第三章-药物的杂质检查2.ppt

1、2023/6/8,1,第三章,药物的杂质检查,2023/6/8,2,基本要求,一、掌握一般杂质检查的原理、方法和计算。二、熟悉色谱法检查杂质的一般方法和原理。三、了解特殊杂质检查的方法和原理及热分析在药物分析中的应用。,2023/6/8,3,第12节 杂质和杂质限量检查,一、药物的纯度 指药物纯净程度，反映了药 物质量的优劣，含有杂质是影响 药物纯度的主要因素。,2023/6/8,4,2023/6/8,5,（一）什么是药物的杂质,无治疗作用影响药物疗效和稳定性对人体有害,氯化物、硫酸盐,水分,砷盐、重金属,（处方中各种附加剂不称杂质）,2023/6/8,6,（二）杂质的分类,（1）一般杂质 分

2、布广泛，多数药物含有的,（检查方法收载于药典附录）,如 氯化物、硫酸盐、铁盐、重 金属、砷盐、酸、碱、水分,1.按来源分类,2023/6/8,7,（2）特殊杂质,某一个或某一类药物在生产或贮藏过程中引入的杂质,如 阿司匹林中的游离水杨酸 异烟肼中的游离肼,（检查方法收载在药典正文项下）,2023/6/8,8,2.按结构分类,3.按性质分类,无机杂质、有机杂质,信号杂质、有害杂质,如 氯化物、硫酸盐、铁盐、重 金属、砷盐,2023/6/8,9,二、药物中杂质的来源,（一）生产过程中引入,3、生产设备，工具，器皿,2、生产中所用试剂，溶剂,1、原料，中间体，副产物,2023/6/8,10,（二）贮

3、存过程中引入,药物的水解、氧化、分解、异构化、晶形转化、聚合、潮解和发霉等。,如：医用麻醉乙醚久置易氧化成醛及过氧化物。,2023/6/8,11,例1、药物及其制剂的成分中不属于杂 质范畴的是 A、药物中的残留溶剂 B、药物中的多晶型 C、药物合成中的副产物 D、阿司匹林中的游离水杨酸 E、维生素AD胶丸中的植物油,2023/6/8,12,三、杂质的限量检查,（一）杂质限量（不影响疗效、稳定性及无毒性）允许药物含有杂质的最大量,（二）杂质检查法 限量检查法 一般不要求准确测定含量 只检查杂质是否超过限量,2023/6/8,13,供试品,对照品,杂质最大允许量,2023/6/8,14,杂质量,药

4、品合格,药品不合格,杂质限量,杂质量,2023/6/8,15,（三）杂质限量的表示方法,（1）百分之几（%）（2）百万分之几（ppm 或106）,2023/6/8,16,（四）杂质限量的计算方法,V,C,M,L,2023/6/8,17,2023/6/8,18,2023/6/8,19,对乙酰胺基酚中氯化物的检查：取本品2.0g，加水100ml，加热溶解后，冷却，滤过，取滤液25ml，依法检查，与标准氯化钠溶液5.0ml（每1ml相当于10ug的Cl）制成的对照液比较，浊度不得更大。问氯化物限量为多少？,2023/6/8,20,葡萄糖中重金属的检查：取本品4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲

5、液（pH3.5）2ml，依法检查，含重金属量不得过百万分之五。问应取标准铅溶液多少ml（每1ml相当于10ug的Pb）？,2023/6/8,21,溴化钠中砷盐的检查：本品依法检查，应取标准溶液2.0ml（每1ml相当于1ug的As）制备砷斑，含砷量不得过0.0004%。问应取供试品多少克？,2023/6/8,22,96：79、检查维生素C中的重金属时,若取样量为1.0g，要求含重金属不得 过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每1ml0.01mg的Pb）多少ml？A、0.2ml B、0.4ml C、2ml D、1ml E、20ml,2023/6/8,23,97：71、检查某药物中的砷盐，取标准 砷

6、溶液2ml（每1ml相当于1g的 As）制备标准砷斑，砷盐限量为 0.0001，应取供试品的量为 A、0.20g B、2.0g C、0.020g D、1.0g E、0.10g,2023/6/8,24,98：87、药物纯度合格是指 A、含量符合药典的规定 B、符合分析纯的规定 C、绝对不存在杂质 D、对病人无害 E、不超过该药物杂质限量 的规定,2023/6/8,25,98：88、检查某药品杂质限量时，称取 供试品W(g)，量取待检杂质的标准 溶液体积为V(ml)，浓度为c(g/ml)，则该药品的杂质限量是 A、W/(c V)100%B、c V W 100%C、V c/W 100%D、c W/V

7、 100%E、V W/c 100%,2023/6/8,26,99m：137、杂质限量常用的表示方法有 A、mol/L B、M C、百分之几 D、百万分之几 E、ng,2023/6/8,27,例1、药物中含有超过限量的杂质，就可能使 A、理化常数超过规定范围 B、外观发生变化 C、含量偏低或活性降低 D、毒副作用增加 E、鉴别反应不明显,2023/6/8,28,例2、称取柠檬酸钠2.0g，加水溶解，加稀 醋酸10mI与水适当使成25ml，依规 定方法检查重金属，与1.0ml标准铅 溶液（10g/ml）用同法制成的对照 液比较，不得更深。重金属限量应为 A、2ppm B、4ppm C、5ppm D

8、、百万分之三 E、百万分之十,2023/6/8,29,一、氯化物检查法,c V,W,（一）原理,第三节 一般杂质的检查方法,2023/6/8,30,（二）操作,2023/6/8,31,（三）测定条件,1、标准溶液 氯化钠 浓度 10g/ml Cl-1,（所显浑浊梯度明显，相当于标 准氯化钠溶液58ml）,适宜检测范围 0.050.08mg/50ml,2023/6/8,32,2、酸性条件,（1）加速AgCl形成,稀硝酸,50ml溶液中含稀硝酸10ml为宜,（如 Ag2CO3、Ag3PO4和Ag2O）,（3）避免弱酸银盐的形成,（2）产生较好的白色乳浊,（4）,2023/6/8,33,3、沉淀剂,

9、供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀。,硝酸银,2023/6/8,34,4、避光、暗处放置5分钟后比浊,5、比浊方法 同置于黑色背景上，自上向下观察,因氯化银见光易分解,2023/6/8,35,二、硫酸盐检查法,（一）原理,2023/6/8,36,（二）操作,2023/6/8,37,（三）测定条件,1、标准溶液 硫酸钾 浓度 100g/ml SO42-,适宜检测范围 0.10.5mg/50ml（相当于标准硫酸钾溶液15ml),2023/6/8,38,2、酸性条件,3、沉淀剂,稀盐酸,50ml溶液中含稀盐酸2ml为宜,氯化钡,稀释后再加，使生成白色浑浊而不是白色沉淀

10、,2023/6/8,39,5、供试品若有色 内消色法,4、比浊方法 同置于黑色背景上，自上向下观察,6、供试液若不澄清,需过滤,先用含盐酸的水洗净滤纸中的硫酸盐后再过滤样品,2023/6/8,40,三、铁盐检查法（硫氰酸盐法）,（一）原理,过硫酸铵,过硫酸铵,2023/6/8,41,（二）操作,2023/6/8,42,（三）测定条件,1、标准溶液 硫酸铁铵 FeNH4(SO4)212H2O 浓度 10g/ml Fe3+,适宜检测范围 0.010.05mg/50ml（相当于标准铁溶液15ml）,2023/6/8,43,2、酸性条件,3、加过硫酸铵的目的,50ml溶液中含稀盐酸4ml为宜,稀盐酸,

11、B、防止光线使反应产物硫氰 酸铁还原或分解褪色,A、氧化 Fe2+为 Fe3+,2023/6/8,44,4、显色剂 30%硫氰酸铵溶液,5、比色方法 同置于白色背景上，自上向下观察,2023/6/8,45,6、若供试液与对照液颜色不一致或 红色太浅,可用正丁醇或异戊醇提取后，分取醇层比色。,2023/6/8,46,四、重金属检查法（限量检查法）,ChP（2010）共收载三法,第三法（硫化钠法）,第二法（炽灼残渣法）,第一法（硫代乙酰胺法）,2023/6/8,47,（一）第一法,1、原理,适用溶于水、稀酸和乙醇的药物,（硫代乙酰胺法）,2023/6/8,48,2、操作,2023/6/8,49,3

12、、测定条件,（1）标准溶液 硝酸铅 浓度 10g/ml Pb2+,适宜检测范围 0.010.02mg/25ml（相当于标准铅溶液12ml),2023/6/8,50,2、酸性条件,3、沉淀剂,4、比浊方法 同置于白色背景上，自上向下观察,（pH在33.5时呈色完全）,25ml溶液中含缓冲液2ml为宜,醋酸盐缓冲液（pH3.5),硫代乙酰胺,2023/6/8,51,5、供试液若有色,（1）外消色法,（2）内消色法,向对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液,2023/6/8,52,（二）第二法（炽灼残渣法）适用于含芳环、杂环以及不溶于 水、稀酸、乙醇的有机药物,将样品经500600炽灼后的残渣，

13、用硝酸、盐酸处理后，按第一法检查,2023/6/8,53,（三）第三法,1、原理,适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物,（硫化钠法）,2023/6/8,54,2、操作,供试液对照液,比浊,2023/6/8,55,3、测定条件,（1）碱性条件,（2）沉淀剂,氢氧化钠溶液,25ml溶液中含5ml,硫化钠,2023/6/8,56,五、砷盐检查法（限量检查法）,ChP（2010）古蔡氏法二乙基二硫代氨基甲酸银法,Ag-DDC法,2023/6/8,57,（一）古蔡氏法,1、原理,(黄色棕色),2023/6/8,58,C,三砷盐检查法,2023/6/8,59,2、操作,比较砷斑,2023/6/

14、8,60,3、测定条件,（1）标准溶液 三氧化二砷 浓度 1g/ml As,适宜检测浓度 0.002mg/33ml（相当于标准砷溶液 2ml）,药典规定用2ml制备标准砷斑,2023/6/8,61,（2）酸性条件,（3）碘化钾（KI）,C、,B、抑制锑干扰（100 gSb）,A、使 As5+As3+,33ml溶液中含5ml,盐酸（亦是反应物）,2023/6/8,62,（4）酸性氯化亚锡（SnCl2）,A、使 As5+As3+,D、与锌形成锌锡齐（去极化）使氢气均匀而连续地发生,B、抑制锑干扰（100 gSb）,C、（褪色）,2023/6/8,63,（5）醋酸铅棉花 Pb(Ac)2,消除锌粒及供

15、试品中少量硫化物的干扰,2023/6/8,64,4、古蔡氏法特点,优点：灵敏度高(1 g As/ml),缺点：有Sb存在时，此法易受干扰。白田道夫法 AS3+AS（棕褐色）,三砷盐检查法,2023/6/8,65,本法不仅用于砷盐的限量检查,而且可用作微量砷盐的含量测定.,(二)二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法)silver diethyldithiocarbamate,2023/6/8,66,（二）Ag-DDC法,直接比色或于510nm波长处测定吸收度,1、原理,(红色胶态),2023/6/8,67,Ag-DDC法测砷瓶,A,B,C,D,2023/6/8,68,2、测定条件,（2）本法

16、适用于含Sb量小于500g 的供试品（500 gSb）,（1）有机碱吸收反应产生的HDDC USP（24）用吡啶 ChP（2000）用三氯甲烷,2023/6/8,69,Sb100ug,Sb500ug,Sb 500ug,Zn、HClKI、SnCl2HgBr2,Zn、HClKI、SnCl2Ag-DDC,SnCl2HCl,黄棕色 砷斑,红色胶态银,棕褐色胶态砷,2023/6/8,70,六、干燥失重测定法,是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，主要是水分，也包括其它挥发性物质,2023/6/8,71,（一）常压恒温干燥法 适用于受热较稳定的药物 干燥温度一般为105,供试品平铺在称量瓶中的厚 度一

17、般不超过5mm,2023/6/8,72,（二）干燥剂干燥法 适用于受热易分解或挥发的药物 干燥剂：硅胶、P2O5、H2SO4,2023/6/8,73,（三）减压干燥法 适用于熔点低，受热不稳定 或水分难赶除的药物 亦可用减压干燥剂干燥法,第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行,2023/6/8,74,（四）热分析法,热重法是在程序控制温度下，测量物质质量与温度关系的一种技术。,2023/6/8,75,六、溶液颜色检查法 控制药物中有色杂质限量的方法,ChP采用三种方法检查1.目视比色法 与标准比色液比较2.分光光度法 测定吸收度3.色差计法 测定与水的色差值,2023/6/8,

18、76,七、炽灼残渣检查法,检查有机药物中混入的无机杂质（金属氧化物或无机盐类）亦称为硫酸灰分,一般限量为 0.1 0.2,2023/6/8,77,方法 样品炭化后+H2SO4湿润 700800炽灼至恒重称重,若残渣需留作重金属检查，则改在500600炽灼至恒重,第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼0.5h后进行,2023/6/8,78,八、易炭化物检查法 检查药物中遇H2SO4易炭化或易被 氧化呈色的微量有机杂质,方法H2SO4炭化后与标准比色液比较,2023/6/8,79,九、有机溶剂残留量测定法,是用以检查药物在生产过程中引入的有害有机溶剂，包括苯、氯仿、二氧六环、二氯甲烷、吡啶、

19、甲苯及环氧乙烷。,检查方法 气相色谱法（ChP）,2023/6/8,80,色谱条件固定相 直径0.250.18mm的二乙烯 苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球,载气 氮气检测器 氢火焰离子化检测器检测柱温 80170,2023/6/8,81,测定法,第一法 溶液直接进样法,第二法 顶空进样法 适用于挥发性大的组分,使样品加热挥发后进样，可免去样品的萃取、浓集等步骤,2023/6/8,82,十、澄清度检查法,检查药物中的微量不溶性杂质（注射剂原料药）（一）原理,2023/6/8,83,（二）浊度标准液的配制,浊度标准液（5个级号）,2023/6/8,84,（三）“澄清”的含义,系指供试品溶液的澄清度

20、相当于所用溶剂，或未超过0.5号浊度标准液,2023/6/8,85,第四节 特殊杂质检查方法,一、物理法：利用药物与杂质在嗅味、挥发性、颜色、溶解行为及旋光性质的差异。,2023/6/8,86,二、化学反应法,1.容量分析法：利用药物与杂质在酸碱性及氧化还原等方面的差异，采用适当的标准溶液滴定共试品溶液，规定消耗溶液的量，以控制杂质限量。2.重量分析方法：规定遗留物重，控制杂质限量。3.比色法和比浊法：利用杂质特有的呈色反应和沉淀反应，与对照品比较。,2023/6/8,87,三、色谱法,（一）纸色谱法(PC)(二)薄层色谱法（TLC）1.在一定供试品及检查条件，不允许有杂质斑点存在。此法以在实验条件下显色剂对杂质的最小检出限控制其限量。2.选用实际存在的待检杂质作为杂质对照品。3.选用可能存在的某种物质作为杂质对照品。4.将供试品稀释到适当浓度作为杂质对照品。5.选用质量符合规定的与供试品相同的药物作为杂质对照品。,2023/6/8,88,（三）HPLC法（四）GC法1.面积归一化法 2.主成分自身对照法3.内标法测定供试品中杂质的总量限度4.内标法加校正因子测定供试品中某个杂质（或主成分）含量5.外标法测定供试品中某个杂质（或主成分）含量。,