培养基模拟灌装试验验证方案样本.docx

培养基模拟灌装试验验证方案样本.docx

《培养基模拟灌装试验验证方案样本.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《培养基模拟灌装试验验证方案样本.docx（35页珍藏版）》请在冰点文库上搜索。

培养基模拟灌装试验验证方案样本

培养基模仿灌装实验验证方案（10ml）

08月

培养基模仿灌装实验验证方案（10ml）

验证方案起草与审批

验证小构成员

部门

人员

职责

粉针车间主任

李海龙

负责验证方案起草、组织、实行及培训。

生产管理部

刘明华

负责验证方案审核和实行协调工作。

设备部

霍育生

负责验证过程中设备设施正常运营。

QA部

宋新莉

负责安排验证过程中监控和取样。

QC部

张华

负责安排验证过程中物料、环境及样品检测。

方案起草

部门

起草人

日期

年月日

验证委员会审视会签

审核人

职务

日期

年月日

年月日

年月日

年月日

年月日

方案批准

批准人

批准日期

年月日

10培养基培养和检查14

1概述

本次培养基模仿灌装实验验证是以灭菌乳糖粉末分装到10ml西林瓶中，整个过程模仿正常粉针剂品种分装状态，在盖塞前将胰蛋白胨大豆肉汤培养基灌入瓶内，压塞轧盖后进行培养，确认无菌分装工艺无菌可靠性。

2.验证目

在各种干扰和最差条件下，评估灭菌工艺、人员更衣、行为习惯、A/B级气流模式、无菌环境建立、消毒维持办法和物料传递控制等整个流程无菌保证水平。

3风险评估

经验证小组人员共同对培养基模仿灌装实验验证进行风险评估，对存在质量风险提出了防止和纠正办法建议，详细见下表：

风险

因素

风险

影响

既有控制办法

也许性P

严重性S

检测性D

风险优先数RPN

风险级别

建议采用办法

人员

未按更衣程序更衣及不规范动作。

污染无菌环境，使产品受到污染

按相应SOP进行培训。

人员进行更衣实验。

3

4

2

24

中

人员定期进行有关培训并进行更衣

确认。

分装线生产前检查及准备

灭菌设备故障，人员操作不当。

所灭菌部件灭菌不彻底，

污染产品

设备通过验证且定期维护，人员培训。

3

4

2

24

中

人员进行有关设备操作培训。

灭菌设备定期验证。

无菌生产中正常干扰

人员无菌操作不规范。

无菌操作失败，使产品

受到污染

进入无菌生产区操作人员经培养基灌装实验确认。

3

4

4

48

高

人员无菌培训，人员经培养基灌装实验确认。

A级区沉降菌采样

无菌操作

失败

在A级区放置沉降碟操作平面低于产品操作平面，避免对产品影响。

2

3

3

18

低

取样人员进行有关SOP及无菌操作

培训。

原料进入A/B级区

未按SOP规定清洁、消毒

污染无菌环境，间接污染到产品

严格执行SOP

人员培训

3

3

2

12

低

定期监测，

加强监控

环境

环境未得到控制

环境对产品产生污染

检查有关验证状况，控制核心操作区人数，定期监测

2

3

3

18

低

定期监测，

定期消毒。

时限性

设备、器具、环境未及时清洁、未拟定有效期

微生物滋生，产品残留于设备中，导致交叉污染

制定相应SOP，人员培训

3

4

3

36

高

SOP规定清洁时间、办法和有效期，人员培训到位。

评估人年月日

4.验证参照原则

4.1药物生产质量管理规范（）

4.2药物生产质量管理规范（）指南

4.3中华人民共和国药典（二部）

4.4药物生产验证指南（）

5.验证范畴

本方案合用粉针车间生产全过程。

涉及：

人员更衣、各房间清洁消毒、物料传递、容器工具解决、内包材解决、中控取样、动态下环境监测、无菌分装、轧盖过程，并在分装过程中模仿正常与非正常干扰活动。

方案中还规定瓶子、胶塞和铝盖灭菌后存储有效期验证。

6.验证职责

6.1验证委员会

6.1.1负责验证方案审批，质量副总进行批准。

6.1.2负责验证协调工作，以保证本验证方案顺利实行。

6.1.3负责验证数据及成果审核。

6.1.4负责验证报告审批。

6.1.5验证证书由验证委员会主任批准后，由质量管理部发放，验证文献由质量管理部归档保存。

6.1.6负责再验证周期确认。

6.2验证小组

6.2.1负责验证方案起草和验证明行。

6.2.2负责验证数据、记录及成果收集、整顿。

6.2.3负责起草验证报告，报验证委员会批准。

6.3设备部

6.3.1.负责组织所需仪器、设备验证。

6.3.2负责设备维护保养。

6.3.3.负责验证所需设备和HVAC系统、水系统及其她公用工程系统正常运营。

6.3.4.负责生产辅助设施和公用工程系统操作和清洁。

6.4质量管理部

6.4.1负责验证方案审核。

6.4.2负责生产过程监控和取样筹划制定。

6.4.3负责取样及对样品检查并发放检查报告。

6.4.4负责收集验证记录，并加以分析。

6.5粉针车间

6.5.1负责组织验证方案实行。

6.5.2负责合理安排验证生产人员。

7验证前提条件

7.1验证中使用文献是最新版本并已生效（见下表）。

文献名称

文献编号

验证总筹划管理规程

SOP-0101-ZL-025／01

确认与验证管理规程

SOP-0101-ZL-019／01

人员进出生产车间管理规程

SOP-02-SC-014／01

生产区卫生管理规程

SOP-02-SC-001／01

无菌生产干净区人员行为规范原则操作规程

SOP-02-SC-037／00

普通区物料传递岗位原则操作规程

SOP-0203-PS-001／01

灭菌岗位原则操作规程

SOP-0203-PS-002／01

DMH-百级净化双扉干热灭菌柜原则操作规程

SOP-0203-E-001／01

XG1.D型机动门脉动真空灭菌器原则操作规程

SOP-0203-E-002／01

洗瓶岗位原则操作规程

SOP-0203-PS-004／01

KQCL60抗生素瓶立式超声波清洗机原则操作规程

SOP-0203-E-003／01

KSZ620/60型隧道式灭菌干燥机原则操作规程

SOP-0203-E-006／01

胶塞清洗灭菌岗位原则操作规程

SOP-0203-PS-005／01

KJCS-10ES全自动湿法超声波胶塞清洗机原则操作规程

SOP-0203-E-005／01

铝盖清洗灭菌岗位原则操作规程

SOP-0203-PS-006／01

KJSL-12ES全自动湿法铝盖清洗机原则操作规程

SOP-0203-E-004／01

FILGUARD-212A型完整性测试仪操作规程

SOP-0203-E-002／01

分装岗位原则操作规程

SOP-0203-PS-007／01

KFG300D型抗生素瓶螺杆分装机原则操作规程

SOP-0203-E-007／01

轧盖岗位原则操作规程

SOP-0203-PS-008／01

ZG300C型抗生素瓶轧盖机原则操作规程

SOP-0203-E-008／01

中间产品传递岗位原则操作规程

SOP-0203-PS-009／01

灯检岗位原则操作规程

SOP-0203-PS-010／01

表面微生物监测操作规程

SOP-0102-T-047/00

沉降菌监测操作规程

SOP-0102-T-006/01

浮游菌监测操作规程

SOP-0102-T-005/01

悬浮粒子监测操作规程

SOP-0102-T-007/01

培养基合用性检查原则操作规程

SOP-0102-T-009/01

干净区监测管理规程

SOP-0101-ZL-028/01

偏差解决管理规程

SOP-0101-ZL-016/01

变更管理规程

SOP-0101-ZL-017/01

7.2参加验证明行人员都已接受相应培训和本方案培训，并考核合格。

7.3粉针车间干净空调净化系统、纯化水系统、注射用水系统、纯蒸汽系统、压缩空气、车间生产设备、称量衡器及培养室温度分布等已通过验证。

7.4有关物料准备。

名称

规格（编号）

生产厂家

胰蛋白胨大豆肉汤培养基

250g／瓶

北京陆桥技术有限公司

无菌乳糖

200目

广州天润药业有限公司

注射用无菌粉末用卤化丁基橡胶塞

20-B2

江阴兰陵瓶塞有限公司

抗生素瓶用铝塑组合盖

ф20×7.1

烟台福山区誉兴制盖有限公司

低硼硅管制注射剂瓶

10ml

江苏潮华玻璃制品有限公司

白色念珠菌

98001

湖北省食品药物监督管理局检查研究院

枯草芽孢杆菌

63501

湖北省食品药物监督管理局检查研究院

铜绿假单孢菌

10104

湖北省食品药物监督管理局检查研究院

金黄色葡萄球菌

26003

湖北省食品药物监督管理局检查研究院

大肠埃希菌

64941

湖北省食品药物监督管理局检查研究院

注：

乳糖通过辐射灭菌。

8验证批次和时间

按本方案持续进行三批培养基模仿灌装，每批灌装数量不不大于5000瓶。

序号

批号

模仿实验时间

第1批

0901

第2批

0902

第3批

0903

9验证环节

9.1模仿灌装实验前确认

9.1.1模仿灌装用无菌乳糖溶解性实验

称取模仿灌装用乳糖10g，于含胰蛋白胨大豆肉汤培养基为3％100ml溶液中，在20～25℃温度条件下，经轻微地振摇应所有溶解。

9.1.2模仿灌装用乳糖微生物生长性实验确认。

9.1.3胰蛋白胨大豆肉汤培养基无菌实验确认。

9.1.4胰蛋白胨大豆肉汤培养基敏捷度实验确认。

9.2灌装前准备

9.2.1培养基灌装实验生产操作流程

培养基、乳糖内包材

相应传递间

脱外包

层流传递窗

（铝塑盖、培养基、乳糖）（胶塞、管制瓶）

物料暂存间

瓶塞清洗间脱内包洗瓶

（乳糖）（胶塞清洗、灭菌）（瓶灭菌）（铝塑盖清洗、灭菌）

原料复核间

瓶塞清洗间

隧道烘箱

铝塑盖清洗间

（生产用品、分装机组件清洗、培养基配制）

原料搽消间

器具清洗间

（生产用品、分装机组件灭菌、培养基灭菌）

层流传递窗

灭菌间

分装间（先分装乳糖，再灌装培养基）

轧盖间

制品传出

9.2.2工衣清洗灭菌，瓶子、胶塞、铝盖、分装机部件和器具按相应岗位SOP规定进行清洗灭菌后进入分装间。

9.2.3培养基配制：

培养基由操作人员按《普通区物料传递岗位原则操作规程》（SOP-0203-ps-001/01）传至器具清洗间，取胰蛋白胨大豆肉汤培养基5瓶（250g/瓶），提成两桶配制，先量取10000ml注射用水（约70℃）加入干净密封桶（65L），缓慢加入培养基1000g，搅拌10分钟，再量取15000ml注射用水（约70℃）加入密封桶中，再搅拌10分钟。

取第二只干净密封桶（65L），先加入6700ml注射用水（约70℃），缓慢加入培养基750g，搅拌10分钟，再量取10000ml注射用水（约70℃）搅拌10分钟。

配制后培养基pH值应在7.3±0.2之间。

将胰蛋白胨大豆肉汤培养基溶解完全稀释至浓度为30g/L溶液。

按《XG1.D脉动真空灭菌器原则操作规程》（sop-0203-E-002/01）操作，121℃、20分钟灭菌后，传入分装间A级区。

9.3模仿灌装过程

9.3.1培养基冷却至室温后，按《分装岗位原则操作规程》（SOP-0203-ps-007/01）和《KFG300D抗生素瓶螺杆分装机原则操作规程》（SOP-0203-E-007/01）进行操作，将无菌乳糖按每支0.5g分装于10ml西林瓶中，按《BT300-1F蠕动泵原则操作规程》（SOP-0203-E-010/01）进行操作，将灭菌胰蛋白胨大豆肉汤培养基按每支灌装7ml，扣好胶塞后按《ZG300C型抗生素瓶轧盖机原则操作规程》（SOP-0203-E-008/01）轧盖密封，在轧盖后缓冲间收集到不锈钢盘中（每个收集盘装载200支左右）。

按分装时间对每个盛装培养基小瓶托盘编号，并记录每盘分装时间。

9.3.2模仿最差生产条件：

人数最多，时间最长。

分装人数为8人，轧盖4人；为加大操作人员疲劳限度和考察对产品影响，模仿灌装超过工艺规程规定期限，时间为8小时，正常生产中午休息1小时。

9.3.3培养基模仿灌装实验操作过程

9.3.3.17：

30至8：

30装机。

9.3.3.2灌装量：

每支西林瓶分装无菌乳糖0.5g，灌装培养基7ml。

9.3.3.38：

30装机后装原粉桶，按照《分装岗位原则操作规程》和《BT300-1F蠕动泵原则操作规程》调节装量0.5小时。

9.3.3.49：

00开始以支/小时速度分装无菌乳糖和灌装培养基30分钟。

9.3.3.5轧盖爆瓶停机15分钟。

9.3.3.6中间模仿运营1小时。

9.3.3.7以支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基30分钟。

9.3.3.8拆装原粉桶0.5小时。

9.3.3.9以支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基30分钟。

9.3.3.1012：

15至13：

15操作人员出来吃饭。

9.3.3.11模仿设备维修1小时，之后用消毒剂对分装机台面上各部件进行擦拭10分钟，调节装量5分钟，自净15分钟，继续分装。

9.3.3.12以支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基30分钟。

9.3.3.13分装机拨瓶盘错位调节15分钟。

9.3.3.14模仿运营0.5小时。

9.3.3.15以3000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基至结束。

9.3.4灌装培养基过程中进行各种正常干扰和非正常干扰模仿。

9.3.4.1正常干扰因素

序号

因素

次数

详细实行

1

装机

1

分装机分装部件组装

2

胶塞转移

3

胶塞清洗机出料，转移至分装机旁隔离器内

3

装原粉桶，调装量

2

装原粉桶和换原粉桶

4

灌装速度

4

支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基

5

灌装速度

1

3000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基

6

模仿运营

2

1次1小时、1次0.5小时

7

装量检查

10

每次分装无菌乳糖和灌装培养基检查2次

8

解决胶塞轨道堵塞

5

每次分装无菌乳糖和灌装培养基解决一次

9

解决掉塞

5

每次分装无菌乳糖和灌装培养基解决一次

10

空瓶扶瓶

5

每次分装无菌乳糖和灌装培养基扶瓶一次

11

轧盖爆瓶

1

停机15分钟

12

中间休息

1

中午休息、吃饭

13

胶塞上料

25

每次分装无菌乳糖和灌装培养基上料5次

14

环境监测

1

分装过程中

15

分装机操作工穿越轨道

8

生产过程中分装机操作工穿越轨道次数为8次。

16

人员表面微生物

2

中午休息出去时、使用结束时

9.3.4.1非正常干扰因素

序号

因素

次数

详细实行

1

出轨后倒瓶

5

每次分装无菌乳糖和灌装培养基倒瓶一次

2

设备维修

1

第三次灌装结束后，停止灌装60分钟，打开分装机台面下控制箱，模仿检查维修。

维修时间约60分钟，之后用消毒剂对分装机台面上各部件进行擦拭，调节装量，继续灌装

3

分装爆瓶

1

爆瓶，停机解决

4

拨瓶盘调节

1

挤瓶导致拨瓶盘错位

9.4实验过程监测

9.4.1西林瓶无菌检查及有效期验证

西林瓶按《KQCL60抗生素瓶立式超声波清洗机原则操作规程》（SOP-0203-E-003/01）进行清洗，按《KSZ620/60型隧道式灭菌干燥机原则操作规程》（SOP-0203-E-006/01）进行灭菌后进入分装间。

9.4.1.1测试办法：

每次取6只西林瓶按直接接种法，其中3支放入300ml硫乙醇酸盐流体培养基中、3支放入300ml改良马丁培养基中，同步做阴性对照，分别在23-28︒C和30-35︒C培养14天；逐日观测并记录。

9.4.1.2.鉴定原则：

所有样品和阴性对照管培养14天后液体澄清，不得有菌生长。

9.4.1.3取样时间：

实验前（9点取样，存储8h）、实验中（12点取样，存储6h）、实验后（16点取样，存储4h）。

9.4.2.胶塞无菌检查及有效期验证

胶塞按《KJCS-10ES全自动湿法超声波胶塞清洗机原则操作规程》（SOP-0203-E-005/01）清洗、灭菌后出料存储于分装间A级区。

9.4.2.1.测试办法：

每次取20只胶塞按直接接种法，其中10只放入100ml硫乙醇酸盐流体培养基中、10只放入100ml改良马丁培养基中，同步做阴性对照，分别在23-28︒C和30-35︒C培养14天；逐日观测并记录。

9.4.2.2.鉴定原则：

所有样品和阴性对照管培养14天后液体澄清，不得有菌生长。

9.4.2.3取样时间为：

实验前（8点取样，存储36h）、实验中（11点取样，存储40h）、实验后（15点取样，存储44h）。

9.4.3铝塑盖无菌检查及有效期验证

铝塑盖按《KJSL-12ES全自动湿法铝盖清洗机原则操作规程》（SOP-0203-E-004/01）清洗、灭菌后出料存储于轧盖间A级区。

9.4.3.1.测试办法：

每次取20只铝塑盖按直接接种法，其中10支放入300ml硫乙醇酸盐流体培养基中、10支放入300ml改良马丁培养基中，同步做阴性对照，分别在23-28︒C和30-35︒C培养14天；逐日观测并记录。

9.4.3.2.鉴定原则：

所有样品和阴性对照管培养14天后液体澄清，不得有菌生长。

9.4.3.3取样时间为：

实验前（8点半取样，存储36h）、实验中（11点半取样，存储40h）、实验后（15点半取样，存储44h）。

9.4.4生产过程环境监测及表面微生物监测

9.4.4.1测试办法：

参见《浮游菌测试原则操作规程》（SOP-0102-T-005/01）、《沉降菌测试原则操作规程》（SOP-0102-T-006/01）、《悬浮粒子测试原则操作规程》（SOP-0102-T-007/01）、《表面微生物监测原则操作规程》（SOP-0102-T-047/00）。

9.4.4.2.鉴定原则

9.4.4.2.1悬浮粒子

干净度级别

静态

动态

≥0.5um

≥5.0um

≥0.5um

≥5.0um

A级

3520

20

3520

20

B级

3520

29

35

2900

C级

35

2900

350

29000

9.4.4.2.2微生物动态监测原则

干净度级别

浮游菌cfu/m3

沉降菌cfu/4

小时（￠90mm）

表面微生物

接触（￠55mm）cfu/碟

5指手套cfu/手套

A级

＜1

＜1

＜1

＜1

B级

10

5

5

5

C级

100

50

25

-----

9.4.4.3取样筹划及取样点

取样点见下表。

取样操作参见《干净区监测管理规程》（SOP-0101-ZL-028/01）。

分装流程图：

进瓶转盘（解决倒瓶）分装（上料、装量检查、添加胶塞、卡瓶、堵塞、停机维修、人员进出、环境监测）轧盖（添加铝塑盖、堵盖、环境监测）

风险因素

取样位置

级别

监测项目

取样办法

取样频率

1.人员操作及数量、着装更换。

2.装量检查。

3.物料转运操作。

4.各种无菌操作。

人员五指手套、手肘、胸部、腹部、头部、口罩、护目镜

A/B级

表面微生物

￠55mm接触碟

半途更衣前实验结束后

进瓶转盘

A级

悬浮粒子

沉降菌

浮游菌

粒子传感器

￠90mm平皿

浮游菌采集器

在线监测

实时监控

实验结束后

分装头

A级

悬浮粒子沉降菌

浮游菌

粒子传感器

￠90mm平皿

浮游菌采集器

在线监测

实时监控

实验结束后

胶塞振荡器

A级

悬浮粒子

沉降菌

浮游菌

粒子传感器

￠90mm平皿

浮游菌采集器

在线监测

实时监控

实验结束后

分装机隔离器表面、隔离器手套

A级

表面微生物

￠55mm接触碟

实验结束后

分装间墙面、门把手、地面

B级

表面微生物

￠55mm接触碟

实验结束后

轧盖机操作台面

A级

悬浮粒子

沉降菌

浮游菌

粒子传感器

￠90mm平皿

浮游菌采集器

在线监测

实时监控

实验结束后

轧盖机隔离器表面、隔离器手套

A级

表面微生物

￠55mm接触碟

实验结束后

轧盖间墙面、地面

B级

表面微生物

￠55mm接触碟

实验结束后

10.实验样品培养和检查

10.1将实验正常样品和不良样品先置23～28℃培养7天，再置30～35℃培养7天，培养时一半正立，另一半倒置，第7天后互换；第7天观测培养基灌装品微生物生长状况，并对污染瓶中微生物进行总结其特点。

若发现污染应明确记录样品灌装时间及数量，若有破损状况应记录并检查其破损因素。

对于微生物污染样品应进行鉴别实验。

10.2如果培养基灌装产品存在污染，将污染瓶中污染菌在营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基上划线和分离培养，挑取单个菌落形态进行形态学观测、革兰染色等初步鉴别。

11.实验成果评价

11.1样品可接受原则

11.1.1所有样品均进行培养，所有样品无浑浊浮现，则为阴性，合格。

11.1.2若有1支浮现浑浊现象需进行调查，并记录污染产生因素。

11.1.3有2支污染则视为验证失败。

需进行调查，填写异常状况报告，依照调查所拟定或也许发生因素制定纠正或改进方案并实行，在调查结束并采用相应办法后重复进行无菌模仿分装实验。

11.1.4浮现阳性样品应进行密封性检查，剔除所有渗漏样品。

11.1.5物料平衡记录

培养基灌装记录物料平衡某些应涉及完整数据记录和对该批丢弃数量描述。

此外，依照无菌灌装验证详细状况，采用分灌装瓶数进行物料平衡计算。

合格原则为100％。

11.2最后判断原则：

11.2.1无菌灌装验证鉴定为合格必要满足如下三条：

所有样品均为阴性（无浑浊现象）

样品促生长实验合格（均有浑浊）

物料平衡成果符合规定（为100％）

11.2.2如果其中任何一项不合格则表白无菌模仿灌装实验不合格。

12.验证成果分析

验证小组负责对验证数据、记录及验证成果收集、整顿，做验证总结，涉及对验证过程审核：

12.1验证明验与否有漏掉。

12.2验证明行过程中对验证方案有无修改，修改因素、根据以及与否通过批准。

12.3验证记录与否符合原则规定。

12.4验证明验成果与否符合原则规定，偏差及对偏差阐明与否合理，与否需要进一步补充实验。

13风险评估与接受

通过对培养基模仿灌装实验成果分析和判断，对核心性风险和非核心性风险所采用初步风险控制办法进行评估，确认风险与否降至为可接受风险。

14验证成果评审和结论

验证委员会负责对验证成果进行综合评审，做出验证结论，验证委员会主任批准后由质量管理部发放验证证书，确认再验证周期。

对验证成果评审应涉及：

（1）验证明验与否有漏掉？

验证记录与否完整？

（2）验证过程中验证方案有无修改？

修改因素、根据以及与否通过批准？

（3）验证明验成果与否符合原则规定？

偏差