1、第一章 沙门氏菌属一、分类属域门纲目科沙门菌属细菌域变形菌门Y-变形菌纲肠杆菌目肠杆菌科沙门菌属主要包括肠道沙门氏菌和邦戈沙门氏菌。肠道沙门氏菌广泛存在于猪、牛、羊、家禽、鸟类、鼠类等多种动物的肠道和内脏中。根据沙门氏菌的致病范围,可将其分为三大类群。类群致病范围类型第一类群只对人致病伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌(甲型、乙型、丙型)、仙台沙门氏菌第二类群食物中毒沙门氏菌群(对人和动物均致病)猪霍乱沙门氏菌(最强)、鼠伤寒沙门氏菌(首位)、肠炎沙门氏菌、纽波特沙门氏菌等第三类群对动物致病(很少感染人)马流产沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌二、生物学特征1.形态染色特性G-
2、无芽孢杆菌。大小通常为0.71.5m2.05.0m,菌端钝圆,散在,偶有短丝状,无荚膜(除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外),一般均有周身鞭毛,能运动,绝大多数菌株有菌毛。2. 培养特性需氧或兼性厌氧菌;生长温度范围为1042,最适生长温度为3537;适宜pH为6.87.8;对营养要求不高,在普通培养基中生长旺盛;胆盐可促进其生长。培养基菌落特征备注NA圆形、光滑、湿润、无色半透明、边缘整齐或不太整齐的中等大小(24mm)菌落鸡白痢、鸡伤寒、猪副伤寒、甲型副伤寒沙门氏菌等只能长成细小菌落MAC无色透明或半透明(不发酵乳糖)、中等大小、边缘整齐、光滑、稍微隆起在MAC/EMB/DHL/SS鉴别大
3、肠埃希氏菌和弗劳地氏柠檬酸杆菌(迟缓或不发酵乳糖)。EMB无色透明或半透明(不发酵乳糖)、中等大小、边缘整齐、光滑、稍微隆起DHL无色半透明、中心黑色或几乎全部黑色(产H2S)的菌落弗劳地氏柠檬酸杆菌产H2S,在WS/HE/DHL培养基上也形成中心带黑色的菌落。SS无色半透明、中心黑色或几乎全部黑色(产H2S)的菌落HE蓝绿色或蓝色,多数菌落中心黑色或几乎全部黑色(产H2S);有些菌株为黄色,中心黑色或几乎全部黑色BS蛋白胨、牛肉浸粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质;葡萄糖提供能源;亚硫酸铋指示剂抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群,但不影响沙门氏菌的生长;磷酸氢二钠是缓冲剂;硫酸亚铁用于产生硫化氢,并与
4、铁产生沉淀,使阳性培养物为具有金属光泽的棕色到黑色菌落;黑色有金属光泽,棕褐色或灰色,菌落周围呈黑色或棕色,有些菌落呈绿色、周围不变色。XLD粉红色,带或不带黑色中心,有些菌株呈现大的带光泽的黑色中心,或呈现全部黑色的菌落;有些菌落呈绿色、周围不变色血平板灰色或灰白色,中等大小(24mm)、圆形、湿润WS月示蛋白胨、牛肉膏提供碳源、氮源、维生素和矿物质;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;十二烷基硫酸钠、溴麝香草酚兰和酸性复红抑制革兰氏阳性菌;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;琼脂是培养基的凝固剂;溴麝香草酚兰和酸性复红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈
5、红色,不发酵糖的菌落为蓝绿色。蓝绿色,中等大小(24mm)、圆形、湿润,中心呈黑色3. 生化特性分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇和山梨醇产气;不分解乳糖、蔗糖、水杨苷和侧金盏花醇;产生硫化氢;原硝酸盐;不水解尿素;不液化明胶;V-P反应阴性;不产吲哚(靛基质试验阴性);能利用枸橼酸盐(个别菌株不利用)。4.抵抗力生长环境生存时间备注水23周该菌常借水或食物传播;对热抵抗力不强,6015min可死亡;5%石碳酸5min杀死;对氯霉素、合霉素极度敏感;选择性培养基用胆盐、煌绿抑制大肠杆菌。粪便12月土壤半年(冻土)5.抗原构造与分类抗原分类构造稳定性菌体抗原(O抗原)(群/组、亚组)刺激机体产生IgM抗
6、体存在菌体表面,多糖-类脂-蛋白复合物(多糖部分决定菌体抗原特异性)稳定,耐热,不被酒精和0.1%石碳酸破坏。鞭毛抗原(H抗原)(型)刺激机体产生IgG抗体蛋白质(蛋白质多肽链上的氨基酸排列顺序和空间构型决定鞭毛抗原特异性)不耐热,加热607015min、酒精处理可被破坏;鞭毛可用甲醛固定制成H抗原,有两相,第一相特异性较高。表面抗原(Vi抗原)如伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌等。糖脂(毒力强,有抵抗吞噬作用,可阻碍O抗原和O抗体凝集)不稳定,不耐热,加热60、酒精处理可被破坏;经加热破坏Vi抗原,O抗原和O抗体就可发生凝集。6.变异变异类型变异结果备注SR变异(光滑型粗糙型)O抗原消失在生
7、理盐水中会自发凝集HO变异H抗原消失SR、HO变异可分别进行,产生SH、RH、SO、RO四种型VW变异Vi抗原消失,形成W型,与抗O血清发生凝集可形成中间型VW型注:以上变异不稳定,是可逆的。如VW型在培养基中含有抗O血清时,可转变为V型。三、致病性致病因素致病物质所致疾病内毒素多糖-类脂-蛋白复合物/脂多糖(O抗原)1.胃肠炎、肠热症(伤寒与副伤寒病,法定乙类传染病)、菌血症或败血症等;2.食物中毒:如鼠伤寒、肠炎、汤卜逊、猪霍乱、乙型及丙型副伤寒沙门菌等;3.慢性肠炎:沙门菌可引起老人和儿童的慢性肠炎;4.败血症:多由猪霍乱沙门菌引起;5.沙门菌的局部感染如颈部、腰部等。侵袭力(Vi抗原)
8、肠毒素(1) 伤寒、副伤寒伤寒沙门氏菌和甲、乙、丙型副伤寒沙门氏菌急性肠道传染病(持续发热、表情淡漠、相对缓脉、玫瑰疹、肝脾大、白细胞减少,有时可出现肠出血、肠穿孔等严重并发症)。【流行病学】传染源:带菌者或患者是唯一传染源。(典型伤寒患者在病程24周排菌量最大)传播途径:粪口传播。(水、食物污染;患者密切接触;苍蝇、蟑螂等媒介机械性携带)人群易感性:普遍易感,病后免疫力持久。流行特征:夏秋季多见;学龄期儿童、青年易感。【发病机制】注:当胃酸pH2时,伤寒杆菌很快被杀死;伤寒杆菌摄入量105以上才能引起发病,胃酸减少和原先有幽门螺杆菌感染等有利于伤寒杆菌的定位和繁殖。伤寒杆菌释放脂多糖内毒素可
9、激活单核吞噬细胞释放白细胞介素-1和肿瘤坏死因子等细胞因子,引起持续发热、表情淡漠、相对缓脉、休克和白细胞减少等表现。(2) 食物中毒肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、和汤普逊沙门氏菌等引起的食物中毒。【病症】恶心、呕吐、腹泻、发热等急性肠胃炎症状;潜伏期短,一般1248h;病程较短,一般24天即可完全恢复。(3)败血症四、微生物学检查:1.标本采集:根据不同疾病采取不同的标本,最好在使用抗生素前采集,然后进行分离与培养。肠热症的第一、二周采血液,第二、三周采粪便与尿液。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。食物中毒采集食物与粪便。2.检查方法及鉴定(1)分离培养1
10、)粪便:一般将粪便或肛拭直接接种于SS和MAC平板上,用两种培养基的目的是为提高标本的阳性检出率。2)血液和骨髓:抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml,立即接种于含0.5%胆盐肉汤或葡萄糖肉汤5ml试管中进行增菌,48h将培养物移种到血平板和肠道鉴别培养基上,若有细菌生长取菌涂片革兰染色并报告结果。对增菌培养物连续培养7天,仍无细菌生长时,则报告阴性。3)尿液:取尿液23ml经硫磺酸盐肉汤增菌后,再接种于肠道菌选择培养基或血平板上进行分离培养,亦可将尿液离心沉淀物分离培养。4)局部感染的脓液。(2)鉴定沙门菌属的鉴定与志贺菌属相同,须根据生化反应和血清学鉴定两方面进行。1)初步鉴定:如为革兰阴性
11、杆菌时作氧化酶试验,阴性时,挑取可疑菌落分别移种于KIA和MIU上。并作生化反应。以沙门菌多价诊断血清作玻片凝集试验。凡符合KIA:KA、产气+-、H2S+-、MIU:动力+、吲哚-、脲酶+,氧化酶-,触酶+,硝酸盐还原+,以沙门菌多价血清作玻片凝集试验阳性,鉴定为沙门菌属。2)最后鉴定:沙门菌血清学鉴定主要借助于沙门菌O抗原多价血清与O、H、Vi抗原的单价因子血清。甲型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌和伤寒沙门菌分别属于A、B、D血清群。(3)血清学诊断肥达试验:用已知的伤寒沙门菌0、H抗原,甲乙丙副伤寒沙门菌H抗原稀释后与被检血清作定量凝集试验,以检测患者血清中抗体的含量,来判断机体是否受沙门菌感染而导致肠热症并判别沙门菌的种类。6
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