动物生殖生理学作业.docx
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动物生殖生理学作业
8.2控制措施的发展
8.2.1过去的控制措施
有关绵羊饲养的方法的书籍记载，可以追溯到十九世纪早期，这些书籍涉及到一些如何增加母羊产羔数量的方法。
这种又来已久的习惯是选择“发情”的绵羊，通过这种途径，只在交配期间或者交配之前给母羊提供更加优良的饲料，这作为用来解释相关机制的研究目标，已经很长一段时间了。
最新的方法是“内分泌腺发情”的使用，其目的就是使用外源促性腺激素（孕马血清促性腺激素（PMSG））来增加绵羊的多胎率。
这种方法在六十多年前被报道，是在前苏联的卡拉库耳大尾绵羊上在一定范围内第一次使用。
此外，由于二十世纪40年代后期起源于剑桥的TerryRobinson的工作，紧急的工作是检验通过生殖腺-营养扩大绵羊多产的可能性。
他发展了这种运用PMSG的技术，这种技术是在母羊发情周去的后阶段给其注射促性腺激素。
尽管母羊的反应各不相同，但是仍然证明这种PMSG的处理在增加平均排卵率和随后的双胎率效果是显著的（Fig.8.3）。
不幸的是，对于农民来说，鉴别出处于发情周期后阶段的母羊是一件不容易的工作，且还受群里中不育公绵羊和时间记录预先注射压力的困扰，可能在苏联的集体农场条件下是可以接受的，但是在世界的其他地方未必吸引人。
对于爱尔兰的农民来说，这在二十世纪六十年代之前一直是一个问题，在此之后，由于在绵羊上轻型超速排卵和精确发情控制的相结合使用，这才成为可能。
8.2.2多重排卵的生理学和内分泌学
农场中哺乳类动物的多重排卵的正态过程依赖于一种平衡，这是卵巢中窦状卵泡的脑垂体促性腺激素和类似雌甾二醇和抑制素的性激素的负反馈效应之间的平衡（Fig.8.4）。
这种知识最后导致免疫程序的发展。
这种程序力图削弱雄激素、雌激素和抑制素的反馈效应；这提升了促性腺激素分泌的抑制性效应，且使额外的额外的卵泡产生并排出。
Fig.8.3.草地上PMSG处理后产下四胞胎的母羊（1956）.一个群体中750只母羊用PMSG处理用于有道多重排卵在维克托洛希尔的RushbrookeEstate的萨克福克羊，其中只有一只成功。
Fig.8.4.促性腺激素分泌和反馈途径（来自Henderson等,1984）.
颗粒层细胞的敏感性
绵羊上的研究来力图检验与排卵率相关的内分泌因子，正如高产羔和低产羔品系所体现的那样。
这些对母羊排卵率审查机制是一遗传变异为基础的，其推断卵巢在控制排卵上比预先实现上起着更加重要的作用。
例如，法国的研究比较了繁殖力高低绵羊品种颗粒层细胞对促性腺激素的敏感性，已经得到的证据表明：
在发情周期的卵泡期，颗粒层细胞敏感性的改变很可能参与了绵羊排卵规律。
卵泡发生的差异动力学很大程度上是基于多个或者单个绵羊品种的差异。
这表明导致高排卵率的因子并不是穿过循环模式或者FSH浓聚物而起作用，而是涉及一个更短的生长期和一个更小一点的最大直径的卵子。
在一个有关差异排卵率的黄体功能的研究中，我们发现，多产的芬兰母羊能够产生更多但是更小一点的黄体和较低水平的孕酮含量，这些孕酮用来维持相对于低产仔的品种来说更多的被移植的胎儿；这也表明控制黄体组织形成的特有繁殖机制可能是存在的。
牛中的双胎
牛中的双胎的发生随品种而不同，也随着例如年龄和环境等因素而改变。
在英国和爱尔兰的一些地方，调查中其记录的发生率通常要下降2%和3%。
在世界范围内，不同品种的双胎率变化从接近0到10%不等，通常在奶牛比肉牛的双胎率更高一些，尽管在不同品种间存在相当大的变化（Karlsenetal.,2000）。
在绵羊和牛中的一个差异出现在胚胎的存活，这是涉及到在卵巢肿多个胚胎的分配问题。
在家牛中，很少有胚胎经子宫迁移，这是一种能够明显影响胚胎存活的因素。
在英国，在绵羊上的研究表明排卵的位置对胚胎的生存并没有影响，单侧排卵的胚胎同双侧排卵的胚胎一样存活。
对绵羊生殖系统的调查已经有确切的证据。
其证据是12%的单侧排卵的母羊的胚胎和所有在一个子宫中双侧排卵的怀孕的母羊的胚胎是经子宫迁移的。
左侧和右侧卵巢
在牛中，有充分的证据证明，右边的卵巢比左边的卵巢显著活跃，通常的平衡状态时60%排卵作用发生右侧，而只有40%发生在左侧。
相同的报道也适用于母羊。
例如在苏格兰布鲁拉特塞尔绵羊中，我们观察到了更高几率的排卵作用是发生在右侧卵巢。
协同或者缺乏来自对侧卵巢的排卵作用的多重排卵也是在右侧发生的更加频繁。
8.2.3.营养和环境因素
绵羊的营养和发情
如前文所述，在过去几个世纪乃至更长一段时间，已经验证了营养在绵羊羔羊的繁殖中的影响。
农民已经意识到了，在繁殖季节的早期或者是之前对母羊发情，这对农民很有利。
营养物质对排卵发挥其功能的方式已经成为到目前为止许多研究的主要课题。
例如在阿伯丁，已经有研究表明，食物摄取对排卵率的影响可能是通过卵泡发生末期的差异来表达，可能通过内部卵泡类固醇水平来发生影响作用。
众所周知，当把葡萄糖灌输到母羊的外周循环，其可以增加排卵率。
没有刺激性FSH分泌，有证据表明母羊的卵巢占去来自葡萄糖，这些葡萄糖是经由一个胰岛素调控GLUT4转运蛋白的体循环，其标志是葡萄糖转运和卵泡大小是相连接的。
短期发情
基于现在的知识，在母羊中运用非常短期的处理来影响排卵率是可能的。
例如，在阿根廷，在快速卵泡发生期用阴道孕激素处理的母羊，通过短期葡萄糖生成处理，这样来修饰排卵率的潜力已经被证明。
一个海绵条状可回收的葡萄糖制剂单次量，随后使母羊接触rams，这增强了排卵率。
在爱尔兰，给母羊孕激素控制的发情周期的最后5天灌输葡萄糖，这可以曾家排卵率。
而在澳大利亚母羊发情周，发现诱发类胰岛素类似物，低血糖抑制黄体激素（LH）分泌，这暗示葡萄糖作为一个正常的下丘脑-脑垂体作用的传递者。
多产母羊特点
在绵羊，众所周知排卵率不仅随着品种变化，其也根据繁殖季节时期的不同而变化。
（见第七章）。
长的繁殖季节似乎是高产绵羊品种的特点（例如Finn,Romanov,Chios）。
例如在希腊Chios绵羊上，研究显示在春季和秋季有发情行为的母羊分别有92%和100%。
春季配种比秋季配种排卵率显著得低（2.85vs.3.33）。
排卵率的季节性影响
在苏格兰，工人力图确定季节性改变对排卵率、受精率、胚胎存活的相对重要性，并以此作为减少绵羊产羔率的原因，相对于十一月配种（中期）而言，配种在二月份（晚期）。
所以推论在排卵率方面的季节性衰退，是在二月份绵羊产羔率下降的主要原因。
猪的排卵率
工人们正在检测不同营养因素对同胎产仔猪数的影响。
在波兰的研究显示在配种前或者配种后，在母猪的日粮中加入b-胡萝卜素可以增加排卵率，在配种期间添加叶酸可以减少胚胎死亡的发生率。
弄清楚在猪中排卵率控制的尝试引导美国的工人去检测，高的或者低的排卵率时雄激素水平；这些结果表明在发情周期的排卵期，增加FSH和LH的浓度同增加排卵率紧密联系的，但是仅仅FSH在这种猪的黄体期的不部分时候是增强的（Knoxetal.,2003）。
卵泡数量
在德国的研究表明猪品种显示的不同的多产参数也在卵泡数量方面是不同的。
在Duroc猪种原始卵泡和初级卵泡的平均数量比迷你猪种高7倍；生产数据显示Duroc猪平均产小猪10.11个而迷你猪是8.33个。
奶头数量与产仔数
美国的工人已经研究了影响奶头数量的因素，发现奶头数量和产仔数以及公猪的比例之间有存在显著的联系。
母猪有更多地乳头使得后代乳头数量多且公猪比例低。
有记录表明在一些猪种存在同卵双胞胎，且在梅山猪种比欧洲猪种中单卵双生更加常见。
8.2.4基因因素
多产羊
苏格兰低地羊商品化的成功取决于很多因素，其中最重要的一点是每年每一只母羊的产仔数量。
在许多国家，使产仔数最大化的努力已经关注在更高产的绵羊品种的选择和提高母羊的营养；在了解新生产仔损失的本质和控制母羊和羊羔疾病的改进已经有极大的帮助了。
在绵羊中排卵率方面基于遗传变异的处理机制中的一些，已经把显示高排卵率绵羊品种分为两类：
（1）一组包括的品种有omanov,FinnishLandrace和D’man，这这些品种中高排卵率反映了多基因的差异；
（2）这一组反映了单个主效基因的行为，或者是一个紧密联系的基因群，例如BooroolaMerino,Icelandic,Javanese,Fat-tail（印尼Fat-tailed）,Inverdale,Belclare,Cambridge和Olkuska。
如前面所述，在法国的研究显示在Romanovs中比非高产的Île-de-Francebreed品种有更高的排卵率，这可能是时对促性腺激素更大的一种响应的结果，在早期卵泡期而不是增加本身促性腺激素水平。
在波兰，研究的注意力已经被吸引到Olkuska绵羊超常的生殖潜力，这表明排卵率范围从1到8不等，平均值是3.0；我们也估计到假设一个单独的基因控制这种效应，在一个杂合子携带者中有一个拷贝的假定的基因，其增加了排卵率1.03个，且每胎产仔数增加了0.63个。
在爱尔兰的研究中认为：
多产的Belclare绵羊（一种以高排卵率和每胎产仔数筛选出来复合品种）石首两个主要基因控制的。
此外，已经检测出主要效应的一个单基因可以影响繁殖力；Booroola母羊的超高产不是由于在骨骼形态形成蛋白（BMPR-IB）type-IB受体中一个单氨基酸替代物。
在苏格兰的研究显示在拥有Booroola基因和控制元件的模样上，脑垂体促性腺激素或者卵巢性激素的分泌模式没有定性的或者定量的差异。
所以推断这个基因在卵巢水平表达，这通过排卵和黄体显现，这些都比受控制的母羊的要小。
来自新西兰的报告显示拥有Booroola基因的携带者有更高的排卵率，这归咎于在卵泡发生水平和脑垂体FSH水平的影响。
现在我们知道，在卵巢中Booroola突变的存在导致卵泡由于颗粒层细胞过早分化而提先成熟。
在英国的Campbell等（2003）研究支持这种观点：
Fec-B基因在卵巢水平表达从而增强卵巢对促性腺激素的敏感性。
此外，在Icelandic绵羊和Javanese绵羊中已经有报道了一个有相似效应的基因（Thoka基因）。
在苏格兰的工人报告在Cheviot母羊的羊羔中有Thoca基因的介绍。
在这个品种中引入这个基因会增加其繁殖力和其更有效地羊羔生产的潜力。
但是，应该注意的是，在多产品种例如FinnishLandrace和Romanov中，并没有明显的证据表明存在产仔数的主效基因;这标志着在绵羊中至少有两种基因控制机制来控制绵羊多产仔。
选择性繁育
在相对低产的母羊中进行选择性繁育，当然，苏格兰低地绵羊的农场主几乎无力承担只产一只羊羔的母羊（表8.5）。
已经有报道在新西兰绵羊品种中的多产性的基因，这是用2180只élite母羊（高产）在一个研究点持续八年的数据记录来研究的，基地母羊的对后代排卵率平均值在Romneys,Coopworths,Perendales和Inverdales上分别为2.15，2.43，2.15和2.96.
图8.5.仅有一个羊羔：
不够好
激素检测
一些工人已经测试了运用早期激素检测来鉴别母羊高产的可能性。
已经有研究显示在多产母羊品种中的幼母羊中高浓度的血浆FSH在有限排卵率的绵羊中式不明显的。
在希腊，证据表明6到12周龄幼母羊血浆FSH浓度可以用于Chios绵羊产仔数的早期选择。
在摩洛哥，相似的证据表明D’man母羊（平均排卵率为2.9）的高产仔率早期是以提高基本的血浆FSH浓度为特点的。
倍数和山羊奶产量
在集中管理的奶山羊中，在多胎生产和羊奶产量之间的关系存在公认的联系。
例如在加拿大，研究表明多胎的Anglo-Nubian产奶量明显高于单胎的（807.6kg比上664.6kg），在意大利，处理在Lombardy饲养的Alpine山羊参数的工人建议，当鉴别用于比较畜群的产奶量的校正因子时，应当把产仔数考虑在内。
猪中FSH水平和产仔数
Cassady等和（2000）在野猪和母猪中的研究力图决定血浆中FSH浓度在遗传角度是否与排卵率有联系；他们推论：
因为对FSH的选择在两个性别中可能是实用的，这似乎在猪育种方案中增加排卵率方面是一个实用的理论，且其不需要用腹腔内窥镜去检查卵巢。
Christenson和Leymaster（2003）的数据表明在猪中排卵率和子宫容量在遗传角度讲是独立的；这些数据的含义是着重对排卵率和子宫容量进行同时选择是必要的，进而增加产仔数量。
标记辅助选择
在猪的生产中同胎产仔数是一个相当重要的经济数值，对猪育种公司来说也是一个辅助选择标记（MAS，）有利的等位基因可能变的越来越重要；最初在中国的猪种中发现得B等位基因，现在发现其同较高的同胎产仔数显著相关。
尽管B等位基因同较高的同胎产仔数相关联，但是其并不是由于在排卵率或者胚胎存活率方面的差异，而是其在胎儿存活方面的差异。
在新西兰，VanRens等（2000）证明胎儿的存活率可能与胎盘大小差异有关系，其结果就是在有雌激素受体（ESR）的基因型AA的猪种中，胎盘机能不全的，但是在雌激素受体ESR基因型BB的却不会。
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肉牛
增加肉牛多重排卵发生率的尝试很多且各种各样。
对于那些用基因选择途径的而言，这需要一个漫长的过程。
二十五年前，。
作为增加肉牛生产经济效益的努力的一部分，双胎群体已经在美国肉类动物研究中心建立；截止到二十世纪末，已经报道的在实验畜群众自然双胎的频率超过35%。
8.2.5.促性腺激素的使用
绵羊中的早期工作
绵羊有许多饲养条件，其中增加双胎百分数的简单技术可能是很有价值的。
选择育种、饲养和管理以及高产绵羊品种，这些在这个方面度发挥着一定作用。
但是，举个例子，应该考虑激素诱导的多胎，特别是在短毛羊中，这显现了低双胎率，且并不遵从任何为了增加同胎产仔数的系统选择育种方针。
事实上，在绵羊多产的激素诱导法，特别是Karakul绵羊在前苏联受到更大关注。
像前面提到的那样，那个时候所使用的技术是有效的但是却是单调的，这涉及到在母羊发情周期卵泡期一个单次量的PMSG；需要使用teaserrams去鉴定母羊，但是这并不容易运用。
孕激素-PMSG联合使用
随着在二十世纪六十年代孕激素海绵条的现，这使得控制发情和改变母羊排卵率成为了可能。
联合使用一个阴道处理的单次量的PMSG是很简单的，促性腺激素通过可取回的阴道设备进入母羊体内。
不论这项技术是否能够吸引农场主，相对于从额外的羊羔中的获利而言，这仅是成本和劳动力的事情。
在爱尔兰，PMSG处理是一种在非发情季节发情控制草案的标准，它只需要调整促性腺激素的量使之适应所涉及到的母羊。
在绵羊发情季节，发情控制并不要求除了孕激素之外的促性腺激素，一个判断正确的PMSG剂量很可能意味着会多产羊羔。
在过去三年，在许多国家的研究已经结合发情控制来增加绵羊的繁殖力。
例如在土耳其，大部分的时间，工人们使用40mg氟代孕酮醋酸盐（FGA）海绵和500iu的PMSG来增加周期Kivircik绵羊多重产仔的发生率（48%对21%）。
偶尔，也使用褪黑激素处理，其主要成分以能够影响多重排卵的发生率。
在法国，在FGA-PMSG之前，褪黑激素预处理（3周），且工人们报告与控制的相比有更多的较大的卵泡和明显高的排卵率（2.6±0.4对1.45±0.35）。
双胞胎牛
许多工人已经检测了，通过促性腺激素处理（准备PMSG或者垂体FSH）诱导肉牛生双胞胎的这种可能性；但是这些物质的主要缺点是促性腺激素途径常常出现明显的个体差异，这对于这种方法来说是太过于明显了。
通常许多母牛产生单胎，而处理组偶尔产生三胞胎、四胞胎甚至五胞胎;产生多胞胎，其代价却很低，这对于研究人员和使用类似方法的农场主来说，已经变得容易做到。
基于最近牛中卵泡动力学知识的取得，对对处于发情周期（在卵泡选择期间）第三天的母牛，施加低剂量的FSH，在发情周期的第五天，通过诱导黄体溶解来排出卵泡，这方面的研究已经开始了。
这方面研究的数据表明：
当在第一个卵泡生长波期间，用FSH处理，可以获得一个50%的双胞胎排卵率。
但是，想前面提到的那样那个，双胞胎排卵并不能一定产生双胞胎。
鹿
增加在鹿中双胎率的尝试已经进行过了。
在西班牙，Garcia等人（2001）在Iberian鹿（马鹿）中，用结合前列腺素（PG）和PMSG的黄体酮释放内部装备，来处理鹿。
尽管孪生发生率很低（13%），记录表明双胞胎的死亡率比单胎的更低一些，这可能是由于减少了出生时体重和较早出生。
8.2.6.免疫方法
雄烯二酮
卵巢生理学是一个复杂的过程，这既包括性腺外的（如FSH和LH）和性腺内的（类固醇和蛋白肽，例如抑制素）激素调控。
作为增加排卵率的一种手段，绵羊卵巢的活性可以通过免疫母羊的方法来增强，这中免疫可以防备卵巢雄激素/雌激素或者蛋白肽（抑制素），这些激素或者抑制机素处于触性腺激素释放负反馈控制过程中。
尽管在二十世纪七十年代，对雄烯二酮的生理学机理知之甚少，免于这这种特别的卵巢类固醇的母羊的排卵方面表现出明显增加。
雄烯二酮被认为是一种通过下丘脑-垂体轴的卵巢活性的积极的调控物质。
但是，我们也认为对雄烯二酮进行的免疫通过减少在排卵前期卵泡闭锁的发生率，增加了绵羊的排卵率。
这种现象的原理还没有完全研究清楚。
其中一个可能性就是免疫减少了本地产生的闭锁因素的效应。
在二十世纪八十年代初，澳大利亚发现了一种抗雄烯二酮的疫苗，并且以多胎素的名字在商业中使用。
这种处理需要两次注射，在配种开始前间隔八周和四周；后来，在引起可靠性前一个月，要求进行一次单独的加强注射，不用以产品为代价，开始母羊处理和预期反应的时间之间的较长的间隔加大了商业上的可以接受性的难度。
二十世纪九十年代中期，新西兰的州研究组织AgResearch的报告文件显示发明了一种Androvax物质。
据说这个产品在配种前8周给药，可以增加产羔羊百分数达到24%；需要指出的是Androvax的结果比多胎素的结果更加一致。
抑制素疫苗
尽管卵巢类固醇类物质的负反馈调节效应能影响FSH分泌和排卵率，这一点已经被广泛地接受，二十世纪八十年代初见证了这强有力的证据：
卵巢也可以产生呢个非甾类复合物、抑制素，它们涉及到调节FSH分泌。
我们确信抑制素提供了一种化学信号，这种信号是用来指明生成的卵巢中卵泡的数量，而对垂体发出信号来减少FSH的分泌，去维持卵子的种属专一性。
实际上有若干种抑制素的类型；在美国，工人们推断有八种不同的抑制素二聚体形式，它们可能涉及到调节基本的FSH和促性腺激素释放激素（GnRH）诱导的脑垂体LH分泌。
前文阐述的的事情的先后顺序（见图8.4），可以认为是抑制素发挥其效应的一种方式。
在黄体退化开始后，孕酮浓度开始下降；来自孕酮的负反馈调节使得脑垂体得到解放，LH的浓度会上升。
伴随这FSH浓度的上升，LH促进了卵泡的生长和成熟，其最终排出。
卵泡抑制素的产生受雄激素的刺激，通过LH作用于卵泡膜内膜产生，刺激颗粒细胞移植素产生。
在卵泡期，当LH和雌甾二醇的浓度继续上升，由于脑垂体分泌的雌甾二醇和抑制素的一致效应，FSH的水平在中卵泡期会下降。
当积极免疫母羊使其免于抑制，在卵泡期，这将会减少FSH的抑制作用，这一点是确定的。
因此使更多的卵泡成熟进入排卵期前的状态。
英国的研究表明对母羊抑制素的主动免疫（牛科动物α1-29蛋白肽，同源形式）能够增加FSH水平、排卵率和产羔率；这也证明绵羊可以对带有持续（至少三年）抗体活性的抑制素疫苗响应，且能够常常增加产仔数量。
这也暗示一种抑制素疫苗可以形成一个实用的、成本低的系统的主要成分，这个系统是用来在低繁殖力的绵羊品种中提高多胎率。
肉牛
在澳大利亚，二十世纪九十年代初的研究都是指向发展商用的肉牛和绵羊抑制素免疫处理的方法。
尽管一个标准的抑制素疫苗已经研制出来，并在这个国家进行试用，进行疫苗接种，结果发现肉牛的排卵率比绵羊更加难操作。
撇开较少实验组的令人鼓舞的反应，对于提供商品要求的双胞胎的目标水平，疫苗明显是失败的。
在爱尔兰，研究的注意力主要是在发展一种用于肉牛双胞胎的免疫方法，这种免疫方法主要是基于抑制素的免疫-中和作用。
山羊
在山羊中对抑制素的主动免疫的效应已经被不同的工人测试过了。
在中国的一组用抑制素（α亚单位，1.32片段）主动免疫了两种山羊，白的和黑的，结果表明白山羊中排卵率高了12.5%，黑山羊高了9%。
猪
在美国，Kreider等人（2000）评估了对卵巢类固醇免疫对排卵率和同窝产仔的在经济上影响；他们的结果表明用己酸孕酮免疫后，同窝产仔数可增加。
Christensen等人（2000）到研究报告指出，初次分娩的母猪已经对滤泡稳定蛋白（一种从滤泡中分离出来的蛋白质）主动免疫，而力图改变产仔数。
对母猪进行四次猪的滤泡稳定蛋白的重组体形式，且允许达到可以用于繁殖的性成熟期。
；从这个结果中，作者推断：
接种的疫苗增加了这些猪的产仔数，这些猪得到了一个相对于滤泡稳定蛋白的较高的抗体滴度。
8.2.7胚胎移植
肉牛双生
在爱尔兰，肉牛双生技术研究已经进行超过三十年了，这种技术是基于胚胎移植（ET）（图8.6）。
胚胎移植就来在其正常生产（人工智能或者自然生产）后若干天，把第二个胚胎（捐赠的）移入母牛子宫的对侧角，。
图8.6通过胚胎移植获得的双胞胎牛
母牛给出了运载双胞胎的一种方法，以它自己的小牛和一头来源于捐赠者胚胎的小牛的形式；
额外的胚胎可以通过体外技术或者传统的超排技术获得。
爱尔兰人在二十世纪八十年代晚期的研究涉及到一系列的农场经验，使用一个体外培养的胚胎，这表明一个人工智能和胚胎移植技术是能够得到一致的在这些牛中产生40%～50%的双胞胎产犊率，这是很有意义的。
在最大规模的体内产生胚胎的现场试验是在捷克共和国进行的。
这这次实验中，胚胎来自屠宰之前的超数排卵的母牛；一次胚胎移植在7500头母牛上进行（表8.2）.
在爱尔兰，采用来源于低成本廉价的肉牛胚胎机会产生体外培养技术，这项技术是兴起于二十世纪九十年代初。
在体外培养的胚胎的高质量的肉牛是使用来自Limousin,Simmental和Charolaiscross母牛的卵母细胞；
表8.3体外培养胚胎移植双胞胎（来自Bourke等，1995）
胚胎移植
控制
母牛数量
469
858
每头母牛产小牛数
1.35±0.02
1.02±0.01
P˂0.001
每头母牛产小牛48h存活数
1.25±0.02
0.99±0.01
P˂0.001
多胞胎百分数
34%
2%
P˂0.001
表8.2在捷克共和国进行的大范围的双胞胎试验（来自Riha和Petelikova,1990）
修正的每个超数排卵供体的平均卵子数
12.08
修正的每个供体的平均胚胎数
9.32
在所有修正的卵子中胚胎所占百分数
70.4
每一个供体移植胚胎的平均数
4.81
进行移植的母牛头数
7185
第一次怀孕的母牛头数
4124
受体的受胎率%
57.4
产犊受体数
3077
总计的双胞胎数
1487（48.3）
单胎数
1590
所产小牛头数
4571
每次分娩所产小牛数
1.49
用来自适合的公牛（这些公牛被证明有很高的繁殖力且生长速率较高）的精子给卵子进行受精，挑选适合相配的动物到合适的农场（它们已经用人工智能的方法获得了较好的繁殖力结果）；这些信条是这样的农场的生产者所信奉，应为这样才更有可能从运用双胎中获利。
推荐使用的步骤是选择通常可以分辨作为适合公牛繁殖交配的母牛，考虑体型和受体母牛的健康等条件。
一个用于检测繁殖效率，双胎率和所有非外科手术的体外培养胚胎移植的小牛出生量的农场实验被进行了。
这项技术涉及到一个在吸管内部冻融的程序，和在农场的直接移植；数据显示在表8.3中，处理了469头母牛，在大范围的农场试验中得到额外的胚胎。
相似的运用已经
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