微生物学实验练习题.docx

微生物学实验练习题.docx

《微生物学实验练习题.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《微生物学实验练习题.docx（22页珍藏版）》请在冰点文库上搜索。

微生物学实验练习题

微生物学实验复习题

二、判断题

1.无菌吸管上端塞入棉花是为了过滤口中的有菌空气。

2.无菌吸管上端塞入棉花的目的是为了防止菌液吸入口中

3.稀释平板测数时，放线菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300个之间的稀释度进行计数。

4.稀释平板测数时，细菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300个之间的稀释度进行计数。

5.稀释平板测数时，细菌，放线菌，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在30-300个的稀释度进行计数。

6.稀释平板测数时，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的稀释度进行计数。

7.稀释平板测数时，细菌、放线菌、真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的稀释度进行计数。

8.用混菌法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是1ml。

9.用涂抹法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是0.1ml。

10.用油镜镜检时应将聚光器升至最高。

11.使用高倍镜时,可将聚光器升至最高。

12.为了满足微生物对微量元素的需要，配制培养基所用的水最好使用自来水。

13.稀释测数用的无菌水通常是由自来水灭菌而成。

14.观察根霉，青霉只需用低倍镜观察即可。

15.实验室通常使用血球计数板测微生物的总菌数。

16.浸油的油镜头可用软的卫生纸擦净。

17.为了节省时间，可直接在染色涂片上滴加香柏油后,直接用油镜观察。

18.使用油镜的正确操作步骤是:

（1）低倍镜观察。

（2）高倍镜观察。

（3）转出高倍镜头，滴加香柏油后用油镜观察。

19.在擦拭显微镜镜头时，应向一个方向擦拭。

20.显微镜镜头的放大倍数越大，它的数值孔径值越大，其镜口角也越大。

21.稀释平板测数通常是采用十倍稀释法。

22.稀释平板测数通常采用的是二倍稀释法。

23.做稀释平板测数时，只需一支吸管从头稀释到尾即可。

24.做稀释平板测数时，每做一个稀释度都必须更换一支无菌吸管。

25.稀释平板测数时，无论是用混菌法，还是用涂抹法,每个平皿中的菌液加入量都是1ml。

26.稀释平板测数时，无论是用混菌法，还是用涂抹法，每个平皿中的菌液加入量都是0.1ml。

27.实验室做固体培养基时，常加1.8%的琼脂作凝固剂，做半固体培养基时,琼脂加入量通常是0.5%。

28.实验室做固体培养基，常加2%的琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是1%。

29.E.coli经革兰氏染色后，菌体呈红色，它是革兰氏正反应细菌。

30.在光学显微镜下，根霉的孢子囊是透明的。

31.使用手提灭菌锅灭菌后，为了尽快排除锅内蒸汽，可直接打开排气阀排气。

32.所有苏云金杆菌的芽胞在菌体的中央。

33.所有真菌菌落的表面干燥，呈绒毛状。

34.所有放线菌菌落表面干燥，呈粉粒状。

35.所有细菌菌落的表面都是光滑湿润状。

36.镜台测微尺每小格的实际长度是10微米。

37.目镜测微尺每小格的实际长度是10μm。

38.镜台测微尺每小格的实际长度是10nm（纳米）。

39.血球计数板两边的平台比计数区高0.1cm。

40.血球计数板两边的平台比计数区高0.1mm。

41.棉花塞塞入试管的长度应为棉塞全长的2/3。

42.棉花塞入试管的长度应为棉塞全长的1/2。

43.摆斜面的长度应不超过试管长度的2/3。

44.摆斜面的长度应不超过试管长度的1/2。

45.血球计数板计数区的面积是1mm2。

46.用血球计数板计数时，任数5个大方格（80个小格）的菌数即可。

47.在使用细菌计数板计数时，为了防止计数偏大，计数区四周压线的菌只能数两边。

48.目镜测微尺每格的实际长度是未知的，需用长度已知的镜台测微尺校正。

49.测微生物的细胞大小时,需要校正的是镜台测微尺每格的实际长度。

50.测微生物细胞大小时，需要校正的是目镜测微尺每格的实际长度。

51.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000mm3。

52.血球计数板计数区共有400个小格，每小格的面积是1/400cm2。

53.用分装器将培养基分装试管时，应谨防培养基沾染试管口。

54.琼脂的熔化温度是80℃以上，凝固温度是45℃以下。

55.琼脂的熔化温度是95℃以上，凝固温度是45℃以下。

56.玻璃器材洗净后在急需时可采用高压蒸汽灭菌，而不能用干热灭菌。

57.细菌计数板每小格的体积是1/20000mm3。

58.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000cm3。

59.无菌室用甲醛熏蒸消毒后可喷氨水以减少甲醛的刺激。

三、填空题

1.霉菌水浸片的制片程序是_________,____________,___________,_____________,_____________,_________________。

2.放线菌印片染色的操作程序是_______________,_____________,_____________,_______________,____________,________________。

3.固体培养基常用__________作凝固剂，普通固体培养基的用量一般为__________，半固体培养基的用量一般为_____________。

4.简单染色的操作程序是_____________,___________,___________,__________,__________,__________。

5.使用手提式灭菌锅进行灭菌的操作程序是__________,__________,__________,_________,___________,__________,___________,__________,___________,____________。

6.实验室配制固体培养基的操作程序是________、____________、_____________、_______________、___________________、_____________________、___________________。

7.有荚膜的细菌用负染色法染色后,荚膜为____色，菌体为_____色。

8.细菌经革兰氏染色后，革兰氏正反应菌呈_______，革兰氏负反应菌呈________。

9.细菌经简单染色后呈_________。

10.显微镜的光学系统由_________,_________,__________和__________组成。

11.显微镜的机械部分包括_________、_________、___________、____________、____________、___________、______________、__________、____________等九部分组成。

12.高氏培养基通常用来培养_________，其pH值为__________。

13.PA培养基通常用来培养_________，其pH值为___________。

14.牛肉膏、蛋白胨培养基通常用来培养____菌，其pH值为________。

15.干热灭菌的工艺条件是_____________________。

16.使用显微镜低倍镜观察时,聚光器应该__________，使用显微镜高倍镜观察时，聚光器应该____________________。

17.革兰氏染色的关键操作是_____________________。

18.显微镜的放大倍数越大，焦深________，调焦应该_____________。

19.按培养基的形态,可将培养基分为____________、__________、__________三种类型。

20.配制常规培养基时通常用________________水。

21.干热灭菌通常用来灭菌_____________，培养基的灭菌通常用________________。

22.细菌稀释测数通常采用___________稀释法，稀释用试管无菌水为__________毫升。

23.配制培养基时常用__________和____________调节pH值。

24.按培养基的特殊用途,可将培养基分成__________、_________、________________等。

25.选择培养基可用来分离培养我们所需的特殊微生物类群，例如我们要从土壤中分离纤维分解菌，可以利用________作唯一碳源来筛选_________；要分离产蛋白酶的微生物，可以利用__________作唯一氮源分离__________。

26.革兰氏染色的操作程序是__________,__________,___________,__________,________________,_____________,____________,_____________,____________,____________,___________,____________。

27.培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或_________的营养基质。

按营养物质的不同来源可分为___________、_____________、_____________三大类。

28.高倍镜头的数值孔径通常为_________，放大倍数为____________。

29.油镜头的数值孔径通常为_____________，放大倍数为____________。

30.低倍镜头的数值孔径通常是__________，放大倍数为____________。

31.穿刺接种使用的接种工具为_________，斜面接种使用的接种工具为_________。

32.进行稀释测数使用的主要器材有_________、______________、___________、_________。

33.用孔雀绿和复红作细菌芽胞染色时，可使菌体呈_____色，使芽胞呈_______色。

34.用日光灯作光源时,通常用_________反光镜，用自然光作光源时，通常用_______反光镜。

35.无菌室杀菌通常采用____________和___________相结合的方法。

36.半固体培养基通常用来检查____________________。

37.摆试管斜面的基本操作方法是________、________、____________。

38.不能加热灭菌的液体培养基应采用_______________除菌，通

常用的器皿有_____________和______________。

39.蓝细菌的培养可用___________________培养基。

40.分离酵母菌时为了抑制细菌的生长，通常用________培养基。

41.从土壤中分离真菌时,通常在培养基中加入________和__________抑制细菌的生长。

42.测微生物大小使用的主要工具是_____________、_____________和__________。

43.进行酵母菌的显微计数使用的主要工具是____________和_______________。

44.进行细菌的显微计数时使用的主要工具是___________和_____________。

45.普通光学显微镜测酵母菌的大小的操作程序是_________________________________、_______________、_______________、_______________、________________、________________、、__________________、____________________。

46.显微计数的操作程序是_____________________、__________________、_________________________、__________________、_____________________、_____________________、_____________________、__________________________。

47.荚膜染色法的操作程序是__________________、___________________、_______________________、______________________、______________________、_______________________、________________________。

48.芽胞染色的操作程序是___________________、_____________________、_____________________、______________________、_________________________、_____________________、______________________、_________________________。

49.芽胞染色的关键操作是_____________________。

50.放线菌印片染色的关键操作是___________________。

51.用负染色法染荚膜的关键操作是____________________。

52.摇床振荡培养通常用来培养___________微生物，享格特的厌氧操作方法通常用来培养______________菌。

53.革兰氏染色反应与细菌细胞壁的_________和_________有关。

在革兰氏染色过程中，当用95%酒精处理后，就放在显微镜下观察，革兰氏阳性菌呈______色，而革兰氏阴性菌呈_______色。

54.血球计数板与细菌计数板的主要差别是_______________。

55.制霉菌水浸片时加棉兰染色液可使菌体呈_____________色。

56.Anabaenaazotica的异型胞通常是________生，在光学显微镜下它是_________的，细胞两端有_______。

它能控制________________的进入，保持异型胞内____________，以利于____________。

57.配制培养基时，应注意各种营养物质的配比，特别是______________。

一般而言,当C:

N5:

1时,有利于________；当C:

N5:

1时有利于___________。

58.由于各种微生物对某种化合物如抗生素、染料的敏感性不同，可以利用这一特征来从土壤中分离出不同类群的微生物。

如在培养基中加入_________，会杀死或抑制____________的生长而分离出___________；在培养基中加入__________，有利于分离到革兰氏阴性菌。

59.细菌在革兰氏染色过程中,最后用蕃红复染因是_____________________,_______________________,_________________________。

60.高倍镜下能看到的物象在油镜下看不到往往是由于____________和_______________引起。

61.微生物在培养基中生长时，由于其____________而使培养基___________发生改变；所以在配制培养基时，为维持该条件的相对恒定，常在培养基中加入缓冲物质如____________或____________。

62.一般而言,微生物在含糖基质上生长，会产__________，而使_____________；微生物分解蛋白质或氨基酸会产____________，而使_____________。

63.在微生物培养过程中使用的培养皿首先是被__________采用的，因此又称培养皿为_______dish。

_________在其妻子的启发下，将固体培养基使用的凝固剂由明胶改为_____________。

64.显微镜的微动螺旋每转一圈升降距离为___________________。

65.两个典型的革兰氏正反应细菌和革兰氏负反应细菌经革兰氏染色后都呈阴性反应往往是由于___________________和____________引起。

66.检查乳品和饮料是否含有__________等肠道细菌，可采用_______________培养基，在这种培养基平板上____________会形成具有__________光泽的紫黑色小菌落。

67.细菌鞭毛经镀银法染色后呈_________色。

68.细菌鞭毛经李夫森法染色后呈_____________色。

69.由于升汞（HgCL2）有腐蚀作用,所以不能用于__________消毒，特别是___________制品。

70.无氮培养基通常用来培养____________，其氮源来自_______________。

四、名词解释

1.电子显微镜

2.普通光学显微镜

3.合成培养基

4.培养基

5.天然培养基

6.半合成培养基

7.革兰氏染色法。

8.简单染色。

9.稀释平板计数法

10.显微直接计数法

11.巴氏消毒

12.间歇灭菌

13.消毒

14.灭菌

15.过滤除菌

16.湿热灭菌

17.干热灭菌

18.选择培养基

19.加富培养基

20.鉴别培养基

21.数值孔径

22.分辨力

23.超净工作台

24.纯培养技术

25.焦深

26.暗视野显微术

27.荧光显微术

28.负相差

29.正相差

五、问题

1.试述在普通光学显微镜下测定微生物细胞大小的基本方法。

2.以测苏云金杆菌工业菌粉中的活菌数为例，试述稀释平板计数的基本方法。

3.试述划线分离的操作方法。

4.如何检查细菌的运动性?

5.简述配制培养基的基本原则:

6.试述配制培养基的基本过程及应该注意的问题。

7.试述显微计数的基本方法。

8.标本片上的某一物象，第一次看到后如何再次找到它?

9.试述在光学显微镜下所看到的Anabaenaazotica的主要特征。

10.革兰氏染色反应的成败关键是什么?

为什么革兰氏染色有十分重要的理论与实践意义?

11.如何从土壤中分离得到一个微生物的纯培养体?

12.察氏培养基的组成为:

蔗糖:

30克,磷酸氢二钾:

1.0克,硝酸钠:

2克,硫酸镁0.5克,氯化钾:

0.5克,硫酸亚铁:

0.01克,蒸馏水:

1000ml.试述:

（1）该培养基的C源,N源各是什么物质。

（2）除C源和N源外的其它物质起什么作用:

（3）该培养基为什么不加生长因子?

微生物学实验复习题答案

一、选择题.1.C.2.D.3.C.4.C.5.D.6.C.7.A.8.B.9.A.10.C.11.C.12.B.13.A.14.C.15.A.16.A.17.A.18.A.19.A.20.D.21.A.22.D.23.A.24.D.25.E.26.A.27.B.28.C.29.C.30.A.31.A.32.C.33.A.34.A.35.C.36.A.37.C.38.A.39.B.40.B.

二、判断题.1.对。

.2.错。

.3.对。

.4.对。

.5.错。

.6.对。

.7.错。

.8.对。

.9.对。

.10.对。

.11.错。

.12.对。

.13.对。

.14.错。

.15.错。

.16.错。

.17.错。

.18.对。

.19.对。

.20.对。

.21.对。

.22.错。

.23.错。

.24.对。

.25.错。

.26.错。

.27.对。

.28.错。

.29.错。

.30.错。

.31.错。

.32.错。

.33.错。

.34.错。

.35.错。

.36.对。

.37.错。

.38.错。

.39.错。

.40.对。

.41.对。

.42.错。

.43.错。

.44.对。

.45.对。

.46.错。

.47.对。

.48.对。

.49.错。

.50.对。

.51.对。

.52.错。

.53.对。

.54.错。

.55.对。

.56对。

.57.对。

.58.错。

.59.对。

.

三、填空题

1.加一滴水于载玻片中央，用解剖针挑取菌丝少许,将菌丝用50%的酒精浸润，将菌丝用蒸馏水水洗，将菌丝放入载玻片水滴中并小心分散，盖上盖玻片

2.印片,干燥,固定,复红染色2-3分钟,水洗,晾干

3.洋菜（琼脂），1.5-2.0%，0.5%

4.涂片，干燥，固定，复红染色1-2分钟，水洗，晾干

5.锅内加水，灭菌物体装锅，对称上紧密封螺帽将锅密封，加热升温，排尽锅内冷空气，升温至灭菌工艺条件{一般为98kpa}，在工艺条件下保压计时{一般为30分钟}，到时间后切断热源，降温，出锅

6.照配方称取药品，将药品溶解在一定量的水中后加热煮沸，将琼脂按量称取后用水浸湿，将浸湿的琼脂加入煮沸的营养液中，待琼脂全部融化后调节pH值，补充损失的水分，分装培养基入不同的容器中

7.无色，红色

8.紫色，红色

9.所染染料的颜色

10.反光镜,聚光镜,物镜,目镜

11.镜座，镜臂，载物台，转换器，镜筒，推动器,粗动螺旋,微动螺旋，聚光镜升降螺旋

12.放线菌，7.5-8.0

13.真菌，5-6

14.细菌、6.8-7.2

15.160-170℃/2h

16.降低，适当升高

17.酒精脱色

18.越小，越小心

19.液体，固体，半固体

20.自来

21.玻璃器材，高压蒸汽灭菌

22.10倍,9

23.1molNaOH、1molHCL

24.选择培养基，加富培养基，鉴别培养基

25.纤维素，纤维分解菌，酪蛋白，蛋白分解菌

26.涂片，干燥，固定，结晶紫染色1分钟，水洗,碘液媒染1分钟，水洗，95%的乙醇脱色25秒，水洗，蕃红复染3-5分钟，水洗，晾干

27.积累代谢产物，天然培养基，合成培养基,，半合成培养基

28.0.65，40x

29.1.25，100x或90x

30.0.25，10x或8x

31.接种针，接种环

32.酒精灯，1ml无菌吸管，9ml试管装无菌水，9cm的无菌平皿

33.红色，绿色

34.平面，凹面

35.紫外灯照射，喷洒化学药剂（如酚）

36.细菌的运动性

37.将摆斜面用特制木条放在桌面上，将装有固体培养基的试管趁热放在特制木条上摆成斜面，斜面长度不得超过试管长度的1/2，将试管棉塞部分用灭菌报纸盖上，以防空气中微生物落到棉塞上引起污染

38.过滤法，蔡氏细菌过滤器，滤膜

39.无氮

40.酸性

41.孟加拉红，链霉素

42.显微镜，镜台测微尺，目镜测微尺

43.显微镜血球计数板。

44.显微镜细菌计数板。

45.将镜台测微尺置载物台上，调焦找到台尺，在低倍镜下校正目镜测微尺每格的长，在高倍镜下校正目镜测微尺每格的长，去掉台尺换上待测样本片，在高倍镜下测出十个酵母菌宽和长的格数，将校正值乘入，算出十个酵母菌的平均宽和平均长，以平均宽Xμm×平均长Yμm表示酵母菌的大小。

46.将待测菌进行适当的稀释，将计数板置于载物台上,在低倍镜下找到计数区,将菌液加到计数区上,调焦看到菌体,按五点取样法计数五个大方格的菌数,计算每小格的含菌数，计算出单位体积（如每ml）中的含菌数。

47.涂片，风干，加复红染色3-5分钟，水洗，晾干，加墨素涂抹，风干。

48.涂片，干燥，固定，孔雀绿加热染色15分钟，水洗，复红染色2-3分钟，水洗，晾干。

49.孔雀绿加热染色适当

50.印片时不能移动

51.涂抹墨素要薄

52.好气，专性厌氧

53.结构，组成，紫，无

54.前者计数区的深度是后者的五倍

55.浅兰

56.间生，透明，极节，氧气，低氧分压，固定分子氮

57.C:

N比（碳氮比），菌体生长，积累代谢产物

58.青霉素（链霉素），细菌和放线菌，真菌，结晶紫