大肠杆菌感受态细胞制备

1、大肠杆菌感受态细胞的制备与重组质粒的转化目的1了解感受态大肠杆菌感受态细胞的制备与重组质粒的转化一目的1.了解感受态细胞生理特性及制备条件,掌握大肠杆菌感受态细胞制备方法.2.掌握质粒DNA 转化大肠杆菌的方法,了解转化的条件和利用半乳糖苷。

2、整理DNA重组大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 DNA重组大肠杆菌感受态细胞的制备及转化DNA重组DNA重组基因重组是指,由不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程.原核生物的基因重组有转化转导和接合等。

3、2）大肠杆菌的原生质体不能被噬菌体感染，却能受噬菌体DNA 转化；（3）适量的溶菌酶能提高转化率。
2、酶受体假说感受态细胞的表面形成一种能接受DNA 的酶 位点，使DNA分子能进入细胞。
证据是：（1）蛋白质合成的抑制剂。

4、如果要克隆较小的DNA片段（10kb）且结构简单,质粒要比其它任何载体都要好。
本实验中应用T载体转化受体菌E. coli DH5的菌株。
由于T载体上带有Ampr 和lacZ基因,故重组子的筛选采用Amp抗性筛选与-互补现象筛。

5、大肠杆菌感受态细胞的制备质粒DNA的转化和重组子筛选解析 思考题 p 如阴性对照中长出菌,可能原因是什么 菌的密度过高或培养时间过长时 会在阳性 p 菌的周围长出一些小的卫星菌落,它们是非 Amp抗性的,试分析原因. 。

6、DNA重组大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 DNA重组大肠杆菌感受态细胞的制备及转化DNA重组DNA重组基因重组是指,由不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程.原核生物的基因重组有转化转导和接合等方式。