桃胶药理学作用地实验的研究Word文档下载推荐.docx

1、当方差齐时组间比较采用单因素方差分析（ONEWAY ANOVA），当方差不齐时用近似F检验的Welch法，并以最小显著差异法（LSD法）或DunnettT3法进行各组间的两两比较。以Q=005为检验水准。结果1造模后大鼠的情况11造模后大鼠的一般情况币常大鼠精神状况良好，饮食、饮水及大小便正常，活动正常，反应灵敏，背毛平伏、浓密而有光泽，体重增长明显。造模组大鼠在实验期间均出现明显得多饮、多食、多尿症状，且尿中出现白色絮状样油脂，精神较为萎靡，活动稍少，体毛偏黄，少光泽。整个实验期造模鼠仅出现一例死亡。12造模后大鼠的体重变化情况造模后各组大鼠的体重，经Levene检验方差齐性（F=0820，

2、P=O370），采用独立样本t检验（Independent SamplesT Test）有显著性差异（t=-4536，卢0000），说明经高能量饲料联合四氧嘧啶造模后，大鼠体重较前显著增加。13造模后大鼠的空腹血糖情况造模后大鼠的空腹血糖，经Levene检验方差不齐（F=47048，P=O000），采用Satterthwaite近似t检验有显著性差异（t=15525，P-O000），说明大鼠造模后空腹血糖较前显著升高。14造模后大鼠的血脂水平造模后各组HDLC无显著性差异（t_O714，P=O479），LDLC有显著性差异（t一10717，P=0ooo），TG有显著性差异（t8005，P=Oo

3、oo），TC有显著性差异（t_5519,P=0ooo），表明造模后的糖尿病大鼠伴有血脂水平的升高。2桃胶的药理学作用21桃胶治疗后大鼠的一般情况桃胶治疗后，低剂量组变化不明显；中、高剂量组糖尿病大鼠多饮、多食、多尿症状改善，体重虽较前仍有增长，但与模型组比较，体重增长相对较缓；体毛色泽较前改善，精神较前好转，活动较多，反应较为灵敏。中文摘要22桃胶对DM模型大鼠体重的影响治疗后各组间大鼠体重比较均有显著差异（F=7403，P-0000），需进一步进行两两比较。予以桃胶治疗后，各剂量组大鼠的体重与正常组比较，虽仍有不同程度的增加（P以05），但与模型组比较有显著性差异（尸m 05），表明桃胶有控

4、制体重增长的作用。23桃胶对DM模型大鼠空腹血糖的影响治疗后各组间空腹血糖比较有显著性差异（F=35938，P=-0000），需进一步进行组问的两两比较。给药后中、高剂量组空腹血糖与正常组比较，无显著性差异（P005），而模型组和低剂量组空腹血糖显著高于讵常组（P001）。中、高剂量组空腹血糖显著低于模型组（P005），高剂量组空腹血糖显著低于低剂量组（P005）。24桃胶对DM模型大鼠胸腺指数和脾脏指数的影响各组大鼠胸腺指数（thymus index）和脾脏指数（spleen index），经方差分析后表明有显著性差异（F=4314，P=-0005；F=8354，P=-0000），需进一步进

5、行两两比较（采用LSD法）。在胸腺指数和脾脏指数方面，模型组与正常组比较均有显著差异（P005），与中、高剂量组比较均有显著差异（P005）；低、高剂量组之l、HJ比较均有显著差异（尸表明桃胶能增加免疫器官重量，调节免疫功能。25桃胶对糖化血红蛋白、胰岛素、C肽、胰岛素敏感指数的影H向各组胰岛素（F=31861，P=0000）、C肽（F=17831，P=0000）、胰岛素敏感指数（F=97432，P=0000），糖化血红蛋I兰t（F=27221，P=0000）均有显著性差异，需进一步进行两两比较。模型组胰岛素、C肽和糖化血红蛋I兰i（GHbAlc）水平显著高于正常组（氏O01），胰岛素敏感指数

6、显著低于J下常组（尸治疗后，高剂量组胰岛素、C肽和血红蛋白与模型组相比显著改善（尸005），而高剂量组上述几个指标较低剂量组有显著性差异（尸模型组LDLC、TG和TC显著高于正常组（PO01），中、高剂量组LDLC、TG和TC显著低于模型组（尸001或尸005），中、高剂量组血脂与正常组接近。由表中可知，低、中、高剂量组之间可见一定的量效关系趋势，但无统计学意义（尸27对DM模型大鼠肝脏、肾脏和胰腺的影响对肝脏的影响：肉眼观察，F常组大鼠肝脏外形正常，暗红色，被膜光滑、湿润。模型组和桃胶低剂量组大鼠的肝脏体积明显增大，包膜紧张，边缘钝圆，质地变软，有油腻感，表面无光泽，呈奶油黄色；桃胶中、高剂

7、量组大鼠的肝体积、质地、色泽均较模型组有明显改善。200光镜下，正常组大鼠肝组织结构完整、清晰，肝小叶结构F常，肝细胞无脂肪变性等异常改变；模型组及给药各组大鼠均有不同程度的肝细胞脂肪变性，以模型组最重，低、中、高剂量次之，其表现为肝小叶界限不清，肝细胞索排列紊乱，大部分肝窦消失，多数肝细胞出现严重的脂肪变性，以小叶中央静脉周围最为严重，肝细胞极度肿胀呈圆形，胞浆内可见大小不等，数量不一的脂滴空泡（脂肪变性），严重者脂滴相互融合，将细胞核挤向细胞一侧，酷似脂肪细胞。对肾脏的影响：肉眼观察下，J下常组大鼠的肾脏体积轻度肿大，包膜紧张，混浊无光泽，呈浊红色。镜下观察，正常组。肾小球和肾小管大小、形

8、态均正常，排列规则。与正常组相比，模型组和低剂量组大鼠肾小球体积明显增大，系膜基质增多，基底膜增厚；近曲小管上皮肿胀，有的小管腔内可见透明管型，远曲小管上皮胞浆空宽，显示气球样变性。肾小管、间质内炎症细胞浸润增多，且有糖原沉积；与模型组比较，中、高剂量组系膜基质增多、基底膜增厚情况减轻，。Iqd,管、问质内炎症细胞浸润减少，无糖原沉积。对胰脏的影响：200倍光镜下，正常组大鼠的胰岛呈椭圆形的细胞团，境界清楚，胰岛数及岛内细胞数较多，各分泌细胞大小一致，胞质丰富，核染色质清晰；模V型组大鼠的胰岛明显萎缩，轮廓欠圆润，胰岛内形态欠规则，细胞数目少，且排列紊乱，肿胀变形，空泡明显，部分细胞缺失、塌陷

9、；低剂量组大鼠的胰岛体积偏小，形态较规则，胰岛内细胞稀疏，大小不一，排列不均，部分细胞出现核固缩；中、高剂量组胰岛数及岛内细胞数明显增多，细胞分布均匀，核大小基本相等，无核固缩现象。研究结论1验证了利用高能量饲料联合4,N量四氧嘧啶可模拟出近似于人类2型糖尿病的模型。2桃胶能改善糖尿病大鼠的一般状况，控制体重；增加免疫器官重量，提高免疫器官指数，改善免疫功能；能改善胰岛素抵抗，控制空腹血糖。3桃胶能改善体内血脂代谢紊乱，降低糖尿病大鼠LDLC、TG、TC水平，从而减轻脂毒性对机体的损伤。4桃胶能在一定程度上减轻肝。肾胰组织的损伤，有利于控制糖尿病及其并发症的发生发展。关键词：桃胶糖尿病血糖血脂

10、 形态学随着我国经济的发展、人民生活水平的提高及膳食结构和生活方式的变化，疾病谱发生了很大变化。生活方式病（糖尿病、心血管病、肥胖、肠癌、便秘等）发病率呈逐年升高的趋势。其中糖尿病（Diabetes mellitus，DM）的发病率不断升高，在我国，1978年以前糖尿病的平均发病率低于1，最近5年的糖尿病发病率以每年11的惊人速度增长。退休职工健康体检分析报告显示：45参检人群存在空腹血糖增高现象，说明糖尿病以及糖耐量异常人数不断增加。我国是全球糖尿病患病率增长最快的国家之一，我国糖尿病患者人数仅次于印度，居世界第二位。预计1112025年，世界糖尿病患者将增至3亿以上。糖尿病的并发症多且较为

11、严重【l巧】，其中肥胖和高血脂往往是糖尿病的危险因素之一。调查显示20岁以上糖尿病患者，80为肥胖患者，肥胖人群糖尿病患病率比普通人群高4倍【6】o我国也是高脂血症，高血压病，肥胖病等生活方式病患病率增长最快的国家之一，肥胖人数约2亿，儿章的肥胖率已达81，与20年前相比成人超重率上升了39，肥胖率上升了97。据中国居民营养与健康状况显示，高脂血症的发病率逐渐增高，成人血脂异常患病率为186，血脂异常人数约16亿人、血脂异常患病人群逐渐年轻化。积极控制血糖、血脂异常和肥胖成为预防心脑血管疾病、降低死亡率的重要手段。桃胶是桃树（蔷薇科植物）的树干受机械损伤（如虫咬、切伤等）或致病后分泌出来的胶质

12、半透明物质【7】。我国桃胶资源较为丰富，分布广泛，广东、河北，江西，江苏，浙江，安徽，云南，四川，贵州等省均为产地。桃胶产量较大，且价格便宜，约为2500元吨。其多糖含量高达90以上，是一种不可多得的纯度较高、临床证实有效的多糖类中药资源。我国古代文献，如草药验方交流集、名医别录、古今录验方、唐本草、本草纲目和千会方等对桃胶的药理作用均有记载。原桃胶味苦，性平，益气、和血、止渴、活血消肿、通淋止痛【8】。古代已经记载桃胶具有治疗消渴的作用，且具有药食兼备的特点。前言目前，桃胶主要应用于食品和工业领域，如饮料、香精、果汁、啤酒、糕点、面包、乳制品、巧克力、泡泡糖等产品，是天然的增稠剂、悬浮剂、胶

13、粘剂、成膜剂、上光剂、稳定剂，被视为国产“阿拉伯胶”。在工业中，桃胶粉可用于轻工业包装、印刷护版、彩色铅笔芯、微粉、陶瓷贴花、焰火、美术颜料、墨汁稳定剂、粉术冶金、磁性材料及化妆品等产品中。桃胶的临床应用主要见于古代文献，在医学领域的药理学研究以及应用研究较少。早在1962年广州放射学会议上，中山医学院曾介绍了桃胶钡剂混悬液作胃肠道检查的方法，认为同阿拉伯胶的效果不相上下。之后有关专利报道，桃胶有增强免疫功能和提高血象的作用。经药理、毒性试验和临床研究，桃胶液对所有T细胞都有升高作用，T3、T4亚群尤为明显；提高血象，以升高白细胞尤为显著；并能保护造血功能，减轻化疗、放疗的毒副作用【9】。另据

14、文献报道，中药桃胶溶液能使II度烧伤创面迅速结痂成膜，渗出液明显减少，疼痛明显减轻，且无过敏反应和其他不良反应，创周炎性反应发生程度低于对照组，细菌学调查结果表明抗菌结果也要优于对照组【l 01。至于桃胶在保健品中的应用办未见报道。利用桃胶生产桃胶多糖，可以大大提高桃胶的药用价值，增加桃胶的经济附加值，使得桃胶资源得以充分的利用，有利于提高农民收入，有益于调整农业产业结构，为农业发展提供技术支持。由于桃树产胶会导致桃果的减产，因而国外严格禁止桃树产胶，关于原桃胶利用与加工方面的研究报道也少见，仅日本有利用原桃胶用作天然食品添加剂的规定。从1996年起，日本一直将桃胶视为天然食品添加剂（2009

15、年食品添加物。梭合影窖c：阴寸为调查辗告耆）使用。如日本公丌特许专利10150930（1998）报道：原桃胶可用作甜味食品和片剂的涂料。我国多个版本的药典也规定桃胶可以用作中药材。我国原桃胶有药用历史传统，且已经开展了许多在食品等领域应用的研究。如：有些厂家将商品桃胶用于制造糕点、面包、乳制品、巧克力、泡泡糖、香料等；中医利用原桃胶防治血淋、石淋、痢疾、腹泻、疼痛等症；现代医学则利用原桃胶治疗糖尿病、泌尿系统结石等疾病，还用作癌症的辅助治疗或药材配料。本课题组多年来一直从事多糖的研究，特别是对多糖的分离、提纯等，已取得阶段性成果【11。31。关于桃胶的理化特性研究结果表明：桃胶主要成分是多糖，

16、其多糖含量高达90以上，其他物质含量极少，其多糖主要由半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等成分组成，在目前已知所有植物中，桃胶中多糖含量最高，是一种不可多得的纯度较高的中药资源。据古代医籍及近代某些老中医经验，均表明桃胶有治疗糖尿病的作用。基于上述，本课题组对桃胶进行了前期初步研究，证实桃胶对糖尿病小鼠有一定的降血糖作用。根据其成分组成，可明确其降糖作用主要与多糖相关，但是不同的多糖，其单糖组成不尽一致，其降糖机制是否与其他多糖一致，尚不明确。本课题将通过模拟糖尿病模型，进一步探讨桃胶多糖的降糖机制，为降糖新药的丌发提供研究方向，并为桃胶多糖丌发成食品新资源和保健品提供依据，从而起到充分利用

17、我国丰富的桃胶资源，带动农林经济发展的作用。第一章多糖的药理学研究概况第一章 多糖的药理学研究概况天然多糖广泛存在于植物、动物和微生物组织中，约有300多种。人们对多糖生物活性的研究，可以追溯到1936年Shear对多糖抗肿瘤活性的发现们。其作为药物始于1943年，随着化学和生物学的快速发展和分离技术的提高，多糖的生物学功能得到了广泛研究和应用。近10多年来，关于多糖的药理学研究也越来越多。现对多糖的研究进行如下综述：1多糖来源及分类近年来，研究表明多糖具有广泛的牛物活性而且作为药物具有低毒高效的优点，因此多糖的研究已经成为当今学术界的一大热点。按其来源可分为：植物多糖：人参多糖、党参多糖、枸

18、杞多糖等；动物多糖：甲壳素、肝素和硫酸软骨素等；真菌多糖：灵芝多糖、香菇多糖、透明质酸和羊肚菌多糖等；海洋生物类多糖：红藻多糖、褐藻多糖、牡蛎多糖、海参多糖等。目前，在2型糖尿病的防治中，研究较多的是植物多糖和真菌多糖的降糖作用。2多糖的生物学活性21免疫调节作用现代医学、细胞生物学及分子生物学的发展使人们认识到免疫系统的紊乱不仅会产生多种疾病，而且与人体衰老及老年人发病有关。多糖可以通过多条途径、多个层面对免疫系统发挥调节作用。大量实验研究表明，多糖不仅能活巨噬细胞（M）、T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞（NK）、细胞毒T细胞（CTL）、淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）等免疫细胞，还能促

19、进细胞因子生成，活化补体，从而对免疫系统发挥多方面的调节作用。胡庭俊等51应用反向离子对高效液相色谱法测定银耳多糖（TPS）对小鼠脾脏淋巴细胞蛋白激酶c（PKC）的活性的影响，结果表明TPS作为外源性信号分子，4与脾淋巴细胞表面特异性受体结合，活化细胞膜PKC，并引起级联反应，使细胞内一系列蛋白质级联磷酸化，最后将胞外信号传递到细胞核，活化核内转录因子，引起基因表达，调节免疫细胞的功能。22抗肿瘤作用手术、放疗和化疗仍是目前治疗癌症的主要手段，但存在术后并发症、癌细胞转移及放化疗对正常细胞的杀伤而引起机体免疫力下降等问题多糖通过增强机体的免疫力可以与手术、放疗及化疗药物配合使用，从而更有效地预

20、防和治疗癌症。多糖通过活化巨噬细胞，活化淋巴细胞，促进细胞因子分泌，活化补体而提高宿主抗肿瘤免疫功能，通过影响肿瘤细胞膜生化、抗自由基、诱导肿瘤细胞分化与凋亡，影响肿瘤细胞超微结构而发挥直接的抗肿瘤作用。多糖的分子结构、给药剂量、给药途径、给药时间、联合运用等是影响多糖抗肿瘤作用的重要因素n6。203。机体内存在多种免疫监视机制发挥着抗肿瘤作用功能，而免疫活性细胞致敏、激活和扩增有依赖于抗原提呈细胞（APC）提呈相应的抗原多肽以及共刺激信号。树突状细胞被认为是目前发现的功能最强的APC，它能摄取各类抗原，在机体细胞免疫和体液免疫调控中均起着重要作用。人们己从不同生物材料中得到多种具有抗肿瘤活性

21、的多糖，如从香菇多糖具有强的抗肿瘤活性，其抑制癌症和抗肿瘤效果不是直接作用于移植性癌细胞，而是通过宿主调节而发生作用。多糖类药物用于抗肿瘤可以克服化疗、放疗过程中对正常细胞的损伤。23抗病毒作用研究发现，红藻中红藻多糖具有明显抑制牛免疫缺陷病毒BIV的生长的作用，杜仲碱被认为含有多糖类，具有抗破坏人体免疫系统病毒的功能；香菇多糖能促进HIV感染者外周血单个核细胞分泌工L一1、IL一2和IFNr，抑制IL一4、IL一10和TNFa分泌212引，均有望开发成抗AIDS药物。另外，有研究认为香菇多糖和灵芝多糖等对抗慢性肝炎有显著疗效，酿酒酵母葡聚糖能增强宿主对鼠肝炎病毒抵抗力，使肝细胞坏死病变明显减

22、轻，并使血清谷丙转氨酶恢复正常，对单纯疱疹病毒和脑脊髓炎病毒有抵抗作用。猪苓多糖能抑铝IJtBV转基因小鼠HBsAg的表达，从而抑制肝炎病毒心引。在已经发现的抗病毒多糖中，活性最强的是硫酸化多糖。一般认为，硫酸多糖通过干扰病毒对宿主靶细胞的朱1i附、抑制抗原的表达、抑制合胞体形成等途径抑制病毒瞳圳。辛现良等瞳钔发现海洋硫酸多糖能抑制病毒逆转录酶活性，干扰HIV一1与细胞吸附，有抑铝iJAIDS的作用。黄精多糖具有抗病毒作用，硫酸化后作用有了很大的提高。24抗氧化作用自由基被认为是机体衰老和某些慢性病发生的原因之一。这是因为自由基引发脂质过氧化产生脂质过氧化物，造成对细胞、酶类及核酸等生物大分子

23、的损害。当机体内的自由基过多或消除过慢，就会攻击各种细胞、器官并使之受到损伤，加速机体的衰老进程并诱发各种疾病。电离辐射也町激发体内产生自由基，对机体造成广泛的损伤。机体抗氧化防御系统对氧化的应激反应主要是提高谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性，从而起到抗氧化作用。关于多糖的抗氧化作用机制尚无定论，一种解释是-OH可以夺取多糖碳氢链上的氢原子结合成水，而多糖碳原子上留下单电子可继续氧化形成过氧自由基，后者可进一步分解；另有研究认为是多糖环上的羟基可与产生-OH等所必需的金属离子络合，从而抑制活性氧自由基的产生。总之，多糖具有清除自由基、提高抗氧化酶活性和抑制脂质过

24、氧化活性的能力，起到保护生物膜和延缓衰老的作用。钦传光等刚采用化学发光法和分光光度法在多种化学模拟体系中研究了泥鳅多糖清除活性氧的作用，结果表明泥鳅多糖能够有效地清除02-、一OH、H202等活性氧，对DNA链具有良好的保护作用。云芝多糖能够增强GSHPX活性，促进H202清除心71，能使辐射引起的迟发型超敏感性反应低下和SOD活力下降明显恢复，过氧化水平降低，对受Y射线辐射的小鼠有明显的防护作用啪3。小鼠服云芝多糖lOmgkg连续315天，不仅对正常小鼠有升高SOD活力和降氐LPO水平的作用，而且能有效减轻或防止因辐射所引起的SOD活力低下，同时使升高的LPO下降啪1。25抗衰老作用中药多糖

25、类成分的抗衰老作用与现代应用，主要涉及以下四个方面：加强DNA的复制与合成，提供必须的微量元素与营养来延长动物的生长期，提高动物对非特异性刺激的抵抗能力以达到强壮作用；调节蛋白质和核酸、糖和脂质代谢：抗脂质过氧化与抑制脂褐素作用；提高机体SOD活力清除LPO和MDA，抑带tJMAOB的作用，以达到抗衰老的作用。州。山茱萸多糖可有效清除羟自由基和超氧阴离子自由基。南沙参多糖能降低老龄小鼠肝、脑中脂褐素含量，显著抑制老龄小鼠血清中丙二醛的生成，提高老龄小鼠红细胞中超氧化酶及全血中谷胱甘肽过氧化物酶的活性，可使老龄小鼠肝、脑中B型单氨氧化酶的活性降低。从荔枝中提炼出中性的多糖具有强大的抗氧化活性，可以作为一个新的抗氧化剂来研究。“1。此外，螺旋藻多糖，菠叶大黄多糖，紫菜多糖均有抗衰老活性。26降JIlL糖作用糖尿病己成为我国的多发病和常见病，其患病率高达3O，尤其是40岁以上的中、老年人群中患病率更高，并具明显上升趋势协21。开发安全、无毒副作用、预防和治疗高血糖的天然药品和保健食品很有必要。研究发现，源自茶叶、南瓜、当归、人参、大麦、玉米等天然植物的多糖具有显著的降血糖效果。我国和同本民间常用粗老茶治疗糖尿病。已证实，茶