啤酒花中单宁的测定.docx
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啤酒花中单宁的测定
发酵制品检测技术
实验指导手册
实验一、啤酒花中单宁的测定
1、实验原理
单宁能被高锰酸钾氧化。
将试样加水煮沸后溶出单宁，用高锰酸钾溶液滴定，以靛蓝胭脂红，又名靛红、靛蓝二磺酸钠或磺化靛蓝为指示剂；由于被滴定溶液的体积较大，故靛蓝胭脂红用量较多，而靛蓝胭脂红本身是一种还原性物质，能消耗高锰酸钾溶液。
此外试样中也可能还有其他可被高锰酸钾氧化的有机物，因此必须进行空白试验。
空白试验是用白明胶（或动物胶）与活性炭吸附单宁（若试液是胶体溶液，可加入氯化钠硫酸溶液使胶体凝聚），再用高锰酸钾滴定，从试样与空白液所消耗的高锰酸钾溶液体积之差，求得样品中单宁的含量。
由于单宁是一种复杂的混合物，故无法写出滴定反应方程式，测定结果以分布较广的没食子单宁表示。
每毫升0．1000N高锰酸钾溶液相当于没食子单宁4.157毫克，此系数是经验数据，与双没食子酸的毫克当量值不完全相符。
2、试剂
①粉状活性炭
②0.1N高锰酸钾溶液（试剂l—48）
③靛蓝胭脂红：
溶液（试剂1—49）
3、测定步骤
（1）试样处理
称取4～5克细碎啤酒花，置人500毫升圆底烧瓶中，加350毫升水，在沸水浴中或直接火回流加热浸出l小时，冷却至室温，过滤，残渣以水洗涤多次，洗涤液及滤液全部收集于500毫升容量瓶中，用水定容至刻度。
（2）测定
吸取50毫升浸出液，置人500毫升三角瓶中，加100毫升水，5毫升靛蓝胭脂红溶液，以0.1N高锰酸钾溶液滴定，溶液由深蓝逐渐变成绿色、黄绿色、至金黄色为终点。
空白试验：
吸取50毫升浸取液，置人200毫升烧杯中，加入不含碱性的活性炭少许，充分搅拌5分钟，以吸附单宁，过滤，用100毫升水洗涤，滤液和洗涤液收集于500毫升三角瓶中，加5毫升靛蓝胭月旨红溶液，用0.1N高锰酸钾溶液如上法滴定至金黄色终点。
4、计算
单宁（%）=[（V1-V2）×N×0.004157]÷（W×0.1000）×100%×500/50
5、讨论
①据轻工业部食品工业科学研究所分析研究室的试验结果，试样中加入20％葡萄糖与未加入者测定结果相同，表明糖的存在对单宁的测定无干扰。
②用高锰酸钾溶液最初滴定时，应l毫升l毫升地加入，至黄绿色时小心地一滴一滴地加入，直至金黄色为止。
若高锰酸钾一次滴加量过多，则需要量也多。
若滴加过慢，需要量也少。
摇动速度也应适当恒定。
③本法也适用野生植物原料（如金刚头、黄狗头等块根类植物）中单宁的测定，但其单宁含量较低（2～5％左右），所耗用高锰酸钾溶液体积较小。
女口增大取样量则单宁不易完全浸出，且样品溶液颜色过深，空白试验所需用的吸附单宁的试剂量也过大，故可采用微量滴定管进行滴定操作以减少滴定误差。
实验二、麦芽糖化力
1、原理
用麦芽浸出液的糖化酶水解淀粉，生成含有自由醛基的单糖或双糖，醛糖在碱性碘液中定量氧化为相应的羧酸。
剩余的碘，酸化后以淀粉作指示剂，用标准硫代硫酸钠溶液滴定。
2、仪器
a.糖化器应满足麦芽汁制备工艺要求，并附有温度计和搅拌器；
b.搅拌器转速80～100ｒ／min；
c.高精度恒温水谷精度±0.1℃；
d.分析天平感量0.1mg；
e.容量瓶200ml；
f.碘量瓶150ml；
g.胖肚吸管100，50，25ml；
h.移液管5ml，分度值0.05ml；
i.滴定管25ml。
3、试剂和溶液
a.醋酸—醋酸钠缓冲溶液pH＝4.3±0.1
称取醋酸30g，用水溶解，并定容至1000ml；另称取醋酸钠（NaC2H3O2·3H2O）34g,
用水溶解，并定容至500ml；将这两种溶液混合；
b.氢氧化钠溶液［c（NaOH）＝1mol／L］
按GB601配制；
c.硫酸溶液［c（1／2H2SO4）＝1mol／L］
按GB601配制；
d.硫代硫酸钠标准溶液［c（Na2S2O3）＝0.1mol／L］
称取硫代硫酸钠24.82g和四硼酸钠7.6g，溶于300～400ml除二氧化碳的水中，并定容至1000ml，按GB601进行标定；
e.碘标准溶液［c（1／2Ｉ2）＝0.1mol／L］
按GB601配制；
f.百里酚酞指示液5g／L
称取百里酚酞0.5g用95％的乙醇溶解，并定容至100ml；
g.淀粉溶液20g／L
称取于105℃烘干2ｈ的可溶性淀粉10.0g，用少量冷水调成糊状，在不断搅拌下注入400ml沸水中，将残余淀粉糊用少许水洗入沸水中，继续煮沸5min，迅速冷却至20℃，并定容至500ml。
4、分析步骤
a.麦芽浸出液的制备
称取细粉样品20.0g（准确至0.1g）于一已知重量的糖化杯中，加入20℃的水480ml，将糖化杯放入40±0.1℃水浴中，在不断搅拌下保温1h。
取出糖化杯，冷却至20℃，用20℃的水冲洗搅拌器，擦干糖化杯外壁。
再加入20℃的水，使其重量为520.0g。
搅拌均匀后，用双层滤纸过滤，弃去最初200ml滤液，随后的50ml供分析用。
b.糖化
（1）于四个200ml容量瓶中各吸入淀粉溶液100.0ml。
1、2号容量瓶中各加入醋酸—醋酸钠缓冲溶液5.00ml，将四个容量瓶放入20±0.1℃水浴中保温20min；
（2）先于1号容量瓶中加入麦芽浸出液5.00ml，60s后于2号容量瓶中加入麦芽浸出液5.00ml，立即计时摇匀，将1、2号容量瓶放入20±0.1℃水浴中保温30min（保温时间从加入麦芽浸出液算起）；
（3）于1、2号容量瓶中立即各加入1mol／L氢氧化钠溶液4.00ml，3、4号容量瓶各加入1mol／L氢氧化钠溶液2.35ml，然后再各加入麦芽浸出液5.00ml，摇匀；
（4）将四个容量瓶用水稀释至刻度，用百里酚酞指示液检查应呈蓝色；
c.测定
分别吸取四个容量瓶中的反应液50.0ml于四个150ml碘量瓶中，加入0.1mol／L碘液25.0ml和1mol／L氢氧化钠溶液3.0ml，加塞，于暗处放置15min。
各瓶加入1mol／L硫酸溶液4.5ml，用0.1mol／L硫代硫酸钠标准溶液滴定至蓝色消失。
5计算
式中：
X15——100g无水麦芽的糖化力，WK；
X2——同一样品麦芽的商品水分，％；
V1——空白滴定消耗硫代硫酸钠标准溶液的毫升数（3、4号瓶的平均值），ml；
V2——样品滴定消耗硫代硫酸钠标准溶液的毫升数（1、2号瓶的平均值），ml；
c——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol／L；
342——转换系数。
6结果的允许差
平行试验之差不大于15WK
实验三、啤酒总酸测定
啤酒中含有多种有机酸和无机酸，主要来源于麦芽及糖化、发酵等工艺过程中酶和酵母的作用。
啤酒的总酸度是指啤酒中各种酸的综合。
1原理
利用酸碱中和原理，以氢氧化钠标准溶液直接滴定啤酒样品的总酸，用pH计测量滴定终点，最后由消耗氢氧化钠标准溶液的体积计算啤酒中总酸的含量。
2仪器
（1）pH计。
（2）电磁搅拌器。
（3）恒温水浴锅。
3、试剂
（1）氢氧化钠标准溶液[c（NaOH）=0.1mol/L]
4、试验程序
（1）样品的处理：
吸取50.00m前面“一”已制备好的酒样于100mL烧杯中，置于40℃水浴中保温30min，并不时振摇，以除去残余的二氧化碳，然后冷却至室温。
（2）样品的测定：
a.按仪器使用说明书校正pH计，并注意校正和测定时的温度要一致。
b.将事先用pH9.22标准缓冲溶液校准过的玻璃电极和甘汞电极插入样品杯中，在电磁搅拌器搅拌下用氢氧化钠标准溶液滴定至pH9.0，记录氢氧化钠标准溶液的用量。
5、计算
X2=2×c×V
式中：
X2——总酸的含量，即100mL样品消耗氢氧化钠标准溶液c（NaOH）=1mol/L]的毫升数，mL/100mL；
c——氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L；
V——消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL；
2——换算成100mL酒样的系数。
所得结果应表示至二位小数。
实验四啤酒苦味值测定
1、原理：
异构a酸被异辛烷（2，2，4-三甲基戊烷）在酸性环境下萃取出，并且在275nm时有最大的吸收值，用紫外分光光度法测定。
2、药品及仪器
药品：
（1）异辛烷
（2）6mol/L盐酸溶液
仪器：
紫外分光光度计、1台离心机/四桌、2支5ml离心管/人，分液漏斗/人，恒温水浴锅，具塞三角瓶
3、测定步骤：
（1）样品预处理
①麦汁或嫩啤酒通过15分钟3000转/分钟离心澄清。
（勿过滤）
②啤酒通过摇晃除二氧化碳。
（2）10ml已制备好的样品在20ºC下恒温。
（如果是麦汁，则5ml麦汁加5ml水），加到三角瓶中，加入0.5ml6N盐酸，20ml异辛烷，拧紧三角瓶的盖，在20ºC下恒温振摇至液体完全混匀，将液体全部转入分液漏斗中，静置分层，弃去下层清液，将上层液体分多次转入离心管中，3000转/分钟离心25分钟，取上层异辛烷层在275nm下通过紫外分光光度计测量吸收值.
4、计算
结果：
BE=测定值*50（麦汁BE=测定值*100）
正常值：
啤酒：
10-40BE 麦汁：
20-60BE
实验五、啤酒双乙酰的测定
1原理
邻苯二胺与双乙酰反应，生成2，3-二甲喹喔啉，在335nm下有一最大吸收，可对双乙酰进行定量测定。
由于其它联二酮类具有相同的反应特性，因此上述测定结果为总联二酮含量。
2试验方法
1）仪器
（1）紫外分光光度计。
（2）带有加热套管的双乙酰蒸馏器。
（3）具有锥形瓶（或平底蒸馏烧瓶）的蒸汽发生瓶：
2000mL（或3000mL）。
2）试剂
（1）盐酸溶液[c（HCl）=4mol/L]。
（2）邻苯二胺溶液（10g/L）：
称取0.100g邻苯二胺溶于盐酸溶液[c（HCl）=4mol/L]中，并定容至10mL，摇匀，放于暗处，当天使用。
（3）有机硅消泡剂（或甘油聚醚）。
3）试验程序
（1）蒸馏：
将双乙酰蒸馏器装好，加热蒸汽发生瓶，使水至沸，通汽预热后，置25mL容量瓶于冷凝器下口，外加冰浴冷却，加2～4滴消泡剂于100mL量筒中，再注入未经除气的预先冷至5℃左右的酒样100mL，迅速加入已预热的蒸馏器内，并用少量水冲洗带塞漏斗，盖塞。
然后用水封口，进行蒸馏，直至蒸馏液接过25mL时（蒸馏需在3～5min内完成），取下容量瓶，用水定容至刻度，摇匀。
（2）显色与测量：
分别吸取蒸馏液10.00mL于两支比色管中，并于第一支管中加入0.5mL邻苯二胺溶液，第二支管中不加（作空白）充分摇匀后，同时置于暗处放置20～30min，然后于第一支管中加2mL盐酸溶液[c（HCl）=4mol/L]，于第二支管中加入2.5mL盐酸溶液[c（HCl）=4mol/L]，混匀后，于335nm波长下，用20mm比色皿，以空白调零点，测定其吸光度。
比色测定操作须在20min内完成。
3、计算
X4=A335×1.2
式中：
X4——双乙酰的含量，mg/L；
A335——在335nm波长下，用20mm比色皿测定的吸光度；
1.2——吸光度与双乙酰含量的换算系数。
所得结果应表示至二位小数。
4、结果的允许差
同一样品的两次平行测定值之差，不得超过0.01mg/L。
实验六、淀粉的测定
方法：
酸水解法
1．原理
样品经乙醚除去脂肪、乙醇除去可溶性糖类后，用酸水解淀粉为葡萄糖，按还原糖测定方法测定还原糖含量，再折算为淀粉含量。
2．试剂
①乙醚。
②85％乙醇。
③6mol/L盐酸溶液；
④10%氢氧化钠溶液；
⑤40%氢氧化钠溶液；
⑥0.2%甲基红乙醇溶液：
称取0.1g甲基红,用60%乙醇溶解并定容到100ml.
⑦中性乙酸铅溶液。
⑧10%硫酸钠溶液。
⑨6mol/l的盐酸,20%NaOH溶液
⑩碱性酒石酸铜甲液:
称取15g硫酸铜（CuSO4.5H20）及0.05g次甲基蓝，溶水中并稀释至1000ml。
⑩碱性酒石酸铜乙液：
称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中再加4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml，储存与橡皮塞玻璃瓶中。
0.1%葡萄糖标准溶液：
精密称取1.000g经过99℃±1℃干燥至恒重的分析纯葡萄糖，加水溶解后移入1000ml容量瓶中，加入5ml盐酸（防止微生物生长），用水稀释到1000ml。
3.设备
水浴锅、温度计、漏斗架、电炉、三角瓶、冷凝管
4．操作步骤
（1）样品处理
粮食、豆类、糕点、饼干、糕干粉、代乳粉等较干燥、易研细的样品称取2～5g（含淀粉0.5g左右）磨碎、过40目筛的样品，置于铺有慢速滤纸的漏斗中，用30ml乙醚分三次洗去样品中的脂肪，再用150ml85％乙醇分数次洗涤残渣以除去可溶性糖类。
以100ml水把漏斗中残渣全部转移至250rnl锥形瓶中。
蔬菜、水果、粉皮、凉粉等水分较多，不易研细、分散的样品先按1：
1加水在组织捣碎机中捣成匀浆。
称取5～10g（含淀粉0.5g左右）匀浆于250ml锥形瓶中，加30ml乙醚振荡提取脂肪，用滤纸过滤除去乙醚，再用30ml乙醚分二次洗涤滤纸上残渣，然后以150ml85％乙醇分数次洗涤残渣，以除去可溶性糖类。
以100ml水把残渣转移到250ml锥形中。
（2）水解
于上述250rnl锥形瓶中加入30ml盐酸，装上冷凝管，置沸水浴中回流2h。
回流完毕，立即用流动水冷却。
待样品水解液冷却后，加人两滴甲基红，先用40％氢氧化钠调到黄色，再用6mol／L盐酸调到刚好变为红色，再用10％氢氧化钠调到红色刚好褪去。
若水解液颜色较深，可用精密PH试纸测试，使样品水解液的PH值约为7。
然后加入20ml20％乙酸铅，摇匀后放置10min，以沉淀蛋白质、果胶等杂质。
再加入20ml10％硫酸钠溶液，以除去过多的铅，摇匀后用水转移至500ml容量瓶中，加水定容，过滤，弃去初滤液，收集滤液供测定用。
；
空白试验取100ml水和30ml6mol／L盐酸于锥形瓶中，按上述方法操作，得试剂空白液。
（3）样品测定按还原糖测定法中的直接滴定法进行。
（4）结果计算
②直接滴定法
淀粉（％）＝
式中 Ｆ—一1０m碱性酒石酸铜相当的葡萄糖量，mg；
V—一滴定时样品水解液消耗量，ml；
Ｖ0—一滴定时空白溶液消耗量，ｍl。
其他同上①。
（5）说明与讨论
①样品含脂肪时，会妨碍乙醇溶液对可溶性糖类的提取，所以要用乙醚除去。
脂肪含量较低时，可省去乙醚脱脂肪步骤。
②盐酸水解淀粉的专一性较差，它可同时将样品中的半纤维素水解，生成一些还原物质，引起还原糖测定的正误差，因而对含有半纤维素高的食品如食物壳皮、高粱、糖等，不宜采用此法。
③样品中加入乙醇溶液后，混合液中乙醇的含量应在80％以上，以防止糊精随可溶性糖类一起被洗掉。
如要求测定结果不包括糊精，则用10％乙醇洗涤。
④因水解时间较长，应采用回流装置，并且要使回流装置的冷凝管长一些，以保证水解过程中盐酸不会挥发，保持一定的浓度。
⑤水解条件要严格控制。
加热时间要适当，既要保证淀粉水解完全，又要避免加热时间过长，因为加热时间过长，葡萄糖会形成糠醛聚合体，失去还原性，影响测定结果的准确性。
对于水解时取样量、所用酸的浓度及加入量、水解时间等条件，各方法规定有所不同。
常见的水解方法还有：
混合液中盐酸的含量达1％，100℃水解4h；混合液中盐酸含量达2％，100℃水解2.5h。
在本法的测定条件下，混合液中盐酸的含量为5%。
实验七、白酒中总酸的测定
1原理
白酒中有机酸以酚酞为指示剂,采用氢氧化钠进行中和滴定,其反应式为:
RCOOH+NaOH──RCOONa+H2O
2试验方法
（3）试剂
1%酚酞指示液:
称取酚酞1.0g,溶于60mL乙醇中,用水稀释至100mL。
0.1mol/L氢氧化钠标准溶液配制
0.1mol/L氢氧化钠标准溶液配制标定：
称取于105～110℃烘至恒重的基准苯二甲酸氢钾0.6g（称准至0.0002g）,溶于50mL不含二氧化碳的水中,加入酚酞指示液2滴,以新制备的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈微红色为其终点。
同时做空白试验。
c.计算
氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度（C）按式
（1）计算:
C=m÷[（V-V1）×0.2042]
式中:
c——氢氧化钠标准溶液浓度,mol/L;
m——基准苯二甲酸氢钾的质量;
V——滴定时,消耗氢氧化钠溶液的体积,mL;
V1——空白试验消耗氢氧化钠溶液的体积,mL;
0.2042——与1.00mL氢氧化钠标准溶液〔c（NaOH）=1.000mol/L〕相当的以克表示的苯二甲酸氢钾的质量。
3、试验程序
吸取酒样50.0mL于250mL锥形瓶中,加入酚酞指示液2滴;以0.1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至微红色,为其终点。
4计算
X=c×V×0.0601×1000÷50
式中:
X——酒样中总酸的含量（以乙酸计）,g/L;
c——氢氧化钠标准溶液浓度,mol/L;
V——测定时消耗氢氧化钠标准溶液的体积,mL;
0.0601——与1.00mL氢氧化钠标准溶液〔c（NaOH）=1.000mol/L〕相当的以克表示的乙酸的质量;
50.0——取样体积,mL。
5结果的允许差
同一样品两次测定值之差,不得超过0.006g/L,保留两位小数,报告其结果。
实验八、白酒中总酯的测定
第一法中和滴定（指示剂）法
1、原理
白酒中总酯的测定是先用碱中和游离酸，再加入一定量的碱使酯皂化，过量的碱用酸滴定。
2、试剂
1%酚酞指示液
0.1mol/L氢氧化钠标准溶液
0.1mol/L1/2HSO4标准溶液
3、仪器
全玻璃回流装置250mL。
4、试验程序
吸取酒样50.0mL于250mL具塞锥形瓶中,加入酚酞指示液2滴,以0.1mol/L氢氧化钠标准溶液中和（切勿过量）,记录消耗氢氧化钠标准溶液的毫升数（也可作为总酸含量计算）。
再准确加入0.1mol/L氢氧化钠标准溶液25.0mL,若酒样总酯含量高时,可加入50.0mL,摇匀,装上冷凝管,于沸水浴上回流半小时,取下,冷却至室温,然后,用0.1mol/L硫酸标准溶液进行反滴定,使微红色刚好完全消失为其终点,记录消耗0.1mol/L硫酸标准溶液的体积。
5计算
X=（25.0×c-c1×V）×0.088×1000÷50.0
式中:
X——酒样中总酯的含量（以乙酸乙酯计）,g/L;
c——氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度,mol/L;
25.0——皂化时,加入0.1mol/L氢氧化钠标准溶液的体积,mL;
c1——硫酸标准溶液的摩尔浓度,mol/L;
V——测定时,消耗0.1mol/L硫酸标准溶液的体积,mL;
0.088——与1.00mL氢氧化钠标准溶液〔c（NaOH）=1.000mol/L〕相当的以克表示的乙酸乙酯的质量;
50.0——取样体积,mL。
6、结果的允许差
同一样品两次测定值之差,不得超过0.006g/L,保留两位小数,报告其结果。
实验九、白酒中总醛的测定
（一）测定意义
白酒中醛类有甲醛、乙醛、丙醛、丁醛、糠醛等，它是发酵过程中醇的氧化产物。
醛类毒性较大，但适量的醛类对酒的香味却起着一定的作用。
甲醛、乙醛沸点比乙醇低，故去除酒头能除去大部分醛类。
五、白酒中总醛以乙醛计算。
（二）原理
醛类中羰基能与亚硫酸氢钠加成反应，过量的亚硫酸氢钠被碘氧化，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定。
（三）试剂
①0.05N硫代硫酸钠溶液（参考试剂1—14）
②0.05N亚硫酸氢钠溶液（试剂l—47）
③0.05N碘溶液（参考试剂1—23）
④0.5％淀粉指示剂（试剂1—16）
（四）测定步骤
吸取50毫升酒样，置人250毫升碘量瓶中，准确加人20毫升0.05N亚硫酸氢钠溶液，于暗处反应半小时，并经常摇动。
准确加入25毫升0.05N碘溶液，摇匀，立即用0.05N硫代硫酸钠溶液滴定至浅黄色，加约l毫升0.5％淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失。
同时作一空白试验，不加酒样，其余操作同上。
（五）计算
（六）讨论
1试剂亚硫酸氢钠极易分解，故用后必须密闭防潮。
所配的亚硫酸氢钠溶液2～3天后就会变质，故应新鲜配制。
配制后最好用0.05N碘溶液粗略标定，然后调整至所需浓库。
2由于亚硫酸氢钠的不稳定性，最好采用焦性亚硫酸钠（又称偏重亚硫酸钠Na2S2O5），其作用与亚硫酸氢钠相同。
实验十、糠醛的测定
糠醛是酒香的重要物质，不少好酒都含有一定量的糠醛，一船含量为0.002—0.003克／100毫升左右。
1、原理
苯胺与盐酸反应，生成盐酸苯胺，盐酸苯胺与糠醛反应，生成樱桃红色化合物，以比色法测定。
2、试剂与仪器
盐酸（1：
125）：
取密度1.19HCL315ml用水稀释至500ml.
无色苯胺:
若有颜色，须重蒸,沸点184℃。
50%乙醇溶液
标准糠醛（10ug/ml）：
吸取0.87ml糠醛，用50%乙醇溶液稀释至100ml，得到（10mg/ml）的糠醛，吸取1ml糠醛，用50%乙醇稀释至100ml，得到（100ug/ml），吸取10ml用50%乙醇稀释至100ml，即得到糠醛（10ug/ml）。
3、测定步骤
①标准系列的制备
a.在50ml比色管中，按下表加入各溶液。
编号
0
1
2
3
4
5
6
标准糠醛
ml
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
6.0
10ug/ml糠醛
ug
0
10
20
30
40
50
60
50%乙醇（v/v）
ml
25
24
23
22
21
20
19
B、加1ml苯胺；
C、加0.25ml密度1.125盐酸，摇匀。
D、室温下显色15min。
②试样管的制备：
取Vml加入水至10ml。
加15ml50%（V/V）乙醇液。
注：
由于显色反应的灵敏度与酒精度有关，标准管为50%，所以，
酒度低于50%（V/V）的试样，用无水乙醇调整至50%，
如：
酒度为40%，取10ml试样。
加入无水乙醇的量为：
10×40%+V=（10+V）×50%
以下同标准管操作。
③比色：
波长：
510nm，以“0”号管为参比。
4、计算
糠醛（ug/ml或ppm）=c/v
C-----试样管中含糠醛的微克数；
V-----试样毫升数。
注意事项：
1温度最好控制在15～20℃，放置15min。
2显色时间应与标准管一致，因随时间颜色加深，随后又减弱。
3加入密度为1.125HCl液时须摇动均匀，否则颜色较浅。
实验十一、甲醇
1原理
甲醇经氧化成甲醛后，与品红亚硫酸作用生成蓝紫色化合物，与标准系列比较定量。
最低检出量为0.02g/100mL。
2试剂
（1）高锰酸钾-磷酸溶液：
称取3g高锰酸钾，加入15mL磷酸（85%）与70mL水的混合液中，溶解后加水至100mL。
贮于棕色瓶内，防止氧化力下降，保存时间不宜过长。
（2）草酸-硫酸溶液：
称取5g无水草酸（H2C2O4）或7g含2分子结晶水草酸（H2C2O4·2H2O），溶于硫酸（1+1）中至100mL。
（3）品红-亚
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