标准操作程序SOP.docx

1、标准操作程序SOP奇美實驗動物中心標準操作程序 【目錄】原創日期：89年12月27日 更新日期：100年 4月12日前言：奇美醫院實驗動物中心標準操作程序（SOP）主要是參照台灣大學醫學院實驗動物中心標準操作程序編撰而成。本中心在行政編制上為醫學研究部下轄實驗室之一，受醫學研究部部主任指揮及實驗動物照護及使用小組監督；目前編制有獸醫師、清潔和代養技術員各一員，各司其職，相互支援，並依現實情況隨時更新修正實驗動物中心SOP。台大實驗動物中心第一章 繁殖組第二章 小動物代養組第三章 大動物代養組第四章 研發組奇美實驗動物中心獸醫師代養技術員清潔技術員獸醫師職責1. 綜合中心經營管理。2. 協助各式

2、動物外科手術之保定、麻醉及術後照顧。3. 實驗室環境監測(每季)。4. 進出動物健康監測及檢疫（委外執行）。5. 支援醫學研究部業務（含動物實驗申請表審核、動物實驗許可書簽發）。6. 院內研究助理、專助及住院醫師教學訓練。7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 39. 40. 41. 42. 43. 支援醫院住院醫師教學訓練（含院外學員）。7. 研發。44. 45. 46. 47. 48

3、. 49. 50. 51. 52. 53. 54. 動物代養：1. 兔室（1）（2）2. 老鼠飼養室（1）（2）（3）3. 藥物代謝室4. 行為觀察室5. 墊飼料室6. 北側走道區及閘門7. 鞋櫃（含拖鞋清洗）籠具清洗：1. 豬飼養區清潔2. 狗飼養區清潔3. 中央走道區清潔4. 手術室清潔5. 機械室及清洗室6. 辦公室清潔7. 業務用具請領1. 綜合動物中心經營管理。2. 協助各室動物外科手術之保定、麻醉及術後照顧。3. 實驗室環境監測(每季)。4. 進出動物健康監測及檢疫（委外執行）。5. 支援醫學研究部業務（含動物實驗申請表審核、動物實驗許可書簽發）。6. 院內研究助理、專助及住院醫師

4、教學訓練。7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 39. 40. 41. 42. 43. 支援醫院住院醫師教學訓練（含院外學員）。7. 研發。44. 45. 46. 47. 48. 49. 50. 51. 52. 53. 54. 實驗動物中心平面簡圖：實驗動物中心標準穿著：每日工作內容簡表：時間星期一星期二星期三星期四星期五星期六0800-0830實驗動物中心工作人員晨間會議（前日業務檢

5、討及今日任務說明）0830-0900空調檢查、設備叫修、消毒鍋開機、動物房飼養用具準備、隔離衣消毒、設備及器械包滅菌等0900-1030動物術後投藥健康評估，繁殖區工作1030-12001200-1300午休1300-16301630-1700設備停機、動物房環境檢查、叫修復檢、電源檢查、綜和檢討及單位會議（今日業務檢討及明日任務說明）常用業務聯絡電話：項目聯絡公司及電話備註動物訂購鼠、天竺鼠國家實驗動物中心：02-26514626樂斯科：03-9615839兔國家實驗動物中心：02-26514626樂斯科：03-9615839天竺鼠國家實驗動物中心：02-26514626豬蘇必作先生：06-

6、7232785台東畜產試驗所：089-232583狗屏東科技大學林茂勇教授墊飼料訂購雍立貿易股份有限公司02-26933322實驗醫材時茂儀器股份有限公司07-3487595病理相關耗材馮之賢0933615657麻醉藥訂購Ketamine管製藥品管理局：1. 管製藥品申請表2. 研究計畫動物實驗許可書3. 研究計畫之材料和方法4. 麻醉藥用量估算表ZoletilPropofolPavulonIsofluraneSevoflurane抗生素嘉獸動物醫院06-2217545奇美醫學中心實驗動物照護及使用小組組織、任務及職責組織：1. 奇美醫學中心實驗動物照護及使用小組（以下簡稱本組）成立系依行政院

7、農業委員會於民國87年11月4日頒行之動物保護法第三章第十六條第三項規定執行。2. 本組對外正式名稱為奇美醫學中心實驗動物照護及使用小組。3. 本組設主席一人，由院長指派之；委員由院長及主席就院內各相關部科室遴選之，醫學研究部主任及實驗動物中心獸醫師為當然委員。另設執行秘書一員，由實驗動物中心獸醫師兼任之。4. 本組之成立、異動或裁撤時皆需呈報主管機關台南縣家畜疾病防治所並核轉農業委員會畜牧處備查。任務：一、審核該機構進行實驗動物之科學應用。 二、提供該機構有關動物實驗設計之科學應用諮詢意見。 三、提供該機構有關實驗動物飼養設施改善之建議。 四、監督該機構實驗動物之取得、飼養、管理及應用等行為

8、。 五、提供該機構年度執行實驗動物科學應用之監督報告。 六、每半年應依查核表實施內部查核一次，並填報查核總表列為監督報告之附件。七、進行動物科學應用之機構如使用猿猴、犬、貓進行科學應用時，該機構之照護委員會或小組應提供審核通過之該等動物實驗申請表影本，並列為監督報告之附件。 前項年度監督報告應於年度結束後三個月內報中央主管機關備查，並副知所屬直轄市或縣（市）主管機關。職責：1. 本組根據動物保護法有權審核本醫學中心利用實驗動物進行科學應用者，其需採用之實驗動物種類、品種、數量及實驗設計應先申請，經本組審議核可，始得進行；變更時，亦同。2. 本組發現該機構進行實驗動物之科學應用，違反動物保護法及

9、相關規定時，有權要求其限期改善，如屆期仍未改善者，得終止其實驗動物之使用；情節重大者應通報所屬直轄市或縣（市）主管機關依本法及相關規定處理，並副知中央主管機關。3. 本組每月與醫學研究委員會同時召開，必要時的召開臨時會議。本章程經實驗動物照護及使用小組通過後，送請院長核准公佈施行，修正時亦同。動物實驗許可書申請同意書申請流程審核時間約3-7個工作天，若有急需請儘早申請第一章 繁殖組一、標準操作程序之三功能二、標準操作程序包含的訊息SOP 100 衛生、清潔一、 清潔劑之使用二、 消毒藥水之使用三、 動物房清潔四、 動物籠、架之清潔及換洗頻率五、 飲水瓶或自動飲水系統的使用及清潔六、 廢棄物之處

10、理七、 EAC 4500小型高壓消毒鍋 操作程序八、 隧道型洗籠機 (Tunnel Cage Washer) 操作程序九、 隧道型洗籠機 (Tunnel Cage Washer) 例行保養SOP 101 飼育、餵食一、 檢視動物異狀須知二、 每種動物使用之飼料及墊料種類三、 動物籠使用規格四、 每種動物餵食次數及量五、 飲水加水須知六、 天竺鼠飲水裡維他命C的補給SOP 102 動物識別與記錄一、 動物識別方法二、 記錄卡的填寫三、 生產記錄表的意義SOP 103 光照與溫、濕度一、 動物房光照監控二、 動物房溫、濕度之控制三、 動物房溫、濕度之記錄四、 動物房冷氣機及抽風機之定期維修SOP

11、104 育種、繁殖方法一、 純品系（Inbred）大、小鼠育種方法二、 非純品系（Outbred）大、小鼠育種方法三、 田鼠（Hamster）育種方法四、 沙鼠（Gerbil）育種方法五、 天竺鼠（Guinea Pig）育種方法六、 紐西蘭白兔育種方法七、 育種動物感染後之撲殺八、 停止育種九、 繁殖日誌SOP 105 飼料管理一、 飼料採購程序二、 飼料進貨及管理三、 飼料及墊料貯存SOP 106 緊急處理一、 全體同仁連絡電話二、 例假日的動物照顧三、 緊急停電須知附錄一 繁殖組實驗動物微生物界定附錄二 實驗動物中心繁殖組動物生產記錄表附錄三 實驗動物中心繁殖組鼠類繁殖動物標準作業程序表附

12、錄四 實驗動物中心繁殖組兔子繁殖動物標準作業程序表附錄五 實驗動物中心繁殖組動物暫留室標準作業程序表附錄六 實驗動物中心繁殖組代養室標準作業程序表附錄七 驗動物中心彌猴代養室標準作業程序表第二章 小動物代養組SOP 200管理人員每日工作要點SOP 201值班人員管理要點SOP 202檢視飼育盒（籠）注意事項SOP 203更換飲水瓶注意事項SOP 204更換飼育盒，底盤注意事項SOP 205動物房光照之監控與維持SOP 206動物房溫度之監控與維持SOP 207動物房濕度之監控與維持附錄八 動物房使用人員意見表 附錄九 動物房工作程序表附錄十 實驗動物中心動物請購與代養申請表第三章 大動物代養

13、組 SOP300犬動物房標準操作程序SOP301豬動物房標準操作程序SOP302兔動物房標準操作程序SOP303猴動物房標準操作程序SOP304 手術室標準操作程序SOP305新進犬檢疫標準操作程序SOP306新進獼猴檢疫標準操作程序SOP307 豬隻麻醉準操作程序第四章 研發組SOP400健康監測：包含繁殖組生產動物與代養組衛兵動物的定期監測SOP401環境監測：包含各動物房的落菌試驗與隔離區內滅菌物件的含菌監測SOP402疾病診斷：主要對象為各組送出異常動物的診斷SOP403 SCID小鼠免疫球蛋白測定：確保SCID小鼠種鼠並無產生的免疫球蛋白的發生附錄十一 培養基特性附錄十二 健康監測動

14、物送檢流程圖附錄十三 實驗動物中心健康監測動物送檢清單附錄十四 疾病動物送檢流程圖附錄十五 實驗動物中心疾病診斷動物送檢清單SOP601Barrier area environmental monitoring I Indoor air quality monitoringSOP602Barrier area environmental monitoring II feed & water monitoringSOP1101Colony health status monitoring Conventional & Barrier rodent colonies1101 Appendix A：

15、1 2SOP1102Flow chart of health monitoringSOP1103EuthanasiaSOP1104Necropsy proceduresSOP1105Serum collection for serologic examinationSOP1106Serologic tests including ELISA and IFA1106 Appendix ASOP1107Collection and culture of bacterial samplesSOP1108Characters of suspicion coloniesSOP1109Flow-chart

16、s of API rapid diagnosis kits in common use1109 Appendix A：1 21109 Appendix B：1 21109 Appendix C：1 21109 Appendix D：1 2SOP1110Preparation of culture agars for health monitoringSOP1111Endoparasites examination methodsSOP1201Necropsy procedures for sick mouseSOP1202Common pathologic methods for diseas

17、e diagnosisSOP1801Standard processes for quantifying serum IgM1801 Appendix A：1 2 3奇美實驗動物中心標準操作程序 【本文】STANDARD OPERATING PROCEDURES 第一章 繁殖組一、 標準操作程序之三功能:1. 緊急時動物之照顧。2. 飼養員每日照顧動物之參考。3. 動物房動物照顧及清潔衛生之評估。二、 標準操作程序包含的訊息:SOP 100 衛生、清潔SOP 101 飼育、餵食 SOP 102 動物識別與記錄SOP 103 光照與溫、濕度SOP 104 育種、繁殖方法SOP 105 飼料管理S

18、OP 106 緊急處理SOP100 衛生、清潔一、 清潔劑之使用器 械使用之清潔劑工作服洗衣粉PC動物籠0.5% 高力士不鏽鋼動物籠(1). 快安清潔劑 (2). 5% 鹽酸飲水瓶及飲水頭先泡5%鹽酸再泡0.5%高力士二、 消毒藥水之使用使用物品名使用消毒水種類動物用相關器具1% Virkon 泡30分鐘動物籠0.5% Virkon 噴灑動物房殺昆蟲0.5% Neguvon 噴灑動物房殺菌1) 0.5% Virkon 噴灑，或 (2) ABQ solution 噴灑三、 動物房清潔1. 動物房每天工作完後，先掃地；必要時再以瓦斯噴火燒牆角。2. 再用 0.5% 高力士拖地後離開。3. 每個月第

19、一個星期三全面大掃除，將動物架後方之牆面及天花板清潔，全動物房整理。四、 動物籠、架之清潔及換洗頻率1. PC塑膠動物籠每週更換1至6次已放進口木屑之乾淨動物籠動物種類及品系每週更換乾境動物籠次數ICR 小鼠每週更換二次ICR 除外小鼠每週更換一次至二次Hamster, Gerbil每週更換一次至二次大鼠 (未帶胎)每週更換二次大鼠 (帶胎)每週更換三至六次2. 不鏽鋼大鼠、天竺鼠、兔子吊籠：每週更換新塑膠布二次動物種類使用塑膠布規格大鼠、天竺鼠籠75x75cm種兔籠 (種用動物)85x85cm待產母兔籠65x75cm3. 不鏽鋼小鼠籠 (Pull Cage)： 每週更換進口木屑二次4. 動物

20、籠架每週以 0.5% 高力士擦拭一次至二次。五、 飲水瓶或自動飲水系統的使用及清潔1. 飲水瓶每兩週以鹽酸浸泡後，用水沖洗，再以 0.5% 高力士清洗一次。2. 水瓶頭以超音波機以熱水加一瓶蓋高力士泡洗15分鐘。3. 自動飲水水箱每月清洗一次。自動飲水頭每天以手指頭壓壓看是否篩塞住，每週以沾 0.5% 高力士之菜瓜布洗一次。 六、 廢棄物之處理1. 動物:一律以二氧化碳安樂死，待30分後放置冷凍庫（男女盥洗室走道），等待每週二委託醫院比照醫療廢棄物送交焚化爐焚燒。 2. 動物排泄物及相關垃圾統一置於清洗室於每日下午三點統一收集後週一或四送醫院垃圾場，倒入垃圾車內。*每包垃圾勿太重 (不要裝半包

21、以上)，以免無法提起倒入垃圾車。3. 針筒或針先以感染廢棄物容器集中後，再以感染性垃圾袋包裝後送交環保單位處理。4. 其他廢棄物一律送醫院垃圾場。七、 YTM-DSA高壓消毒鍋操作程序1. 接上電源。2. 機器上方水槽，注入蒸餾水約至滿 (隨時注意水量，須滿，否則會燒焦)。3. 消毒前先將水開關開啟，將水注入內鍋達水平 (與物品固定架等高) 後關閉。4. 將門關緊，如未關緊安全開關啟動，電源無法通電。5. 將消毒時間設定 (原則上已經設定15分鐘)。6. 固體滅菌時，調整乾燥時間約15分鐘。液體滅菌時則乾燥時間設定0分鐘。7. 器械可設定 121 (1KG) 及 132 (2KG)。8. DO

22、OR SWITCH 放在OFF位置。液體滅菌時，開關放在液體滅菌位置固體滅菌時，開關放在固體滅菌位置機器若有故障請撥電話醫工組(分機：52848、52849)聯絡永大明鄧先生前來修護。小消毒鍋機器若有故障請撥電話 06-3117502找三豐醫療儀器股份有限公司前來修護。八、 遂道型洗籠機 (Tunnel Cage Washer) 操作程序1. 確定前後四個邊門 (ACCESS DOOR) 已關妥。2. 確定前後門的”緊急停止按鈕” (EMERGENCY STOP) ，於拉出位置。3. 將電源開關 (POWER SWITCH) ，轉向”ON”的位置此時電源指示燈會亮。4. 按下”起動鍵” (ST

23、ART BOTTOM) ，等待準備燈 “READY” 亮時再進行下面步驟。5. 準備燈“READY” 亮後，按下”預洗” (PREWASH) 之起動鍵 (START) ，此時指示燈會亮。6. 再來依序按下“清洗” (WASH) ，“洗清” (RINSE) 及“輸送帶” (CONVEYOR) 之起動鍵，此時指示燈會亮。7. 按下“烘乾” (DRYER) 之起動鍵。8. 開始送入動物籠，進行洗滌程序。9. 洗滌完畢後，按下“洗滌結束紐” (FINAL CYCLE) ，此時所有PUMP停止，清洗蓄水槽上之濾網，蓄水槽會自動排出廢水。10. 最後將電源開關轉向”OFF”位置，結束操作。 注意事項：當清

24、潔劑用完時，清潔劑指示燈 (Detergent Low) 會亮，並響笛警告，此時應更換新的清潔劑。更換步驟如下：1. 將清潔劑開關按下於”OFF”位置。2. 將清潔劑吸管放入新的清潔劑筒。3. 按住”PRIME SWITCH”，待清潔劑充滿管子後再放鍵。4. 打開清潔劑開關於”ON”位置。*機器若有故障請撥電話0800211907，找康谷公司維護部前來修護。九、 隧道型洗籠機 (Tunnel Cage Washer) 例行保養1. 每一槽之噴水頭需拆下以除鏽劑清洗。(每週一次)2. 每一水槽上有一層濾網，每天關機前需清洗乾淨。(每天一次)3. 機器內壁需定期以除鏽劑清洗去鏽。(每月一次)4.

25、自動控制閥，需保養。(每月二次)SOP101 飼育、餵食一、 檢視動物異狀須知1. 為每天進動物房記錄溫度（20-25）、濕度（30-70）後的第一件事。2. 檢查每一動物籠之飲水及攝食狀況，若飲水及攝食正常則繼續一天之工作。3. 若飲水及飼料不正常的動物籠，先檢查是否飲水瓶阻塞，再看動物是否有疾病徵兆。若有，立即通知辦公室。4. 工作時留意是否有疾病徵兆或死亡動物，並隨時通知獸醫。 二、 每種動物使用之飼料種類墊飼料訂購：02-26933322雍立貿易，張家榮先生動 物 種 類飼養性質動物飼料規格ICR小鼠繁殖交配 #5008ICR小鼠離乳待售#5001其它純品系小鼠全數一致#5008SPF

26、大、小鼠全數一致#5010大鼠及沙鼠全數一致#5001田鼠非哺乳期#5001田鼠哺乳期#5008天竺鼠全數一致#5035兔子全數一致#5025三、 動物籠使用規格1. 所有繁殖中之小鼠都使用小PC塑膠籠飼養 (每籠飼養四隻以內)。離奶待售之小鼠也以小PC塑膠籠飼養 (每籠飼養七隻)，或與小PC等高之大PC飼養 (每籠飼養30隻)。但ICR小鼠因數量大使用不鏽鋼Pull Cage飼養 (每籠飼養70隻)。2. 所有繁殖中大鼠都使用大PC塑膠籠飼養 (每籠飼養四隻以內) ，離奶待售之大鼠以不鏽鋼吊籠飼養 (每籠飼養20隻)。3. 天竺鼠都使用不鏽鋼吊籠飼養繁殖 (每籠飼養四隻以內) ，離奶待售之天

27、竺鼠以不鏽鋼吊籠飼養 (每籠飼養10隻)。4. 兔子使用不鏽鋼兔籠飼養繁殖 (每籠飼養一隻) ，離奶待售兔子使用不鏽鋼兔籠飼養 (每籠飼養二隻)。如下表動物種類 飼養性質動物籠規格最高飼養隻數ICR小鼠繁殖交配PC塑膠籠1:1-3ICR小鼠離乳待售不鏽鋼Pull Cage70隻其它純品系小鼠繁殖交配PC塑膠籠1:1-3其它純品系小鼠離乳待售小PC塑膠籠或大PC籠7隻、30隻大鼠繁殖交配PC塑膠籠1:1-3大鼠離乳待售不鏽鋼吊籠20隻天竺鼠繁殖交配不鏽鋼吊籠1:3天竺鼠離乳待售不鏽鋼吊籠10隻兔子繁殖交配不鏽鋼兔籠1或1單隻兔子離乳待售不鏽鋼兔籠3-5隻四、 每種動物餵食次數及量1. 大、小老鼠: 繁殖房之飼料儘量添加足夠一星期之量，約把容器裝滿。2. 大、小老鼠暫留室之動物飼料需添滿飼料槽，每隔兩天餵一次，但放假日需加滿飼料槽。3. 兔子房需特別注意：單隻兔子110公克飼料 (約一杯 150c.c. 之不鏽鋼杯)。名牌倒放之單隻懷孕母兔則加 150公克飼料。生產後有帶仔兔之母兔則需加滿飼料槽。離乳後之小兔因3至5隻放一籠，故須加滿飼料槽。4. 天竺鼠房每一有繁殖卡之動物籠添加150公克。離乳待售之動物籠 (7-10隻) 則加滿飼料槽。五、 飲水添加水須知1. 若飲水不正常的動物籠，先檢查是否飲水瓶阻塞，若有阻塞先予以