荷叶化学成分研究.docx

1、荷叶化学成分研究荷叶化学成分研究本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！莲属隶属于被子植物门双子叶植物纲睡莲科Nymphaeaceae的莲亚科。该属植物有2种，分别为美洲黄莲NelumbopentapetalaFernald.,北部为中心分布在北美；中国莲,以中国为中心分布在亚洲、大洋洲。我国仅有中国莲一种，为多年生水生草本植物，在湖南、湖北、浙江、江苏等地有广泛种植。传统医学中荷叶、荷花、藕和莲子都多有应用，在治疗咽病、胸痛、遗精、白癒风、天花、痢疾、咳嗽、呕血、略血、血尿、子宫出血、高

2、脂血症、发热、霍乱、肝病、剧渴等病症上均有疗效。同时,莲生物体的不同部位,如荷叶、莲藕、莲子等,又具有很高的食用价值。从莲的各个部位分离出的单体成分主要包括生物碱类、黄酮类、三萜类、类固醇、多酚类等E-。荷叶是莲的干燥叶,具有清暑化湿，升发清阳，凉血止血等功效，荷叶中含丰富的生物碱类化合物，目前对荷叶的应用多集中于减肥功效的开发。为了更好的利用和开发该植物,选取荷叶为研究对象，对其所含的化学成分进行分离及活性筛选。从荷叶中共分离得到化合物27个，包括15个黄酮,2个生物碱，2个甾体,2个甾体苷,3个脂肪醇,1个苯酚和2个megastigmaneglucosides类化合物。其中，6个为首次从该

3、植物中分离得到,4个为首次从荷叶中分离得到。1材料Bruker-AVX型核磁共振仪，内标为TMS;JMS-T100CSmass型质谱仪，电离电压为70eV;RE-52型旋转蒸发仪（河南巩义市英峪仪器厂）；Taike-X6显微熔点测定仪（温度计未校正）；循环水真空泵DLSB40L(巩义市英峪仪器厂）；KQ-300超声仪（昆山市超声仪器有限公司）；柱色谱硅胶（160200，200300目，青岛海洋化工厂）；D101大孔树脂SephadexLH-20(GE);GF254色谱硅胶板（Merck);所有化学试剂均为分析纯。实验材料于2009年10月购于北京市卫仁饮片厂，经中国中医科学院中药研究所王智民研

4、究员鉴定为莲/era的干燥叶。2提取与分离荷叶干燥样品20kg经粉碎后,70%乙醇12倍体积中试化回流提取2次，每次2h,合并提取液，减压浓缩后得浓缩液30L。将浓缩液用乙酸乙酯萃取3次，正丁醇萃取2次，浓缩后得乙酸乙酯部分495g(A部分），21(56mg),22(17mg),FrA3_2硅胶柱色谱以石油醚-丙酮（3:1)洗脱，得到5(25mg),A4部分硅胶柱色谱分离以石油醚-丙酮（3:125:1)梯度洗脱，得到6(29mg),7(16mg),25(20mg)。正丁醇部分700g(B部分）经过D101大孔树脂粗分，分别用水,30%,50%乙醇梯度洗脱，得到3部分B1B3,其中B1部分再硅胶

5、柱色谱分离分别以氯仿-甲醇-水（40:8:1)洗脱，得到化合物14(10mg),15(10mg);以氯仿甲醇-水（30:8:1)洗脱得到化合物10(150mg),之后，此部分收集到的第13份（),经过SephadexLH-20(甲醇洗脱）得到化合物8(12mg),第14份（),经过Sephadex只-20(甲醇洗脱）得到化合物9(14以8);最后，以氯仿-甲醇-水（20:8:1)洗脱，得到的第15份()经过SephadexLH-20(甲醇洗脱）得到化合物11(15mg),12(8mg),第16份（),经过SephadexLH-20(甲醇洗脱)得到化合物13(6mg)。B2部分硅胶柱色谱分离以氯

6、仿-甲醇-水（40:8:10:0:1)洗脱得到化合物27(15mg)。B3部分以氯仿-甲醇-水(240:20:1)洗脱得到化合物16(28mg),20(85mg),洗脱收集到的第31份（)再经过SephadexLH-20(甲醇洗脱）得到化合物17(14mg)。第34份经过SephadexLH-20(甲醇洗脱）得到化合物18(11mg),第35份以氯仿-甲醇-水(120:20:1)洗脱得到化合物19(120mg),26(13mg)。3结构鉴定化合物1白色粉末，易溶于氯仿，难溶于甲醇，mp8590C。EI-MSm/z297,157,139,125,111,97,83,69,571H-NMR(CDC

7、l3,600MHz)S：(1H,m,H40),(52H,brs,H-29,1127),(3H,t,J=,H4),(3H,t,J=,H-28)。通过分析质谱裂解规律及比对文献8的报道,鉴定化合物为10-二十八院醇（10-ctacosanol)。化合物6黄色针晶（氯仿），mp158160C。1H-NMR(CDCl3,600MHz)S：(1H,s,-OH),(1H,d,J=,H-3),(1H,d,J=,H-6),(2H,d,J=,H-2,6),(1H,d,=,H-a),(2H,d,J=,H-3,5),(1H,d,J=,H-5),(1H,s,H-3),(6H,s,-OCH3)；13C-NMR(DMSO

8、-d6,150MHz)S:(C=O),(C-6),(C-4),(C-4),(C-8),(C-l),(C-2),(C-6),(C-a),(C4),(C-3),(C-5),(C-3),(C-2),(4-OCH3),(4-OCH3)。以上数据与文献9报道基本一致，鉴定为6hy-droxy-4,4-dimethoxychalcone。化合物7棕黄色针晶（氯仿），mp150C。ESI-MSm/z289M+H+,274M+H-CH3+。1H-NMR(CDCl3,600MHz)S：(1H,s,-OH),(1H,d,J=,H-6),(1H,d,J=,H-5),(1H,d,J=3Hz,H-4),(1H,d,J=

9、,H-2),(3H,s,8OCH3),(3H,s7-OCH3),(3H,s,3-OCHj)；13C-NMR(DMSO-d6,150MHz)S:(C4),(C-2),(C-3),(C-4),(C-5),(C-6),(C-7),(C-8),(C-4a),(C-4b),(C-8a),(C-8b),(C=O),(3OCH3),(7-OCH3),(8OCH3)。以上数据与文献10报道基本一致,鉴定为1-羟基-3,7,8-二甲氧基Bill酉同（3,7,8trimetlioxy-lhyckoxyF:组卷传道客巴巴再传118已上传an-thone)。化合物8黄色粉末，易溶于甲醇，不易溶于氯仿，mp236238

10、C。ESI-MSm/z479M+H+。1H-NMR(DMSO-i6,600MHz)S：(1H,d,J=,H-6),(1H,d,J=,H-8),(1H,dd,J=,H-2),(1H,d,J=,H-3),(1H,d,/=,H-6),(1H,d,J=,H4”),(1H,m,H2”),(1H,m,H-3”),(1H,m,H-T),(1H,m,H-5”),(1H,m,H-6”),(1H,m,H-6”),(3H,s,7-OCH3)；13C-NMR(DMSO-i6,150MHz)5:(C-2),(C-3),(C-,(C-5),(C-6),(C-7),(C-8),(C-),(C40),(C4),(C-2),(

11、C-3),(C-4),(C-5),(C-3),(C4”),(C-2”),(C-3”),(C-4”),(C-5”),(C-3”)。以上数据与文献11报道基本一致，鉴定为鼠李素-3-9-3-D-B比喃葡萄糖苷（rhamnetin-5-9-3DglucopyrH-T),(1H,d,J=,H-5”),(2H,m,H-3”),(1H,d,=,H-T),(1H,d,=,H-2”),(1H,m,H-3m),(1H,d,=,H-T),(1H,d,=,H-5),(1H,dd,J=,H-5),(1H,s,H4”“),(1H,d,J=,H-2”“),(1H,t,J=,H-3”“),(1H,m,H-T,(1H,d,J

12、=,H-5”），(1H,d,J=,H-6ffff),(3H,s,-OCH3)；13C-NMR(DMSO-d6,150MHz)5：(C-2),(C-3),(C-0,(C-5),(C-3),(C-7),(C-8),(C-9),(C-10),(C4),(C-2),(C-3),(C-4),(C-5),(C-3),(C-r),(C-T),(C-3”),(C-T),(C-5”),(C-3”),(C-T),(C-2m),(C-3m),(C-T),(C-5),(C-T”),(C-2”“),(C-3”“),(C-T”),(C-5”“),(C-3”“),(-OCH3)。以上数据与文献12报道基本_致，鉴定该化合物

13、为异鼠李素-3-9-al-鼠李糖-(H)-a-3-来苏糖-(1-2)-3-)-葡萄糖苷(isorhamnetin-3-O-a-L-hamnopyranosyl-C1-?6)-a-D-lyxopyranosyl-(1-2)-3-D-glucopyrano-side)。化合物16黄色粉末，易溶于甲醇，不易溶于氯仿，mp170173C。ESI-MSm/z633M+Na+。酸水解化合物16,薄层色谱检验水解产物，检出葡萄糖和来苏糖。1H-NMR(DMSO-i6,600MHz)5:(1H,d,J=,H-2),(1H,dd,=,H-3),(1H,d,J=,H-5),(1H,d,J=,H-8),(1H,d,

14、J=,H-3),(1H,d,J=,H4”),(1H,t,=,H-2”),(1H,t,J=,H-3”),(1H,m,H-4”),(1H,m,H-5”),(1H,m,H-6”),(1H,m,H-6”),(1H,d,=,H-T),(1H,m,H-2”),(1H,m,H-3),(1H,m,H-T),(1H,dd,J=,H-5m),(1H,dd,J=,H-5),(3H,s,-OCH3);13C-NMR(DMSO-i6,150MHz)5：(C-2),(C-3),(C-4),(C-5),(C-5),(C-7),(C-8),(C-),(C40),(C4),(C-2),(C-3),(C-4),(C-5),(C-

15、3),(C-T),(C-2”),(C-3”),(C-4”),(C-5”),(C-3”),(C-T),(C-2m),(C-3m),(C-T),(C-5m),(-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致，故鉴定该化合物5),(1H,d,/=,H-8),(1H,d,J=,H-6),(1H,d,J=,H4”),(3H,s,-OCH3)；13C-NMR(DMSO-d6,150MHz)5：(C-2),(C-3),(C-,(C-5),(C-6),(C-7),(C-8),(C-9),(C-10),(C4),(C-2),(C-3),(d),(C-5),(d),(C-r),(C2”),(C-3”),(C-T),(C

16、-5”),(CV),(-XH3)。以上数据与文献13报道基本_致,故鉴定该化合物为(1H,d,J=,H-6),(1H,d,J=,H4”),(1H,d,J=,H4m),(3H,s,3-OCH3),(3H,d,J=,H-3m);13C-NMR(DMSO-d6,150MHz)5：(C-2),(C-3),(C-0,(C-5),(C-3),(C-7),(C-8),(C-9),(C-10),(C4),(C-2),(C-3),(C-4),(C-5),(C-5),(C-r),(C-T),(C-3”),(C-T),(C-5”),(C-3”),(C-T),(C-2m),(C-3m),(C-T),(C-5m),(C

17、-3m),(-3CH3)。经查阅文献，以上数据与文献14报道基本_致,故鉴定该化合物为异鼠李素-3-O-a-L-鼠李糖-(1-6)-3D-葡萄糖苷（isorhamnetin-3-O-a-L-hamnopyranosyl-(1-6)-3-D-glucopyranoside)。化合物24白色针状晶体（甲醇），mp157159C。EI-MSm/z414,399,396,381,329,303,273,271,255,246,231,213。H-NMR(CDCl3,600MHz)5:(1H,m,H-7),(1H,m,H-3),(3H,d,=,H-21),(3H,t,J=,H-29),(3H,d,=,H

18、-26),(3H,d,J=,H-27),(1H,s,H49),(1H,s,H48);13C-NMR(CDCl3,150MHz)5:(C4),(C-2),(C-3),(C-4),(C-5),(C-6),(C-7),(C-8),(C-9),(C40),(C41),(C42),(C-13),(C44),(C45),(C46),(C47),(C48),(C49),(C-20),(C-21),(C-22),(C-23),(C-?706?24),(C-25),(C-26),(C-27),(C-28),(C-29)。以上数据与文献15对照一致，鉴定该化合物为stigmast-7-sn-3S-jl。化合物25

19、白色针状结晶（氯仿），mp104105C。EI-MSm/z10(M+)MHz)5:(2H,m,H-3,6),(2H,m,H-4,5);13C-NMR(CDCl3,150MHz)5:(C4,2),(C-3,6),(C-4,5)。以上数据与文献16对照一致，故鉴定该化合物为邻二羟基苯（benzene4,2-diol)。化合物2,与J-谷甾醇对照品共薄层Rf相同，故鉴定为J-谷甾醇(J-sitosterol);化合物3,数据与文献16对照一致，鉴定为1-十一烷醇（1-rnde-canol);化合物4,数据与文献17对照一致，鉴定为1-二十烷醇（14cosanol);化合物5,与胡萝卜苷对照品薄层色谱

20、Rf及显色情况一致,故鉴定为胡萝卜苷（daroside);化合物13,数据与文献22对照一致,鉴定为槲皮素-34芸香糖苷（quercetin-3-O-utinoside);化合物14,数据与文献23对照一致，鉴定为紫云英苷（astragalin);化合物19,数据与文献22对照一致，鉴定为槲皮素（quercetin);化合物20,数据与文献20对照一致,鉴定为山柰酚（kaempferol);化合物21,数据与文献24对照一致，鉴定为去氢荷叶碱（dehydro-nuciferine);化合物22,数据与文献24阳性，抑制率均大于50%,分别为（)%,(士)%,()%,()%,()%,()%。在这

21、6个化合物中，有5个为黄酮类化合物，其中鼠李素-3-9-3-D-1比喃葡萄糖苷的抑制作用最强，超过了阳性对照Curcumint的（)%。不同浓度下化合物活性的测定有待进一步进行活性复筛。体外其他活性筛选考察了化合物127对体外脂肪酶抑制活性、体外乙酰胆碱酯酶抑制活性和体外人胰岛淀粉样多肽抑制活性，以抑制率（)表示抑制活性。结果显示，体外脂肪酶抑制活性试样在质量浓度为抑制活性试样在浓度为74mg?L-1,体外人胰岛淀粉样多肽的抑制活性在浓度为?L-1时，各试样的抑制率均50%,因此认为无明显抑制作用。 5讨论通过对化合物的分离鉴定发现，正丁醇萃取层中主要以黄酮类化合物为主要成分，且含量较大。以往对荷叶的开发利用，主要利用了其生物碱类成分的活性，开发的新药及保健类食品也主要侧重于减肥降脂方面的功效。而其所含有的大量黄酮类化合物成分的活性则开发的不够，如抗氧化，抑菌等活性。淀粉样蛋白(S-amyloid,AS)本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！