细菌总数测定的心得体会.docx

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细菌总数测定的心得体会

细菌总数测定的心得体会

　　篇一：

细菌总数测定操作规程

　　细菌总数检测操作规程

　　1原理

　　试样经过处理，稀释至适当浓度，在一定条件（如使用特定的培养基，在温度30℃±1℃培养72h±3h等）下培养后，所得1g（mL）试样中所含细菌总数。

　　2试剂与仪器

　　所用器具

　　三角烧瓶、玻璃珠、具塞试管、培养皿、1000μL枪头、5mL枪头、称量勺、接种环、接种针、移液器

　　仪器：

分析天平、恒温培养箱、微型振荡器、超净工作台、高压灭菌锅所用试剂和培养基

　　营养琼脂

　　取营养琼脂，加入蒸馏水1L，搅拌加热至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

　　3、操作步骤

　　配制%生理盐水。

　　称取氯化钠溶于1000mL蒸馏水中。

　　三角烧瓶加入生理盐水90mL和玻璃珠，试管中加入生理盐水9mL，121℃灭菌30min。

（三角烧瓶个数与样品数量一致，试管数量与稀释次数相关）

　　将1000μL枪头、培养皿、5mL枪头、称量勺，121℃灭菌30min。

（注意计算数量）将枪头、培养皿置于烘箱103℃烘干。

（1-3步需提前一天完成）

　　对称量房间进行紫外灭菌30分钟，关灯静置60min。

以无菌操作取样品10g于含90mL生理盐水三角烧瓶中，于振荡器上振荡30min，制成1:

10的均匀稀释液。

　　用1000μL枪头吸取1:

10稀释液1mL，沿管壁慢慢注入含有灭菌生理盐水9mL的试管中，于振荡器上混合均匀，制成1:

100的均匀稀释液。

　　另去一只1mL灭菌吸管，按照上述操作方法，作10倍递增稀释，如此每递增稀释一次，即更换一支灭菌吸头。

　　选择2个~3个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释的吸管移

　　1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个培养皿。

　　稀释液移入培养皿后，及时将凉至46℃±1℃的培养基（可放置46℃±1℃水浴锅内保温）注入培养皿约15mL，小心转动培养皿使试样与培养基充分混匀（从稀释试样到倾注培养时间不能超过30min）。

如估计试样中所含微生物可能在培养基平皿表面生长时，待培养基完全凝固后，可在培养基表面倾注凉至46℃±1℃的水琼脂培养基4mL。

　　待琼脂凝固后，倒置平皿于30℃±1℃恒温培养箱内培养72h±3h取出，计算平板内细菌总数目，细菌总数乘以稀释倍数，即得每克试样所含细菌总数。

　　4、细菌总数计算方法

　　做平板菌落计数时，可用肉眼观察，如菌落形态较小可借助放大镜观察。

在计算出各平板细菌总数后，求出同稀释度的两个平板菌落的平均值。

细菌总数的报告形式

　　细菌总数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，采用两位有效数字，在两位有效数字后面的数值，以四舍五入方法修约。

为了缩短数字后面的零数，也可以用10的指数表示。

（见表1）

　　细菌总数计数的报告平板细菌总数的选择

　　选择细菌总数在30-300之间的平板进行细菌总数测定，每一稀释度使用两个平板菌落的平均数。

两个平板其中一个平板有较大片状菌落生长时不宜采用；若片状菌落不到平板的一半，而另一半菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全平皿细菌总数。

稀释度的选择

　　①应选择平均细菌总数在30~300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之（见表1中例次1）②若有两个稀释度，其生长的细菌总数均在30~300之间，则视两者之比如何来决定。

若其比值（高稀释度数值：

低稀释度数值）≤2，应报告其平均值；若＞2则报告其中较小的数字（见表1中例次2及例次3）。

　　③若所有稀释度的平均细菌总数均大于300，则应按稀释度最高的平均细菌总数乘以稀释倍数报告之（见表1中例次4）。

　　④若所有稀释度的平均细菌总数均小于30，则应按稀释度最低的平均细菌总数乘以稀释倍数报告之（见表1中例次5）。

　　⑤若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释度报告之（见表1中例次6）。

　　⑥若所有稀释度的平均细菌总数均不在30~300之间，其中一部分＞300，或者小于30时，则以最接近30或300的平均细菌总数乘以稀释倍数报告之（见表1中例次7）。

　　表1稀释度选择及细菌总数报告方式

　　篇二：

水中细菌总数的测定

　　水中细菌总数的检测

　　1.实验目的

　　1、学习并掌握水的细菌学检测方法

　　2、了解水质状况与细菌数量在饮用水检测中的重要性。

　　2.菌落总数standardplate-countbacteria

　　水样在营养琼脂上、有氧条件下37°C培养48h后，所得1mL水样所含菌落的总数。

细菌总数是评价水质污染程度的主要卫生指标，所测定的细菌总数增多说明水被生活废弃物污染。

由于结果不能说明污染的，因此必须结合总大肠菌群数来判断污染源和安全程度。

　　3.培养基与试剂

　　营养琼脂成分

　　按照上述配方称取各成分混合后，加热溶解，调整pH为~，分装于玻璃容器中（如用含有较多杂质的琼脂，应先过滤。

），经kPa（121°C,15lb）湿热灭菌20min，储存于冷暗处备用。

　　4.仪器和材料

　　仪器：

高压蒸汽灭菌器、干热灭菌箱、水热恒温培养箱、电炉、天平、冰箱。

材料：

灭菌平皿（直径9cm）、灭菌试管、刻度吸管、三角烧瓶、采样瓶、酒精灯、消毒水、镊子、试管架等。

　　放大镜或菌落计数器、pH计或精密pH试纸、火柴或打火机。

　　5.样品采集

　　自来水的取样：

先将自来水龙头用酒精棉擦拭，再用酒精灯火焰灭菌，打开龙头放水3-5min，用无菌空三角瓶接取水样200ml。

　　纯净水取样：

用消毒酒精棉擦拭纯水机出口后，先放走部分水，再用无菌空三角瓶接取水样200毫升。

　　地表水的取样：

应取距水面10—15cm的深层水样，先将灭菌的带玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流入瓶中，盛满后，将瓶塞盖好，再从水中取出，最好立即检查，否则需放入冰箱中保存。

　　6.检验步骤

　　生活饮用水（自来水、纯净水）：

以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入灭菌培养皿中，倾注约15ml已融化并冷却到45°C左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。

每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注培养基作为空白对照。

　　待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于36°C±1°C条件下连续培养48h，进行菌落计数，即为1ml水样中的菌落总数。

　　水源水：

以无菌操作方法吸取1ml充分混匀的水样，注入盛有9ml灭菌生理盐水的试管中，混匀呈1:

10稀释液。

　　吸取1:

10稀释液1ml，注入盛有9ml灭菌生理盐水的试管中，混匀呈1:

100稀释液。

按同法依次稀释成1:

1000、1:

10000稀释液备用。

如此递增稀释一次，必须更换一支刻度吸管。

　　用灭菌吸管吸取1ml未稀释的水样和2~3个适宜稀释度的水样，分别注入灭菌培养皿内，其余操作同生活饮用水的检验步骤。

　　7.菌落计数及报告方法

　　作平皿菌落计数时，可用眼睛直接观察，必要时用放大镜检查以防遗漏。

在记下各平皿的菌落数后，应求出同稀释度的平均菌落数，供下一步计算时应用。

在求同稀释度的平均数时，若其中一个平皿有较大片状菌落产生时，则不宜采用，而应以无片状菌落产生的平皿作为该稀释度的平均菌落数。

若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半皿计数后乘2以代表全皿菌落数。

然后再求该稀释度的平均菌落数。

不同稀释度的选择及报告方法

　　范围时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例1）。

　　若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30~300之间，则视二者之比值来决定：

若其比值小于2，应报告两者的平均数（如表1实例2）；若比值大于2，则报告其中稀释度较小的菌落数（如表1实例3）。

若等于2亦报告其中稀释度较小的菌落数（见表1实例4）。

　　若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例5）。

　　若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例6）。

　　若所有稀释度的平均菌落数不在30~300之间，则应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例7）。

　　若所有稀释度的平板上均无菌落生长，则以“未检出”报告之。

　　如果所有平板上都菌落密布，不要用“多不可计”报告，而应在稀释度最大的平板上，任意数其中2个平板1cm2中的菌落数，除2求出每平方厘米内平均菌落总数，乘以皿底面积cm2，再乘以其稀释倍数报告之。

菌落计数的报告：

菌落数在100以内时，按实有数报告；大于100时，采用两位有效数字，在两位有效数字后面的数值，以四舍五入法计算；为了缩短后面的零数，也可以用10的指数来表达（见表1“报告方式”列。

）

　　8.生活饮用水卫生标准规定：

菌落总数不超过100CFU/ml。

9.实验报告内容1、记录实验方法和步骤。

2、列表说明检测结果。

（1）自来水

（2）从自来水的细菌总数结果来看，是否合乎饮用水的标准？

　　篇三：

测量心得体会

　　测量心得

　　大二上学期我们正式开始了“工程测量实习”，在此之前，我们在老师的带领下进行了一系列的准备工作。

首先，说明了测量任务和测量的实际意义及重要性，我们跟随老师来到测区地点，看了学校的测量范围，在老师的讲解中我们知道了测区是我们学院校区，虽然测区比较大，基本上是我们整个学校及周围，测绘图也是我们整个学校的平面图。

在这个已经是冬季的时节，天气比较冷，但我们还是安安心心的测量，抓紧时间实习，为了尽快完成任务，我们每一周都在加班的努力，尽管很累，很辛苦，可我们还是克服了种种困难，同时我们也在实习中感觉到了充实。

　　在此之前，我们在老师的带领下学习相关测量知识，但那毕竟是理论的，实际操作对我们来说还是模糊的，所以，这次实习就是对我们整个学期以来本科目的一次大检验。

我们把这次实习当做我们以后工作的一次磨练，把我们学到的知识与实际联系起来，从实践中发现自己的不足，弥补我们的缺陷。

　　测量是一项务实求真的工作，半点马虎都不行，我们在测量实习中必须保持数据的原始性，这也是很重要的。

为了确保计算的正确性和有效性，我们得反复校核对各个测点的数据是否正确。

我们在测量中不可避免的犯下一些错误，比如读数不够准确，气泡没居中等等，都会引起一些误差。

因此，我们在测量中内业计算和测量同时进行，这样就可以及时发现错误，及时纠正，同时也避免了很多不必要的麻烦，节省了时间，也提高了工作效率。

　　测量也是一项精确的工作，通过测量学的学习和实习，在我的脑海中形成了一个基本的测量学的轮廓。

测量学内容主要包括测定和测设两个部分，要完成的任务在宏观上是进行精密控制，从微观方面讲，测量学的任务为按照要求测绘各种比例尺地形图;为各个领域提供定位和定向服务，建立工程控制网，辅助设备安装，检测建筑物变形的任务以及工程竣工服务等。

而这一任务是所有测量学的三个基本元素的测量实现的：

角度测量、距离测量、高程测量。

　　这次实习不仅是对动手能力的一次提升，更是对理论知识的一次综合性的巩固。

让我们深深的体会到了“理论指导实践，实践促进理论的发展”这个道理。

虽然测量学是一门实践性很强的学科，但是也要求我们掌握扎实的理论知识。

如果我们没有扎实的理论功底，就只知道那样做，不知道为什么那样做，当我们遇到了类似的其他问题时，我们就不能融会贯通，用其他的方法来解决它。

所以我认为理论知识是实践的前提，我们只有把理论知识学好，才能更好的促进实践。

所以我们要认真的学好理论知识，为以后的工作打下坚实的基础。

理论知识不错，但动手能力不行，那只能是纸上谈兵，对个人的发展也是不利的，所以我们要多动手，提高自己的动手能力，并在实践中促进理论知识的巩固。

只有在理论和实践这两个过程中相互作用，我们才能更好的掌握理论知识，提高自己的动手能力。

　　这次测量学实习不是以个人为单位，而是以组为单位。

我将我们的组比作大海，而我们每个组员就是大海中的一滴水，如果想要一滴水不干涸，就必须让这一滴水融入大海，从这个比喻中我们可以看出团结的力量是伟大的。

测量工作也是这样的，只有我们每个组员团结起来才能将测量学实习做好。

所以说测量学实习结果的好坏不是由这个组中某个人所决定的，而是由这个组中的每个成员所决定的。

只有我们每个人都发挥各自

　　的聪明才智，通过我们共同努力，我们才能把测量学实习做好。

所以我认为团结精神在测量工作中是很重要的，我们要在以后不断的培养我们自己的团队精神和集体荣誉感。

　　在这次实习中，我们学到了测量的实际能力，更有面对困难的忍耐力，同时也认识到小组团结的重要性以及测量的步骤。

首先，是熟悉了水准仪、光学经纬仪的用途，熟练了经纬仪的使用方法，掌握了仪器的检验和校正的方法;其次，在对数据的检查和校正的过程中，明白了各种测量误差的，其主要有三方面：

仪器误差、外界影响误差、观测误差。

了解如何避免测量结果误差，最大限度的就是减少误差的出现，即要做到：

1、在仪器选择上要选择精度较高的合适仪器。

2、提高自身的测量水平，降低误差。

3、通过各种处理数据的数学方法如：

多次测量取平均数等来减少误差。

除此之外，还应掌握一套科学的测量方法，在测量中要遵循一定的测量原则，如“从整体带局部”、“先控制后碎步”、“由高级到低级”的工作原则，并做到步步有检核。

这样做不但可以防止误差的积累，及时发现错误，更可以提高测量的效率。

通过测量实践，学会了地形图的绘制和碎步的测量等课堂上无法做到的东西，很大程度上提高了动手和动脑的能力，同时也拓展了与同学的交际合作能力。

一次测量实习要完整的做完，单靠一个人的力量和构思是远远不够的，只有小组的合作和团结才能让实习快速而高效的完成。

　　几周以来，我们都坚守在自己的“阵地”，观测、记录、计算、描点......我们分工合作，力求更好地完成任务。

在测量过程中，我们遇到了很多问题和疑难：

如

　　立标尺时，标尺除立直外，还要选在重要的地方。

因此，选点就非常重要，同时并非点越多越好，相反选取的无用点过多不但会增加测量、计算和绘图的时间浪费，而且会因点多而产生较大的误差。

　　在用经纬仪测量的过程中，气泡的居中也会产生误差，十字丝的对准的等

　　计算问题。

计算必须两个人来完成，一个初步计算，一个校核。

在此过程中，我们也遇到了类似的问题，但我们不断的重复检验中算出了正确的数据，尽量的减少了误差的出现。

　　这次实习，我们学到很多的东西。

让我更好的掌握了测量的基本功和测量的一些要素，同时也促进了与同学间的交往，使我懂得了团结互助的重要性以及仪器使用的正确方法等很多知识。

　　通过实习，使我收获了很多，比如通过实训能更熟练的使用水准仪、经纬仪等测量仪器与工具，并能快速的架好仪器进行测量工作；较好的掌握了经纬仪测量、地形图测绘的基本方法，很好的巩固了理论教学知识，提高了实际操作的技能。

让我发现在平时学习中存在的很多知识漏洞。

课本上介绍仪器使用的知识都比较抽象，到了真正实践中的时候，我们未能很好把书本知识应用到实践中，还需要老师再次进行指导。

在近距离的接触这些实物，能我更牢固的掌握相关的知识点。

实训使我们巩固了以前课堂上所学到的知识并且对以前的零碎的测量知识有了综合应用的机会。

　　其次，一次测量实习要完整的做完，但靠一个人的力量是远远不够的，只有小组的合作和团结才能让实习快速而高效的完成，通过实习对培养我们团队协作精神有促进作用。

它增进了同学们之间的交流和团结，互帮互补，分工合作，共同面对、解决困难，共同寻求如何更快更好地完成任务的方法，确保进度的完成。

　　第三，通过这次实习，有利于培养我做事严谨、认真、不畏艰难困苦的作风。

不论是对中整平时的重复精确瞄准还是在计算时反复检验计算数据，每个步骤都尽量做到脚

　　踏实地、一丝不苟，使误差尽可能的减小，及时发现错误及时检查。

不论外界的环境的恶劣，克服一下就算不了什么。

正确面对困难，学会静下来耐心的思考分析问题，能够独立借助书本找出解决途径。

做事要又负责的态度，若因为自己而造成了错误要主动承担并积极补救。

　　这次测量仪器的使用和实地的测量实习工作的开展，让我们更直观接触到了建筑工程测量这个学科，也为我们今后走上工作岗位后，更好更快地使用仪器、控制测量奠定了坚实的基础。

一个人的知识和能力只有在实践中才能发挥作用，才能得到丰富、完善和发展。

大学生成长，就要勤于实践，将所学的理论知识与实践相结合一起，在实践中继续学习，不断总结，逐步完善，有所创新，并在实践中提高自己由知识、能力、智慧等因素融合成的综合素质和能力。

实践是检验真理的唯一标准。

总的来说，这次实习让我体会到了外业的艰辛，内业的耐心，工作的细心。

我们锻炼了实际的能力，让我在未来面对选择时更有信心和勇气。

感谢老师给了我们参与这次实际工程的机会，同时也要感谢老师对我们十多天的耐心指导。

　　这次实习对于以后踏入社会有了一个很好的的接轨。

感谢学校给我们的这次机会。

我们会珍惜在学校的学习时间，学习更多的专业知识，为日后的工作打下基础。