显微镜的使用及生物图谱.docx

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显微镜的使用及生物图谱

显微镜的使用及生物图谱

普通光学显微镜的使用方法

一、显微镜的主要构造

普通光学显微镜的构造主要分为三部分：

机械部分、照明部分和光学部分。

1.机械部分

（1）镜座：

是显微镜的底座，用以支持整个镜体。

（2）镜柱：

是镜座上面直立的部分，用以连接镜座和镜臂。

（3）镜臂：

一端连于镜柱，一端连于镜筒，是取放显微镜时手握部位。

（4）镜筒：

连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。

（5）物镜转换器（旋转器）：

接于棱镜壳的下方，可自由转动，盘上有3－4个圆孔，是安装物镜部位，转动转换器，可以调换不同倍数的物镜，当听到碰叩声时，方可进行观察，此时物镜光轴恰好对准通光孔中心，光路接通。

（6）镜台（载物台）：

在镜筒下方，形状有方、圆两种，用以放置玻片标本，中央有一通光孔，我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器（推片器），推进器左侧有弹簧夹，用以夹持玻片标本，镜台下有推进器调节轮，可使玻片标本作左右、前后方向的移动。

（7）调节器：

是装在镜柱上的大小两种螺旋，调节时使镜台作上下方向的移动。

①粗调节器（粗螺旋）：

大螺旋称粗调节器，移动时可使镜台作快速和较大辐度的升降，所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中，通常在使用低倍镜时，先用粗调节器迅速找到物象。

②细调节器（细螺旋）：

小螺旋称细调节器，移动时可使镜台缓慢地升降，多在运用高倍镜时使用，从而得到更清晰的物象，并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。

2.照明部分

装在镜台下方，包括反光镜，集光器。

（1）反光镜：

装在镜座上面，可向任意方向转动，它有平、凹两面，其作用是将光源光线反射到聚光器上，再经通光孔照明标本，凹面镜聚光作用强，适于光线较弱的时候使用，平面镜聚光作用弱，适于光线较强时使用。

（2）集光器（聚光器）位于镜台下方的集光器架上，由聚光镜和光圈组成，其作用是把光线集中到所要观察的标本上。

①聚光镜：

由一片或数片透镜组成，起汇聚光线的作用，加强对标本的照明，并使光线射入物镜内，镜柱旁有一调节螺旋，转动它可升降聚光器，以调节视野中光亮度的强弱。

②光圈（虹彩光圈）：

在聚光镜下方，由十几张金属薄片组成，其外侧伸出一柄，推动它可调节其开孔的大小，以调节光量。

3.光学部分

（1）目镜：

装在镜筒的上端，通常备有2－3个，上面刻有5某、10某或15某符号以表示其放大倍数，一般装的是10某的目镜。

（2）物镜：

装在镜筒下端的旋转器上，一般有3－4个物镜，其中最短的刻有“10某”符号的为低倍镜，较长的刻有“40某”符号的为高倍镜，最长的刻有“100某”符号的为油镜，此外，在高倍镜和油镜上还常加有一圈不同颜色的线，以示区别。

在物镜上，还有镜口率（N.A.）的标志，它反应该镜头分辨力的大小，其数字越大，表示分辨率越高，各物镜的镜口率如下表：

物镜镜口率（N.A.）工作距离（mm）10某0.255.4040某0.650.39100某1.300.11

表中的工作距离是指显微镜处于工作状态（物象调节清楚）时物镜的下表面与盖玻片（盖玻片的厚度一般为0.17mm）上表面之间的距离，物镜的放大倍数愈大，它的工作距离愈小。

显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积，如物镜为10某，目镜为10某，其放大倍数就为10某10=100。

二、显微镜的使用方法1.低倍镜的使用方法

（1）取镜和放置：

显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上，镜座后端距桌边1－2寸为宜，便于坐着操作。

（2）对光：

用拇指和中指移动旋转器（切忌手持物镜移动），使低倍镜对准镜台的通光孔（当转动听到碰叩声时，说明物镜光轴已对准镜筒中心）。

打开光圈，上升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼在目镜上观察（右眼睁开）,同时调节反光镜方向，直到视野内的光线均匀明亮为止。

（3）放置玻片标本：

取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部位调到通光孔的正中。

（4）调节焦距：

以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。

一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。

然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使镜台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。

如果物象不在视野中心，可调节推片器将其调到中心（注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的）。

如果视野内的亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节，如果在调节焦距时，镜台下降已超过工作距离（>5.40mm）而未见到物象，说明此次操作失败，则应重新操作，切不可心急而盲目地上升镜台。

2.高倍镜的使用方法

（1）选好目标：

一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。

（2）转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察（防止高倍镜头碰撞玻片），如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。

（3）调节焦距：

转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察，此时一般能见到一个不太清楚的物象，可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5－1圈，即可获得清晰的物象（切勿用粗调节器!

）

如果视野的亮度不合适，可用集光器和光圈加以调节，如果需要更换玻片标本时，必须顺时针（切勿转错方向）转动粗调节器使镜台下降，方可取下玻片标本。

3.油镜的使用方法

（1）在使用油镜之前，必须先经低、高倍镜观察，然后将需进一步放大的部分移到视野的中心。

（2）将集光器上升到最高位置，光圈开到最大。

（3）转动转换器，使高倍镜头离开通光孔，在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢转动油镜，在转换油镜时，从侧面水平注视镜头与玻片的距离，使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。

（4）用左眼观察目镜，并慢慢转动细调节器至物象清晰为止。

如果不出现物象或者目标不理想要重找，在加油区之外重找时应按：

低倍→高倍→油镜程序。

在加油区内重找应按：

低倍→油镜程序，不得经高倍镜，以免油沾污镜头。

（5）油镜使用完毕，先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦去，然后再用干擦镜纸擦干净。

三、显微镜使用的注意事项

1.持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势，不可单手提取，以免零件脱落或碰撞到其它地方。

2.轻拿轻放，不可把显微镜放置在实验台的边缘，以免碰翻落地。

3.保持显微镜的清洁，光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，机械部分用布擦拭。

4.水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台，如果沾污应立即擦净。

5.放置玻片标本时要对准通光孔中央，且不能反放玻片，防止压坏玻片或碰坏物镜。

6.要养成两眼同时睁开的习惯，以左眼观察视野，右眼用以绘图。

7.不要随意取下目镜，以防止尘土落入物镜，也不要任意拆卸各种零件，以防损坏。

8.使用完毕后，必须复原才能放回镜箱内，其步骤是：

取下标本片，转动旋转器使镜头离开通光孔，下降镜台，平放反光镜，下降集光器（但不要接触反光镜）、关闭光圈，推片器回位，盖上绸布和外罩，放回实验台柜内。

最后填写使用登记表。

（注：

反光镜通常应垂直放，但有时因集光器没提至应有高度，镜台下降时会碰坏光圈，所以这里改为平放）

四、正确安装的问题

六、正确使用准焦螺旋的问题

七、物镜转换的问题

八、正确用眼的问题

1.在载玻片的中央滴一滴曝气池混合液（注意：

曝气池取上的混合液最好沉淀30min后用胶头滴管吸取），加盖盖玻片后用滤纸将周围的水吸净擦干净后放到载物台上观察。

2.如果有气泡，可以用滴管在盖玻片一侧滴加清水，用吸水纸在另一侧吸引排出气泡。

3.载物台一定要保持水平，避免清水流出污染载物台。

十、生物处理系统污泥镜检项目及要求1.取样及镜检要求

1）常规镜检取样位置在曝气池出水口附近，水面下10cm左右为宜；当寻求把握曝气池整体污泥状况时，应选取多点取样方式，选取点应

具有代表性（包括厌氧区、缺氧区、好氧区、回流污泥口附近）。

2）采样应为曝气均匀的污泥混合液，或者是取样后在烧杯中静置10~15min的混合液下层污泥，建议镜检时取用均匀的混合液镜检。

3）为使镜检更具有真实性并保持污泥的活性，应在取样后30min内完成镜检。

2.镜检项目及描述

1）菌胶团密实度、大小、形状；2）丝状菌丰度、长度、种类；3）微生物相：

即微生物种类，一般泥样中可能出现的微生物有轮虫、钟虫、楯纤虫、肾形虫、吸管虫、漫游虫、线虫、游仆虫、变形虫、游离细菌等；有时还有水蚤等大型动物。

注：

根据微生物相，可大致判断泥龄及生物处理系统处理程度，这需要日积月累的观察形成自己的经验来判断；判断种类后，还应分辨和记录该种微生物所属的种类（比如，钟虫，包括小口钟虫等几种类别，记录时应记录是小口钟虫）。

附件：

生物观察相

【名称】裂口虫（Amphileptu）本体长：

120---150微米【分类】中间性活性污泥类原生动物本体宽：

35---45微米

【形态】体形侧扁呈烧瓶状，前端有一微向侧弯的长“颈”，胞口在“颈”的腹缘，裂缝状；全身纤毛分布均匀，沿裂缝状的胞口处有较长的纤毛；体质较透明，伸缩泡分布不规则。

【名称】沟内管虫（Etoiphon）本体长：

25---30微米【分类】中间性活性污泥类原生动物本体宽：

18---22微米

【形态】身体呈宽阔的卵圆形，前端平直或少许下陷，后端浑圆，背腹面扁平，表膜比较坚硬而不大会改变形状；具有7或8根纵长的沟；胞口位于前端下陷处，有管状的胞咽，两根同样细长的鞭毛从靠近胞口处伸出，一根总是在前方划动，另一根拖在后面，可能有滑翔作用

【生态】沟内管虫很可能是依靠植物式腐生性营养进行生活的，它是否能吞食细菌尚未有定论；它的出现处理水BOD多半较低，沟内管虫已接近活性污泥类原生动物。

【图片】：

【名称】尖毛虫（O某ytricha）本体长：

30---156微米【分类】中间性活性污泥类原生动物本体宽：

54---65微米

【形态】身体呈长的卵形，比较柔软而容易变动，体长约为体宽的2.5倍，前端三分之一细狭，从此向后浙膨大，腹面扁平背面或多或少凸出；口缘区较大，前触角8根，5根在前，另3根倾斜排列成行；腹触毛5根，臀触毛5根；内质含有少量食泡。

【生态】以细菌，单细胞绿藻，和小型鞭毛虫为食物；生态耐性较强，对寡污性或中污性水均能忍受；在活性污泥中出现不多，与游仆虫相比尖毛虫出现在处理水BOD较高的时候，是中间性活性污泥类原生动物。

【图片】：

【名称】楯纤虫（Apidica）【分类】活性污泥类原生动物

【本体】体长：

25-40微米体宽：

18-29微米

【形态】体形小，甲呈三边的圆形，前端最狭小，后端最宽阔而平直，少许钝圆，背面凸出，前触毛4根，倾斜的列成一行，腹触毛3根，列在前半部，臀触毛5根，相当长而细，倾斜的排列在后部。

【生态】以细菌为食物，生态范围较广，但对化学物质极为敏感，可作为有毒物质判定的生物指标。

楯纤虫可作为水质处理良好的指示生物，大量出现时，处理水BOD大多在15㎎/l以下。

但楯纤虫过多时，2000个/ml以上，不断地在活性污泥翻来翻去，也会影响污泥的沉降效果。

【图片】

【名称】游仆虫（Euploteeurytomu）【分类】活性污泥类原生动物

【形态】身体坚实，不会弯曲或改变形状，系宽阔的椭圆形，背面或多或少凸出，腹面扁平，后半部比前半部少许狭一些，后部浑圆，口缘区相当大而长，前触毛有7根，臀触毛5根，尾触毛4根，伸缩泡位于后半部右侧，大核呈很长的带形。

【生态】主要以鞭毛虫和纤毛虫为食料，有时也吞食单细胞藻类。

经常出现在较低BOD负荷时候，此时，处理后出水质BOD通常在10㎎/l左右，是活性污泥类原生动物。

【图片】

【名称】小口钟虫（Vorticellamicotoma）【分类】活性污泥类原生动物

【本体】长：

32-70微米宽：

22-48微米口围直径：

12-25微米柄长：

20-380微米【形态】本体近似圆形，但它的长度通常仍显著地超过宽度，前端口围小而狭，膨大的中部最宽阔，从中部向前后两端逐渐细削，具有纤毛的口圆盘略小于口围。

内质呈乳白色或淡褐色，经常含有相当多的食泡，柄比较细长，柄内内有肌丝轴鞘，受到刺激时会伸缩。

以单独生活为主，很少有丛生习惯，游泳体呈瘦长的圆筒形，行动迅速。

【生态】以细菌为主要食料，同时也会掠食微型单细胞藻类，它最适宜的温度是25℃，若在35℃以上则会形成包裹或畸形，最后死亡，大量出现在处理水质较好的情况下，BOD多半在20㎎/l以下。

【图片】

【名称】沟钟虫（Varticellaconrallaria）【分类】活性污泥类原生动物

【本体】长：

55---105微米宽：

35---58微米口围直径：

55---75微米柄长：

100---550微米

【形态】体形比较长的钟虫，也有近似圆筒形的，少数比较粗糙。

前端口围边缘较本体更宽阔，后端则向着柄逐渐细削，具有纤毛的口围盘大小和口围内缘相适应。

内质含有不少卵圆形的食泡，往往带一些黄色。

柄粗细适中，但相当长，柄内内有肌丝轴鞘，受到刺激时会伸缩。

很少单独生活，喜欢在一起丛生。

游泳体呈粗壮的圆筒形，行动迅速。

【生态】以细菌为食料，有时亦兼食单细胞藻类，大量出现在处理水质良好的时候，处理水BOD在15㎎/l以下。

【图片】

【名称】跳侧滴虫（Pleuromona）【分类】非活性污泥类原生动物

【本体】本体长6---10微米本体宽3---5微米

【形态】身体很小，一般呈肾形,两端浑圆，具有２根鞭毛．短一些的一根鞭毛无休止的摆动，对溶解氧缺乏比较敏感,在显微镜下观察时作很快的旋转行动。

【生态】滴虫以细菌为主要食料，就生态环境来讲适合在中污性和多污性的水体．大量的游离细菌在水中是其大量繁殖的基础条件，所以它的大量出现往往是高污泥负荷，污泥解体，菌胶团分解，处理水质透明度降低，COD，BOD指标上升。

【图片】

【名称】波豆虫（Bodo）【分类】非活性污泥类原生动物

【本体】本体长11----15微米本体宽5-----7微米

【形态】身体很小,呈卵圆形，前端有一少许弯转的突出“尖角”，后端浑圆。

两根鞭毛起源于前端从胞口内伸出。

鞭毛是活动器官同时也是食物收集器官，因此其活动性很强。

【生态】主要以细菌为食料，就生态习性而言它是a-中污性和多污性的种类。

是非活性污泥类原生动物的代表，经常出现在ＢＯＤ负荷高并且溶解氧低的时候，它若数量上占优势则处理水浑浊，多半ＢＯＤ在３０mg/l以上。

【图片】

【名称】草履虫（Parmecium）

【分类】非活性污泥类原生动物本体长180---300微米本体宽42---75微米【形态】草履虫在原生动物中属体形较大的一种，身体呈圆筒形,后半中间最宽阔，前半部腹面有一下凹的口沟，中沟底部有一椭圆形的胞口。

身体周围都均匀地布满着纤毛．后端的若干纤毛少许长一些；表膜下面外质比较透明，内质充满着颗粒状物质，食物泡比较多，伸缩泡两个一个位于体长四分之一处，另一个位于体长四分之三处。

【生态】其主要以细菌为食料，最适宜的生态环境是中污性和多污性．大量出现在几乎测不出溶解氧浓度的环境中,在活性污泥中每当净化程度较差的时候它会较多的出现．【图片】