推荐下载关于酒制甘肃丹参的炮制工艺研究.docx
《推荐下载关于酒制甘肃丹参的炮制工艺研究.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《推荐下载关于酒制甘肃丹参的炮制工艺研究.docx（29页珍藏版）》请在冰点文库上搜索。
推荐下载关于酒制甘肃丹参的炮制工艺研究
[键入文字]
关于酒制甘肃丹参的炮制工艺研究
【编者按】：
医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果
的论说性文章。
论文网为您提供医药论文范文参考，以及论文写作指导和格式排版要
求，解决您在论文写作中的难题。
关于酒制甘肃丹参的炮制工艺研究
作者：
宋平顺,杨树声,马真金,郭永福
【摘要】目的以甘肃丹参中脂溶性成分、水溶性成分为指标,通过正交试验探讨酒
制甘肃丹参的炮制工艺。
方法采用高效液相色谱法,以脂溶性成分、水溶性成分含量为
指标,通过正交设计筛选炮制工艺。
结果水提取对脂溶性成分转移率仅为2.4%,实际意
义不大;而对水溶性成分丹酚酸B含量有显著影响,最佳工艺条件为10%的黄酒,加20%
的酒量,在80℃炒炙4min。
结论选择最佳炮制工艺对于酒制甘肃丹参的制备较为合
理。
1
[键入文字]
【关键词】甘肃丹参;炮制工艺;正交试验;丹酚酸B;高效液相色谱法
Abstract：
ObjectiveWithfat-solubleingredientsandwater-solublecomponentsas
indicators,toinvestigatetheprocessingtechnologyofwineGansuSalviabyorthogonaltest.
MethodWithfat-solubleingredientsandwater-solublecomponentsdeterminedbyHPLC,the
processingtechnologyofwineGansuSalviawasoptimizedbyorthogonaltest.ResultThe
transferrateoffat-solubleingredientswithwaterextractionwas2.4%,withlittlesignificance,
whileithadasignificantimpactonsalvianolicacidB.Thebestprocessconditionwas10%
yellowricewine,added20%wine,friedin80℃for4min.ConclusionItwasreasonableto
choosethebestprocessconditionforwineGansuSalvia.
Keywords：
GansuSalvia;processingtechnology;orthogonaltest;Salvianolicacid;HPLC
甘肃地产丹参药材商品习称甘肃丹参,来源于唇形科鼠尾草属植物甘西鼠尾草
SalviaprzewalskiiMaxim.、褐毛甘西鼠尾草SalviaprzewalskiiMaxim.var.mandarinorum
（Diels）Stibal的根及根茎[1],作为丹参代用品,应用历史悠久[2]。
目前,甘肃丹参酒制法多
为经验操作,选择的辅料、用量、火候等缺乏规范的工艺参数,导致饮片质量不易控制。
本研究以脂溶性成分、水溶性成分的含量为指标,采用正交试验设计,探讨酒制甘肃丹参
的最佳炮制工艺;并且依据其变化对有关炮制方法和炮制机理进行探讨,为酒制甘肃丹参
生产工艺及临床疗效提供依据。
2
[键入文字]
1仪器与试药
美国Waters高效液相色谱仪（515型泵,717自动进样器,2487型紫外检测器）。
METFIJERAE240电子天平;超声波清洗器KQ2500（昆山市超声仪器有限公司）。
DGB/20-002台式干燥箱（重庆试验设备厂制造）;电子调温电热套（天津市泰斯特仪器有限
公司）;水浴锅（河南巩义市英峪予华仪器厂）;美的牌电磁炉（美的集团）。
丹参酮ⅡA（批号110766-200417）、丹参酮Ⅰ（批号0867-200003）、二氢丹参酮（批号
868-200002）、隐丹参酮（批号852-9903）、丹酚酸B（批号111562-200504）均由中国药品
生物制品检定所提供,供含量测定用。
甲醇、乙腈为色谱纯;水为纯净水;其余试剂为分
析纯。
辅料黄酒（酒精度分别5%、10%,浙江绍兴酒厂）、白酒（酒精度42%,甘肃省条
山酒厂）。
甘西鼠尾草SalviaPrzewalskiiMaxim.的根茎,野生品自采于岷县,经笔者严格
鉴定。
2方法与结果
2.1脂溶性成分含量测定[3]
2.1.1色谱条件大连伊利特C18色谱柱（4.6mm250mm,5?
m）。
流动相：
甲醇-水
3
[键入文字]
（80∶20）;流速：
1.0mL/min;检测波长：
270nm;进样量：
10?
L;柱温：
室温。
理论塔板
数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000。
2.1.2对照品溶液的制备精密称取8.44mg丹参酮ⅡA、5.17mg丹参酮Ⅰ、5.58mg
二氢丹参酮和4.10mg隐丹参酮对照品,分别置于100mL棕色量瓶中,加甲醇定容制成
对照品储备溶液。
2.1.3供试品溶液的制备精密称定甘肃丹参（过3号筛）0.3g,置具塞三角烧瓶中,精密
加甲醇50mL,称重,超声处理（功率250W,频率33kHz）40min,放冷,用甲醇补充减失的重
量,摇匀。
2.2水溶性成分含量测定[4]
2.2.1色谱条件大连伊利特C18色谱柱（4.6mm250mm,5?
m）。
流动相：
甲醇-冰醋
酸-水（20∶80∶1）。
二元梯度洗脱：
0min5min,甲醇10%;5min25min,甲醇10%
35%;25min45min,甲醇35%。
流速：
1.0mL/min;检测波长：
280nm;进样量：
10?
L;柱
温：
45℃。
理论塔板数按丹酚酸B峰计算应不低于4000。
2.2.2对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品8.25mg,置于10mL量瓶中,加甲
醇定容制成对照品储备溶液。
4
[键入文字]
2.2.3供试品溶液的制备取甘肃丹参样品（过3号筛）0.5g,精密称定,置50mL容量瓶
中,精密加水50mL,称定重量,90℃水浴回流90min,放冷,再称定重量,用水补足减失的
重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
2.3酒制甘肃丹参饮片的制备
取原药材,除去杂质,洗净,每隔1h均匀洒1次水,并翻匀,共洒水4～6次,使药材软化,
稍晾,切薄片,晾干,即得甘肃丹参饮片。
称取甘肃丹参饮片共9份,每份20g,分别置于9个容器中,按L9（34）正交表安排的9种
工艺,加入相应量的辅料,拌匀,闷润2h,置于电磁炉上的锅中,用相应温度炒至规定的时间
（电磁炉控温和定时）,晾干,置干燥容器内,备用。
另取5g饮片粉碎成粗粉,测得水分。
称取酒制甘肃丹参饮片10g,置具塞三角烧瓶中,加水40mL,闷润20min,置煤气炉加
热至沸,文火保持沸腾10min,取下,过滤;滤渣加水20mL,置煤气炉加热至沸,文火保持沸
腾10min,取下,过滤;合并两次滤液,定容至50mL,摇匀,即得酒制甘肃丹参饮片溶液。
2.4炮制工艺的优选与结果分析
5
[键入文字]
tips:
感谢大家的阅读，本文由我司收集整编。
仅供参阅！
【编者按】：
医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果
的论说性文章。
论文网为您提供医药论文范文参考，以及论文写作指导和格式排版要
求，解决您在论文写作中的难题。
双黄连颗粒中绿原酸含量的HPLC测定
作者：
张洪涛,蔡俊安,郭鑫慧
【摘要】目的采用高效液相色谱法测定双黄连颗粒中绿原酸的含量。
方法用外标
一点法,DiamonsilODS1C18色谱柱,甲醇-水-冰醋酸（15∶85∶1）为流动相,流速为1.0
mL/min,=324nm。
结果绿原酸在0.060～1.210g范围内呈良好线性,回归方程为
Y=105427X+586.43,r2=0.9995,平均加样回收率为99.3%,RSD=0.82%（n=6）。
结论本方
法简便、准确,专属性强,测定结果重复性好,为双黄连颗粒中绿原酸的定量分析提供了科
学有效的方法。
6
[键入文字]
【关键词】双黄连颗粒;绿原酸;高效液相色谱法;含量测定
Abstract：
ObjectiveToestablishthemethodfordeteminingthecontentofchlorogenic
acidinShuanghuanglianKelibyHPLC.MethodsUsingDiamonsilODS1C18column,with
methanol-water-glacialaceticacid（15∶85∶1）asthemobilephase,detectionwavelengthas
324nmandflowratewas1.0mL/min.ResultsThecalibrationcurvewaslinearattherange
of0.060～1.210gforchlorogenicacidandtheequationwasY=105427X+586.43,r2=0.999
5.Theaveragerecoverywas99.3%andRSDwas0.82%（n=6）.ConclusionThismethodwas
simple,accurateandproper,andthereduplicationoftheresultwasgood,whichprovide
scientificquantitativeanalysismethodofchlorogenicacidinShuanghuanglianKeli.
Keywords：
ShuanghuanglianKeli;chlorogenicacid;HPLC;contentdetermination
双黄连颗粒收载于2005年版《中华人民共和国药典》（一部）[1],处方由金银花、黄
芩、连翘组成,功能疏风解表、清热解毒,用于外感风热所致的感冒。
金银花为方中君
药。
原标准中只收载了黄芩的含量测定方法,没有君药金银花的成分含量测定方法,因此,
不能有效和全面地控制药品质量。
为了更好地控制双黄连颗粒的质量,提高双黄连颗粒
的质量标准,我们参照2005年版《中华人民共和国药典》（一部）中收载的双黄连片,采用
高效液相色谱（HPLC）法对金银花的主要成分绿原酸进行了含量测定,并进行了方法学研
究。
现报道如下。
7
[键入文字]
1仪器与试药
高效液相色谱仪：
SPD-10A日本岛津;紫外分光仪：
上海康化生化仪器制造厂;超声波
清洗器：
SK3200H上海科导超声仪器有限公司。
绿原酸对照品由中国药品生物制品检定所提供（批号110753-200413,供含量测定用）;双
黄连颗粒由河南百年康鑫药业有限公司提供（批号20081101、20081102、20081103）。
其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇-水-冰醋酸（15∶85∶1）为流动相,流速为
1.0mL/min,检测波长为324nm。
理论塔板数按绿原酸峰计算应不低于6000[1]。
2.2溶液的制备
8
[键入文字]
2.2.1对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量,精密称定,置于棕色量瓶中,加50%甲
醇制成每1mL含60L的溶液,即得对照品溶液。
2.2.2供试品溶液的制备取装量差异项下的本品,研细,取约0.4g,精密称定,置于50
mL的量瓶中,加50%甲醇适量,超声处理（功率135W,频率59kHz）20min。
放置至室温,
加50%甲醇至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2mL,置10mL量瓶中,加50%甲醇至刻
度,摇匀,滤过,取续滤液,即得供试品溶液。
2.2.3阴性样品的测试取缺金银花的样品,按供试品制备方法制备阴性样品后测定,在
绿原酸相应位置无峰出现,说明阴性样品的其他成分无干扰。
色谱图见图1。
图1双黄
连颗粒HPLC图谱注：
A.对照品;B.供试品;C.阴性样品
2.3线性关系的考察
取同一对照品溶液（60.51g/mL）,分别精密吸取1、2.5、5、10、20L注入液相色谱仪,
测定峰面积。
以峰面积积分值为纵坐标,绿原酸对照品进样量为横坐标绘制标准曲线,计
算回归方程为：
Y=105427X+586.43,r2=0.9995,表明绿原酸在0.060～1.210g之间呈良
好的线性关系。
9
[键入文字]
2.4精密度试验
取同一对照品溶液,重复进样6次,每次进样10L,测定绿原酸峰面积,结果RSD=0.14%,
表明精密度良好。
2.5重复性试验
取同一批号（批号20081101）供试品,按供试品溶液制备方法制备5份供试液,依法测定
每份样品中绿原酸的含量。
结果RSD=1.18%,表明本法重复性良好。
2.6稳定性试验
取同一批号（批号20081101）供试品,按2.2.2项下方法制备供试品溶液,分别在0、2、
4、6、8h测定峰面积,RSD=0.76%（n=5）。
表明制备的供试品溶液在8h内稳定。
2.7加样回收率试验
10
[键入文字]
tips:
感谢大家的阅读，本文由我司收集整编。
仅供参阅！
2.4.1正交试验设计参照全
国炮制规范中酒制方法和实际经验,选取影响较大的因素,采用正交试验法进行工艺优
选。
选取酒的种类（A）、酒的用量（B）、炒炙温度（C）、炒炙时间（D）,分别设3个水平,不
考虑交互作用,选用L9（34）正交表安排试验,因素水平见表1。
表1正交试验因素水平表
2.4.2试验方法按酒制甘肃丹参样品的方法制备饮片,再按L9（34）正交表安排的9种
工艺进行试验,每份试验重复2次,然后,取饮片按酒制甘肃丹参饮片溶液的制备方法,滤
液分别测定脂溶性成分、水溶性成分含量及转移率。
2.4.3脂溶性成分正交试验结果及分析测定丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮和隐
丹参酮4种成分的总量（?
g/g）,正交试验测定数据和统计结果见表2。
由于水提取对脂溶性成分转移率很低,实际意义不大。
含量极差分析认为,各因素的主
次顺序是ABC方差分析4因素的水平变化对总丹参酮转移率均没有显著影响（P
O.05）。
2.4.4水溶性成分正交试验结果及分析测定丹酚酸B含量,正交试验测定数据和统计
结果见表3,方差分析见表4。
11
[键入文字]
含量极差分析认为,各因素的主次顺序是ABCD,即酒种类酒的用量（%）炒炙温度
炒炙时间（min）,最佳的工艺条件定为A2B2C1D2,即10%的黄酒,加20%的酒量,在80℃
炒炙4min。
方差分析认为,因素A对结果有显著影响（P0.05）,因此,将酒的浓度确定为10%的黄酒
是必要的;而B、C和D对结果无显著影响,可任取一水平进行搭配。
表2脂溶性成分
L9（34）正交试验结果注：
转移率是炮制后与炮制前4种成分在提取液中总量的比率表3
水溶性成分L9（34）正交试验结果注：
转移率是炮制后与炮制前丹酚酸B成分在提取液
中总量的比率表4水溶性成分正交试验方差分析表
从表2与表3可以看出,水溶性成分的提取率显著高于脂溶性成分,因此,甘肃丹参以饮
片水煎入药时,对脂溶性成分可以忽略不计,亦不采用加权平均法计算其综合评分,直接以
水溶性成分的最佳的工艺条件定为A2B2C1D2,即10%的黄酒,加20%的酒量,在80℃炒
炙4min,作为提取工艺研究的考察指标。
2.4.5验证试验2次最佳工艺验证结果分别为18.01、17.85mg/g,丹酚酸B成分含量
高于试验组,说明所选工艺条件A2B2C1D2是最佳工艺。
3讨论
12
[键入文字]
3.1指标的选择与最佳工艺
甘肃丹参中的脂溶性成分、水溶性成分是与其药效作用密切相关的重要活性物质,在
进行正交试验时,笔者以两类成分作为考察酒制工艺的指标;为了使考察的结果更为贴近
实际,我们采用传统的用药方法即饮片煎煮。
由于脂溶性成分的煎出率非常低,实际意义
不大而忽略。
关于炮制品的最佳工艺,我们选择水溶性成分提取最佳工艺,即10%的黄
酒,加20%的酒量,在80℃炒炙4min。
3.2影响因素探讨
tips:
感谢大家的阅读，本文由我司收集整编。
仅供参阅！
方差分析表明,酒的种类影
响最显著,这与大多数文献报道相同;其次是酒的用量,而炒炙时间、炒炙温度影响较小。
传统炮制技术中关于炒制火候的规定为文火,较为含糊,实际操作全凭经验。
本研究采用
80、110、160℃进行炒炙,最佳工艺的炒炙温度为80℃,虽然与文献报道文火的温度掌
握在120～130℃有一定的差别,但80℃与110℃的煎出率、成品性状相似,160℃酒
炙品焦斑明显,甚至呈焦褐色,成品外观较差。
说明火候对酒炙品的质量影响较大。
3.3炮制对化学成分的影响
13
[键入文字]
从试验来看,炮制对各类成分的影响表现出一定程度的多向性,酒炙品水煎出物中脂溶
性成分的含量非常低,但其中的丹酚酸B明显高于生品（12.56mg/g）,可能是因为酒炙过
程改变了药物的物理性状,有利于丹酚酸B的浸润、溶解、扩散等,提高了其溶出率
[5]。
【参考文献】
[1]甘肃省食品药品监督管理局.甘肃省中药材标准[S].兰州：
甘肃文化出版
社,2009.72.
[2]赵建邦.甘肃丹参的研究与应用评价[J].中药材,2003,26（7）：
581.
[3]杨树声,宋平顺.丹参类药材脂溶成分HPLC测定[J].兰州大学学报（自然科学
版）,2009,35（4）：
61.
[4]杨树声,宋平顺.丹参类药材水溶成分HPLC测定[J].甘肃中医学院学
报,2008,23（6）：
43.
14
[键入文字]
[5]冉懋雄,郭建民.现代中药炮制手册[M].北京：
中国中医药出版社,
2002.133,147,282.
医药卫生栏目
tips:
感谢大家的阅读，本文由我司收集整编。
仅供参阅！
15
升级会员 