红花继木有效成分的分析.docx
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红花继木有效成分的分析
红花继木有效成分的分析
摘要：
用气相色谱-质谱（GC-MC）联用法对红花继木红叶和绿叶中的脂溶性成分和挥发油成分进行鉴定，并对两种叶子的成分进行比较。
我们分别从红花继木绿叶和红花继木红叶中分别鉴定出14种和16种脂肪酸，占提取物总量的95.31%和98.83%，以及15种和13种挥发油，分别占提取物总量的77.77%和66.81%。
红花继木红叶与红花继木绿叶脂肪酸含量区别最大的是油酸、亚油酸，红花继木红叶与红花继木绿叶挥发油含量区别最大的是叶醇。
红花继木叶中含有大量的脂肪酸和挥发性油，可以用于传统的中医药中。
关键词：
红花继木；脂肪酸；挥发油；气相色谱-质谱联用仪
中图分类号：
TS91文献标识码：
B
Loropetalumchinensevar.rubrumactiveingredientsanalysis
TongjingjingXiqiqun
（SchoolofLightIndustryandFoodSciences,SouthChinaUniversityofTechnology,Guanzhou510640,GuandongChina）
Abstract:
WeisolateandidentifyLoropetalumfattyacidsandvolatileoilcompositioninleaveswithgaschromatography-massspectrometry（GC-MS）method,andcomparethedifferencebetweengreenleavesandredleaves.Results:
Weidentify14and16kindsoffattyacids,about95.31%and98.83%oftotalextractives,FromLoropetalumLoropetalumgreenleavesandredleavesrespectively.Alsoweidentify15and13kindsofvolatileoil,about77.77%and66.81%oftotalextractivesrespectively,FromLoropetalumLoropetalumgreenleavesandredleavesrespectively.Conclusion:
thebiggestdifferenceinfattyacidisoleicacidandlinoleicacidandleavealcoholinvolatileoilbetweenthesetwokindleaves.ManykindsofunsaturatedfattyacidsexistsinleavesofL.chinensevar.rubrum.Theleavesoftheplantcanbeusedasthetraditionalchinesemedicine.
Keywards:
Loropetalumvar.rubrum;fattyacid;volatileoil;GC-MS
1引言
红花继木（Loropetalumchinensevar.rubrum）金缕梅科檵木属，色花系花红叶红的常绿灌木或小木，喜光，稍耐阴，但阴时叶色容易变绿，耐旱，喜温暖，耐寒冷，萌芽力和发枝力强，耐修剪，耐瘠薄，但适宜在肥沃、湿润的微酸性土壤中生长。
红继木适应性强，栽培管理很粗放，叶片花均为红色，春秋两季花开不断，广泛应用于园林、道路及盆景[1]。
主要分布于长江中下游及以南地区；印度北部也有分布，我国主产于江苏省无锡、宜兴、溧阳、句容等地。
我国红花继木的产业化开发有20多年历史，湖南是中心产区。
2004年全省生产面积3500hm2，年产苗木5亿株，年销售额6亿元。
经多年推广应用，2004年中国红花继木生产面积达6000hm2，年产苗木8亿株，年销额9亿元，产品销往20多个省市，出口日本、韩国、新加坡、美国、荷兰、英国、法国、德国、意大利，成为中国花卉业的特色产品之一。
目前全国最大的红花继木基地落户江西南昌百事通招宝，是福建招宝生态农庄在江西南昌主打的名贵树种种植基地，占地2000余亩，姿态各异，价值数十亿元。
红花继木是特产湖南的珍贵乡土彩叶观赏植物,经过我国20多年的产业化开发,在品种选育与应用、标准化生产与市场经营等方面取得一定成绩。
目前该产业正面临从数量增长型向质量效益型的转变，品种和市场是红花继木产业化可持续发展的关键[3]。
外国引种红花继木，原种都来自中国，国内外对檵木的研究逐渐从形态学到分子生化的研究，红花继木提取物中富含的没食子酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯等对多种细菌和真菌有抑制作，具有杀菌消毒的功效。
红花继木中还含有黄酮类物质[14]，尤其是嫩叶中含量较多，黄酮类物质是一大类具有广泛开发前景的天然抗氧化剂资源物质闭，其有明显的抗溃疡、消炎、抗菌、抗衰老、降血酯等生理活性，可用作防治高血压及动脉血管硬化的辅助治疗。
而且我们已从红花继木中分离出多种化合物如谷甾醇（I）36-Hydroxy-glutin-5-ene（11）、3a-Hydroxy-glutin-5-ene（HI）、p-胡萝卜苷（IV）、2",6"-digalloylglucoside[7]、槲皮素、山柰酚和杨梅素[8]等多种物质。
现已经通过蒸馏法提取白继木花的挥发油成分，用GC毛细管柱进行分离，质谱检测，归一化法测定其相对含量[13]。
通过对红继木生理生化的研究，可以逐渐的掌握红继木叶的变色原理，还有檵木极少发生病虫害，只是在初春嫩叶期有少量蚜虫侵害[9]，便于管理，成本及工作量都大大减少，可以利用其防病的原理，于更好的为园林、道路及盆景服务，可以人为的控制，改变叶的颜色，及更好的为医药服务。
目前还没有对红继木叶片组成方面的研究，本文主要是用气相色谱-质谱（GC-MC）联用法对红花继木红叶和绿叶中的脂溶性成分和挥发油成分进行鉴定，并对两种叶子的成分进行比较，以期为进一步利用红花继木资源提供依据。
2材料与方法
2.1材料与试剂
材料所有材料于2010年10月采集于南昌大学前湖校区，红花继木为栽培种。
所有材料经南昌大学生命科学与食品工程学院李恩香博士鉴定。
试剂乙醚、无水硫酸钠等均为上海国药分析纯药品。
2.2仪器与设备
旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器RE-52旋转蒸发仪；
气相色谱-质谱联用仪美国安捷仑公司产品（GC-MSAgilent6890N/5973I）。
2.3方法
2.3.1脂肪酸的提取分析
2.3.1.1粗脂肪提取采用索氏提取装置，称取2g鲜叶剪碎，用脱脂滤纸包裹，置于索氏提取器中，下方烧瓶中加入50ml乙醚，在65℃条件下提取4h，回收大部分乙醚，于烘箱中60℃烘至恒重。
2.3.1.2脂肪酸甲酯化取脂肪酸50mg于10ml试管中，加入2ml苯和石油醚（V:
V＝1:
1）混合溶液和0.4mol/LKOH-CH3OH溶液2ml，振荡10min，静置10min，加入1mlH2O，分层后移出上清液，并用无水Na2SO4脱水备用。
2.3.1.3GC-MS分析气相色谱条件：
气化室温度280℃，柱温70~270℃，升温速度6℃/min，载气高纯He，进样量1μl,分流比为20:
1。
质谱条件：
E1离子源，离子源温度230℃，电子能量70eV，扫描范围30~550amu，以峰面积归一化法定量。
2.3.2挥发油提取分析
2.3.2.1蒸馏法提取挥发油采用周熠等的方法，准确称取经破碎处理的新鲜植物叶片50.0g加入圆底烧瓶，加入150ml蒸馏水，接在同时蒸馏萃取器的A端，同时蒸馏萃取器B端烧瓶中加入60ml无水乙醚，将A端圆底烧瓶置于电磁炉上加热，使其保持微沸，B端圆底烧瓶放入水浴锅中保持温度为45℃，进行同时蒸馏萃取8h。
向B端烧瓶中的萃取液加入5g无水硫酸钠，干燥过夜。
最后用旋装蒸发仪将乙醚溶液浓缩至1ml，供GC-MS分析用。
2.3.2.2GC-MS分析气相色谱条件：
气化室温度280℃，柱温70～270℃，升温速度6℃/min，载气高纯He，进样量1μl，分流比为20:
1。
质谱条件：
E1离子源，离子源温度230℃，电子能量70eV，扫描范围30～550amu，以峰面积归一化法定量。
2.4结果与分析
2.4.1脂肪酸的提取分析
图1红花继木绿叶脂肪酸总离子流图
Fig.1TotalioncurrentchromatogramoffattyacidsfromGLCRbyGC-MS
图2红花继木红叶脂肪酸总离子流图
Fig.2TotalioncurrentchromatogramoffattyacidsfromRLCRbyGC-MS
表1红花继木叶粗脂肪化学成分GC-MS分析结果
Table1ResultsofmaincomponentsofcrudefatbyGC-MStechnologyfromGLCRandRLCR
序号
化合物
分子式
含量/%
GLCR
RLCR
1
辛烷Octane
C8H18
0.3
0.08
2
十一烷Undecane
C11H24
0.04
0.01
3
癸酸Decanoicacid
C10H20O2
4
十四烷Tetradecane
C14H30
5
十五烷Pentadecane
C15H32
0.03
0.01
6
月桂酸Dodecanoicacid
C12H24O2
0.02
7
2,4-二特丁基苯酚Phenol,2,4-bis（1,1-dimethylethyl）
C14H22O
0.01
8
十六烷Hexadecane
C16H34
0.04
0.02
9
十七烷Heptadecane
C17H36
0.06
0.02
10
2-甲基十三烷Tridecane,2-methyl-
C14H30
11
11-（1-乙基丙基）二十一烷11-（1-ethylpropyl）heneicosane
C26H54
0.01
12
十四烷酸Methyltetradecanoate
C14H28O2
0.08
0.03
13
十八烷Octadecane
C18H38
0.04
0.02
14
十五烷酸Pentadecanoicacid
C15H30O2
0.01
15
12-甲基-十四烷酸Tetradecanoicacid,12-methyl-
C15H30O2
0.02
16
正十九烷Nonadecane
C19H40
0.01
17
顺-7-十六烯酸7-Hexadecenoicacid,（Z）-
C16H30
0.14
18
棕榈油酸9-Hexadecenoicacid,（Z）-
C16H30O2
0.09
19
十六烷酸Hexadecanoicacid
C16H32O2
8.87
11.71
20
14-甲基-棕榈酸Hexadecanoicacid,14-methyl-
C17H34O2
0.08
0.07
21
十七烷酸methylheptadecanoate
C17H34O2
22
三甲基硅酯棕榈酸Hexadecanoicacid,trimethylsilylester
C19H40O2Si
0.05
0.02
23
亚油酸9,12-Octadecadienoicacid（Z,Z）-
C18H32O2
29.26
24
油酸9-Octadecenoicacid,（Z）-
C18H34O2
47.01
75.28
25
植物醇Phytol
C20H40O
0.74
26
硬脂酸Octadecanoicacid
C18H36O2
3.18
4.88
27
1-十五烯pentadec-1-ene
C15H30
0.44
28
9,17-十八二烯醛9,17-Octadecadienal,（Z）-
C18H32O
29
1,19-二十碳双烯1,19-Eicosadiene
C20H38
30
9,17-十八碳双烯酮（9Z）-octadeca-9,17-dienal
C18H32O
0.03
31
12-甲基-反，反-2,3-十八碳二烯-1-醇12-Methyl-E,E-2,13-octadecadien-1-ol
0.04
32
11-二十碳烯酸11-Eicosenoicacid
C20H38O2
0.7
1.06
33
4-甲基二十二烷4-Methyldocosane
C23H48
0.13
34
二十烷酸Eicosanoicacid
C20H20O2
1.73
1.68
35
11,13-二十碳二烯酸11,13-Eicosadienoicacid
C20H36O2
36
1-十九烯1-Nonadecene
C19H38
0.04
0.04
37
氯代二十七烷Heptacosane,1-chloro-
C27H55Cl
0.14
38
正二十三烷Tricosane
C23H48
0.09
0.06
39
正二十八烷Octacosane
C28H58
0.12
40
顺，顺-2-甲基-3，13-十八二烯醇2-Methyl-Z,Z-3,13-octadecadienol
C19H36O
41
二十一烷酸Heneicosanoicacid
C21H42O2
0.05
42
7,11-十六二烯醛7,11-Hexadecadienal
C16H28O
43
蜡酸Hexacosanoicacid
C26H52O2
0.86
0.11
44
芥酸13-Docosenoicacid,（Z）-
C22H42O2
0.08
45
山嵛酸Docosanoicacid
C22H44O2
2.17
2.58
46
二十三碳酸Tricosanoicacid
C23H46O2
0.04
47
二十四碳酸Tetracosanoicacid
C24H48O2
1.14
1.14
总计
97.4
99.31
我们从GLCR和RLCR粗脂肪提取物经GC-MS分析分别分离出的40种和53种成分，去除匹配度低于85%的成分，两种叶片中分别鉴定出26种和30种成分（见表1）。
鉴定出的脂肪酸种类分别为14种和16种，分别占提取物总量的95.31%和98.83%。
在两种叶片中含量较高的成分有油酸（47.01%、75.28%）、亚油酸（29.26%、0%）、棕榈酸（8.87%、11.71%）、硬脂酸（3.18%、4.88%）、山嵛酸（2.17%、2.58%）、二十烷酸（1.73%、1.68%）、二十四酸（11.14%、1.14%）。
表2红花继木叶脂肪酸含量的比较
Table2ThecomparisonoffattyacidscontentfromtheleavesofGLCRandRLCR
脂肪酸
相对含量/%
脂肪酸
相对含量/%
GLCR
RLCR
GLCR
RLCR
C12:
0
0.02
C20:
1
0.7
1.06
C14:
0
0.08
0.03
C20:
0
1.42
1.73
C15:
0
0.02
0.01
C21:
0
0.05
C16:
0
8.87
11.71
C22:
0
2.17
2.58
C16:
1
0.14
0.09
C22:
1
0.08
C17:
0
0.08
0.07
C23:
0
0.04
C18:
0
3.23
4.9
C24:
0
1.14
1.14
C18:
1
47.01
75.28
C26:
0
0.86
0.11
C18:
2
29.26
总计
95.31
98.83
从表2中可以看出，鉴定出的饱和脂肪酸有癸酸、月桂酸、十四烷酸（豆蔻酸）、12-甲基-十四烷酸、十五烷酸、十六烷酸（棕榈酸）、14-甲基-棕榈酸、三甲基硅酯棕榈酸、十七烷酸十八烷酸（硬脂酸）、二十烷酸（花生酸）、二十一烷酸、二十二烷酸（山萮酸）、十三碳酸、二十四碳酸、蜡酸等16种，分别占GLCR和RLCR脂肪酸含量的18.2%和22.32%。
单不饱和脂肪酸为油酸、棕榈油酸、顺-7-十六烯酸、11-二十碳烯酸、芥酸等5种，分别占GLCR和RLCR脂肪酸含量的47.85%和76.51%。
多不饱和脂肪酸为亚油酸、11,13-二十碳二烯酸，占GLCR脂肪酸含量的29.26%，RLCR中不含多不饱和脂肪酸。
GLCR和RLCR脂肪酸中含量最多的是C18:
0脂肪酸，分别达到79.5%和80.18%。
红花继木红叶与红花继木绿叶脂肪酸含量区别最大的是油酸（47.01%、75.28%）、亚油酸（29.26%、0%），这可能是引起红花继木叶片颜色差别的主要原因之一。
2.4.2挥发油的提取分析
图3红花继木红叶挥发油总离子流图
Figure3TotalioncurrentchromatogramofVolatileoilfromRLCRbyGC-MS
图4红花继木绿叶挥发油总离子流图
Figure4TotalioncurrentchromatogramofVolatileoilfromRLCRbyGC-MS
表3檵木和红花继木叶挥发油化学成分GC-MS分析结果
Table3ResultsofmaincomponentsofcrudefatbyGC-MStechnologyfromGLCRandRLCR
序号
化合物
分子式
含量
GLCR
RLCR
1
糠醛Furfural
C5H4O2
0.52
0.57
1,2二甲基-环丙烷2-Ethyl-3-vinyloxirane
C5H10
8.42
叶醇3-Hexen-1-ol,（Z）-
C6H12O
12.73
30.47
2
十四烷Tetradecane
C14H30
0.29
0.41
3
1-碘-十八烷Octadecane,1-iodo-
C18H37I
0.13
4
十五烷Pentadecane
C15H32
1.09
1.84
5
十六烷Hexadecane
C16H34
1.79
2.69
6
十七烷Heptadecane
C17H36
1.19
2.09
7
2,6,10,14-四甲基-十六烷Hexadecane,2,6,10,14-tetramethyl-
C20H42
0.44
8
2,6-二甲基-十七烷Heptadecane,2,6-dimethyl-
C19H40
1.19
9
十八烷Octadecane
C18H38
0.51
0.73
10
棕榈酸甲酯Hexadecanoicacid,methylester
C17H34O2
0.66
0.87
11
N-棕榈酸n-Hexadecanoicacid
C16H32O2
17.47
6.02
12
十八碳二烯酸，甲基酯9,12-Octadecadienoicacid,methylester
C19H34O2
1.6
1.63
13
十八碳烯酸，甲基酯Octadecenoicacid,methylester
C19H36O2
1.61
2.14
14
油酸OleicAcid
C18H34O2
31.7
6.99
15
棕榈酸，三甲基硅酯Hexadecanoicacid,trimethylsilylester
1.94
16
硬脂酸Octadecanoicacid
C18H36O2
5.03
17
油酸甘油酯Octadecenoicacid（Z）-droxypropyleste
C21H40O4
0.68
18
二十烷Eicosane
C20H42
0.75
总计
77.77
66.81
GLCR和RLCR挥发油提取物经GC-MS分析分别分离出的60和40种成分，去除匹配度低于85%的成分，两种叶片中分别鉴定出15种和13种成分（见表3），分别占提取物总量的77.77%和66.81%。
表4檵木和红花继木叶脂肪酸含量的比较
Table4ThecomparisonofvolatileoilcontentfromtheleavesofGLCRandRLCR
挥发油
相对含量/%
GLCR
RLCR
C5H4O2
0.52
0.57
C5H10
12.73
30.47
C14H30
0.29
0.41
C15H32
1.09
1.84
C16H34
1,79
2.69
C20H42
0.44
0
C19H40
1.19
C20H42
0.75
总计
16.81
37.92
我们从GLCR和RLCR中鉴定出的脂肪酸种类分别有8种和8种，分别占提取物总量的16.81%和37.92%。
在两种叶片中含量较高的成分有糠醛（0.52%、0.57%）、1,2-二甲基-环丙烷（0%、8.42%）,叶醇（12.73%、30.47%）、十四烷（0.29%、0.41%）、十五烷（1.09%、1.84%）、十六烷（1.79%、2.69%）、十七烷（1.19%、2.09%）、2,6,10,14-四甲基-十六烷（0.44%、0%）、2,6-二甲基-十七烷（0%、1.19%）、十八烷（0.51%、0.73%）、二十烷（0%、0.75%）。
红花继木红叶与红花继木绿叶挥发油含量区别最大的是叶醇（12.73%、30.47%），这可能是引起红花继木叶片颜色差别的主要原因之一。
2.5结论
通过GC-MS，我们分别鉴定出红花继木红叶和红花继木绿叶中14种和16种脂肪酸，分别占提取物总量的95.31%和98.83%。
在两种叶子中，脂肪酸含量区别最大的是油酸（47.01%、75.28%）、亚油酸（29.26%、0%）。
通过GC-MS，我们分别鉴定出红花继木红叶和红花继木绿叶中15种和13种挥发油，分别占提取物总量的77.77%和66.81%。
在两种叶子中，挥发油含量区别最大的是叶醇（12.73%、30.47%）。
致谢：
本课题是在导师，邹志文，孙宝
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