机能试验学试验项目单科试验和综合试验剌激.docx

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机能试验学试验项目单科试验和综合试验剌激

第二篇机能实验学实验项目

第一章单科实验和综合实验

第一节剌激强度、频率与骨骼肌收缩的关系

【实验目的和原理】

通过本实验了解剌激强度、频率与骨骼肌收缩幅度之间的关系，掌握阈剌激、阈上剌激和最大剌激等基本概念；熟悉并掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备方法。

活的可兴奋组织具有对剌激发生反应的能力，即兴奋性。

但刺激要引起组织兴奋必须具备三个条件，即剌激强度、剌激持续时间和强度一时间变化率在一定的范围内。

本次实验固定后两个条件，观察改变剌激强度对骨骼肌收缩的影响。

不同种类的组织，其兴奋性高低不一，同一种组织的不同单位其兴奋性的高低也不相等。

就一根骨骼肌纤维来说，只要剌激强度达到一定的阈值，就可引起肌纤维收缩。

低于阈值的剌激不引起反应，超过阈值的剌激，并不能增加反应，它对剌激的反应是“全或无”式的。

但是，对于整块肌肉来说就不一样了。

如腓肠肌是由许多肌纤维组成的，各条肌纤维的兴奋性并不相同，因此，用单个剌激直接（或通过神经间接）剌激腓肠肌时，如剌激强度太弱，则不能引起肌肉收缩，只有当剌激强度达到一定数值时,才能引起肌肉收缩。

这种刚能引起最小反应的最小剌激强度称阈强度，而刚达到阈值强度的剌激叫做阈剌激。

阈剌激引起的肌肉收缩称为阈收缩。

以后，随着剌激强度的增加，肌肉的收缩也相应地逐步增大，这种高于阈值的剌激称为阈上剌激。

当剌激增大到某一强度时，肌肉将出现最大的收缩反应。

此时，如再继续增大剌激强度，肌肉的收缩却不再增大，这种能使肌肉发生最大收缩反应的最小剌激强度称为最大强度。

这种强度的剌激称为最大剌激。

最大剌激引起肌肉收缩称最大收缩。

可见，在一定范围内，骨骼肌收缩的大小与剌激强度呈正变关系。

这是剌激与组织反应之间的一个普遍规律。

不同的刺激频率可使骨骼肌出现不同的收缩形式。

如果刺激频率较低，每个刺激间的间隔时间大于肌肉收缩期和舒张期的时间,则肌肉出现一连串的单收缩。

随着刺激频率的增加,当新的剌激引起的收缩到来时,落在前一次剌激引起的单收缩的舒张期内,于是肌肉连续在尚未完全舒张的基础上出现新的收缩,表现为锯齿形的收缩曲线,称为不完全强直收缩。

随着剌激频率的进一步增加,新的剌激引起的收缩到来时,落在前一次收缩的收缩期内,于是肌肉处于持续收缩状态，产生完全强直收缩。

【实验对象】

蟾蜍或蛙

【实验器材和药品】

蛙板、蛙钉、探针、镊子、粗剪刀、玻璃针、棉线、任氏液、滴管、MedLab生物信号采集处理系统、张力换能器、地线、剌激输出线、肌动器、细塑料管。

【实验步骤】

1.制备坐骨神经腓肠肌标本:

（1）破坏脑脊髓。

（2）剪除躯干上部及内脏。

（3）剥皮。

（4）将手及用过的剪子、镊子等全部手术器械用自来水洗净，再进行以下操作。

（5）分离两腿：

用镊子从背位夹住脊柱将标本提起，剪去向上突出的骶骨（注意勿损伤坐骨神经），然后用粗剪刀沿正中线将脊柱分为两半并从耻骨联合中央剪开两侧大腿，使其两腿完全分离，将两腿浸于盛有任氏液的培养皿中。

（6）游离坐骨神经：

取一后肢，腹面向上，于脚趾部位用大头针将标本固定在蛙板上，沿脊柱侧用玻璃针分离坐骨神经，然后用玻璃针轻轻勾起坐骨神经，逐一剪断其神经分支，用粗剪刀剪断脊柱，保留一块与坐骨神经相连的脊椎骨。

再将标本背侧向上固定于蛙板上，用镊子提起梨状肌并剪断，再沿坐骨神经沟（股二头肌及半膜肌之间的裂隙处）分离出大腿部的坐骨神经，并用玻璃针轻轻勾起坐骨神经干，剪断所有的神经分支，一直游离至腘窝部为止。

（7）用镊子夹住连有坐骨神经的脊椎骨，将神经搭于腓肠肌上，用剪子将膝关节周围的大腿肌肉剪除，将膝关节上方的股骨刮干净，暴露其股骨，于膝关节上1cm处用粗剪刀剪断，保留部分就是坐骨神经小腿标本。

（8）将上述坐骨神经小腿标本在跟腱处穿线结扎并剪断结扎线以下靠近脚趾端的跟腱。

左手提起结扎线，右手用玻璃分针游离腓肠肌至膝关节处，用粗剪刀于膝关节处将小腿其余部分全部剪掉，即制备出一个具有附着在股骨上的腓肠肌和带有支配腓肠肌的坐骨神经标本。

（9）检查标本的兴奋性：

用经任氏液湿润的锌铜弓短暂接触坐骨神经，若标本的兴奋性良好，此时肌肉则发生明显而灵敏的收缩，即可将标本放入盛有任氏液的培养皿中，以备做实验之用（若无锌铜弓也可用中等强度单个电脉冲剌激检查标本的兴奋性）。

2.实验装置与仪器连接

（1）固定坐骨神经腓肠肌标本：

将标本的股骨端插入肌动器的固定骨的螺旋孔内，并旋紧螺旋，使腓肠肌位于股骨的上方。

（2）连结实验装置线路：

将张力换能器固定在铁支架上肌动器的上方，将腓肠肌腱上的结扎线与换能器输入端的弹片连接，此连线不宜太紧或太松，并与地面垂直。

坐骨神经置于肌动器剌激电极上，接线柱的引线与MedLab生物信号采集处理系统的剌激“输出”相连。

（3）仪器操作：

启动MedLab生物信号采集处理系统,点击菜单“实验/常用生理学实验”，选择相应的实验名，调用已设置好仪器参数的文件，开始采样观察。

【观察项目】

（1）单刺激对肌肉收缩的影响：

菜单选择“刺激强度对骨骼肌收缩的影响”实验，观察肌肉单收缩的波形，辨认收缩期和舒张期。

当剌激强度达到一定数值时，肌肉便出现微弱的收缩，在屏幕上记录到一次收缩曲线，即阈收缩，此时所用的剌激强度为阈剌激。

（2）阈上刺激与肌肉收缩：

待肌肉完全松弛后，增加剌激强度，肌肉收缩的幅度将随着剌激强度的增加而增大，在屏幕上描记出比以前高的收缩曲线。

按此法依次进行，观察肌肉收缩的幅度与剌激强度的关系。

（3）最大剌激与肌肉收缩：

当剌激强度增加到一定数值后，肌肉收缩的幅度不再随剌激强度的增加而增大，此时的剌激强度为最大剌激，肌肉的收缩为最大收缩。

（4）连续刺激对肌肉收缩的影响：

菜单选择“刺激频率对骨骼肌收缩的影响”实验，用前面的最适刺激强度，观察5Hz、10Hz、15Hz、20Hz、25Hz、30Hz、35Hz、40Hz、45Hz、50Hz刺激频率时肌肉出现的复合收缩和强直收缩波型变化。

将观察到的实验结果打印输出或描画于实验报告上。

【注意事项】

（1）制备神经肌肉标本时不要过度牵拉神经；用玻璃针分离神经；股骨应适当留长一些，以便固定。

（2）实验过程中每次剌激之后须待肌肉松弛后再给下一个剌激，并给标本滴加任氏液，以保持其湿润。

（3）如刺激神经效果不好，可直接刺激肌肉。

【思考题】

1.随着刺激强度的增加，肌肉收缩有何变化？

为什么？

2.随着刺激频率的增加，肌肉收缩形式有何变化？

为什么？

3.为什么刺激频率增加，肌肉收缩的幅度也增大？

4.肌肉收缩可以融合，肌肉的动作电位是否也可融合？

为什么？

第二节骨骼肌兴奋-收缩耦联及脱耦联现象观察

[实验目的和原理]

观察骨骼肌兴奋和收缩之间的关系,掌握记录离体骨骼肌动作电位和机械收缩的方法。

用适宜的电脉冲直接刺激离体的骨骼肌或间接刺激其运动神经时,将引起肌肉发生动作电位和机械收缩。

肌肉的机械收缩经换能装置可与动作电位同步显示。

肌肉的电位变化和机械收缩之间存在耦联过程。

把肌纤维兴奋和肌纤维收缩连接起来的中介过程称为兴奋-收缩耦联。

其结构基础是三联管结构，耦联因子是Ca2+。

用高渗甘油对骨骼肌的横管膜进行选择性破坏后,可出现兴奋-收缩脱耦联,即在肌肉表面可记录到动作电位,但肌肉并不收缩。

【实验对象】

蟾蜍或蛙。

[实验器材和药品]

MedLab生物信号采集处理系统,蛙类手术器械,肌动器,万能支架,双凹夹,张力换能器,记录电极,培养皿,锌铜弓，任氏液,高渗甘油。

【实验步骤】

1.坐骨神经腓肠肌标本的制备,见第一节。

2．实验装置的连接和使用:

将标本的股骨断端固定于肌动器;标本的肌腱引线连接到张力换能器的横臂梁上,使肌肉的长度约为原长的1.2倍;将坐骨神经搭在肌动器的一对刺激电极上;引导电极接触肌肉表面。

做电-机械变化的同步描记。

启动MedLab生物信号采集处理系统,点击菜单“实验/常用生理学实验”，选择“骨骼肌兴奋时的电话动与收缩的关系”实验，调用已设置好仪器参数的文件，开始采样观察。

【观察项目】

1.给标本单个电刺激,观察肌肉动作电位后是否出现收缩反应,仔细观察动作电位与机械收缩之间的时间关系。

2.取下标本,将其腓肠肌浸泡在高渗甘油任氏液中15-20min,当肌肉外观出现皱折时用锌铜弓刺激标本的神经,如肌肉无收缩反应,再将标本浸泡在任氏液中5-10min,然后重复上项观察。

（或在剌激标本,观察腓肠肌的单收缩曲线和动作电位波形稳定后,用浸泡甘油的棉花盖于腓肠肌上,每隔30s刺激坐骨神经一次。

观察经过多少分钟后,只出现动作电位,而不出现腓肠肌收缩）。

将观察到的实验结果打印输出或描画于实验报告上。

【注意事项】

1.在实验过程中要经常用任氏液湿润神经肌肉标本以防干燥。

2.用单脉冲刺激标本,刺激强度及频率应从小到大逐渐增加,两次刺激间隔时间不小于30s.

3.用甘油浸泡腓肠肌时间不宜过长,以锌铜弓剌激神经时肌肉不出现收缩反应即可。

【思考题】

1.何谓兴奋-收缩耦联？

2.高渗甘油浸泡过的肌肉是否出现收缩反应？

为什么？

第三节坐骨神经干动作电位记录、神经冲动传导速度、神经干不应期的

测定和局麻药对神经干动作电位的影响

【实验目的和原理】观察蟾蜍或蛙坐骨神经干的双相和单相动作电位，了解测定神经冲动传导速度和神经干不应期的原理和方法。

通过观察分析局麻药对神经干动作电位传导的影响，以加深对动作电位传导机制以及神经传导特征的理解。

神经干的动作电位是神经兴奋的客观标志。

当一处的神经纤维兴奋时,其对静止部位呈负电性质,此一电位差所产生的局部电流,使静止部位相继兴奋。

通过这种局部电流的方式,使动作电位在整个神经干上扩布传导。

用生理学方法可引导出此电位差及其变化并通过屏幕显示。

根据引导方法的不同、所记录到的动作电位可以是双相或单相的。

神经冲动以局部电流或跳跃传导的方式沿着神经纤维传导,其传导速度取决于纤维的直径、内阻、有无髓鞘等因素。

蟾蜍坐骨神经干为混合神经，其中包括很多有髓鞘和无髓鞘、不同直径的传入和传出纤维。

刺激坐骨神经干所引出的动作电位为复合电位,即由一大群不同兴奋阈、传导速度和幅值的峰形电位所总和而成。

神经冲动的传导速度可由测定神经冲动所经过的距离和耗费的时间来计算。

神经是可兴奋组织，当接受一次刺激而被兴奋之后,其兴奋性将会发生规律性的时期变化,依次经过绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期,然后再恢复到正常的兴奋性水平。

为了测定神经一次兴奋后兴奋性的变化,可先给予一定强度的刺激（条件性刺激）,在神经兴奋后,按不同时间间隔给予第二个刺激（检验性刺激）,根据标本对检验性刺激反应的兴奋阈,来判定神经组织当时的兴奋性。

在本次实验中第一个（条件性）和第二个（检测性）刺激采用参数完全相同,在不同时间间隔内检查第二个刺激所引起作电位幅值大小,作为反映部分神经纤维兴奋性变化规律的指标。

神经要完成传导动作电位的功能，需要其结构和生理状态都是完整的，局麻药通过干扰钠通道的功能状态破坏了神经纤维的生理完整性，使得动作电位不能继续传导下去。

【实验对象】

蟾蜍或蛙

【实验器材和药品】

MedLab生物信号采集处理系统、引导电极、剌激电极、神经标本盒、蛙手术器械、棉线、滤纸、任氏液、烧杯、2%的卡因或利多卡因。

【实验步骤】

1.制备坐骨神经干标本方法和步骤与制备坐骨神经腓肠肌标本基本相同。

不同的是背部的皮肤可用手撕去,而大小腿的皮肤则要用小剪刀剪除。

任何粗暴的动作都将造成神经干的损伤,以致影响观察和记录。

认清坐骨神经及其走向后,在靠近脊柱处穿线结扎,并在结扎线上剪断神经,线头保留约1cm。

用镊子夹住线头,提起坐骨神经进行分离,至腘窝处可见有两条分支：

胫神经和腓神经。

剪去任一分支（腓神经较浅,易分离,常保留）,继续分离留下的另一分支,直至脚趾端。

用线结扎,在结扎线的远端,剪断腓神经,也保留约1cm的线头,将完全游离的坐骨神经干置于盛有任氏液的烧杯中备用。

按照同样的方法,分离另一根坐骨神经干备用。

2.实验装置与仪器的连接:

按图所示用导线连接实验仪器，Medlab的刺激输出连接一对刺激电极，两对引导电极连接Medlab的CH2和CH4通道，将神经干标本放置在神经标本屏蔽盒的7根电极上，神经的脊柱端放刺激电极上，神经的远端放引导电极上。

启动MedLab生物信号采集处理系统,点击菜单“实验/常用生理学实验”，选择“神经干动作电位”，调用己设置好仪器参数的文件，开始采样观察。

【观察项目】

1.坐骨神经干双相动作电位的观察

调节刺激电压,可在屏幕上出现一个双相动作电位。

如果图形反相,可将引导电极4、5之间互换。

调节剌激电压大小,观察动作电位有何变化，并找出坐骨神经干的阈值和最大刺激强度。

仔细观察双相动作电位波形，读出最大刺激时双相动作电位上下相的幅度和整个动作电位持续时间。

2.神经冲动传导速度的测定

观察通道2、4的采样窗中先后出现的两个双相动作电位，分辨剌激伪迹和两个动作电位第一相的起始部位（或峰值部位）。

测量出两个动作电位起点的时间间隔t2-t1,或取两个动作电位峰值之间的时间间隔。

用尺量出引导电极4到6之间的坐骨神经干的长度,输入主机中。

3.神经干不应期的测定选择系统菜单“神经干动作电位不应期的测定”实验项目。

在屏幕上引导出一适当的动作电位,给予二个相同刺激脉冲。

调节两个剌激脉冲的时间间隔,同时观察第二个动作电位与第一个动作电位峰值大小。

当两个剌激脉冲的时间间隔从0毫秒开始慢慢增加。

如果仅有第一个脉冲产生动作电位,而第二个脉冲不能引起神经干产生动作电位,表示这两个剌激脉冲的时间间隔短于该神经的不应期。

当第二个剌激脉冲的时间间隔增加到刚能引起神经干出现第二个幅值很小的动作电位时,表示这两个刺激脉冲的时间间隔稍超出不应期。

逐渐增加两个脉冲的时间间隔,可见第二个动作电位幅值增大,当第二个动作电位增大到与第一个动作电位幅值相同时,这两个剌激脉冲的时间间隔即代表神经兴奋完全恢复所需要的时间。

如欲测神经干纤维的最短绝对不应期，则可在增大刺激强度后观察第二个剌激刚不能引起神经干出现动作电位的时间间隔。

4.坐骨神经干单相动作电位的观察

用镊子将记录电极4和5之间的神经夹伤,屏幕上动作电位的波形发生了什么变化。

5.观察局部麻醉药对神经干动作电位的阻断作用与单向动作电位

再取一根制备好的坐骨神经标本放置于神经标本盒的电极上，观察双相动作电位波形、双相动作电位上下相的幅度和整个双相动作电位的持续时间。

在两个引导电极之间的神经用2%的卡因或利多卡因阻断,观察神经干动作电位波形有何变化,在电极3,4之间的神经再用2%的卡因或利多卡因阻断观察神经干动作电位波形有何变化。

将观察到的实验结果打印输出或描画于实验报告上。

【注意事项】

1.分离神经时切勿强力牵拉、剪伤、手触神经，神经干标本应尽量分离干净，并随时滴加任氏液，以免标本干燥。

2.观察及记录时，神经干必须与各电极接触良好。

其两端结扎线不能接触金属屏蔽盒。

【思考题】

1．为什么坐骨神经干动作电位幅度在一定阈上刺激范围内会随着刺激强度增加而增大？

这违背了动作电位的“全或无”原则吗？

2.为什么在一般情况下坐骨神经干双相动作电位的波形是不对称的？

3.测定神经冲动传导速度的原理和影响神经冲动传导速度的因素是什么？

4.当实验中第一和第二个动作电位相距太近，所测传导速度准确吗？

应怎么办？

5.在一定时间间隔内，为何随两个剌激脉冲时间间隔的加大,第二个动作电位的幅度值也逐渐增大?

不应期长短有何生理意义？

6.应用局麻药后动作电位波形有何变化？

为什么？

第四节剌激蛙迷走交感神经干对心脏活动的影响

【实验目的和原理】

心脏受交感神经和迷走神经的双重支配。

心交感神经兴奋时,其末梢释放的去甲肾上腺素作用于心肌细胞上的β受体,从而使心率加快,心肌收缩力加强;心迷走神经兴奋时其末梢释放的乙酰胆碱,作用于心肌细胞膜上的M受体,从而使心率减慢,心肌收缩力减弱。

在蟾蜍和蛙,迷走神经和交感神经混合成束称为迷走交感神经干。

本实验的目的是用电刺激的方法观察迷走神经和交感神经同时兴奋对心脏活动的影响。

【实验器材与药品】

MedLab生物信号采集处理系统,张力换能器,蛙心夹,保护电极,蛙类手术器械,铁支架,双凹夹,滴管,1%阿托品,任氏液。

【实验对象】

蟾蜍或蛙。

【实验步骤和方法】

1．手术:

取蟾蜍或蛙1只,破坏脑和脊髓,使其仰卧固定于蛙板上。

2．分离迷走交感神经干:

在一侧下颌角与前肢间剪开皮肤,将皮下结缔组织分离,暴露提肩胛肌,并将其剪断,在其下方可见到一血管神经束,其中有皮动脉、颈静脉、迷走交感神经干。

用玻璃分针仔细分离迷走交感神经干,穿线备用（图）。

3.剪掉胸骨下部,小心剪开心包,暴露心脏,用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖,并使蛙心夹的连线与张力换能器相连。

4.将保护电极置于迷走交感神经干下,并通过刺激输出线与MedLab生物信号采集处理系统相连。

5.连接并调整好MedLab生物信号采集处理系统。

启动MedLab生物信号采集处理系统,点击菜单“实验/常用生理学实验”，选择“期前收缩与代偿间歇”，调用已设置好仪器参数的文件，开始采样观察。

【观察项目】

1．描记正常的蛙心搏动曲线,调节收缩幅度至适当。

注意观察并记录心跳的频率、强度以及心室的收缩强度。

2．应用较弱的阈上电刺激通过保护电极刺激迷走交感神经干,观察此时心搏曲线将发生什么变化?

3．改用较强的阈上电刺激通过保护电极剌激迷走交感神经干,结果又将如何?

4．如果用较强的阈上电剌激持续刺激迷走交感神经干,此时将出现什么结果?

5．在心脏表面滴加阿托品后,重复以上项目,结果又将如何?

将观察到的实验结果打印输出或描画于实验报告上。

【注意事项】

1．制备蛙的迷走交感神经干标本时,应注意用玻璃分针仔细分离迷走交感神经干,不要损伤伴行的血管。

2．要经常用任氏液湿润迷走交感神经干,以保持神经的兴奋性;也不能使保护电极上的液体过多,以防电极短路,造成剌激无效。

3．刺激的强度应从弱开始,逐步递增,不可太强;刺激的持续时间不宜太长。

【思考题】

1．用较弱的阈上剌激刺激迷走交感神经干时,心搏曲线发生什么变化?

为什么?

2．改用较强剌激时,结果又将如何?

为什么?

3．若刺激的持续时间适当延长,将出现什么结果?

为什么?

4．在心脏表面滴加阿托品后,再剌激迷走交感神经干,结果又将如何?

为什么?

第五节蛙心起搏点、期前收缩和代偿间歇

【实验目的和原理】

利用结扎方法来观察蛙心起搏点和心脏不同部位的自律性高低,学习在体蛙心心跳曲线的记录方法,并通过期前收缩与代偿间歇的观察,验证心肌不应期长的特征。

哺乳动物心脏的特殊传导系统具有自动节律性，但各部分的自律性高低不同，以窦房结的自律性为最高。

正常心脏每次搏动都从窦房结发出，依次传到心房、心室引起收缩，所以窦房结被称为哺乳动物的心起搏点。

两栖动物的心起搏点是静脉窦。

正常情况下，心房和心室在静脉窦起搏细胞发出的冲动作用下顺序搏动，只有当正常起搏点传来的冲动受阻或节律性降低时，心脏下部节律性较低的部位才能发出自动节律。

心肌每发生一次兴奋后，其兴奋性会发生一系列周期性变化。

心肌兴奋性的特点是兴奋后绝对不应期长，相当于整个收缩期。

因此在心脏收缩期中，任何刺激都不能引起心肌兴奋和收缩；在舒张期内，给予心室一次阈上刺激，可在正常节律性兴奋到达心室之前，引导一个提前出现的兴奋和收缩，称为期前收缩或额外收缩。

期前收缩具有不应期，当正常的节律性兴奋传到心室时，常常落在这个期前收缩的不应期，因而不能引起心室的兴奋和收缩，心室停留于舒张状态，直至下次正常节律性兴奋到达时，才恢复正常的节律性收缩。

这种期前收缩后出现的较长时间的间歇期，称为代偿间歇。

【实验对象】蟾蜍或蛙

【实验器材和药品】蛙类手术器械一套、蛙心夹、滴管、线、小试管、任氏液,张力换能器,MedLab生物信号采集处理系统。

【实验步骤和观察项目】

１.蛙心起搏点的观察

（1）取蟾蜍1只，用探针刺毁脑和脊髓后，将蟾蜍仰卧固定在蛙板上。

用镊子提起胸骨后端腹部的皮肤，剪一小口，然后将剪刀由切口处伸入皮下，向左右两侧锁骨外侧方向剪开皮肤，并向头端掀开皮肤。

用镊子提起胸骨后端的腹肌，腹肌上剪一小口，将大剪刀伸入胸腔内，紧贴胸壁（以免损伤下面的心脏和血管），沿皮肤切口方向剪开肌肉，剪断左右喙骨和锁骨，使创口成一个倒三角形“V“。

用小镊子提起心包膜，用小剪将心包膜剪开，暴露出心脏。

（２）从心脏的腹面可看到一个心室，左右两个心房、动脉圆锥和左、右主动脉干。

房室之间有一房室沟。

用玻璃针将心室翻向头侧，就可看到两心房的下端有与两心房相连的静脉窦。

心房和静脉之间有一半月形白色条纹称窦房沟。

静脉窦与前后腔静脉相连。

（３）观察静脉窦、心房、心室收缩顺序，并计数它们在单位时间内的跳动次数。

（４）用细镊子在主动脉干下穿一线备用，用玻璃针将心尖翻向头端，暴露心脏背面，然后将主动脉干下的那一条线在窦房沟处绕一结，当线准确落到半月形白色条纹（窦房沟）上时，迅速扎紧，以阻断静脉窦和心房之间的传导，此为斯氏第一结扎。

于是心房、心室立即停止跳动，而静脉窦仍照常在跳动。

计数静脉窦在单位时间内的跳动次数。

（５）待心房、心室恢复跳动后，再取一线绕在房室沟作一紧结，即斯氏第二结扎。

阻断房室之间的传导后观察心房和心室跳动情况。

分别计数单位时间内静脉窦、心房、心室频率。

2.期前收缩和代偿间歇的观察

（1）取蟾蜍1只破坏脑和脊髓，同前暴露心脏。

将蛙心夹上的连线缚于张力换能器弹性悬梁臂的着力孔上，刺激电极一端与MedLab生物信号采集处理系统刺激输出线相连，另一端固定于铁支架，并使心室恰好处于电极的两极之间，无论心室在收缩和舒张，均能与两极相接触。

（2）启动MedLab生物信号采集处理系统,点击菜单“实验/常用生理学实验”，选择“期前收缩与代偿间歇”，调用已设置好仪器参数的文件，开始采样观察。

描记正常蛙心的搏动曲线，分清曲线的收缩相和舒张相。

（3）分别在心室收缩期和舒张早期，及时刺激心室，观察能否引起期前收缩。

（4）在心室舒张早期之后，及时刺激心室，观察有无期前收缩的出现。

刺激如能引起期前收缩，观察其后是否出现代偿间歇。

将观察到的实验结果打印输出或描画于实验报告上。

【注意事项】

1.破坏蛙的脑和脊髓要完全。

2.作第一结扎时，结扎线应准确地扎紧窦房沟，不能扎住静脉窦。

3.蛙心夹与张力换能器间的连线应有一定的紧张度。

【思考题】

1.通过本实验证实蛙心正常起搏点应是哪个部位？

为什么能控制其他部位自律细胞的活动？

2.在心室的收缩期和舒张早期给予阈上刺激能否引起期前收缩？

为什么？

3.在期前收缩之后为什么会出现代偿间歇？

第六节化学因素对离体心脏活动的影响

【实验目的和原理】学习离体蛙心的灌流方法,观察内环境理化因素对心脏活动的影响,初步认识递质,受体及其阻断剂的作用。

离体和脱离神经支配的动物心脏,若保存在适宜的环境中,在一定的时间内,仍能保持自动的,有节律的舒缩活动。

本实验所用灌流液为任氏液,正是一种比较接近两栖动物内环境的液体;因此用任氏液灌流蛙心,蛙心仍能近于正常地跳动相当长时间。

在此基础上,改变灌流液的理化性质,心脏的活动也会随之改变。

这说明内环境的相对稳定,是维持心脏正常活动的先决条件。

另外,心脏受植物性神经支配。

当交感神经兴奋时,其末稍释放递质去甲肾上腺素,作用于心肌细胞膜上的β受体,从而使心跳加快、加强。

当迷走神经兴奋时,末稍释放递质乙酰胆碱,作用于细胞膜上的M受体,从而使心跳变慢、变弱。

阿托品是胆碱能M受体阻断剂,心得安是肾上腺素能β受体阻断剂,因此,当把递质或受体阻断剂直接加入灌流液中时