新编高中生物实验操作.docx
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新编高中生物实验操作
实验使用高倍显微镜观察几种细胞
一.实验目的:
1)使用高倍显微镜观察几种细胞,比较不同细胞的异同点
2)运用制作临时装片的方法
二.实验原理:
利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构,例如:
可以看到叶绿体、线粒体等细胞器,从而能够区别不同的细胞。
三.方法步骤:
1、显微镜的使用:
取镜→安放→对光→压片→观察→收放。
(1)低倍镜使用:
(观察任何标本都必须先用低倍镜,且标本应透明)
(2)高倍镜使用:
先使用低倍镜确定目标→移动装片,使目标位于视野中央→转动转换器,换用高倍镜→调焦(转动细准焦螺旋)(视野较暗,可调反光镜或光圈)
2、显微镜使用注意事项:
(1)成像特点:
放大倒立的虚像。
(2)放大倍数计算:
物镜的放大倍数×目镱的放大倍数。
放大倍数指的是物体的长或宽。
(3)物像的移动方向与装片的移动方向相反。
(4)低倍镜下成像特点:
物像小、细胞数目多、视野亮。
高倍镜下成像特点:
物像大、细胞数目少、视野暗。
(5)放大倍数的判断方法:
目镜:
镜头长放大倍数小,镜头短放大倍数大。
物镜:
镜头长放大倍数大,镜头短放大倍数小。
物镜与装片之间的距离:
距离近放大倍数大,距离远放大倍数小。
(6)低倍镜使用过程中,下降镜筒时必须双眼侧视镜筒,防止镜头撞到玻片。
低倍镜找到物像后,换上高倍镜时,观察过程中只能使用细准焦螺旋。
问
(1)是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野明亮?
为什么?
提示:
低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;高倍镜视野小,通过的光少,但放大的倍数高。
问
(2)为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察?
提示:
如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。
因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。
问(3)用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?
提示:
不行。
用高倍镜观察,只需微调即可。
转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。
第四步:
观察并用细胞准焦螺旋调焦。
四、讨论:
1.使用高倍镜观察的步骤和要点是什么?
答:
(1)首先用低倍镜观察,找到要观察的物像,移到视野的中央。
(2)转动转换器,用高倍镜观察,并轻轻转动细准焦螺旋,直到看清楚材料为止。
2.试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点,并描述它们之间的差异,分析产生差异的可能的原因:
答:
这些细胞在结构上的共同点是:
有细胞膜、细胞质和细胞核,植物细胞还有细胞壁。
各种细胞之间的差异和产生差异的可能原因是:
这些细胞的位置和功能不同,其结构与功能相适应,这是个体发育过程中细胞分化产生的差异。
3.P8图是一个大肠杆菌的电镜照片和结构模式图,大肠杆菌与你在本实验中观察到的细胞有什么主要区别?
答:
从模式图中可以看出,大肠杆菌没有明显的细胞核,没有核膜,细胞外有鞭毛,等等。
大肠杆菌电镜照片大肠杆菌结构模式图
实验检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一.实验目的:
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
二.实验原理:
某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。
如:
加热
葡萄糖+Cu(OH)2葡萄糖酸+Cu2O↓(砖红色)+H2O,即Cu(OH)2被还原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。
淀粉遇碘变蓝色。
3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。
)
三.实验材料
1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。
(因为组织的颜色较浅,易于观察。
)
2.做脂肪的鉴定实验。
应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。
3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
四、实验试剂
斐林试剂(包括甲液:
质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:
质量浓度为0.05g/mLCuSO4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括A液:
质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液:
质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。
五、实验仪器:
双面刀片,试管,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜。
六、方法步骤:
(一)可溶性糖的鉴定
操作方法
注意问题
解释
1.制备组织样液。
(去皮、切块、研磨、过滤)
苹果或梨组织液必须临时制备。
因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。
2.取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。
3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;
切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。
斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水;
甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu(OH)2生成。
4.试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:
浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)
最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。
也可用酒精灯对试管直接加热。
防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;
缩短实验时间。
(二)脂肪的鉴定
操作方法
注意问题
解释
花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。
干种子要浸泡3~4小时,新花生的浸泡时间可缩短。
因为浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形。
切片要尽可能薄些,便于观察。
在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分钟。
染色时间不宜过长。
用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。
酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。
同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。
用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片。
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。
低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。
装片不宜久放。
时间一长,油滴会溶解在乙醇中。
三、蛋白质的鉴定
操作方法
注意问题
解释
制备组织样液。
(浸泡、去皮研磨、过滤。
)
黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。
鉴定。
加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,溶液变紫色。
A液和B液也要分开配制,储存。
鉴定时先加A液后加B液。
CuSO4溶液不能多加。
先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。
A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu(OH)2沉淀,而失效。
否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
可用蛋清代替豆浆。
蛋清要先稀释。
如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。
附:
淀粉的检测和观察
用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。
碘液不要滴太多
以免影响颜色观察
实验观察DNA和RNA在细胞中的分布
一、实验原理:
1、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA主要分布在细胞质中。
2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。
用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。
3、盐酸的作用
①盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输;
②盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合
二、实验材料:
人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞
三、实验用具:
大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、
石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜
四、方法步骤:
1、取材
①滴:
在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液;
②刮:
用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下;
③涂:
将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中;
④烘:
将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。
2、水解
①解:
将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中,进行材料的水解;
②保:
将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟。
3、冲洗涂片
①冲:
用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟;
②吸:
用吸水纸吸去载玻片上的水分。
4、染色
①染:
用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5分钟;
②吸:
吸去多余染色剂;
③盖:
盖上盖玻片。
5、观察
①低:
在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰;
②高:
转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。
五、考点提示:
1、取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质;
2、取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞;
3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗;
4、用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂;
5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟。
实验用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体
一、实验原理:
1、叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色、扁平的椭球形或球形,散布于细胞质中,可以在高倍显微镜下观察它的形态。
2、线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中,健那绿染液能使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色。
通过染色,可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
二、实验材料:
新鲜的藓类的叶、人的口腔上皮细胞、新配制的质量分数为1%的健那绿染液(将0.5g健那绿溶解于50mL生理盐水中,加温到30-40摄氏度,使其充分溶解)
三、实验用具:
显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签
四、方法步骤:
步骤
操作方法
目的与作用
(1)取材
①新鲜的藓类的叶
②菠菜叶下表皮略带一些叶肉
①藓类叶为单层细胞
②下表皮容易撕取,要略带些叶肉
(2)制片
注意叶片不能太干了,保持有水的状态
以免影响细胞活性
(3)观察
叶绿体呈椭圆形,可随细胞质的流动而流动。
叶绿体在弱光下以最大面积(长轴)转向光源,在强光下以最小面积(短轴)转向光源。
(1)取材
漱口,口腔内侧壁上轻刮几下
(2)染色
将口腔细胞放在健那绿液滴上
(3)观察
盖上盖玻片,显微镜下观察,线粒体被染成蓝绿色
问题
1、为什么不用植物细胞来观察线粒体?
植物线粒体相对较少,叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。
2、如果观察发现染色不足,如何补色?
在盖玻片一侧滴加健那绿液,另一侧用吸水纸吸
五、考点提示:
1、观察叶绿体时选择藓类叶的原因:
藓类属于低等植物,叶片是绿色的单层细胞,不需加工即可进行观察。
2、临时装片中的材料要随时保持有水状态的原因:
保证细胞器的正常形态并能悬浮在细胞质基质中,否则,细胞失水收缩,将影响细胞器形态的观察。
实验植物细胞的吸水和失水
1.原理:
成熟(有明显液泡)的植物细胞能够与外界溶液组成一个渗透系统,通过渗透作用的方式吸水或失水。
①植物细胞的原生质层相当于一层半透膜
②细胞液浓度>细胞外溶液浓度时,细胞吸水;
细胞液浓度<细胞外溶液浓度时,细胞失水
③细胞壁与原生质层的伸缩能力不同。
2.条件:
细胞液与外界溶液浓度差,原生质层(半透膜)
3.材料:
紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡),质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。
4.步骤:
制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)
中央液泡大小
原生质层的位置
细胞大小
蔗糖溶液
清水
5.记录表:
6.注意问题:
(1)细胞发生质壁分离后,细胞壁与细胞膜之间的空隙充满的是0.3mg/mL蔗糖溶液。
(2)动物细胞能发生渗透作用但不会发生质壁分离。
(3)选材:
选取紫色洋葱鳞片叶外表皮。
其细胞液为紫色,在显微镜下与无色透明的细胞壁容易区分,观察到的质壁分离和复原效果明显。
另外,取新鲜水绵、黑藻叶、南瓜表皮也可以做这个实验。
(4)试剂:
选用0.3g/ml蔗糖糖溶液。
浓度过高,细胞质壁分离速度虽然很快,但不久就会将细胞杀死,细胞不能进行质壁分离复原;若浓度过低,则不能引起细胞质壁分离或速度太慢。
另外,8%食盐溶液、5%的硝酸钾溶液、一定浓度的尿素、甘油……也可使用,但后面三者在引起质壁分离后可自动复原。
(5)时间的控制:
做好质壁分离的实验后,不久就要做质壁分离复原实验。
避免使质壁分离的细胞长时间处于较高浓度的外界溶液中,细胞过度失水而导致死亡。
从而观察不到质壁分离复原的现象。
(6)应用:
①可以用于测定细胞液的浓度②可以用于判断细胞的死活
实验比较过氧化氢在不同条件下的分解
一、实验目的:
通过比较过氧化氢在不同条件下分解的快慢,了解过氧化氢酶的作用和意义
二、实验原理:
新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶,根据酶的专一性,可知其可以催化过氧化氢分解成水和氧。
三、实验材料:
质量分数为20%的猪肝研磨液,新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液,质量分数为3.5%的FeCl3溶液
四、实验用具:
量筒,试管,滴管,试管夹,试管架,卫生香,火柴,酒精灯,大烧杯,石棉网,温度计
五、方法步骤:
1、取4支洁净试管,分别编号1,2,3,4,向试管内分别加入2ml过氧化氢溶液。
2、将2号试管放在90℃左右的水浴中加热,观察气泡情况,并与1号试管作比较。
3、向3号试管内滴入2滴FeCl3溶液,向4号试管内滴入2滴肝脏研磨液,观察哪支试管产生的气泡多。
4、2至3min后,将点燃的卫生香分别放在3、4号试管内液面的上方,观察哪支试管中的卫生香燃烧更猛烈。
六、实验结论:
1、加热能促进H2O2的分解,提高反应速率;
2、酶有催化作用,与无机催化剂相比,酶具有高效性。
实验影响酶活性的条件
一、实验目的:
1、初步学会探索影响酶活性条件的方法。
2、探索过氧化氢酶在不同温度和PH下催化过氧化氢水解的情况。
二、实验原理:
淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
麦芽糖和葡萄糖遇碘后,不形成紫蓝色的复合物,但能
与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
三、实验材料:
质量分数为2%的新配置的淀粉酶溶液,新鲜的质量分数为20%的猪肝研磨液,
质量分数为3%的可溶性淀粉溶液,新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液,
质量分数为5%的盐酸,质量分数为5%的氢氧化钠溶液,蒸馏水,冰水,热水,
碘液,斐林试剂
四、实验用具:
量筒,试管,滴管,试管夹,三脚架,火柴,酒精灯,小烧杯,大烧杯,石棉网,温度计,
五、方法步骤:
(1)探究温度对酶活性的影响
原理:
淀粉遇碘后,形成蓝色的复合物。
淀粉酶可以可以使淀粉水解成麦芽糖,麦芽糖遇碘后,不形成蓝色的复合物。
步骤
项目
试管1
试管2
试管3
1
加入可溶性淀粉溶液
2mL
2mL
2mL
2
放置在不同温度环境下5分钟
0℃
100℃
60℃
3
加入新配置的淀粉酶溶液
1mL
1mL
1mL
4
滴入碘液
2滴
2滴
2滴
5
观察结果
变蓝
变蓝
不变蓝
在温度对酶活性的影响的实验中,三支试管的条件,除温度外均相同。
3号试管处在60℃的温度条件下,酶活性最大,试管中的淀粉被分解,滴入碘液后不会变蓝。
2号试管的温度条件是100℃,这样高温度条件下,淀粉酶已失去活性,1号试管的温度条件是O℃,低温抑制淀粉酶的活性。
所以2号和1号试管中的淀粉都没有被分解,滴上碘液后都会变蓝,此实验可以证明:
酶的催化作用需要适宜的温度条件,温度过高和过低都将影响酶的活性。
(2)探究pH对酶活性的影响
实验1:
原理:
过氧化氢(H2O2)在过氧化氢酶的催化作用下,可以分解成水和氧气,可以放入带火星的木条,看能否复燃来检测是否有氧气产生。
步骤
项目
试管1
试管2
试管3
1
加入过氧化氢溶液
2mL
2mL
2mL
2
加入蒸馏水
1mL
—
—
3
加入盐酸溶液
—
1mL
—
4
加入NaOH溶液
—
—
1mL
5
滴加肝脏研磨液
2滴
2滴
2滴
6
37℃水浴
5min
5min
5min
7
检
验
放入带火星的木条
复燃
不复燃
不复燃
试管内气泡产生量
有气泡产生
没有气泡
产生
没有气泡
产生
2号试管内加入了盐酸,溶液的pH较低,3号试管内加入了氢氧化钠,溶液的pH较高,在过低或过高pH环境中,过氧化氢酶失去活性,不能使过氧化氢分解,没有氧气产生而1号试管没有加入酸或碱,溶液近似中性,过氧化氢酶将过氧化氢分解成水和氧气,使木条复燃。
实验2
原理:
淀粉在淀粉酶的作用下,被分解成麦芽糖,麦芽糖能与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色沉淀
步骤
项目
试管1
试管2
试管3
1
加入可溶性淀粉溶液
2mL
2mL
2mL
2
加入蒸馏水
1mL
—
—
3
加入盐酸溶液
—
1mL
—
4
加入NaOH溶液
—
—
1mL
5
加入新配置的淀粉酶溶液
2滴
2滴
2滴
6
60℃水浴
5min
5min
5min
7
加入斐林试剂
2mL
2mL
2mL
8
50℃-60℃水浴
2min
2min
2min
9
观察结果
有砖红色沉淀
无
无
实验现象记录如下:
1号试管有砖红色沉淀生成,2号试管无砖红色沉淀生成,3号试管无砖红色沉淀生成。
2号试管内加入了盐酸,溶液的pH较低,3号试管内加入了氢氧化钠,溶液的pH较高,在这样的pH环境中,淀粉酶失去活性,不能使淀粉分解,所以试管中加人斐林试剂后并无砖红色沉淀生成。
1号试管内没有加入酸或碱,溶液近似中性,这样的pH适于淀粉酶发挥催化作用,所以淀粉被分解并与斐林试剂反应,生成砖红色沉淀。
以上实验可以证明,酶的催化作用需要适宜的pH,pH偏低或偏高都能影响酶的活性
实验探究酵母菌细胞呼吸的方式
1.原理:
酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水:
C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量
在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳:
C6H12O62C2H5OH+2CO2+少量能量
2.装置:
(见课本)下图为“探究酵母菌细胞呼吸的方式”的实验装置图
甲:
有氧呼吸装置 乙:
无氧呼吸装置
ABCDE
分析:
A瓶加入的试剂是NaOH,其目的是:
使进入B瓶的空气先经过NaOH处理,排除空气中CO2对实验结果的干扰。
C瓶和E瓶加入的试剂是澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液),其作用是:
检测CO2的产生
D瓶应封口放置一段时间后,再连通E瓶,其原因是:
D瓶应封口放置一段时间后,酵母菌会将瓶中的氧气消耗完。
再连通E瓶,就可以确保通入澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液)的CO2是酵母菌的无氧呼吸所产生的
3.检测:
(1)检测CO2的产生:
使澄清石灰水变浑浊,或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
(2)检测酒精的产生:
橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与酒精发生反应,变成灰绿色。
实验叶绿体中色素的提取和分离
一、实验目的:
1、初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。
2、探索叶绿体中有几种色素。
二、实验原理:
1、叶绿体中的色素能溶解在丙酮(有机溶剂,酒精、汽油、苯、石油醚等)中,所以用丙酮可提取叶绿体中色素。
2、色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢,因而可用层析液将不同的色素分离。
三、实验材料:
新鲜的绿叶(如菠菜的绿叶),无水乙醇,层析液(由20份在60~90℃下分馏出来的石油醚、2份乙醇和1份苯混合而成。
93号汽油也可代用),二氧化硅和碳酸钙。
四、实验用具:
干燥的定性滤纸,试管,棉塞,试管架,研钵,玻璃漏斗,尼龙布,毛细吸管,剪刀,药勺,量筒(10ml),天平。
五、方法步骤:
(1)称取5g绿色叶片并剪碎
提取色素研钵→研磨→漏斗过滤→
(2)加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮收集到试管内并塞紧管口
(1)将干燥的滤纸剪成6cm长,1cm宽的纸条,剪去一端两角(使层析液同时到达滤液细线)
制滤纸条
(2)在距剪角一端1cm处用铅笔画线
(1)用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线
滤液划线
(2)干燥后重复划2-3次
(1)向烧杯中倒入3ml层析液(以层析液不没及滤液细线为准)
纸上层析
(2)将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁,轻轻插入层析液中
(3)用培养皿盖盖上烧杯
观察结果:
滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带(如下图)
最宽:
叶绿素a;
最窄:
叶绿素b;
相邻色素带最近:
叶绿素a和叶绿素b;
相邻色素带最远:
胡萝卜素和叶黄素。
六、考点提示:
1、二氧化硅:
为了使研磨充分;碳酸钙:
保护色素免受破坏;丙酮:
色素的溶剂。
2、扩散最快的是胡萝卜素(橙黄色),扩散最慢的是叶绿素b(黄绿色)。
3、滤纸上有四条色素带说明了绿叶中的色素有四种,它们在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散的快慢也不一样。
4、裁取定性滤纸时,注意双手尽量不要接触纸面,以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。
5、制备滤纸条时,要将滤纸条的一端剪去两角,这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀,便于观察实验结果。
6、根据烧杯的高度制备滤纸条,让滤纸条长度高出烧杯1cm,高出的部分做直角弯折。
7、滤纸上的滤液细线如果触到层析液,细线上的色素就会溶解到层析液中,就不会在滤纸上扩散开来,实验就会失败。
8、画滤液细线时,用力要均匀,速度要适中
9、研磨要迅速、充分。
a.因为丙酮容易挥发;b.为了使叶绿体完全破裂.从而能提取较多的色素;c.叶绿素极不稳定,能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。
实验细胞大小与物质运输的关系
一、实验目的:
通过探究细胞大小,即细胞的表面积与体积之比(即细胞的相对表面积),与物质