肠道病原菌——沙门氏菌属.doc

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第一章沙门氏菌属

一、分类

沙门菌属

细菌域

变形菌门

Y-变形菌纲

肠杆菌目

肠杆菌科

沙门菌属主要包括肠道沙门氏菌和邦戈沙门氏菌。

肠道沙门氏菌广泛存在于猪、牛、羊、家禽、鸟类、鼠类等多种动物的肠道和内脏中。

根据沙门氏菌的致病范围,可将其分为三大类群。

类群

致病范围

类型

第一类群

只对人致病

伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌(甲型、乙型、丙型)、仙台沙门氏菌

第二类群

食物中毒沙门氏菌群(对人和动物均致病)

猪霍乱沙门氏菌(最强)、鼠伤寒沙门氏菌(首位)、肠炎沙门氏菌、纽波特沙门氏菌等

第三类群

对动物致病(很少感染人)

马流产沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌

二、生物学特征

1.形态染色特性

G-无芽孢杆菌。

大小通常为0.7~1.5μm×2.0~5.0μm,菌端钝圆,散在,偶有短丝状,无荚膜(除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外),一般均有周身鞭毛,能运动,绝大多数菌株有菌毛。

2.培养特性

需氧或兼性厌氧菌;生长温度范围为10~42℃,最适生长温度为35~37℃;适宜pH为6.8~7.8;对营养要求不高,在普通培养基中生长旺盛;胆盐可促进其生长。

培养基

菌落特征

备注

NA

圆形、光滑、湿润、无色半透明、边缘整齐或不太整齐的中等大小(2~4mm)菌落

鸡白痢、鸡伤寒、猪副伤寒、甲型副伤寒沙门氏菌等只能长成细小菌落

MAC

无色透明或半透明(不发酵乳糖)、中等大小、边缘整齐、光滑、稍微隆起

在MAC/EMB/DHL/SS鉴别大肠埃希氏菌和弗劳地氏柠檬酸杆菌(迟缓或不发酵乳糖)。

EMB

无色透明或半透明(不发酵乳糖)、中等大小、边缘整齐、光滑、稍微隆起

DHL

无色半透明、中心黑色或几乎全部黑色(产H2S)的菌落

弗劳地氏柠檬酸杆菌产H2S,在WS/HE/DHL培养基上也形成中心带黑色的菌落。

SS

无色半透明、中心黑色或几乎全部黑色(产H2S)的菌落

HE

蓝绿色或蓝色,多数菌落中心黑色或几乎全部黑色(产H2S);有些菌株为黄色,中心黑色或几乎全部黑色

BS 蛋白胨、牛肉浸粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质;葡萄糖提供能源;亚硫酸铋指示剂抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群,但不影响沙门氏菌的生长;磷酸氢二钠是缓冲剂;硫酸亚铁用于产生硫化氢,并与铁产生沉淀,使阳性培养物为具有金属光泽的棕色到黑色菌落;

黑色有金属光泽,棕褐色或灰色,菌落周围呈黑色或棕色,有些菌落呈绿色、周围不变色。

XLD

粉红色,带或不带黑色中心,有些菌株呈现大的带光泽的黑色中心,或呈现全部黑色的菌落;有些菌落呈绿色、周围不变色

血平板

灰色或灰白色,中等大小(2~4mm)、圆形、湿润

WS月示蛋白胨、牛肉膏提供碳源、氮源、维生素和矿物质;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;十二烷基硫酸钠、溴麝香草酚兰和酸性复红抑制革兰氏阳性菌;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;琼脂是培养基的凝固剂;溴麝香草酚兰和酸性复红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为蓝绿色。

蓝绿色,中等大小(2~4mm)、圆形、湿润,中心呈黑色

3.生化特性

分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇和山梨醇产气;不分解乳糖、蔗糖、水杨苷和侧金盏花醇;产生硫化氢;原硝酸盐;不水解尿素;不液化明胶;V-P反应阴性;不产吲哚(靛基质试验阴性);能利用枸橼酸盐(个别菌株不利用)。

4.抵抗力

生长环境

生存时间

备注

2~3周

①该菌常借水或食物传播;

②对热抵抗力不强,60℃15min可死亡;5%石碳酸5min杀死;

③对氯霉素、合霉素极度敏感;

④选择性培养基用胆盐、煌绿抑制大肠杆菌。

粪便

1~2月

土壤

半年(冻土)

5.抗原构造与分类

抗原分类

构造

稳定性

菌体抗原(O抗原)

(群/组、亚组)刺激机体产生IgM抗体

存在菌体表面,多糖-类脂-蛋白复合物(多糖部分决定菌体抗原特异性)

稳定,耐热,不被酒精和0.1%石碳酸破坏。

鞭毛抗原(H抗原)

(型)刺激机体产生IgG抗体

蛋白质(蛋白质多肽链上的氨基酸排列顺序和空间构型决定鞭毛抗原特异性)

不耐热,加热60~70℃15min、酒精处理可被破坏;鞭毛可用甲醛固定制成H抗原,有两相,第一相特异性较高。

表面抗原(Vi抗原)如伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌等。

糖脂(毒力强,有抵抗吞噬作用,可阻碍O抗原和O抗体凝集)

不稳定,不耐热,加热60℃、酒精处理可被破坏;经加热破坏Vi抗原,O抗原和O抗体就可发生凝集。

6.变异

变异类型

变异结果

备注

S—R变异(光滑型—粗糙型)

O抗原消失

在生理盐水中会自发凝集

H—O变异

H抗原消失

S—R、H—O变异可分别进行,产生SH、RH、SO、RO四种型

V—W变异

Vi抗原消失,形成W型,与抗O血清发生凝集

可形成中间型—VW型

注:

以上变异不稳定,是可逆的。

如VW型在培养基中含有抗O血清时,可转变为V型。

三、致病性

致病因素

致病物质

所致疾病

内毒素

多糖-类脂-蛋白复合物/脂多糖(O抗原)

1.胃肠炎、肠热症(伤寒与副伤寒病,法定乙类传染病)、菌血症或败血症等;

2.食物中毒:

如鼠伤寒、肠炎、汤卜逊、猪霍乱、乙型及丙型副伤寒沙门菌等;

3.慢性肠炎:

沙门菌可引起老人和儿童的慢性肠炎;

4.败血症:

多由猪霍乱沙门菌引起;

5.沙门菌的局部感染如颈部、腰部等。

侵袭力

(Vi抗原)

肠毒素

(1)伤寒、副伤寒

伤寒沙门氏菌和甲、乙、丙型副伤寒沙门氏菌——急性肠道传染病(持续发热、表情淡漠、相对缓脉、玫瑰疹、肝脾大、白细胞减少,有时可出现肠出血、肠穿孔等严重并发症)。

【流行病学】

①传染源:

带菌者或患者是唯一传染源。

(典型伤寒患者在病程2~4周排菌量最大)

②传播途径:

粪→口传播。

(水、食物污染;患者密切接触;苍蝇、蟑螂等媒介机械性携带)

③人群易感性:

普遍易感,病后免疫力持久。

④流行特征:

夏秋季多见;学龄期儿童、青年易感。

【发病机制】

注:

①当胃酸pH<2时,伤寒杆菌很快被杀死;伤寒杆菌摄入量>105以上才能引起发病,胃酸减少和原先有幽门螺杆菌感染等有利于伤寒杆菌的定位和繁殖。

②伤寒杆菌释放脂多糖内毒素可激活单核吞噬细胞释放白细胞介素-1和肿瘤坏死因子等细胞因子,引起持续发热、表情淡漠、相对缓脉、休克和白细胞减少等表现。

(2)食物中毒

肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、和汤普逊沙门氏菌等引起的食物中毒。

【病症】

①恶心、呕吐、腹泻、发热等急性肠胃炎症状;

②潜伏期短,一般12~48h;

③病程较短,一般2~4天即可完全恢复。

(3)败血症

四、  微生物学检查:

1.标本采集:

根据不同疾病采取不同的标本,最好在使用抗生素前采集,然后进行分离与培养。

肠热症的第一、二周采血液,第二、三周采粪便与尿液。

整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。

食物中毒采集食物与粪便。

  

2.检查方法及鉴定  

(1)分离培养  

1)粪便:

一般将粪便或肛拭直接接种于SS和MAC平板上,用两种培养基的目的是为提高标本的阳性检出率。

  

2)血液和骨髓:

抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml,立即接种于含0.5%胆盐肉汤或葡萄糖肉汤5ml试管中进行增菌,48h将培养物移种到血平板和肠道鉴别培养基上,若有细菌生长取菌涂片革兰染色并报告结果。

对增菌培养物连续培养7天,仍无细菌生长时,则报告阴性。

  

3)尿液:

取尿液2~3ml经硫磺酸盐肉汤增菌后,再接种于肠道菌选择培养基或血平板上进行分离培养,亦可将尿液离心沉淀物分离培养。

 

 4)局部感染的脓液。

  

(2)鉴定

沙门菌属的鉴定与志贺菌属相同,须根据生化反应和血清学鉴定两方面进行。

  

1)初步鉴定:

如为革兰阴性杆菌时作氧化酶试验,阴性时,挑取可疑菌落分别移种于KIA和MIU上。

并作生化反应。

以沙门菌多价诊断血清作玻片凝集试验。

 凡符合KIA:

K/A、产气+/-、H2S+/-、MIU:

动力+、吲哚-、脲酶+,氧化酶-,触酶+,硝酸盐还原+,以沙门菌多价血清作玻片凝集试验阳性,鉴定为沙门菌属。

 2)最后鉴定:

沙门菌血清学鉴定主要借助于沙门菌O抗原多价血清与O、H、Vi抗原的单价因子血清。

甲型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌和伤寒沙门菌分别属于A、B、D血清群。

   

(3)血清学诊断

肥达试验:

用已知的伤寒沙门菌0、H抗原,甲乙丙副伤寒沙门菌H抗原稀释后与被检血清作定量凝集试验,以检测患者血清中抗体的含量,来判断机体是否受沙门菌感染而导致肠热症并判别沙门菌的种类。

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