智慧树知到《分子生物学实验》章节测试题完整答案Word文档下载推荐.docx

1、 2、制作固体培养基时，琼脂的含量为5%7%1%5-2% 3、下列不是LB培养基成分的是牛肉膏 4、打开高压蒸汽灭菌器取出灭菌物品的时间是灭菌时间到时锅内温度降到0时锅内压力降到0时灭菌过程中可以开盖取物 5、分离纯化好氧微生物不适宜用的方法是稀释倒平板法稀释涂布平板法连续平板划线法分区平板划线法 第三章 1、碱法抽提质粒DNA的原理中，下列说法正确的是抽提过程中基因组DNA变性而质粒DNA不变性抽提过程中基因组DNA和质粒DNA 均变性抽提过程中基因组DNA和质粒DNA 均复性抽提过程中基因组DNA复性而质粒DNA很难复性B 2、抽提质粒时，加入溶液II可使溶液pH达到8672512.012

2、.5D 3、DNA变性时被破坏的是磷酸二酯键糖苷键氢键碳原子间化合键C 4、微量移液器移液时，下列说法正确的是吸取溶液时应将排放按钮先按至第二停点再将吸头插入液面下吸液放出溶液时先将排放按钮按至第一停点，略停后，再按至第二停点放出溶液时排放按钮按至第一停点吸取溶液时应将吸头插入溶液后再将排放按钮直接按至第一停点 5、质粒提取过程中，加入下列哪种试剂使DNA变性溶液I溶液II溶液III酚-氯仿异-戊醇（25:24:1） 第四章 1、决定扩增产物片段长度的主要因素是模板DNA的长度引物的长引物在模板DNA是结合的位扩增的方向 2、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的增多Taq DNA聚

3、合酶加量过多和引物加量过多缓冲液中镁离子含量过高A 3、PCR产物短期存放可在什么温度下保存4常温-80高温 4、PCR的反应体系要具有以下条件：被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的DNA引物dNTP作为模板的目的DNA序列具有热稳定性的DNA聚合酶ABCD 5、 使用Taq DNA聚合酶应注意实验室一直在室温下使用时应使用冰盒不需要使用冰盒-20现用现取BD 第五章 1、标准分子量DNA（DNA Marker）的主要作用是没有具体作用对照样品DNA验证琼脂糖配置的浓度检验成像的质量 2、配置琼脂糖凝胶时，下面正确的做法是检测不同长度DNA需要配置不同浓度的琼脂糖凝配置电泳缓冲液时不需要调

4、节pH加热琼脂糖后，不需要冷却就可以直接倒胶溴化乙锭添加的越多，成像时越清楚 3、关于琼脂糖凝胶电泳下面正确的说法是可以检测蛋白样品只能检测DNA样品可以检测DNA，也可以检测蛋白质可以检测DNA和RNA 4、关于DNA Marker的使用，下列说法正确的是DNA Marker的成分是单一大小的DNA使用时要加入上样缓冲液使用时要提前煮沸变性DNA Marker可以指示样品DNA的大小 5、制胶板和梳子的使用，说法正确的是根据样品的体积来选择根据电泳的时间选择根据样品的数量来确定根据实验的目的选择AC 第六章 1、异丙基硫代半乳糖苷作为一种很强的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定，它可诱导LacZ

5、的表达。它的缩写是（）IPTGAPTGEPTGCPTG 2、设计适用于蓝白斑筛选的基因工程菌为（）菌株。α-半乳糖苷酶缺陷型beta;gamma;Gamma; 3、在蓝白斑筛选实验中，转化了空载体的细菌长出的菌落为（）蓝色白色黑色红色 4、在蓝白斑筛选实验中，转化了重组质粒的细菌长出的菌落为（） 5、对感受态细胞进行热激处理时，所使用的温度是（）3742100 第七章 1、在制备大肠杆菌感受态细胞时应取用（ ）的大肠杆菌。迟滞期对数期平台期衰亡期 2、将目的基因导入微生物细胞的最常用方法是（）感受态细胞法显微注射法农杆菌转化法 3、细菌处于容易吸收（）的状态叫感受态。外源DNA外源

6、RNA内源DNA内源RNA 4、制备感受态细胞时，要用低渗CaCl2溶液在（）时处理快速生长的对数期细菌 5、对感受态细胞进行热激处理时，所使用的温度是（C ） 第八章 1、pBV220表达载体用于抗性筛选的基因是PLPROriAmpCIts857 2、DPS表达蛋白C-端连上6个组氨酸（6His）的作用蛋白定位作用方便目的蛋白的纯化使融合蛋白DPS可以可溶性表达提高目的蛋白的表达量 3、进行构建重组质粒时选择的内切酶，其酶切位点序列不能与目的基因中的序列一致。 4、目的基因上下游是否需要设计起始密码子和终止密码子需要根据表达载体的不同而确定。 5、DNA标准分子量DL2000共有六条条带，其

7、中分子量大小排在第三大的是500bp条带。 第九章 1、最常用的筛选转化细菌是否含质粒的方法是营养互补筛选抗药性筛选免疫化学筛选PCR筛选 2、下列外源DNA导入宿主细胞的方法中，不是依据转化方式原理而进行的方法是（ ）。重组质粒载体+感受态细胞重组噬菌体DNA或重组噬菌质粒+感受态细胞外源DNA被包装成λ噬菌体颗粒+宿主细胞酵母质粒载体+酵母细胞的原生质体 3、大肠埃希菌转化实验中，出现假阳性克隆的原因可能有（ ）。载体自身环化效率过高琼脂平板上的抗生素失活或含量过低载体DNA与插入片段的分子比率过高抗生素的浓度过高ABC 4、不必提取质粒DNA进行酶切鉴定，而是直接以菌体热解

8、后的DNA为模板进行PCR扩增的鉴定阳性克隆的方法是（）菌落pcr法限制性酶切法杂交筛选法DNA序列分析法 5、进行菌落PCR时，能扩增出与目的序列大小相当的特异片段的转化子为（）假阳性重组子真重组子假重组子 第十章 1、表达载体与克隆载体不同，pBV220载体中不属于基因表达元件的是PL、PRrrnBT1T2SD序列ori 2、大肠杆菌原核表达载体一般不具备的特点是遗传背景清楚成本低、表达量高表达产物分离纯化相对简单可以进行蛋白糖基化等翻译后加工 3、分离胶倒入胶板后要立即加一层双蒸水，下列说法错误的是使分离胶界面保持水平阻止空气中的氧气对胶聚合的抑制加浓缩胶时要将水层倒出加浓缩胶时不必将水

9、层倒出 4、分离胶缓冲液的pH是378.8 5、若电泳过程中溴酚蓝指示剂不向负极移动，不可能的原因有未接通电源电泳槽漏液造成断路电路接反凝胶中有小气泡 第十一章 1、半干转膜仪正极在上，负极在下。 2、Western blot时，半干转膜法电压不能超过25V 3、关于湿法转膜法操作，下列说法正确的是?阴极一侧放凝胶阳极一侧放凝胶阴极一侧放PVDF膜阳极一侧放PVDF膜AD 4、进行免疫学检测时，关于二抗，下列说法正确的是?二抗可以与Anti-His结合二抗可以与DPS结合二抗需要进行适度稀释在一段时间内二抗可以重复利用ACD 5、HRP标记的二抗的显色试剂是NBT/BCIP 第十二章 1、用工

10、程菌进行诱导表达蛋白时接种后直接诱导接种培养到对数期浓度时诱导接种培养到高浓度的菌液时诱导接种培养到较稀的菌液时诱导 B 2、6个组氨酸标签（6His）连接在DPS蛋白的（）N-端中间位置C-端 3、包涵体是指没有正确折叠的目的蛋白。 4、凝胶过滤依据分子量大小分离蛋白，小分子量的先洗脱出来，大分子量后洗脱出来。 5、纯化蛋白时可以通过煮沸破碎菌体细胞壁 第十三章 1、对Dps蛋白功能描述不正确的表述是：活性Dps能够消除羟基自由基的形成活性Dps能与DNA形成复合体结构域活性Dps是十二聚体活性Dps内形成Fe3O4沉淀 2、细菌更容易吸收的铁元素形式是：Fe2+FeCl3Fe3O4FeOO

11、H 3、Fenton反应能产生超氧自由基 4、DNA分子在Fenton试剂作用下被降解 5、检验DNA分子是否降解采用的是SDS-PAGE电泳 第十四章 1、通常来说，含有ploy（A）尾巴的是?tRNArRNA原核生物mRNA真核生物mRNA 2、提取总RNA的方法有哪些?苯酚法胍盐法氯化锂沉淀法层析法 3、TRIzol含有哪些成分?苯酚异硫氰酸胍8-羟基喹啉-巯基乙醇 4、提取RNA时，75%乙醇的作用是?溶解蛋白质抽提可溶性蛋白沉淀RNA洗涤RNA中的盐离子 5、用NanoDrop测样品时，仅需0.5-2 µL 样品。 第十五章 1、qPCR能够实时测定特异性产物的量，并推断

12、目的基因的初始量，并且不需要取出PCR产物进行分离，就能得到数据。 2、关于利用Phusion酶进行PCR反应，下列说法正确的是?变性时间与模板有关退火温度与引物有关延伸时间与DNA聚合酶有关所用缓冲液与GC含量有关 3、反转录反应的模板可以是总RNA，也可以是mRNA 4、影响RT-PCR 结果的因素有哪些?mRNA的质量tRNA的质量反转录酶的质量引物的质量 5、关于Phusion高保真酶，下列说法正确的是与普通的Taq酶相比，能大大降低出错的可能性具有5”-3”和3”-5”核酸外切酶的活性其产物是平末端其产物可用于TA克隆法克隆 第十六章 1、外源目的基因应插入到表达载体的（）：MCSP 2、构建pBV-dps-2x-6his进行了几轮PCR扩增?一轮二轮三轮四轮 3、进行融合蛋白的表达一般不会影响目的蛋白的生物学活性。 4、与pBV-dps-2x-6his进行重组，构建融合表达载体时，外源目的基因上下游必须设计上XhoI和XbaI酶切位点。 5、如果要获得单独的目的蛋白，应在目的蛋白和融合蛋白之间设计蛋白酶酶切位点。