珠子参对S180荷瘤小鼠化疗的减毒作用Word文档下载推荐.docx

1、计数外周血中白细胞（white blood cell, WBC）、计算网织红细胞比值；记录小鼠生存时间。 结果：5 FU+珠子参组S180荷瘤小鼠外周血WBC及网织红细胞下降程度低于5 FU组（P0.01）。5 FU+珠子参组S180荷瘤小鼠平均存活时间为32.5 d，5 FU组平均存活时间为23.5 d，两组比较差异有统计学意义（P0.01）。 结论：珠子参可减轻5 FU化疗后的骨髓抑制，并可延长荷瘤化疗小鼠生存时间。 【关键词】 珠子参; 化学疗法; 肉瘤180; 小鼠Rhizoma Panacis majori reduces toxicity of chemotherapy in S1

2、80 bearing miceMethods: S180 cells were subcutaneously injected to the right armpit of the mice to establish the S180 bearing model, and thirty mice were randomly divided into untreated group, 5 FU group and 5 FU combined with RPM group （5 FU plus RPM group）. The general condition of S180 bearing mi

3、ce was observed. The white blood cells, red blood cells, and reticulocytes in the peripheral blood were counted, and the ratio of reticulocytes was measured too. The life span of the S180 bearing mice was recorded.Results: The white blood cell count and the ratio of reticulocytes in 5 FU plus RPM gr

4、oup were higher than those in 5 FU group （P0.01）. The average lifespan of 5 FU plus RPM group was 32.5 days and that of the 5 FU group was 23.5 days; there was a significant difference in the lifespan between the two groups （P0.01）.Conclusion: RPM can reduce the toxic effect of 5 FU and prolong the

5、lifespan of S180 bearing mice.Keywords: Codonopsis convolvulacea; chemotherapy; sarcoma 180; mice珠子参（Rhizoma Panacis majoris，RPM）又名扣子七，是五加科人参属植物珠子参的根茎，具有活血散瘀、补血止血和消肿止痛之功，主要分布于东喜马拉雅至中国西部山区。研究表明，珠子参水煎液可明显对抗环磷酰胺和60Co辐射所引起的骨髓造血功能损伤，使降低的红细胞（red blood cell，RBC）、血红蛋白（hemoglobin, Hb）和白细胞（white blood cell, W

6、BC）明显升高，并可明显增加骨髓有核细胞及网织红细胞数1，但对恶性肿瘤使用化疗药物后引起的骨髓抑制和造血功能损伤有无减毒作用，尚无人报道。前期研究发现，珠子参水煎液有显著抑瘤作用（另文报道），本课题以S180荷瘤小鼠为实验对象，观察珠子参对化疗药物5 氟尿嘧啶（5 fluorouracil，5 FU）毒副反应的作用。1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 实验动物与细胞株 46周龄昆明近交系小鼠30只，雌雄各半，体质量1618 g，动物合格证为医动字第19 052号，由同济医科大学动物实验中心提供。小鼠肉瘤腹水细胞株S180，由华中科技大学同济医学院免疫学教研室沈关心教授惠赠，接种于小鼠腹腔

7、内。1.1.2 主要药品与试剂 珠子参购自湖北宜昌久康药房，经宜昌市药品检验所鉴定，产于湖北省神农架林区。5 FU针剂，250 mg/支，由天津氨基酸公司人民制药厂生产，灭菌生理盐水稀释至一定浓度，避光常温保存。1.1.3 主要仪器 光学显微镜，Olympus公司生产；超净工作台（SW CQ IF型），苏州净化设备厂生产；调温加热套（KDM型），山东郓城仪器厂生产；电子天平（MP200A型），上海良平仪器厂生产。1.2 实验方法1.2.1 药品配制 珠子参由三峡大学医学院中医系实验室打为细粉，蒸馏水浸泡6 h，置圆底烧瓶内，用KDM型调温加热套加热，挥发油提取器提取挥发油和芳香成分后，转为50

8、 浸煎30 min提取水溶性成分，纱布过滤取汁后，药渣加水再煮沸，转为50 浸煎30 min，共煎3次。药液混合，加热浓缩定容，与挥发油等混匀制成口服液，终浓度为生药0.33 g/ml，经0.22 m微孔滤膜过滤除菌，4 保存。1.2.2 动物模型的制作 参照文献2方法，S180腹水瘤株小鼠体内传代，抽吸腹水，呈乳白色，D Hanks液洗涤离心3次后，调整细胞浓度至1.0106个/ml，台盼蓝拒染法检测细胞存活率95%可用于实验，将0.2 ml细胞悬液注射至小鼠右腋皮下。全程严格无菌操作，40 min内完成。1.2.3 分组与给药 小鼠每笼5只，自由摄食与饮水。造模后采用随机数字表法随机分为模

9、型组、模型+5 FU组（简称5 FU组）、模型+5 FU+珠子参组（简称5 FU+珠子参组），每组10只。造模后第2天起，5 FU+珠子参组小鼠予珠子参煎液0.3 ml灌胃，1次/d，至实验结束为止；模型组和5 FU组小鼠给予0.3 ml生理盐水灌胃。5 FU组和5 FU+珠子参组小鼠自造模第2天起按25 mg/kg体质量腹腔注射5 FU 0.4 ml，1次/d，连续5 d；模型组小鼠腹腔注射0.4 ml生理盐水。隔4周后再次同上予腹腔注射5 d。1.2.4 外周血指标 各组小鼠于造模前1 d、5 FU第1次给药后3 d和5 d分别割尾取血。2%冰醋酸裂解红细胞，常规光学显微镜下计数WBC；经

10、煌焦油蓝染色后涂片，常规光学显微镜下计数红细胞和网织红细胞（reticulocyte，Ret），并计算Ret比值。计算公式：Ret比值=Ret计数/红细胞计数100%。1.2.5 一般情况观察 实验过程中严密观察小鼠精神状态、活动、饮食、毛发、粪和小便等一般状况。1.2.6 生存时间 观察小鼠的生存情况，记录其生存时间。1.3 统计学方法 应用SPSS 10.0软件进行统计分析，采用单因素方差分析和SNK法进行组间比较。 2 结果2.1 荷瘤小鼠治疗前后WBC计数 治疗3 d和5 d后，模型组小鼠外周血中WBC计数稍高于造模前，但差异无统计学意义（P0.05）；5 FU组小鼠于治疗3和5 d时

11、WBC计数明显下降，显著低于治疗前（P0.01），且5 d时下降更明显。5 FU+珠子参组小鼠WBC计数也低于治疗前（P0.01）。药物治疗3 d和5 d时组间比较，5 FU+珠子参组小鼠WBC计数均低于模型组（P0.01），高于5 FU组（P0.05，P0.01）。见表1。2.2 荷瘤小鼠治疗前后Ret比值 模型组小鼠灌胃3 d时Ret比值下降明显，与治疗前比较，差异有统计学意义（P0.05），5 d时有所回升，与治疗前比较差异无统计学意义。5 FU组小鼠3 d和5 d时Ret比值均明显低于治疗前（P0.01），5 d时下降更明显。5 FU+珠子参组小鼠治疗后Ret比值低于治疗前（P0.01

12、）。治疗后3 d和5 d组间相比，5 FU+珠子参组小鼠Ret均低于模型组（P0.05，P0.01），高于5 FU组（P0.01）。见表2。表1 各组荷瘤小鼠治疗前后白细胞数（略）Table 1 WBC counts in S180 bearing mice before and after chemotherapy*P0.05, *P0.01, vs before treatment in the same group; P0.01, vs untreated group; P0.05, P0.01, vs 5 FU group.表2 各组荷瘤小鼠治疗前后网织红细胞比值（略）Table 2

13、Ratio of Ret in S180 bearing mice before and after chemotherapy*P0.05, *P0.01, vs before treatment in the same group; P0.05, P0.01, vs untreated group; P0.01, vs 5 FU group.2.3 荷瘤小鼠一般状况观察 5 FU组小鼠在腹腔注射给药后6 d起，出现明显的脱毛、踡缩、抱团、拉稀，活动情况及饮食量均较模型组明显降低，消瘦，在8、9和11 d各死亡1只。其余小鼠度过急性期后，运动，体形等有所改观，但总体上不及模型组及珠子参联合用药

14、组。第2次注射5 FU后，5 FU+珠子参组小鼠也出现脱毛，但体形及运动状况亦优于5 FU组，且第2疗程中未见小鼠死亡。2.4 生存时间 模型组、5 FU组和5 FU+珠子参组的平均生存天数分别为24.0、23.5和32.5 d。5 FU+珠子参组的平均生存天数与模型组和5 FU组比较明显延长（P0.01）；5 FU组平均生存天数低于模型组，但差异无统计学意义。3 讨论 化疗的减毒研究日趋受到重视，所谓减毒是指减轻癌症病人在化疗中的毒副作用，即对化疗中造血、消化、免疫等系统毒副反应的减低或控制，以及对化疗后期反应或少见副作用的防治。5 FU是第一个根据一定设想而合成的抗代谢药，是目前临床上应用

15、最广泛的抗嘧啶类药物之一3，在肿瘤内科治疗中占有重要地位。其主要的毒副反应是胃肠道刺激症状和骨髓抑制4，从而明显影响外周血象，导致许多患者因为不能耐受而被迫中断治疗。临床上静脉滴注5 FU后骨髓抑制的低谷期出现在714 d5，患者容易并发严重感染，甚至危及生命。本实验结果表明，5 FU化疗可致小鼠外周血细胞明显下降，其中以WBC下降最为明显，在给药5 d后，降至一个低谷。结合小鼠表现来看，5 FU组小鼠分别在8、9、11 d出现死亡，其后逐渐稳定。虽由于考虑到反复割尾对小鼠刺激过大，失血过多，容易引起小鼠死亡，对以后的实验造成影响，此期间未进行血指标检测，但基本可以认为5 FU对小鼠的毒副作用

16、以12周内最为明显，与人体较相似。5 FU组与加用珠子参组小鼠WBC比较差异有统计学意义，加用珠子参组小鼠3 d和5 d时WBC值低于模型组，但明显高于5 FU组（P0.01）。在研究红细胞系变化时，血液网织红细胞计数是一个很敏感的指标6，其绝对值计数或与红细胞比值下降均可提示红系造血障碍。实验中发现注射5 FU 5 d后，昆明小鼠Ret比值明显下降，与用药前及模型组比较差异有统计学意义，而5 FU+珠子参组治疗3 d和5 d时，Ret比值均高于5 FU组，低于模型组。提示珠子参能在一定程度上拮抗5 FU的骨髓抑制，起到机体保护作用。【参考文献】 1 Duan JY, Chen RM. Eff

17、ect of Rhizoma Panacis majoris on blood and hematopoiesis function. Xi Bei Yao Xue Za Zhi. 1996; 11（2）: 72 73. Chinese. 段泾云, 陈瑞明. 珠子参对血液和造血功能的影响. 西北药学杂志. 1996; 72 73. 2 Zeng Y, Luo G, Yang WJ, et al. Inhibitory effect of acetylshikonin injection on mouse S180 sarcoma. Zhong Yao Yao Li Yu Lin Chuang.

18、 2008; 24（1）: 22 23. Chinese with abstract in English. 曾云, 罗刚, 杨文吉, 等. 乙酰紫草素注射液对S180荷瘤小鼠抑瘤作用研究. 中药药理与临床. 2008; 22 23. 3 Chen XQ. New materia medica. Beijing: Peoples Medical Publishing House. 1998: 513. Chinese. 陈新谦. 新编药物学. 北京: 人民卫生出版社. 1998: 513. 4 Zhang XM. Pharmacology and clinical application of

19、 anti tumor drugs. Zhengzhou: Henan Medical University Press. 1999: 129. Chinese. 张蕈沐. 抗癌药物的药理与临床应用. 郑州: 河南医科大学出版社. 1999: 129. 5 Chen XG, Han R, Yang ZC. Pharmacology and pharmacotherapeutics of anti metabolism drugs. Beijing: Peoples Medical Publishing House. 2000: 1774. Chinese. 陈晓光, 韩锐, 杨藻宸. 抗代谢药药理学和药物治疗学. 北京: 人民卫生出版社. 2000: 1774. 6 Wang Q. Experimental methods of modern medicine. Beijing: Peoples Medical Publishing House. 1997: 1056. Chinese.