋势[J].长治学院生化系.中国野生植物资源.2006(8):
22~24