常用缓冲溶液配制方法.docx
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常用缓冲溶液配制方法
X毫升mol/L甘氨酸+Y毫升mol/LHCI，再加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
50
50
50
50
50
50
50
50
甘氨酸分子量=,mol/L
甘氨酸溶液含
15.01克/升。
2.邻苯二甲酸-
-盐酸缓冲液（
mol/L）
X毫升mol/L邻苯二甲酸氢钾+mol/L
HCl，再加水稀释到20毫升
PH（20C）
X
Y
PH（20C）
X
Y
5
5
5
5
5
5
5
5
5
邻苯二甲酸氢钾分子量：
=,mol/L邻苯二甲酸氢溶液含
40.85克/升
3.磷酸氢二钠-
-柠檬酸缓冲液
pH
LNa2HPO
L
pH
LNa2HPO
L
（毫升）
柠檬酸
（毫升）
柠檬酸
（毫升）
（毫升）
NaHPO-2HO分子量=,mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7-HbO分子量=,mol/L溶液为21.01克/升。
4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液
pH
钠离子浓度
（mol/L）
酸（克）
a-h2O
氢氧化钠
（克）
NaOH97%
盐酸（毫升）
HCl（浓）
最终
（升）
210
84
160
10
210
83
116
10
210
83
106
10
210
83
45
10
245
144
68
10
285
186
105
10
266
156
126
10
①
体积
使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化
钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（mol/L）
柠檬酸钠NaC6H5O7•2HQ分子量，mol/L溶液为29.41克/毫升。
6.乙酸-乙酸钠缓冲液（mol/L）
PH（18C）
mol/L
NaAc
（毫升）
mol/L
HAc
（毫升）
pH（18C）
mol/L
NaAc
（毫升）
mol/L
HAc
（毫升）
Nc2Ac-3H2O分子量=,mol/L溶液为27.22克/升。
7.磷酸盐缓冲液
（1）磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（）
NaHPO-12^0分子量=,mol/L溶液为克/升。
NaHPQ・2H2O分子量=,mol/L溶液为克/升。
pKa
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个
值，所以用它们配制的缓冲液，pH范围最宽：
NaHPQ：
PKa1=,pKa2=；NaHPO：
pKa1
=,PKa2=
pH范围宽；③pH
溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为：
①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的
受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH变化小，如稀释10倍后pH的变化小于。
其缺点为：
①易与常见的钙Ca24离子、镁Mg24离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②
会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。
15M11.876克15M9.078克0.05M0.2M
（2）磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15mol/L）
pH
mol/L/15Na2HPO
（毫升）
mol/L
11.硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）
pH
0.05M硼砂
（毫升）
0.2M硼酸（毫
升）
pH
0.05M硼砂
（毫升）
0.2M硼酸（毫
升）
硼砂NaBJ•1OH2O,分子量=;溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。
硼酸HBO,分子量=,溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
12•甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05M）
X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升加水稀释至200毫升
pH
甘氨酸分子量=;0.2M溶液含15.01克/升。
13.硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）
X毫升0.05M硼砂+Y毫升加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
50
50
硼砂NafeB4O•lOHbO,分子量=;0.05M溶液为19.07克/升。
14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）
C击、Mg+存在时不得使用
N2HCO分子量=;0.1M溶液为8.40克/升。
15.“PBS缓冲液
pH
H2O
1000
1000
1000
100ml
NaCl
8.5g
NaHPO
2.2g
NaHPO
0.4g
名称
（Name）
（Compoundingway）
草酸盐
C[KH3（C2O4）2•2H2O]
标准缓
为L。
称取12.71g
冲溶液
四草酸钾
[KH3（C2O4）2•2H2O]
溶于无二氧化碳的
水中，稀释至
1000ml
酒石酸
在25C时，用无二
盐标准
氧化碳的水溶解外
缓冲溶
苯二甲
酸氢盐
标准缓
冲溶液
消旋的酒石酸氢钾
（KHOHO6），并剧烈
振摇至成饱和溶液
cGHCOHCOK）为
L,称取于士C干燥
2〜3h的邻苯二甲
酸氢钾（KHCH4O4）
10.21g,溶于无CO
的蒸馏水，并稀释
至1000ml
（注：
可用于酸度
pH标准缓冲溶液
StandardpHBufferSolutions
不同温度时的pH值（pHindifferenttemperatures）
0C
5C
10C
15C
20C
25C
30C
35C
40C
不同温度时的pH值（pHindifferenttemperatures）
45C
50C
55C
60C
70C
80C
90C
95C
-
-
不同温度时的pH值（pHindifferenttemperatures）
0C
5C
10C
15C
20C
25C
30C
35C
40C
-
-
-
-
-
不同温度时的pH值（pHindifferenttemperatures）
45C
50C
55C
60C
70C
80C
90C
95C
-
-
不同温度时的pH值（pHindifferenttemperatures）
0C
5C
10C
15C
20C
25C
30C
35C
40C
不同温度时的pH值（pHindifferenttemperatures）
45C
50C
55C
60C
70C
80C
90C
95C
-
-
磷酸盐
标准缓
冲溶液
硼酸盐
标准缓
冲溶液
计校准）
分别称取在士C干
燥2〜3h的磷酸氢
二钠（NaHPQ）
（3.53士0.01）g
和磷酸二氢钾
（KHPQ）（3.39
士0.01）g，溶于预
先煮沸过15—
30min并迅速冷却
的蒸馏水中，并稀
释至1000ml（注:
可用于酸度计校
准）
C（Na2BO-10H2Q）称
取硼砂
（NaBOz•I0H2Q）
（3.80士0.01）g
（注意：
不能烘！
）,
溶于预先煮沸过
15—30min并迅速
冷却的蒸馏水中,
并稀释至1000ml。
置聚乙烯塑料瓶中
密闭保存。
存放时
要防止空气中的
不同温度时的pH值（pHindifferenttemperatures）
10C
15C
30C
35C
40C
45C
不同温度时的pH值（pHindifferenttemperatures）
50C
55C
60C
70C
80C
90C
95C
不同温度时的pH值（pHindifferenttemperatures）
45C
5C
10C
15C
20C
25C
30C
35C
不同温度时的pH值（pHindifferenttemperatures）
50C
55C
60C
70C
80C
90C
95C
40C
pH基准试剂配制。
注：
为保证pH值的准确度，上述标准缓冲溶液必须使用
常用pH缓冲溶液的配制和pH值
PreparationandpHValuesofCommonpHBufferSolutions
序号
溶液名称
配制方法
pH值
（No.）
（Solutionname）
（Preparation）
（pHvalue）
1
氯化钾-盐酸
mlmol/LHCl与mlmol/LKCl混合均
匀后，加水稀释至100ml
2
氨基乙酸-盐酸
在500ml水中溶解氨基乙酸150g,加480ml
浓盐酸，再加水稀释至1L
3
一氯乙酸-氢氧化钠
在200ml水中溶解2g一氯乙酸后，加40gNaOH,溶解完全后再加水稀释至1L
4
邻苯二甲酸氢钾-盐
把mlmol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与ml
酸
mol/LHCl混合均匀，加水稀释至100ml
5
邻苯二甲酸氢钾-氢
氧化钠
把mlmol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液
与mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至
100ml
6
六亚甲基四胺-盐酸
在200ml水中溶解六亚甲基四胺40g，加浓
HCl10ml，再加水稀释至1L
7
磷酸二氢钾-氢氧化
把mlmol/L的磷酸二氢钾与mlmol/L
钠
NaOH混合均匀，加水稀释至100ml
8
硼酸-氯化钾-氢氧
把mlmol/L的硼酸-氯化钾与mlmol/L
化钠
NaOH混合均匀，加水稀释至100ml
9
氯化铵-氨水
把mol/L氯化铵与mol/L氨水以2：
1比例
混合均匀
10
硼酸-氯化钾-氢氧
化钠
把mlmol/L的硼酸-氯化钾与
mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100
ml
11
氨基乙酸-氯化钠-
氢氧化钠
把mlmol/L氨基乙酸-氯化钠与ml
mol/LNaOH混合均匀
12
磷酸氢二钠-氢氧化
钠
把mlmol/LNa2HPO与mlmol/L
NaOH混合均匀，加水稀释至100ml
13
氯化钾-氢氧化钠
把mlmol/LKCl与mlmol/LNaOH混合
均匀，加水稀释至100ml
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