高考生物二轮复习专题系统练 专题122微生物的培养和应用 Word版含答案.docx

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高考生物二轮复习专题系统练专题122微生物的培养和应用Word版含答案

2020届高考生物二轮复习专题系统练专题12.2微生物的培养和应用

1、下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述,错误的是()

A.操作顺序为汁算—称量—溶化—倒平板—灭菌

B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C.待培养基冷却至50℃左右时倒平板

D.待平板冷却凝固后将平板倒过来放置

2、下列有关微生物培养基配制的原则,表述正确的是(  )

A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子

B.—般培养基中碳源和氮源具有一定的比例,且培养基的各种组分中碳源的含量最多,其次为氮源

C.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、氧浓度、渗透压的影响

D.营养物质的浓度越高越好

3、如表表示某培养基的配方,下列叙述正确的是(  )

成分

蛋白胨

葡萄糖

K2HPO4

伊红

美蓝

琼脂

美蓝

蒸馏水

含量

10g

10g

2g

0.4g

0.065g

适量

0.065g

1000mL

A.从化学性质看该培养基属于合成培养基;从用途看,该培养基属于选择培养基

B.培养基中葡萄糖可以为微生物提供碳源和能源,提供氮源的是蛋白胨

C.该培养基中含有能提供生长因子的物质,调好培养基的pH后就可以直接接种

D.用该培养基培养大肠杆菌时应将pH调至酸性

4、将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。

在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。

下列有关叙述不正确的是()

A.若在M培养基中加入青霉素,可用于真菌的筛选

B.制备培养细菌的培养基时应将pH调至酸性

C.M培养基中马铃薯浸出液可为微生物提供无机盐

D.倒平板时,应将皿盖打开一条稍大于瓶口的缝隙

5、下列有关消毒与灭菌的说法,正确的是(  )

①日常生活中经常用到的消毒法是煮沸消毒法

②对接种室、接种箱或超净工作台要使用巴氏消毒法进行消毒

③实验操作者的双手使用酒精进行灭菌

④接种环、接种针等金属用具常使用灼烧法进行灭菌

⑤培养基常使用高压蒸汽法进行灭菌

A.①②③     B.③④⑤     C.①②③④⑤     D.①④⑤

6、无菌技术包括以下几个方面的叙述,其中正确的是()

A.紫外线照射前,适量喷洒石碳酸等消毒液,可以加强消毒效果

B.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖

C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D.在微生物接种的实验中,用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒

7、下列关于微生物培养的叙述,不正确的是(  )

A.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵

B.高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子、芽孢

C.划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落

D.稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目

8、下列有关菌种保藏的叙述中,错误的是(   )

A.临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上

B.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法

C.临时保藏菌种的培养基不需要定期更换

D.长期保藏菌种时,各取1mL灭菌甘油和培养菌液混匀后保存在-20℃冷冻箱中

9、下列有关统计菌落数目的方法的叙述,不正确的是(  )

A.利用血细胞计数板,在显微镜下可以准确计算出一定容积的样品中活菌的数量

B.当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌

C.活菌计数法就是通过统计平板上的菌落数,推测出样品中大约含有多少活菌

D.为保证活菌计数法的结果准确,需设置重复组且选择菌落数在30~300的平板进行计数

10、下面关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述中,正确的是(   )

A.只有能合成脲酶的微生物才能分解拔素

B.筛选分解尿素的细菌时,应以尿素为培养基中唯一的营养物质

C.统计样品中的活菌数目—般用平板划线法

D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变蓝,则表明筛选到了分解尿素的细菌

11、某研究小组利用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。

回答下列问题:

1.研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水溶液后,装入图中所示的试管中,再将待测污水样滴加进去振荡摇匀,一段时间后,若观察到溶液颜色变化情况为________,说明微生物在培养过程中产生了CO2。

若要用重铬酸钾检测微生物在培养过程中是否产生了酒精,具体做法是________________。

2.利用图乙所示的“滤膜法”测定大肠杆菌的数目时,应先制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,该培养基的灭菌方法是________________,灭菌后待培养基冷却至_____________°C左右时,在__________附近倒平板。

3.图乙中滤膜的孔径应_____________(填“大于”“小于或“等于”)大肠杆菌。

若将滤膜转移到伊红美蓝培养基上培养一段时间,然后统计_________色的菌落数目,就可估算出单位体积样品中大肠杆菌的数目,但这样得到的统计值往往要比实际值低,原因是______________。

12、地沟油,泛指在生活中存在的各类劣质油,如回收的食用油、反复使用的炸油等,长期食用可能会引发癌症,对人体的危害极大。

可用脂肪酶处理地沟油将其降解,为了获得高产脂肪酶的菌株,某研究小组进行了相关实验。

1、欲从城市排污下水道里筛选出能分泌脂肪酶的细菌,在配制培养该种细菌的培养基时,培养基中的唯一碳源应当是。

从功能上来说,这种培养基属于。

2、培养微生物常用的接种方式是(填两种),为了检测所使用的平板灭菌是否彻底或是否被污染,操作方法是。

为了实现目的菌株的分离和计数,应在该培养基中加入,制成平板。

3、为了得到大量能分泌脂肪酶的细菌,需要对细菌进行扩大培养,扩大培养时需要对微生物进行计数,取0.1mL样品稀释为

倍的稀释液涂布,用固体培养基对其培养,每隔24小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录数据作为结果,这样可以防止。

最后统计三个平板上的菌落数分别是200、180、220,则样品中微生物的数量约为个/mL。

该统计结果常低于实际活菌数,这是因为。

13、酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。

有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。

研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。

下图所示为操作流程,请回答下列问题:

1.配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的__________,及时对培养基进行分装,并进行__________灭菌。

2.取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约__________(填25℃、50℃或80℃)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。

3.挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。

下列叙述合理的有__________。

a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌

b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落

c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量

d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株

4.步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和__________供应。

为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上__________色细胞的个数应不少于__________,才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。

14、手机已经成为人们的生活必备品,有些人甚至时时刻刻离不开手机,你知道手机上的细菌有多少吗?

有调查显示,手机每平方厘米就驻扎了l2万个细菌,按照这样推算,那整个手机起码有上百万个细菌。

某科学小组就手机屏幕上的细菌和马桶按钮上的细菌进行了对比实验,其过程如图所示,回答下列问题:

(1)培养细菌的培养基需要灭菌和调节pH。

调节pH应在对培养基采用法进行灭菌之(填“前”或“后”)完成。

(2)科学小组进行接种时,采用的接种工具是。

接种后的平板倒置培

养的目的是。

(3)实验结果显示手机屏幕和马桶按钮上都有多种细菌。

小组1的结果是在正确的实验操作下得到的,而小组2“马桶按钮”培养基结果的出现的原因可能是。

(4)科学小组按图示操作取样测定某手机屏幕的细菌数量。

将10 mL菌悬液进行梯度稀释,分别取0.2 mL稀释倍数为103的样品液接种到4个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为25个、38个、44个、50个,则该手机屏落的细菌数约为个/cm2,该方法统计的细菌数往往比实际值,原因是。

15、炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病,对炭疽病疑似患者,可通过如图所示鉴定炭疽杆菌的实验进行确诊,其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌。

表中所示是培养炭疽杆菌的血琼脂平板培养基成分。

请回答下列问题:

(1)根据表格内容分析,从用途上进行分类,血琼脂平板培养基属于___________(填“通用培养基”或“选择培养基”)。

(2)由表可知,微生物生长所需的营养物质有_____________。

(3)制备图中的液体培养基时需对其灭菌,目的是杀死__________。

各种材料装入灭菌锅时不要装得太挤,以免_____________。

(4)据图分析,接种可疑菌后,经35℃培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是__________。

对照组试管中应加入____________,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组(填“高”或“低”),则可确诊疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。

此实验依据的原理是_________。

(5)对排除的疑似患者及易感人群,可采取的最有效的预防措施是__________。

 

[答案]以及[解析]

1[答案]及[解析]

[答案]A

[解析]A.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,A错误;B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯,加入少量的水,加热,B正确;C.待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,C正确;D.待平板冷却凝固约后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿低在上,D正确。

2[答案]及[解析]

[答案]C

[解析]培养微生物时,一般需要碳源、氮源、水和无机盐,有些需加人生长因子,A错误;一般培养基中碳源、氮源具有一定的比例,但培养基中含量最多的不一定是碳源,B错误;在培养基中营养物质的浓度并不是越高越好,D错误。

3[答案]及[解析]

[答案]B

[解析]此配方中葡萄糖为主要的碳源,同时也是微生物的能源物质,蛋白胨作为氮源,配方中还有可鉴別大肠杆菌的伊红和美蓝,故从用途看该培养基为鉴別培养基,A错误,B正确;在调节好pH后,培养基还需经灭菌才可用于菌种的培养,C错误;用该培养基培养大肠杆菌时需将pH调至中性或微碱性,D错误。

4[答案]及[解析]

[答案]B

[解析]培养基中一般含碳源、氮源、水、无机盐。

由马铃薯浸出液制成的培养基中含有水、碳源、氮源、无机盐等,可用来培养真菌,加入青霉素可以抑制细菌生长,A正确;大多数细菌生长适宜的pH是7.0-7.6,培养细菌时需将培养基pH调至中性或微碱性,B错误;M培养基中马铃薯浸出液可以为微生物提供碳源、氮源、无机盐等,C正确;倒平板时,用左手将皿盖打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上皿盖,D正确。

5[答案]及[解析]

[答案]D

[解析]日常生活中经常用到的消毒法是煮沸消毒法,①正确;对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果,然后使用紫外线进行照射消毒,②错误;实验操作者的双手使用酒精进行消毒,③;接种环、接种针等金属用具常使用灼烧法进行灭菌,④正确;培养基常使用高压蒸汽法进行灭菌,⑤正确。

6[答案]及[解析]

[答案]A

[解析]用紫外线照射30min,可以杀死物体表面或空气中的微生物,在照射前,适置喷洒石炭酸等消毒液,可以加强消毒效果,A正确;高压灭菌加热结束时,待压力表指针回到零后,才能开启锅盖,不能打开放气阀使压力表指针回到零,B错误;为了防止污染,接种环经火焰灭菌,冷却后才可以快速挑取菌落,C错误;在微生物接种的实验中,一般用75%酒精对实验者的双手进行消毒,用紫外线照射30min对超净工作台进行灭菌,D错误。

7[答案]及[解析]

[答案]C

[解析]微生物培养过程中要进行无菌操作,防止外来杂菌的入侵,A正确;高温灭菌可杀死所有微生物,B正确;划线分离可在培养基上获得逐渐分离的单菌落,C错误;稀释涂布平板法可获得单菌落并计数活菌数目,D正确。

8[答案]及[解析]

[答案]C

[解析]对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法,将菌种接种到固体斜面培养基上,在合适的温度下培养,A、B正确;临时保藏菌种的培养基每隔3〜6个月需要定期更换,C错误;长期保藏菌种时,在3mL的甘油瓶中装入1mL灭菌甘油和1mL培养菌液,混匀后保存在-20℃冷冻箱中,D正确。

9[答案]及[解析]

[答案]A

[解析]统计菌落数目的方法有显微镜直接计数法和间接计数法(活菌计数法)。

利用特定的血细胞计数板,在显微镜下可以计算一定容积的样品中微生物的数量,但不能区分死菌与活菌,A错误;当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,B正确;通过统计平板上的菌落数能推测出样品中大约含有多少活菌,C正确;活菌计数法在操作过程中,需要设置重复组,增强实验的说服力与准确性同时为了保证为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数,D正确。

10[答案]及[解析]

[答案]A

[解析]筛选分解尿素的细菌的实验中,采用的是以尿素为唯一氮源的培养基,B错误;统计样品中的活菌数目一般用稀释涂布平板法,C错误;在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果PH升高,指示剂变红,这样就能初步鉴定该种细歯能够分解诚素,D错误。

11[答案]及[解析]

[答案]1.由蓝变绿再变黄;取2mL培养液的滤液注入干净的试管中,再向试管中滴加酸性重铬酸钾溶液,振荡摇匀后观察溶液颜色的变化;

2.高压蒸汽灭菌法;50;酒精灯火焰;

3.小于;黑;当两个或多个大肠杆菌连在一起时,平板上只能观察到一个菌落

[解析]1.CO2可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。

取2mL培养液的滤液注入干净的试管中,再向试管内滴加酸性重铬酸钾溶液,振荡摇匀后观察颜色变化。

若溶液颜色变为灰绿色,说明微生物在培养过程中产生了酒精。

2.牛肉膏蛋白胨固体培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法,灭菌后待培养基冷却至50°C左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。

3.滤膜的孔径应小于大肠杆菌,才能将污水水样中的全部大肠杆菌都留在滤膜上,使计数更准确。

在伊红美蓝培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色,统计黑色菌落数,可以估算出单位体积样品中大肠杆菌数目当两个或多个细胞连在一起时,平板上只能观察到一个菌落,因此统计的菌落数往往小于实际值。

12[答案]及[解析]

[答案]1、脂肪;选择培养基

2、稀释涂布平板法、平板划线法;选择未接种的平板在适宜条件下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生;琼脂

3、培养时间不足而导致计数时遗漏部分菌落;

;当两个或多个细菌连在一起时,平板上只能观察到一个菌落

[解析]1、为了筛选出分泌脂肪酶的菌株,必须以脂肪作为唯一碳源,在这种培养基中只有能分解脂肪的细菌能够生存,该培养基为选择培养基。

2、接种微生物时,可采用稀释涂布平板法或平板划线法,为了检测平板灭菌是否彻底或是否被污染,应选择未接种的平板在适宜条件下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生。

为了实现目的菌株的分离和计数,应在该培养基中加入琼脂,制成平板。

3、计算微生物的数量应取三个平板的平均值,样品中微生物的数量约为(200+180+220)÷3÷0.1×104=2.0×107个/ml。

该结果常低于实际值,因为当两个或多个细菌连在一起时,平板上只能观察到一个菌落。

13[答案]及[解析]

[答案]1.pH;高压蒸汽(湿热);2.50℃;3.a、b、d;4.氧气;无;30

[解析]1.配制培养基的操作步骤为称量→溶化→定容→调pH→培养基的分装→包扎→灭菌,因此微生物的培养基配制好后应该先调节pH,再分装。

常见的灭菌方法有:

干热灭菌、高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌。

培养基适宜用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

2.在步骤③中,待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板。

3.在划线过程中,接种针、接种环使用前都必须灭菌,以防止杂菌污染,a正确;划线时应避免划破培养基表面,否则将不能形成正常菌落,b正确;该实验的目的是获得利用工业废甲醇作为碳源的酵母菌,不需要测定酵母菌中的甲醇含量,c错误;培养基中的甲醇浓度越高,此种培养基中得以生存的酵母菌利用甲醇的能力越强,因此可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株,d正确。

4.酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖,因此为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和氧气供应;台盼蓝是大分子物质,不能将活细胞染色,再根据25×16型的血球计数板:

1毫升悬液中待测标本(菌体)总数=80小方格内菌体数/80×400×104×稀释倍数。

而台盼蓝与菌液等体积加入,因此要达到每毫升3×109个活细胞的预期密度,理论上无色细胞数应该不少于(3×109)÷(1000×2×104×400÷80)=30个。

14[答案]及[解析]

[答案]

(1)高压蒸汽灭菌前

(2)涂布器防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染

(3)梯度稀释倍数不够

(4)1.375×l05低有可能两个或多个细胞连在一起,而平板上观察到的只是一个菌落

[解析]

15[答案]及[解析]

[答案]

(1)通用培养基

(2)碳源、氮源、水、无机盐和生长因子

(3)物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子妨碍蒸汽流通影响灭菌效果

(4)可疑菌大量繁殖与实验组等量的生理盐水低实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌,使细菌死亡,溶液变澄清

(5)接种(炭疽杆菌)疫苗

[解析]

(1)根据表格内容分析,该培养基含有牛肉青、蛋白练是细菌的通用培养基。

(2)由表可知,微生物生长所需的营养物质碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。

(3)培养基通常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌,以杀死所有的微生物,包括芽孢和孢子。

各种材料装入灭菌锅时不要装得太挤,以免妨碍蒸汽流通影响灭菌效果。

(4)接种可疑菌后,经35℃培养24小时,可疑菌大量繁殖,使液体培养基变浑浊、实验组加入生理盐水配制的澄清噬菌体液,则对照组试管中应加入与实验组等量的生理盐水,与实验组同时培养6小时,实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌,使细菌死亡,造成培养基的浑浊度比对照组低。

(5)对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体和记忆细胞。

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