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细胞与细胞工程

第四章细胞与细胞工程

【菜单】

第一节细胞的生物膜系统

各种生物膜在结构上的联系

直接联系:

各膜之间的相连。

间接联系:

通过“出芽”,小泡的移动、融合。

各种生物膜在功能上的联系

例:

胰岛细胞分泌蛋白的形成、分泌过程中各种细胞结构的分工和联系。

生物膜系统的概念与作用

概念:

各种膜形成的结构体系是统一的整体。

作用

①使细胞具稳定的内环境。

②代谢的场所,为酶提供附着点。

③进一步分隔细胞,使代谢高效有序进行。

研究生物膜的意义

理论上:

阐明细胞生命规律。

实践上:

模拟选择透过性设计结构,用于工业、农业、医学等。

第二节细胞工程简介

细胞工程概念

植物细胞工程

细胞全能性

概念、机理、体内不表现的原因、表现的条件

植物组织

培养

过程:

离体部分——脱分化——再分化——植物体

应用:

培养无病毒植物,快速繁殖、人工种子等

植物体细胞杂交

过程:

去细胞壁——原生质体融合——组织培养——植株

意义与应用:

克服远缘杂交不亲和、培养新品种

动物细胞工程

常用技术:

细胞培养、细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植

动物细胞培养

过程:

取材——原代培养——传代培养——细胞株——细胞系

应用:

生产生物制品、皮肤移植、检测有毒物质、治疗预防疾病

动物细胞融合:

条件、用途

单克隆抗体

原理、实例、过程

应用:

疾病的诊断、治疗、预防等方面。

【精解】

例1、动物细胞分泌蛋白从内质网腔内分泌到细胞外,需穿过膜的层数为()

A.0B.1C.2D.3

解析:

分泌蛋白在内质网的核糖体上合成后需经内质网的粗加工,再经高尔基体的进一步加工,最后经细胞膜分泌到细胞外。

在此过程中都先通过膜融合,小泡的转移进行的,分泌小泡并没穿过膜。

从细胞膜的内容中也可分析:

大分子物质不能通过膜。

只能经内吞、外排进出细胞。

所以答案选(A)

例2、相对膜面积指的是单位体积具有的膜面积,把真核细胞的相对细胞膜面积记为A真,原核细胞的记为A原。

把真核细胞的相对生物膜面积记为B真,原核细胞的记为B原,则一般细胞中下列判断正确的是()

A.A真>A原B真>B原B.A真<A原B真<B原

C.A真<A原B真>B原D.A真>A原B真<B原

解析:

因为原核细胞比真核细胞要小得多,所以相对表面积即相对细胞膜面积要大于真核细胞,而原核细胞除细胞膜外,细胞内基本无其他膜结构,真核细胞内则有核膜,各种细胞器的膜。

所以,相对生物膜面积原核细胞要小于真核细胞,答案选(C)

例3、生物膜的结构特点是具一定的流动性,下列各过程与膜的流动性无关的是()

A.白细胞吞噬病菌B.内质网的分泌蛋白送到高尔基体进一步加工

C.颗粒性物质从细胞内排出D.RNA聚合酶从细胞质进入细胞核

解析:

A需要细胞膜凹陷为小囊,把病菌包围在囊中,小囊从细胞膜上分离而进入细胞。

C则相反,但也需要膜与颗粒性物质形成小囊,再与细胞膜融合继而把它排出,B过程也是通过膜的“出芽”形成小泡而转移的,它们都离不开膜的流动性。

只有D过程,是通过核孔进入细胞核,而不需要膜的变化。

所以答案选(D)

例4、下列各项生物科学成果,属于细胞工程的是

A.用DNA探针检测白血病B.用苏云金芽孢杆菌的抗虫性培育抗虫棉

C.单克隆抗体的制备D.培养能同时分解多种烃的“超级细菌”

解析:

A是用白血病患者细胞中分离出的癌基因制备的。

B是通过转基因技术把苏云金芽孢杆菌导入棉植株培育而成的。

D是把多种细菌的有关基因同时转入一种菌的结果。

它们都属于基因工程,而C是把淋巴细胞和肿瘤细胞融合,利用两种细胞的特点制备的,属于细胞工程的成果,所以答案选“C”。

例5、用植物离体细胞进行组织培养,需要多种外界因素的作用,上面各项不是组织培养必需条件的是()

A.一定的光照和CO2B.适宜的温度和O2

C.水和矿质元素D.有机营养和激素

解析:

组织培养是在实验室条件下进行的,不需要植物细胞的光合作用提供养料,所以A是非必要的。

而B是植物生命活动所必需的。

C对植物的生长也不可缺少,由于没有光合作用,组织培养过程还必须有机营养以维持细胞的分裂和生长,组织培养过程中的脱分化和再分化还离不开有关的植物激素,所以D也是必需的。

答案选(A)。

例6、小黑麦是通过种间杂交,再使杂种细胞染色体加倍培育而成的,它同时具备小麦和黑麦的优良特点。

用细胞工程的技术,也能做到这一点,回答下列问题:

⑴要使两种生物的特点在一个个体上体现,可用细胞工程的__________手段,它和小黑麦培育具共同的生物学意义是_______________________。

⑵如用细胞工程培育小黑麦,其大致过程为:

 

⑶你认为上述过程的关键步骤是____________________

解析:

⑴小黑麦是自然界没有的物种,它是小麦和黑麦的遗传物质在一个个体上同时表达的结果,杂交再加倍可以实现,用植物体细胞杂交也能把小麦和黑麦的遗传物质融合在一个个体。

它们一个是通过生殖细胞的结合再加倍一个是通过体细胞的融合。

其共同意义就是克服了远缘杂交不亲和或逾越了生殖隔离。

⑵植物体细胞杂交是用两个来自不同植物的体细胞融合,并把杂种细胞培养成新植物体的方法,它首先要把二体细胞的原生质体融合,这需要去掉细胞壁。

常用的是酶解方法,再给以一定的刺激,让原生质体融合,然后经组织培养培育为新植株。

答案:

⑴植物体细胞杂交,克服了远缘杂交障碍

⑵小麦细胞↘

去细胞壁→原生质体融合—→杂种细胞培养—→愈伤组织—→根、芽—→植物体

黑麦细胞↗去分化再分化

⑶原生质体的融合,愈伤组织的再分化

例7、在细菌身上几乎可以找到植物所需的各种抗性,我们可以把这些抗性基因转移到植物体内,从根本上改变植物的特点。

据此回答下列问题:

⑴将细菌基因转移到植物细胞的技术属生物工程中的_____工程。

将获得抗性基因的植物细胞培养为植株属生物工程中的_____工程。

⑵要把细菌的基因转入植物细胞,需要基因的运载体。

为了筛选运载体必须具备标记基因,现有两种运载体,一种含抗青霉素基因。

另一种含能产生金黄色产物的基因,你认为应选哪一种运载体?

为什么?

所选运载体是_____。

理由是____________________。

⑶植物组织培养需要通过细胞的分裂和生长,培养基中应有__________。

⑷人工种子的主体是什么?

_______。

如何形成?

_____________

⑸人工种皮对胚状结构起保护作用。

在制备时可据需要添加防霉药物,它应加在哪一部分?

_____

解析:

⑴生物工程包括基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程等。

转基因技术是在分子水平上改变遗传特性属于基因工程,而将一个植物细胞培育为植物需组织培养,属于细胞工程。

⑵选用标记基因的目的是为了便于筛选,一定要考虑受体细胞的特性。

因为青霉素只能抑制细菌的繁殖,所以不能用它来筛选植物细胞,应选有颜色反应的运载体。

⑶植物组织培养需要通过细胞的分裂和生长,培养基中应有植物生长素和细胞分裂素。

⑷人工种子的主体是具生根发芽能力的胚状结构,是愈伤组织经再分化后形成的。

⑸人工种皮对胚状结构起保护作用,在制备时据需要添加多种原料用来防虫、防霉等,以保证发芽率。

答案:

⑴基因工程、细胞工程

⑵含能产生金黄色产物的基因的运载体。

因为抗青霉素的只能用于筛选细菌,青霉素不能作用于植物细胞。

而颜色反应是所有细胞中都可观察辩认的。

⑶生长素、细胞分裂素

⑷D

⑸人工种皮。

例8、动物细胞工程的基础技术是动物细胞培养,其过程大致是:

取动物胚胎或幼龄动物的器官和组织——→单个分散细胞

细胞系←—细胞株←—传代细胞←—原代细胞

回答下列问题:

⑴器官组织先要用胰蛋白酶处理,其目的是_______________。

如换用胃蛋白酶处理行吗?

为什么?

___________________________________

⑵过程中细胞株的传代细胞很难形成细胞系,可加以一定的处理,使之成为细胞系,这种处理方法类似于()

A.诱变育种B.单倍体育种C.多倍体育种D.杂交育种

解析:

⑴动物细胞培养需单个分散的细胞制作悬浮液,这样可使细胞更多地接触培养基,利于细胞的分裂生长,而在组织、器官里细胞是成团的,若直接培养,各细胞接触培养基少且不均匀,所以首先要使细胞分开。

因动物细胞互相间的粘着性糖蛋白起着主要作用,所以要用胰岛蛋白酶处理,使之分散。

胃蛋白酶虽然也能分解蛋白质,但需要很强的酶性环境,这对细胞不利,所以用胰蛋白酶而不能用胃蛋白酶。

⑵细胞株的细胞一般不能无限分裂,只有出现癌变的才能继续分裂发展为细胞系,用一定方法使之产生癌变就可达到目的,诱导细胞癌变也就是使之产生基因突变。

答案:

⑴使细胞分散、不行、所需酸性太强会伤害细胞⑵A

例9、用动物细胞培养获得的细胞可用来检测有毒物质。

请根据条件设计实验检测不同浓度的农药甲胺磷对兔子细胞形态变异的影响。

⑴所给材料:

已培养好的兔子细胞悬浮液,浓度分别为50PPM、100PPM、200PPM、400PPM的甲胺磷溶液、兔子细胞的液体培养基、显微镜一台、载玻片、盖玻片、细胞培养瓶各若干。

⑵实验步骤:

 

⑶结果及分析

 

解析:

理论上分析这个实验难度并不大,要注意设置正常细胞为对照,观察结果时数据处理合理就可以。

参考答案:

⑵实验步骤:

将兔子细胞悬浮液均匀分为5份,分装五个培养瓶中,各加等量培养基标上1、2、3、4、5。

然后在1号瓶不加甲胺磷、2-5号瓶分别加等量的50~400PPM的甲胺磷液。

在一定条件下培养,一定时间后取各瓶中悬浮液各二滴(等量)在两块载片上加盖玻片(载玻片上标相应的1、2、3、4、5)观察。

⑶结果及分析:

以1号瓶细胞为标准,其它瓶的细胞在两块载玻片各随机取一视野,把形态变异的细胞计数,取平均值以视野中细胞总数为分母,计算比例,统计制表即可。

瓶号

细胞总数

变异细胞数

变异比例

2

3

4

5

例10、破伤风杆菌侵入哺乳动物后能产生破伤风毒素,使动物致死,为获得抗破伤风毒素的单克隆抗体,可以采用如下办法:

破伤风杆菌——→老鼠

提取细胞A鼠骨髓瘤细胞

↓细胞融合

筛选细胞B

细胞培养

筛选细胞C

继续培养

从培养液中提取抗体

回答下列问题:

⑴细胞融合所用的细胞A应是_____,要使两种细胞融合,可用_____作为诱导剂。

⑵过程中有两次筛选,第一次筛选的细胞B是_____细胞,第二次筛选的细胞C是_____细胞。

⑶实验前用破伤风杆菌感染老鼠诱导老鼠产生特异性免疫的_____。

进行感染时需划破老鼠皮肤进行按种,划破的伤口应深一些还是浅一些?

为什么?

_______________

解析:

⑴实验目的是为了获取抗破伤风毒素的抗体,产生抗体的是经免疫的淋巴B细胞。

为使细胞相互融合,必须有一定的诱导剂辅助,常用的有灭活的仙台病毒、聚乙二醇等。

⑵经诱导后的细胞不一定融合,且融合的细胞也有多种,可能是A与A融合,A与瘤细胞融合或瘤细胞与瘤细胞融合。

所以要用一定的方法筛选,选出目的细胞——A与瘤细胞融合的杂种种瘤细胞,得到的杂种瘤细胞不一定能产生抗体。

能产生抗体的也不定是抗破伤风毒素的抗体,所以要再一次筛选,选出产生抗破伤风毒素抗体的细胞。

⑶抗体的产生属于特异性免疫的体液免疫。

另外,破伤风杆菌是厌氧生物,为使感染成功,需接种得深一些。

答案:

⑴效应淋巴B细胞、灭活的仙台病毒或聚乙二醇

⑵杂种瘤细胞、能产生所需抗体的杂种瘤细胞

⑶体液免疫、应深一些,因为破伤风杆菌是厌氧生物

 

【精练】

基础训练

第一节细胞的生物膜系统

1.组成生物膜系统的生物膜是指()

A.在结构上直接相连的生物膜B.具有单层膜的细胞器

C.具有双层膜的细胞器D.细胞内的所有生物膜

2.在细胞内的各种膜中,功能全,联系广的细胞器是()

A.细胞膜B.内质网C.核膜D.线粒体膜

3.生物膜化学组成的表述最全面的是()

A.蛋白质、糖类、类脂B.糖蛋白、类脂

C.蛋白质、糖类、脂质D.糖蛋白、脂质

4.下列各组生物膜中,成分与结构最相似的是()

A.内质网膜与细胞核膜B.线粒体外膜与内膜

C.内质网膜与高尔基体膜D.细胞膜与细胞核膜

5.不同膜结构的膜之间互相转化,以“出芽”方式进行的是()

A.核膜、内质网膜B.细胞膜、高尔基体膜

C.内质网膜、细胞膜D.细胞膜、线粒体膜

6.一种细胞器的部分生物膜是怎样转移到另一种细胞器的()

A.随着细胞质的流动到达特定部位B.从高尔基体到内质网

C.从内质网直接到达细胞膜D.通过形成具有膜的小泡而转移

7.下列关于生物膜的叙述,正确的是()

A.各种生物膜的化学组成没有差别B.细胞内的各种生物膜之间是可以相互转化的

C.细胞内有的膜与其它膜没有联系D.任意两个膜结构的膜可以互相转化

8.生物膜本身的作用中不包括()

A.物质运输B.信息传递C.能量交换D.蛋白质加工

9.分泌蛋白的运输方向是()

A.游离的核糖体→内质网→高尔基体→细胞膜

B.附着的核糖体→内质网→高尔基体→细胞膜

C.核糖体→高尔基体→内质网→细胞膜

D.内质网→核糖体→高尔基体→细胞膜

10.下列有关生物膜系统的叙述中,不正确的是()

A.细胞膜使细胞有相对稳定的内环境

B.细胞的化学反应都在生物膜内或膜外进行

C.生物膜把细胞分隔成许多小区室

D.广阔的膜面积为酶提供了大量的附着位点

11.下表是5种生物膜中三种物质——蛋白质、脂类、糖类的含量对比表

生物膜

蛋白质

(质量分数%)

脂类

(质量分数%)

糖类

(质量分数%)

人红细胞膜

49

43

8

大鼠肝细胞膜

59

35

2.9

内质网膜

67

33

含量很少

线粒体外膜

52

48

含量很少

线粒体内膜

76

24

含量很少

据图回答下列问题:

(1)细胞内的各种生物膜不仅在结构上相互关联,从上表可以看出它们的_____也大致相同,但_____有差别。

构成生物膜的类脂主要是_____,在细胞膜上糖类常和_____结合在一起,形成_____,具有_____,_____,_____等功能。

(2)表中的5种生物膜中,_____与外层核膜相连,在有的细胞中还可以看到其与_____相连,从而使细胞各部分连接成一个有机的整体。

在合成旺盛的细胞里,其总是和_____紧密相依。

12.在人和鼠的细胞融合实验中,用两种荧光物分别标记两种抗体,使之分别结合到鼠和人的细胞膜表面抗原物质上(如右图)。

实验结果表明,细胞开始融合时,人、鼠细胞的表面抗原“泾渭分明”,各自只分布于各自的细胞表面;但在融合之后,两种抗原就平均地分布在融合细胞的表面了。

请分析回答以下问题:

(1)细胞融合的实验表明了组成细胞膜的_____分子是可以运动的,由此也证明了细胞膜具有_____的特点。

(2)在细胞融合实验中,一种抗体只能与相应的抗原结合,说明了这类物质在分子结构上具有_____性。

(3)细胞融合实验若在20℃条件下进行,则两种表面抗原平均分布的时间大大延长,这说明____________________。

若在1℃条件下,两种表面抗原便难以平均地分布,这又说明_________________________。

第二节细胞工程简介

1.细胞工程是按照人们的意愿改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。

它属于()

A分子水平B细胞水平C细胞器水平D细胞水平或细胞器水平

2.下列哪项不属于细胞工程技术?

()

A有性杂交B体细胞杂交C组织培养D细胞核移植

3.在一个生物体内,细胞没有表现出全能性,是因为()

A.细胞失去了全能性B.不同的细胞基因是不同的

C.不同细胞的基因,表达是不同的D.不同细胞的基因,变异是不同的

4.在生物体的所有细胞中全能性最高的是()

A.卵细胞B.植物花粉C.体细胞D.受精卵

5.细胞分化过程一般是不可逆的,下列事实与这一论点不相符的是()

A.胚胎发育B.核分化C.脱分化D.再分化

6.植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来,将单个细胞放在特定的培养基上培养,获得了许多完整的植株。

实现此过程的最重要的原因是()

A.细胞分裂B.细胞生长C.细胞分化D.细胞增殖

7.用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织,下列叙述错误的是()

A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的

B.该愈伤组织的细胞没有全能性

C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成

D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构

8.下列哪项不是植物组织培养必需的物质?

()

A.无机盐B.有机小分子C.O2D.CO2

9.要获得一个杂种植株,下列步骤最完整的是()

A.分离原生质体→诱导原生质体融合→组织培养→得到杂种植株

B.分离原生质→原生质体融合→杂种植株

C.获取细胞→原生质融合→组织培养→杂种植株

D.获取细胞→原生质直接融合→组织培养

10.植物体细胞杂交不是用以解决不同生物之间的()

A.亲缘关系远B.生殖隔离C.地理隔离D.组织分化

11.下图是植物组织培养的过程示意田,据图分析回答:

AB

植物的组织细胞或器官→培养基中培养————→愈伤组织————→胚状体→植物体

(1)图中A表示____________________,B表示____________________。

(2)培养基中除含有丰富的营养物质外,应加入____________________和____________________(植物激素)以刺激植物组织脱分化形成A。

(3)脱分化和再分化这两个过程的进行需要维持一定的外界条件,一是要有适宜的___________,二是___________,三是___________否则植物组织培养就不能取得成功。

12.如下图为植物细胞杂交过程示意图,请分析回答:

(1)植物体细胞杂交的理论基础是________。

(2)1过程中,目前最常用的方法是________法,也就是在________的条件下用________等分解植物的细胞壁。

(3)2过程的方法有物理法和化学法两大类:

物理法是利用________、振动、电刺激等;化学法是用________等作为诱导剂。

(4)4_____和5_____过程实际上就是植物细胞工程的基础技术。

13.动物细胞培养的正确过程是()

A.原代培养—→传代培养—→细胞株—→细胞系

B.原代培养—→传代培养—→细胞系—→细胞株

C.传代培养—→细胞系—→原代培养—→细胞株

D.原代培养—→细胞系—→传代培养—→细胞株

14.在动物细胞培养的有关叙述中正确的是()

A.动物细胞培养的目的就是获得大量的细胞分泌蛋白

B.动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散

C.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中

D.培养至50代后的传代细胞称为细胞株

15.在动物细胞培养中,不会发生的是()

A.酶促反应B.细胞生长C.细胞增殖D.细胞融合

16.在动物细胞培养中,必须经过遗传物质改变才能实现的是

A.细胞株B.细胞系C.原代细胞D.传代细胞

17.在进行动物细胞培养时,通常选用的材料是()

A.衰老退化的动物细胞B.成熟动物个体的体细胞

C.动物的受精卵D.动物胚胎或幼年个体的细胞

18.为了使用于培养的动物组织细胞分散开,以便配置成一定浓度的细胞悬浮液,选取的组织应该先用哪种物质进行处理()

A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.盐酸D.胰脂肪酶

19.在动物细胞培养中,一部分细胞可能在培养条件下无限制的传代下去。

这种细胞称之为()

A.原代细胞B.传代细胞C.细胞株D.细胞系

20.动物细胞融合的应用中最重要的是()

A.克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体

C.培育新物种D.生产杂种细胞

21.单克隆抗体与血清抗体相比,优越之处在于()

A.单克隆抗体能够制成“生物导弹”

B.单克隆抗体可以在体外培养

C.单克隆抗体的特异性强,灵敏度高,产量也大大高于血清抗体

D.单克隆抗体的制备过程简单

22.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合,可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体,其依据是()

A.B淋巴细胞可以产生抗体,但不能无限增殖

B.B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体

C.骨随瘤细胞可以无限增殖,但不能产生抗体

D.杂交瘤细胞可以无限增殖,但不能产生抗体

23.动物细胞培养的基本过程示意图。

请据此回答

(1)容器A中放置的是动物器官或组织。

它一般取自_____。

(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是__________,然后用_____酶处理,这是为了使细胞分散开来。

这样做的目的是____________________。

(3)培养首先在B瓶中进行。

在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培养到10代左右,到此时的培养称为______。

(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中,用_____处理,然后配置成_____,再分装。

(5)有少数的细胞能存活下来,继续传下去,一般能传到40—50代,这种传代细胞叫做_____。

这种细胞的遗传物质与前面的细胞_____(相同,不同)。

(6)这种细胞传至50代后一般不能再传,但有少数细胞遗传物质发生改变,带有细胞的特征,有可能在培养条件下无限制的传下去。

24.下图是单克隆抗体制备过程示意图,据图回答问题:

(1)图A过程是从小鼠细胞的脾脏中取得____细胞,该细胞能产生_____。

(2)B过程是一个____过程,该过程的进行需要灭活的_____或_____的诱导。

(3)单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,其优点是_____。

25.有人做了如下实验:

用玻璃针移除一种两栖类卵细胞中的细胞核,然后用玻璃微吸管将蝌蚪胸腺细胞的细胞核注人去核的卵细胞内。

经特殊方法刺激,此卵细胞有可能分裂发育成蛙,请根据以上实验回答;

(1)此实验属于细胞工程中的_____技术。

(2)由此培育出来的蛙,遗传物质是来自_____,发育成的蛙是否可能有该两栖类的性状?

为什么______________________________。

26.我国著名生物学家童第周1978年曾报告,将黑斑蛙的红细胞核移入去了核的黑斑蛙卵,卵子发育为正常的蝌蚪,红细胞核便成为有各种正常功能的细胞核。

这个例子说明,像红细胞这样高度特化的细胞,其核中也保留有____________________。

提高训练

1.生物膜有能量转换、物质运输、信息传递等几种主要功能,这些功能与生物膜与的哪种物质有关()

A.磷脂B.糖类C.蛋白质D.固醇

2.细胞膜与其完成各种生理功能极为重要的结构特点是()

A.磷脂排列成双分子层B.两侧膜物质分子排列不对称

C.球蛋白分子覆盖或镶嵌于磷脂双分子层D.膜物质分子的运动使其有流动性

3.细胞膜表面有糖被,糖被的主要成分和功能是()

A.蛋白质,保护B.多糖,保护C.蛋白质,识别D.蛋白质和多糖,识别

4.牛奶中含有乳球蛋白和酪蛋白等物质。

在奶汁的形成过程中,与上述物质的合成和分泌有密切关系的细胞结构是()

A.核糖体、线粒体、中心体、染色体B.线粒体、内

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