珠子参对S180荷瘤小鼠化疗的减毒作用Word文档下载推荐.docx

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计数外周血中白细胞（whitebloodcell,WBC）、计算网织红细胞比值；

记录小鼠生存时间。

　　结果：

5FU+珠子参组S180荷瘤小鼠外周血WBC及网织红细胞下降程度低于5FU组（P＜0.01）。

5FU+珠子参组S180荷瘤小鼠平均存活时间为32.5d，5FU组平均存活时间为23.5d，两组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。

　　结论：

珠子参可减轻5FU化疗后的骨髓抑制，并可延长荷瘤化疗小鼠生存时间。

【关键词】珠子参;

化学疗法;

肉瘤180;

小鼠　　RhizomaPanacismajorireducestoxicityofchemotherapyinS180bearingmice　　Methods:

S180cellsweresubcutaneouslyinjectedtotherightarmpitofthemicetoestablishtheS180bearingmodel,andthirtymicewererandomlydividedintountreatedgroup,5FUgroupand5FUcombinedwithRPMgroup（5FUplusRPMgroup）.ThegeneralconditionofS180bearingmicewasobserved.Thewhitebloodcells,redbloodcells,andreticulocytesintheperipheralbloodwerecounted,andtheratioofreticulocyteswasmeasuredtoo.ThelifespanoftheS180bearingmicewasrecorded.　　Results:

Thewhitebloodcellcountandtheratioofreticulocytesin5FUplusRPMgroupwerehigherthanthosein5FUgroup（P0.01）.Theaveragelifespanof5FUplusRPMgroupwas32.5daysandthatofthe5FUgroupwas23.5days;

therewasasignificantdifferenceinthelifespanbetweenthetwogroups（P0.01）.　　Conclusion:

RPMcanreducethetoxiceffectof5FUandprolongthelifespanofS180bearingmice.　　Keywords:

Codonopsisconvolvulacea;

chemotherapy;

sarcoma180;

mice　　珠子参（RhizomaPanacismajoris，RPM）又名扣子七，是五加科人参属植物珠子参的根茎，具有活血散瘀、补血止血和消肿止痛之功，主要分布于东喜马拉雅至中国西部山区。

研究表明，珠子参水煎液可明显对抗环磷酰胺和60Co辐射所引起的骨髓造血功能损伤，使降低的红细胞（redbloodcell，RBC）、血红蛋白（hemoglobin,Hb）和白细胞（whitebloodcell,WBC）明显升高，并可明显增加骨髓有核细胞及网织红细胞数［1］，但对恶性肿瘤使用化疗药物后引起的骨髓抑制和造血功能损伤有无减毒作用，尚无人报道。

前期研究发现，珠子参水煎液有显著抑瘤作用（另文报道），本课题以S180荷瘤小鼠为实验对象，观察珠子参对化疗药物5氟尿嘧啶（5fluorouracil，5FU）毒副反应的作用。

　　1材料与方法　　1.1实验材料　　1.1.1实验动物与细胞株4～6周龄昆明近交系小鼠30只，雌雄各半，体质量16～18g，动物合格证为医动字第19052号，由同济医科大学动物实验中心提供。

小鼠肉瘤腹水细胞株S180，由华中科技大学同济医学院免疫学教研室沈关心教授惠赠，接种于小鼠腹腔内。

　　1.1.2主要药品与试剂珠子参购自湖北宜昌久康药房，经宜昌市药品检验所鉴定，产于湖北省神农架林区。

5FU针剂，250mg/支，由天津氨基酸公司人民制药厂生产，灭菌生理盐水稀释至一定浓度，避光常温保存。

　　1.1.3主要仪器光学显微镜，Olympus公司生产；

超净工作台（SWCQIF型），苏州净化设备厂生产；

调温加热套（KDM型），山东郓城仪器厂生产；

电子天平（MP200A型），上海良平仪器厂生产。

　　1.2实验方法　　1.2.1药品配制珠子参由三峡大学医学院中医系实验室打为细粉，蒸馏水浸泡6h，置圆底烧瓶内，用KDM型调温加热套加热，挥发油提取器提取挥发油和芳香成分后，转为50℃浸煎30min提取水溶性成分，纱布过滤取汁后，药渣加水再煮沸，转为50℃浸煎30min，共煎3次。

药液混合，加热浓缩定容，与挥发油等混匀制成口服液，终浓度为生药0.33g/ml，经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，4℃保存。

　　1.2.2动物模型的制作参照文献［2］方法，S180腹水瘤株小鼠体内传代，抽吸腹水，呈乳白色，DHanks液洗涤离心3次后，调整细胞浓度至1.0×

106个/ml，台盼蓝拒染法检测细胞存活率≥95%可用于实验，将0.2ml细胞悬液注射至小鼠右腋皮下。

全程严格无菌操作，40min内完成。

　　1.2.3分组与给药小鼠每笼5只，自由摄食与饮水。

造模后采用随机数字表法随机分为模型组、模型+5FU组（简称5FU组）、模型+5FU+珠子参组（简称5FU+珠子参组），每组10只。

造模后第2天起，5FU+珠子参组小鼠予珠子参煎液0.3ml灌胃，1次/d，至实验结束为止；

模型组和5FU组小鼠给予0.3ml生理盐水灌胃。

5FU组和5FU+珠子参组小鼠自造模第2天起按25mg/kg体质量腹腔注射5FU0.4ml，1次/d，连续5d；

模型组小鼠腹腔注射0.4ml生理盐水。

隔4周后再次同上予腹腔注射5d。

　　1.2.4外周血指标各组小鼠于造模前1d、5FU第1次给药后3d和5d分别割尾取血。

2%冰醋酸裂解红细胞，常规光学显微镜下计数WBC；

经煌焦油蓝染色后涂片，常规光学显微镜下计数红细胞和网织红细胞（reticulocyte，Ret），并计算Ret比值。

计算公式：

Ret比值=Ret计数/红细胞计数×

100%。

　　1.2.5一般情况观察实验过程中严密观察小鼠精神状态、活动、饮食、毛发、粪和小便等一般状况。

　　1.2.6生存时间观察小鼠的生存情况，记录其生存时间。

　　1.3统计学方法应用SPSS10.0软件进行统计分析，采用单因素方差分析和SNK法进行组间比较。

　　2结果　　2.1荷瘤小鼠治疗前后WBC计数治疗3d和5d后，模型组小鼠外周血中WBC计数稍高于造模前，但差异无统计学意义（P＞0.05）；

5FU组小鼠于治疗3和5d时WBC计数明显下降，显著低于治疗前（P＜0.01），且5d时下降更明显。

5FU+珠子参组小鼠WBC计数也低于治疗前（P＜0.01）。

药物治疗3d和5d时组间比较，5FU+珠子参组小鼠WBC计数均低于模型组（P＜0.01），高于5FU组（P＜0.05，P＜0.01）。

见表1。

　　2.2荷瘤小鼠治疗前后Ret比值模型组小鼠灌胃3d时Ret比值下降明显，与治疗前比较，差异有统计学意义（P＜0.05），5d时有所回升，与治疗前比较差异无统计学意义。

5FU组小鼠3d和5d时Ret比值均明显低于治疗前（P＜0.01），5d时下降更明显。

5FU+珠子参组小鼠治疗后Ret比值低于治疗前（P＜0.01）。

治疗后3d和5d组间相比，5FU+珠子参组小鼠Ret均低于模型组（P＜0.05，P＜0.01），高于5FU组（P＜0.01）。

见表2。

　　表1各组荷瘤小鼠治疗前后白细胞数（略）　　Table1WBCcountsinS180bearingmicebeforeandafterchemotherapy　　*P0.05,**P0.01,vsbeforetreatmentinthesamegroup;

△△P0.01,vsuntreatedgroup;

▲P0.05,▲▲P0.01,vs5FUgroup.　　表2各组荷瘤小鼠治疗前后网织红细胞比值（略）　　Table2RatioofRetinS180bearingmicebeforeandafterchemotherapy　　*P0.05,**P0.01,vsbeforetreatmentinthesamegroup;

△P0.05,△△P0.01,vsuntreatedgroup;

▲▲P0.01,vs5FUgroup.　　2.3荷瘤小鼠一般状况观察5FU组小鼠在腹腔注射给药后6d起，出现明显的脱毛、踡缩、抱团、拉稀，活动情况及饮食量均较模型组明显降低，消瘦，在8、9和11d各死亡1只。

其余小鼠度过急性期后，运动，体形等有所改观，但总体上不及模型组及珠子参联合用药组。

第2次注射5FU后，5FU+珠子参组小鼠也出现脱毛，但体形及运动状况亦优于5FU组，且第2疗程中未见小鼠死亡。

　　2.4生存时间模型组、5FU组和5FU+珠子参组的平均生存天数分别为24.0、23.5和32.5d。

5FU+珠子参组的平均生存天数与模型组和5FU组比较明显延长（P＜0.01）；

5FU组平均生存天数低于模型组，但差异无统计学意义。

　　3讨论　　化疗的减毒研究日趋受到重视，所谓减毒是指减轻癌症病人在化疗中的毒副作用，即对化疗中造血、消化、免疫等系统毒副反应的减低或控制，以及对化疗后期反应或少见副作用的防治。

5FU是第一个根据一定设想而合成的抗代谢药，是目前临床上应用最广泛的抗嘧啶类药物之一［3］，在肿瘤内科治疗中占有重要地位。

其主要的毒副反应是胃肠道刺激症状和骨髓抑制［4］，从而明显影响外周血象，导致许多患者因为不能耐受而被迫中断治疗。

临床上静脉滴注5FU后骨髓抑制的低谷期出现在7～14d［5］，患者容易并发严重感染，甚至危及生命。

本实验结果表明，5FU化疗可致小鼠外周血细胞明显下降，其中以WBC下降最为明显，在给药5d后，降至一个低谷。

结合小鼠表现来看，5FU组小鼠分别在8、9、11d出现死亡，其后逐渐稳定。

虽由于考虑到反复割尾对小鼠刺激过大，失血过多，容易引起小鼠死亡，对以后的实验造成影响，此期间未进行血指标检测，但基本可以认为5FU对小鼠的毒副作用以1～2周内最为明显，与人体较相似。

5FU组与加用珠子参组小鼠WBC比较差异有统计学意义，加用珠子参组小鼠3d和5d时WBC值低于模型组，但明显高于5FU组（P0.01）。

在研究红细胞系变化时，血液网织红细胞计数是一个很敏感的指标［6］，其绝对值计数或与红细胞比值下降均可提示红系造血障碍。

实验中发现注射5FU5d后，昆明小鼠Ret比值明显下降，与用药前及模型组比较差异有统计学意义，而5FU+珠子参组治疗3d和5d时，Ret比值均高于5FU组，低于模型组。

提示珠子参能在一定程度上拮抗5FU的骨髓抑制，起到机体保护作用。

【参考文献】　　1DuanJY,ChenRM.EffectofRhizomaPanacismajorisonbloodandhematopoiesisfunction.XiBeiYaoXueZaZhi.1996;

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