智慧树知到《分子生物学实验》章节测试题完整答案Word文档下载推荐.docx

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2、制作固体培养基时,琼脂的含量为

5%

7%

1%

5-2%

3、下列不是LB培养基成分的是

牛肉膏

4、打开高压蒸汽灭菌器取出灭菌物品的时间是

灭菌时间到时

锅内温度降到0时

锅内压力降到0时

灭菌过程中可以开盖取物

5、分离纯化好氧微生物不适宜用的方法是

稀释倒平板法

稀释涂布平板法

连续平板划线法

分区平板划线法

第三章

1、碱法抽提质粒DNA的原理中,下列说法正确的是

抽提过程中基因组DNA变性而质粒DNA不变性

抽提过程中基因组DNA和质粒DNA均变性

抽提过程中基因组DNA和质粒DNA均复性

抽提过程中基因组DNA复性而质粒DNA很难复性

B

2、抽提质粒时,加入溶液II可使溶液pH达到

8

6~7

2~5

12.0~12.5

D

3、DNA变性时被破坏的是

磷酸二酯键

糖苷键

氢键

碳原子间化合键

C

4、微量移液器移液时,下列说法正确的是

吸取溶液时应将排放按钮先按至第二停点再将吸头插入液面下吸液

放出溶液时先将排放按钮按至第一停点,略停后,再按至第二停点

放出溶液时排放按钮按至第一停点

吸取溶液时应将吸头插入溶液后再将排放按钮直接按至第一停点

5、质粒提取过程中,加入下列哪种试剂使DNA变性

溶液I

溶液II

溶液III

酚-氯仿异-戊醇(25:

24:

1)

第四章

1、决定扩增产物片段长度的主要因素是

模板DNA的长度

引物的长

引物在模板DNA是结合的位

扩增的方向

2、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的增多

TaqDNA聚合酶加量过多和引物加量过多

缓冲液中镁离子含量过高

A

3、PCR产物短期存放可在什么温度下保存

4℃

常温

-80℃

高温

4、PCR的反应体系要具有以下条件:

被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的DNA引物

dNTP

作为模板的目的DNA序列

具有热稳定性的DNA聚合酶

ABCD

5、使用TaqDNA聚合酶应注意

实验室一直在室温下

使用时应使用冰盒

不需要使用冰盒

-20℃现用现取

BD

第五章

1、标准分子量DNA(DNAMarker)的主要作用是

没有具体作用

对照样品DNA

验证琼脂糖配置的浓度

检验成像的质量

2、配置琼脂糖凝胶时,下面正确的做法是

检测不同长度DNA需要配置不同浓度的琼脂糖凝

配置电泳缓冲液时不需要调节pH

加热琼脂糖后,不需要冷却就可以直接倒胶

溴化乙锭添加的越多,成像时越清楚

3、关于琼脂糖凝胶电泳下面正确的说法是

可以检测蛋白样品

只能检测DNA样品

可以检测DNA,也可以检测蛋白质

可以检测DNA和RNA

4、关于DNAMarker的使用,下列说法正确的是

DNAMarker的成分是单一大小的DNA

使用时要加入上样缓冲液

使用时要提前煮沸变性

DNAMarker可以指示样品DNA的大小

5、制胶板和梳子的使用,说法正确的是

根据样品的体积来选择

根据电泳的时间选择

根据样品的数量来确定

根据实验的目的选择

AC

第六章

1、异丙基硫代半乳糖苷作为一种很强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,它可诱导LacZ的表达。

它的缩写是()

IPTG

APTG

EPTG

CPTG

2、设计适用于蓝白斑筛选的基因工程菌为()菌株。

&

alpha;

-半乳糖苷酶缺陷型

beta;

gamma;

Gamma;

3、在蓝白斑筛选实验中,转化了空载体的细菌长出的菌落为()

蓝色

白色

黑色

红色

4、在蓝白斑筛选实验中,转化了重组质粒的细菌长出的菌落为()

5、对感受态细胞进行热激处理时,所使用的温度是()℃

37

42

100

第七章

1、在制备大肠杆菌感受态细胞时应取用()的大肠杆菌。

迟滞期

对数期

平台期

衰亡期

2、将目的基因导入微生物细胞的最常用方法是()

感受态细胞法

显微注射法

农杆菌转化法

3、细菌处于容易吸收()的状态叫感受态。

外源DNA

外源RNA

内源DNA

内源RNA

4、制备感受态细胞时,要用低渗CaCl2溶液在()℃时处理快速生长的对数期细菌

5、对感受态细胞进行热激处理时,所使用的温度是(C)℃

第八章

1、pBV220表达载体用于抗性筛选的基因是

PLPR

Ori

Amp

CIts857

2、DPS表达蛋白C-端连上6个组氨酸(6His)的作用

蛋白定位作用

方便目的蛋白的纯化

使融合蛋白DPS可以可溶性表达

提高目的蛋白的表达量

3、进行构建重组质粒时选择的内切酶,其酶切位点序列不能与目的基因中的序列一致。

4、目的基因上下游是否需要设计起始密码子和终止密码子需要根据表达载体的不同而确定。

5、DNA标准分子量DL2000共有六条条带,其中分子量大小排在第三大的是500bp条带。

第九章

1、最常用的筛选转化细菌是否含质粒的方法是

营养互补筛选

抗药性筛选

免疫化学筛选

PCR筛选

2、下列外源DNA导入宿主细胞的方法中,不是依据转化方式原理而进行的方法是()。

重组质粒载体+感受态细胞

重组噬菌体DNA或重组噬菌质粒+感受态细胞

外源DNA被包装成&

lambda;

噬菌体颗粒+宿主细胞

酵母质粒载体+酵母细胞的原生质体

3、大肠埃希菌转化实验中,出现假阳性克隆的原因可能有()。

载体自身环化效率过高

琼脂平板上的抗生素失活或含量过低

载体DNA与插入片段的分子比率过高

抗生素的浓度过高

ABC

4、不必提取质粒DNA进行酶切鉴定,而是直接以菌体热解后的DNA为模板进行PCR扩增的鉴定阳性克隆的方法是()

菌落pcr法

限制性酶切法

杂交筛选法

DNA序列分析法

5、进行菌落PCR时,能扩增出与目的序列大小相当的特异片段的转化子为()

假阳性重组子

真重组子

假重组子

第十章

1、表达载体与克隆载体不同,pBV220载体中不属于基因表达元件的是

PL、PR

rrnBT1T2

SD序列

ori

2、大肠杆菌原核表达载体一般不具备的特点是

遗传背景清楚

成本低、表达量高

表达产物分离纯化相对简单

可以进行蛋白糖基化等翻译后加工

3、分离胶倒入胶板后要立即加一层双蒸水,下列说法错误的是

使分离胶界面保持水平

阻止空气中的氧气对胶聚合的抑制

加浓缩胶时要将水层倒出

加浓缩胶时不必将水层倒出

4、分离胶缓冲液的pH是

3

7

8.8

5、若电泳过程中溴酚蓝指示剂不向负极移动,不可能的原因有

未接通电源

电泳槽漏液造成断路

电路接反

凝胶中有小气泡

第十一章

1、半干转膜仪正极在上,负极在下。

2、Westernblot时,半干转膜法电压不能超过25V

3、关于湿法转膜法操作,下列说法正确的是?

阴极一侧放凝胶

阳极一侧放凝胶

阴极一侧放PVDF膜

阳极一侧放PVDF膜

AD

4、进行免疫学检测时,关于二抗,下列说法正确的是?

二抗可以与Anti-His结合

二抗可以与DPS结合

二抗需要进行适度稀释

在一段时间内二抗可以重复利用

ACD

5、HRP标记的二抗的显色试剂是NBT/BCIP

第十二章

1、用工程菌进行诱导表达蛋白时

接种后直接诱导

接种培养到对数期浓度时诱导

接种培养到高浓度的菌液时诱导

接种培养到较稀的菌液时诱导

B

2、6个组氨酸标签(6His)连接在DPS蛋白的()

N-端

中间位置

C-端

3、包涵体是指没有正确折叠的目的蛋白。

4、凝胶过滤依据分子量大小分离蛋白,小分子量的先洗脱出来,大分子量后洗脱出来。

5、纯化蛋白时可以通过煮沸破碎菌体细胞壁

第十三章

1、对Dps蛋白功能描述不正确的表述是:

活性Dps能够消除羟基自由基的形成

活性Dps能与DNA形成复合体结构域

活性Dps是十二聚体

活性Dps内形成Fe3O4沉淀

2、细菌更容易吸收的铁元素形式是:

Fe2+

FeCl3

Fe3O4

FeOOH

3、Fenton反应能产生超氧自由基

4、DNA分子在Fenton试剂作用下被降解

5、检验DNA分子是否降解采用的是SDS-PAGE电泳

第十四章

1、通常来说,含有ploy(A)尾巴的是?

tRNA

rRNA

原核生物mRNA

真核生物mRNA

2、提取总RNA的方法有哪些?

苯酚法

胍盐法

氯化锂沉淀法

层析法

3、TRIzol含有哪些成分?

苯酚

异硫氰酸胍

8-羟基喹啉

-巯基乙醇

4、提取RNA时,75%乙醇的作用是?

溶解蛋白质

抽提可溶性蛋白

沉淀RNA

洗涤RNA中的盐离子

5、用NanoDrop测样品时,仅需0.5-2&

micro;

L样品。

第十五章

1、qPCR能够实时测定特异性产物的量,并推断目的基因的初始量,并且不需要取出PCR产物进行分离,就能得到数据。

2、关于利用Phusion酶进行PCR反应,下列说法正确的是?

变性时间与模板有关

退火温度与引物有关

延伸时间与DNA聚合酶有关

所用缓冲液与GC含量有关

3、反转录反应的模板可以是总RNA,也可以是mRNA

4、影响RT-PCR结果的因素有哪些?

mRNA的质量

tRNA的质量

反转录酶的质量

引物的质量

5、关于Phusion高保真酶,下列说法正确的是

与普通的Taq酶相比,能大大降低出错的可能性

具有5”-3”和3”-5”核酸外切酶的活性

其产物是平末端

其产物可用于TA克隆法克隆

第十六章

1、外源目的基因应插入到表达载体的():

MCS

P

2、构建pBV-dps-2x-6his进行了几轮PCR扩增?

一轮

二轮

三轮

四轮

3、进行融合蛋白的表达一般不会影响目的蛋白的生物学活性。

4、与pBV-dps-2x-6his进行重组,构建融合表达载体时,外源目的基因上下游必须设计上XhoI和XbaI酶切位点。

5、如果要获得单独的目的蛋白,应在目的蛋白和融合蛋白之间设计蛋白酶酶切位点。

 

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