实验室质量手册.docx

1、实验室质量手册一、果汁感官检验1、色泽、外观形态及杂质取混合均匀的果汁50ml于100ml洁净透明的烧杯中，置于明亮处，用肉眼观察其色泽、外观形态，杂质检测须用蒸馏水稀释至原浆浓度。2、香气及滋味：取混合均匀用蒸馏水稀释到原果可溶性固形物（或规定）的果汁50ml于100ml洁净的烧杯中，在室温下（20）立即用嗅觉仔细鉴别其气味，用味觉品尝其滋味，检查有无异味。注：果汁可溶性固形物不足规定要求时以原果汁检测；品尝第二个样品前须用清水漱口。二 、理化检测1、可溶性固形物 标准：GB/T10203仪器：A、手持糖量仪分析步骤：a.测定前用蒸馏水校准折射仪。b.分开折射仪两面棱镜，用脱脂棉蘸乙醚或乙醇

2、擦净。c.用末端熔圆的玻璃棒蘸取试液23滴，滴于折射仪棱镜面中央(注意勿使玻璃棒触及镜面)。d.迅速闭合棱镜，静置1min，使试液均匀无气泡，并充满视野。e.对准光源，通过目镜观察接物镜，旋转调节手轮，选择和样液可溶性固形物相适宜的范围，观察视野中明暗分界线处读数。f.从目镜百分数标尺读出可溶性固形物的百分含量。B、数显阿贝折射仪：分析步骤：a.测定前用蒸馏水或标准试样校对折射仪。b.打开折射仪两面棱镜，用脱脂棉蘸乙醇擦净。c.将被测样放在折射棱镜的工作面上，盖上棱镜盖，对准光源通过目镜观察视均，旋转调节手轮，使明暗分界线落在交叉线视场中，调节色散校正手轮和聚光镜的位置，使明暗分界线对准交叉线

3、的交点。d.按“READ”显示键，显示窗内“00000”消失，显示“”数秒后“”消失，显示被测样品的折射率，再按“BX”键即显示被测样品未经温度修正的可溶性固形物含量；或按“BXTC”键即显示被测样品经温度修正后可溶性固形物含量。e.允许误差：同一样品两次测定值之差，不应大于0.5，取二次测定的平均值作为结果，精确到小数点后1位。2、可滴定酸度：按GB/T 12456规定的方法。电位滴定法(1)仪器：自动电位滴定计 、PH计(2)试剂：0.1mol/L氢氧化钠标准溶液。(3)被测样液的制备：用100ml烧杯精确称取果汁15 g，加50ml蒸馏水，充分摇匀供测定用。 (4)测定步骤a.将自动电位

4、滴定计接通电源，预热30min后，用pH6.86、pH9.18的缓冲溶液校正。b.设定滴定终点为pH8.20。c.加好氢氧化钠标准溶液，并调整滴定仪液位显示器为“00.00”。将搅拌棒放入烧杯中，然后将烧杯置于电磁搅拦器上，电极插入烧杯内试样中适当位置（使玻璃电极泡浸入试样且不接触搅拌棒），e.开动电磁搅拌器，然后按下“滴定鼠标”按钮，滴定开始；滴液快速滴下，在接近终点时，滴速减慢，当试样pH值到达终点13秒数值不变化，滴定即行告终。f.滴定结束后记录消耗氢氧化钠标准溶液的毫升数。(5)计算： X可滴定酸% （VMK/ m）100 式中：X可滴定酸 g/l00g V滴定耗用0.1mol/l氢氧

5、化钠毫升数 M氢氧化钠溶液的摩尔浓度 K苹果酸的系数 0.067，柠檬酸的系数0.064，酒石酸的系数0.075m被测样品克数（6）连续滴定两次，误差不超过0.5%，取平均值，报告结果取小数点后两位。3、PH值(1)仪器：pH计、磁力搅拌器(2)样品处理：取样品少许，用蒸馏水稀释至规定要求的可溶性固形物。(3)测定：将样品放入磁力搅拌器，将pH计电极插入样品溶液中，待数据稳定，读出pH值,结果取小数点后两位。果汁浓度不足规定要求的可溶性固形物时以实数值检测。4、透光率（1）分光光度计（2）样品处理：取样品少许，用蒸馏水稀释至规定要求的可溶性固形物。（3）测定：用1cm比色皿，以蒸馏水调100%

6、，在625nm波长处测定其透光度。果汁浓度不足规定要求的可溶性固形物时以实数值检测。5、色值（1）分光光度计（2）样品处理：取样品少许，用蒸馏水稀释至规定要求的可溶性固形物。（3）用1cm比色皿，以蒸馏水调100%，在440nm波长处测定其色值，结果取小数点后一位。果汁浓度不足规定要求的可溶性固形物时以实数值检测。6、浊度(1)仪器 浊度仪用2100N型浊度仪：(2)样品处理： 将果汁用蒸馏水稀释至可溶性固形物为规定要求的可溶性固形物。（3）测量步骤： 将试样倒入浊度仪测量杯，放入浊度仪，待数据稳定后读数。（4）结果取三位有效数字7、果胶（1）试剂: 乙醇95（加1%的浓盐酸）（2）分析步骤：

7、将果汁用蒸馏水稀释至可溶性固形物为规定要求的可溶性固形物后，取果汁与95乙醇按1:1之比例混合，轻微摇动，以免破坏胶体的形成，如在1530min内有絮状物出现，则果汁有果胶；没有絮状物出现，则果汁中不含果胶。8、淀粉(1)试剂: 碘溶液0.005mol/L称取碘(GB625)0.65g及碘化钾(GB1272)1.75g于100ml烧杯中，加少量蒸馏水使其溶解，并用蒸馏水稀释至500ml摇匀，保存于具塞棕色瓶中。（2）分析步骤：将果汁用蒸馏水稀释至可溶性固形物为规定要求的可溶性固形物后，取20ml于50ml烧杯中，加热至70，冷却后加入0.005mol/L碘溶液1ml，摇匀，并观察其显色反应，如

8、显黄色，则无淀粉，显蓝色，则有淀粉，显棕色，则有少量淀粉。9、氨基态氮标准：浓缩果清汁中氨基态氮的测定方法甲醛值法GB12413.2(1)试剂：a.0.1mol/l氢氧化钠标准溶液b.中性甲醛溶液：量取200ml甲醛溶液于400ml烧杯中，置于电磁搅拌器上，边搅拌边用氢氧化钠溶液调至pH8.10。c.30%过氧化氢。d.pH6.86缓冲液：按GB604中缓冲溶液的制备配制。(2)仪器设备：a.自动电滴定计，测量范围0-14pH，精确0.1pH。b.玻璃电极和甘汞电极。（3）试样的制备：准确称取5g（精确至0.001g）浓缩果汁至烧杯中，加50ml蒸馏蒸馏水，充分摇匀供测定用。(4)测定步骤：a

9、.将自动电位滴定接通电源，预热30min后，用pH6.8的缓冲溶液校正。b.将烧杯置于电磁搅拌器上，电极插烧杯内试样中适当位置（使玻璃电极泡浸入试样且不接触搅拌棒），如需要加适量蒸馏水。c.开动电磁搅拌器，用0.1000mol/l氢氧化钠溶液漫漫中和试样中的有机酸，滴定pH8.20，并保持1min不变。然后慢慢加入1015ml中性甲醛溶液。1min后用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至pH8.10，记录消耗氢氧化钠标准溶液的毫升数。(5)计算X （CV14/ M）100式中：X 每100g试样中氨基态氮的毫克数，mg/100g。 C 氢氧化钠标准滴定溶液的浓度 mol/L。 V 加入中性甲醛溶液后，滴

10、定试样耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积，ml。 M 试样的质量，g (6)结果取三位有效数字10、灰分的检测（1）取大小适宜瓷坩埚置马弗炉中，在600下灼烧0.5h，冷却至200以后，取出放入干燥器中冷至室温，精密称量，并重复灼烧至恒重。（2）取试样约10g（准确至0.1mg）于坩锅中（W0），称重（W1），然后先在沸水浴上蒸干，再放在电炉上加热，直至碳化。将坩锅移至马弗炉中，在52525下灼烧灰化至碳微粒消失，样品呈灰白色为止，冷却至200后，用坩锅钳取出坩锅放入干燥器中冷却至室温，精确称重（W2），并重复灼烧至恒重（两次之差不超过0.5mg）,按下式计算灰分含量：灰分%=（W2-W0/W1-W

11、0）100% 式中：W0坩锅重量（g） W1样品重量和坩锅重量之和 W2灰分重量和坩锅重量之和 11、果汁槽果汁检测（1）从果汁槽取100ml果汁。（2）摇匀后，分别装入离心管，3000r/min，离心10分钟,读取下面沉淀物的体积,算出悬浮物含量，并观察有无果实籽壳存在。12、悬浮物含量（1）从卧螺分离机、离心机后取100ml搅匀的果汁。将果汁置入两个10ml刻度离心管，对称放入离心机，3000r/min，10分钟。（2）取出离心管，读取沉淀物的体积，取其平均值为悬浮物含量。（3）从卧螺分离机、离心机开始至结束每60分钟取样一次。（4）以时间为横坐标，悬浮物含量为纵坐标作图。13、铜按GB5

12、009.13规定的方法，二乙胺基二硫代甲酸钠法。14、铅：按GB 5009.12规定的方法测定 双硫腙比色法。15、砷：GB5009.11规定的方法测定 砷斑法16、 单宁的检测（一） 试剂（1）1M醋酸锌（分析纯）溶液（需以标定后的EDTA-2N溶液标定浓度）。（2） 0.05M EDTA2Na溶液：取EDTA2Na2H2O(分析纯)约18.6g加蒸馏水溶解成1000ml，以标准锌溶液（0.02M）标定其实际浓度。（3）PH=10缓冲溶液(NH4CL-NH4OH)。（4）铬黑T指示剂。（5）鞣质水溶液(单宁水溶液)1%100ml或用4g干皮粉于水蒸汽抽提器内抽提，抽提液用水稀成100ml。（

13、二）、实验（1）精密吸取1M ZnAc2(醋酸锌)溶液20ml于500ml容量瓶中，加饱和氨水14ml，测其PH是否为11.0，摇匀使白色沉淀溶解。（2）将鞣质水溶液（含单宁1%）100ml加蒸馏水稀释至400ml，于水浴上温热至35+-2，然后定量的缓缓注入（1）的容量瓶中，并不断摇动，加毕后继续振摇1分钟，置原水浴内放置30分钟（间歇振摇数次），冷至室温，加蒸馏水调至刻度，摇匀，过滤（用定量滤纸过滤），收集滤液（滤液需澄清），于干燥的三角烧瓶中（初滤出部分弃去）。精密吸取滤液20ml（或25ml）于三角瓶中，加蒸馏水300ml，PH=10的缓冲溶液25ml，铬黑T指示剂12滴（或1ml-颜

14、色淡时），然后以0.05M EDTA 2Na溶液滴定，溶液由红色变为蓝色即为终点。（三）、计算单宁含量%=(0.1556*V*100)/W式中V=20*MZn-（25或20）*ME*QMZnZnAC2溶液的摩尔浓度；MEEDTA 2Na溶液的摩尔浓度；QEDTA 2Na溶液滴定消耗的毫升数；0.15561ml1 MZn ZnAC2可络合0.1556单宁（鞣质）；W样品重量（质量）（g）；25为系数20ml或25ml相当于500ml的20或25分之一。（四）、附：试剂的配制及标定：1、氨水缓冲溶液（PH=10.5）的配制：称取67g氯化铵，溶于200ml水中，加570ml氨水，混合以水稀至100

15、0ml。2、铬黑T指示剂0.6%：称取0.6g铬黑T，溶于100ml三乙醇胺中，加入4g盐酸羟搅拌溶解之。3、 EDTA（乙二胺四乙酸二钠）分子量=372.24，如果要配制0.008915M EDTA标准溶液，即称取3.319g EDTA溶于水稀至1000ml；如要配置0.00446M EDTA标准溶液，即称取1.6595g EDTA溶于水中稀至1000ml。4、EDTA标准溶液的标定：吸取10ml（如0.02M）锌标准液，加60ml水，10ml氨性缓冲溶液，1-2滴铬黑T指示剂，用EDTA滴定，溶液由红色变为纯兰色为终点。EDTA摩尔浓度（mol/l或克分子浓度）按下式计算： M=（10*0

16、.02）/V式中：V滴定时消耗EDTA溶液的毫升数5、 锌标准液0.02M的配制：准确称取1.3074g纯锌，用20ml（1+1）盐酸溶液溶解，至锌全部溶解后，将溶液移入1000ml容量瓶中，以水稀释至刻度。注：锌的毫克当量=0.0653锌的克当量=65.3717、果汁中Vc的测定（一）仪器及材料精度0.0001g分析天平、刻度0.1ml的50ml酸式滴定管、1000ml棕色容量瓶、10ml移液管、50ml烧杯、升华碘、可溶性淀粉、柠檬酸、分析纯Vc（二）操作（1）溶液制备a. 0.1N碘储存液：将20g的KI溶于2040ml的蒸馏水中，加入16.25g升华碘，使之溶解并转移至1000ml的容

17、量瓶中，稀释至刻度。此溶液储存在避光带盖的低酸性玻璃瓶中，可储存34周。b. 0.01N碘液：移取100 ml0.1N碘液至1000ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，在每班使用前用标准Vc溶液标定此溶液。c. 淀粉指示剂：在10ml冷水中加入2g可溶性淀粉，慢慢向100ml沸水中到此浆液并煮沸1分钟，冷却后移入指示剂瓶中。d. 10%柠檬酸溶液：用1000ml蒸馏水溶解100g柠檬酸。d. Vc标准溶液：精确称取0.250gVc，用10%柠檬酸溶液溶解，并定容至250ml，此溶液极不稳定，应立即使用。e. 0.01N碘液的标定： 移取10ml标准液于150ml烧杯中，加入约90ml 10%柠檬酸溶

18、液，用碘液滴定至终点（兰色），记录所用碘液毫升数（V），碘值=10/V。（2）样液滴定 用移液管取待测果汁样品10ml入50ml烧杯中，加入23滴淀粉指示剂，用0.01N碘液滴定至溶液显兰色，且30s内不褪色即为终点，记录所用碘液体积V2。（3）结果计算：Vc(mg/100ml)=碘值* V2*10三、 微生物检测1、细菌总数 按GB4789.2规定的方法测定菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件培养后，所得1g或1ml检样中所含细菌菌落的总数。菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。每种细菌都有它一定的

19、生理特性。培养时，应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、pH、需氧性质等)去满足其要求，才能分别将各种细菌都培养出来。 但在实际工作中，一般都只用一种常用的方法去作细菌菌落总的测定，所得结果，只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温性需氧菌的菌落总数。(1)设备和材料温箱:36箱1。冰箱:04。恒温水浴:461。天平。电炉:可调式。吸管:容量为1ml和10ml，标有0.1ml单位的刻度。三角烧瓶:容量为500ml。玻璃珠:直径为5mm平皿:皿底直径为9cm。试管:18200mm。酒精灯。均质器或乳钵。试管架。灭菌刀或剪刀。灭菌镊子。酒精棉球。登记簿。玻璃蜡笔。(2)培养基和试剂营养琼

20、脂培养基:GB 4789.28-84食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3.7条。75%乙醇。生理盐水稀释液:定量分装于试管内，灭菌。（3）检验过程菌落总数的检验程序如下: 每皿内加入适量琼脂作成几个适当倍数的稀释液 报 告菌 落 计 数482 h 361 (4)操作步骤 1)检样稀释及培养a.以无菌操作，将检样10ml放于含有90ml灭菌生理盐水稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，经充分振摇作成1:10的均匀稀释液。用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液)，振摇试管混合均匀，作成1:100

21、的稀释液。b.另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml灭菌吸管。c.根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择23个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。稀释液移入平皿后，应及时将凉至46营养琼脂培养基(可放置于461水浴保温)注入平皿约15ml，并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。 d.待琼脂凝固后,翻转平板,置361温箱内培养482h取出， 计算平板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得毫升样品所含菌落总

22、数。 2)菌落计数方法作平板菌落计数时，可肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数。 3)菌落计数报告a.平板菌落数的选择 选取菌落数在30300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很匀匀，即可计算半个平板后乘2代表全皿菌落数。b.稀释度的选择应选择平均菌落数在30300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之(见表例1)。若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30300

23、之间，则视二者之比如何来决定，若其比值小于2，应报告其平均数；若大于2则报告其中较小的数字(见表例2及3)。若所有稀释度的平均产菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表例4)。若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落乘以稀释倍数报告之(见表例5)。 若所有稀释度均无菌落生长，则以小于() 1乘以最低稀释倍数报告之(见表例6)。若所有稀释度的平均菌落数均在30300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表例7)。 c.菌落数的报告菌落数在100以内时按其实有数报告;大于100时，采用二

24、位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示(见表“报告方式”栏). 稀释度选择及菌落数报告方式例次稀释液及菌落数两稀释液之比菌落总数(个/g或个/ml)报告方式(个/g或个/ml)10-110-210-31多不可计16420-1640016000或1.6*1042多不可计295461.63775038000或3.8*1043多不可计271602.22710027000或2.7*1044多不可计多不可计313-313000310000或3.1*104527115-270270或2.7*1056000-1*10107多不可计30512-

25、3050031000或3.1*1042、大肠菌群GB4789.3大肠菌群系指一群在3724小时能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来源于人畜粪便，故以此为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，具有广泛的卫生学意义。食品中大肠菌群数系以每100ml(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。 ()设备和材料温箱:361。水浴:440.5。仪器与材料天平、显微镜。均质器或乳钵、温度计、平皿、试管、吸管、载玻片。()培养基及试剂乳糖胆盐发酵管:GB 4789.28-84食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂中3.9。伊红美蓝琼脂:GB 4789.28-84中3.23

26、。乳糖发酵管: GB 4789.28-84中3.10。蛋白胨水: GB 4789.28-84中2.13。靛基质试剂: GB 4789.28-84中2.13。革兰氏染色液:GB 4789.28-84中1.2。()检验程序检样大肠菌群检验程序如下：稀释大肠菌群阴性产气伊红美蓝琼脂平板361 242h报告 乳糖发酵管361 242h革兰氏染色革兰氏阴性无芽胞杆菌革兰氏阳性不产气产气大肠菌群阴性大肠菌群阴性报告大肠菌群阳性报告报告(4)操作步骤 1)检样稀释 以无菌操作将检样10ml放于含有90ml灭菌生理盐水稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，经充分振摇成1:10的均匀稀释液。 用1m

27、l灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水稀释液的试管内，振摇试管，混匀，作成1:100的稀释液。 另取1ml灭菌吸管，按上项操作依次作10倍递增稀释液，每递增稀释一次，换用1支1ml灭菌吸管。 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择三个稀释度，每个稀释度接种3管。 2)乳糖发酵试验将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1ml以上者，用双料乳糖胆盐发酵管；1ml及1ml以下者，用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管，置361温箱内，培养242h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则按下列程序进行。 3)分离培养将产气的发酵管分

28、别转种在伊红美蓝琼脂平板上，置361温箱内，培养1824h，然后取出，观察菌落形态，并作革兰氏染色和证实试验。 4)证实试验在上述平板上，挑取可疑的大肠菌群菌落12个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置361温箱内培养242h，观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。 5)报告根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，报告每100ml(g)大肠菌群的最可能数。(5)粪大肠菌落 1)检样稀释见(4)中1）条。2）44乳糖发酵试验将检样以无菌操作接种于乳糖胆盐发酵管内（1ml以上者，用双料乳糖胆盐发酵管；1ml及1ml以下者，可用单料乳糖胆盐发酵管）

29、，置440.5水浴内，培养242h，经培养后，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为阴性。如有产气者，则按下列程序进行。 3）证实试验将所有产气发酵管，分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，置361培养1824h，并同时接种蛋白胨水，置440.5培养24h。经培养后，在上述平板上观察有无典型菌落生长，并做革兰氏染色镜检。在蛋白胨水内加靛基质试剂约0.5ml，观察靛基质反应。4）结果评定凡靛基质阳性，平板上有典型菌落者，则证实为粪大肠菌群阳性。 5）报告根据证实为粪大肠菌群的阳性管数，查MPN检索表，报告每100ml(g)粪大肠菌群的最可能数。()大肠菌群测定方法滤膜法 1)培养基 品红亚硫酸钠培养基：称取39g营养琼脂，3.5gK2HPO4、5g无水亚硫酸钠，加20ml5%碱性品红乙醇溶液，1000ml蒸馏水，加热溶解，于高压蒸气灭菌器内，经0.15Mpa压力下灭菌20min，倒入15mm平皿内2030ml摇匀，冷后放入冰箱保存。 乳糖蛋白胨培养液称取10g蛋白胨、3g牛肉膏、5g乳糖、5gNaCl，加1000ml蒸馏水加热溶解，调整pH=7.27.4，1ml1.6%溴甲酚紫乙醇溶液，混匀后分装于装有导管的15mm试管中，灭菌备用。2)步骤 以无菌操作将检样10ml放于含有90ml灭菌生理盐水稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，经充分振摇成1:1