植物组织培养复习资料付答案仅供参考.docx

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植物组织培养复习资料付答案仅供参考

植物组织培养复习材料

一、名词解释。

1、植物组织培养（planttissueculture）：

植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术

2、脱分化（dedifferentiation）：

指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞即愈伤组织的现象。

3、再分化（redifferentiation）：

愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。

4、外植体（explant）：

植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。

（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等）

5、愈伤组织（callus）：

原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。

在组培中，则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。

6、器官发生：

胚胎时期由胚层器官原基发育成器官的过程。

包括细胞分化和器官形成。

7、胚状体发生：

在植物细胞、组织或器官体外培养过程中，由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。

可进一步发育成植株。

8、细胞全能性（celltotipotency）：

指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。

9、细胞分化：

一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。

10、极性：

细胞（也可指器官或植株）内的一端与另一端在形态结构和生理生化上的差异。

11、试管苗：

通过组织培养产生的植株。

12、看护培养：

是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。

这块愈伤组织被称为看护组织。

13、固相化培养：

将细胞或原生质体固着在琼脂糖、藻（月元）酸盐或多聚赖氨酸中，然后将他们放入液体培养基中震荡培养。

这种培养方法既利用了振荡培养室营养物质和气体易于交换的优点，有利用了固相化使细胞免受振荡时剪切力的作用。

14、悬浮细胞培养：

将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增值的技术。

适用于大规模的培养，使细胞工程的基本平台。

15、植板效率=（每个平板中新形成的细胞团数/每个平板中接种的细胞数）*100

16、实验室的组成及功能：

1.基本实验室

（1）准备室

（2）接种室（3）培养室

2.辅助实验室

（1）细胞学实验室

（2）摄影室及暗室（3）生化分析室（无菌操作室、化学实验室、培养室、细胞学观察室、暗室）。

17、植物种质：

物亲代通过生殖细胞或体细胞传递给后代的遗传物质，植物种质资源即为携带各种不同遗传物质的植物总称。

18、玻璃化现象：

指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。

其苗称为玻璃化苗。

19、基本培养基：

包括大量元素和微量元素（无机盐类）、维生素和氨基酸，还有糖和水等。

20、完全培养基：

在基本培养基基础上，根据各种不同试验要求，添加各种植物生长调节物质以及其他复杂有机附加物，包括有些成分尚不完全清楚的天然提取物。

21、外植体褐变：

在组织培养过程中，外植体向培养基中释放褐色的物质（醌类）致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之变成褐色而逐渐死亡的现象。

22、微体快繁：

利用植物组织培养技术进行的一种营养繁殖方法。

23、微体嫁接：

把极小（小于0.2mm）的茎尖作为接穗嫁接到实生木上，然后将嫁接后的砧木接种到新培养基上培养。

24、敏感植物：

有些植物对病毒极为敏感，一旦感染病毒就会在其叶片乃至全株上表现特殊的病斑，如马铃薯病毒—千日红、黄烟花、心烟叶、毛叶蔓陀罗。

菊花病毒—矮牵牛。

25、固相化的方法：

凝胶包埋、表面吸附、网格及泡沫固定、膜固定。

26、悬浮细胞培养:

将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。

27、固相化细胞培养：

把细胞固定在一种惰性基质，如琼脂、藻盐酸、聚丙烯酰胺、纤维或膜上面或里面，细胞不能运动，而营养液可以在细胞间流动，供应其营养。

28、条件培养：

在选用的培养基中，加入一定量以生长过组织或细胞的培养液（离心去除组织或细胞）称条件培养液。

用条件培养液培养细胞，即使接种的细胞密度低于最低有效密度，这些细胞也能生长和分裂。

30、再分化培养：

31、液体培养：

指在进行培养时，培养基中不加琼脂等凝固剂，一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。

32、细胞培养：

指从植物体中分离了单细胞，无人工条件下进行培养，使其生长增殖，甚至发育成完整植株的技术。

33、无病毒苗：

指不含该种植物主要危害病毒的苗木。

34、原生质体融合：

指使分离下来的不同亲本的原生质体，在人工控制的条件下，像性细胞受精作用那样互相融合成一体，又称体细胞杂交。

35、胚状体：

体细胞在一定条件下所诱导形成的胚称为体细胞胚，即胚状体

36、原生质体：

指去掉细胞壁的由质膜包裹有生命活力的裸细胞。

37、单倍体植株：

只含有配子体染色体组数的植株。

38人工种子：

指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。

39、离体授粉：

将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来,进行无菌培养,并以一定的方式授以无菌花粉,使之在试管内实现受精的技术,又称为离体受精或试管受精

40、植物生长调节剂：

植物中调节生长及其他功能的激素类物质。

主要分为三类：

植物生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类。

41、器官培养：

指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。

42、植物胚胎培养：

指对植物的胚、胚胎、胚珠和子房的培养。

二、不定项选择（每题2分，共10分）

１、下列不属于生长素类的植物激素是___AD______。

AKt；BIAA；CNAA；DZT

２、影响培养基凝固程度因素有__ABCD____。

A琼脂的质量好坏；B高压灭菌的时间；C高压灭菌的温度；D培养基的PH

３、第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是：

B

AMorel；BHaberland；C   Schleiden；DWhite

４、下列不属于大量元素的盐是___C______。

ANH4NO3；BKNO3；CZn SO4.7HO2；DMgSO4.7HO2

５、下列实验中可能获得单倍体植株的是___BCD_____。

A小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养

6、活性炭在组织培养中的作用有__ABC____。

A吸附有毒物质；     B减少褐变，防止玻璃化；  C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；D增加培养基中的养分

7、下列具有细胞全能性的细胞是：

_ABCD___。

A成熟的老细胞；B幼嫩的组织细胞；C愈伤组织细胞D番茄的受精合子

8、下列培养基中____C___无机盐的浓度最低。

AMS培养基；BB培养基；CWhite培养基；DN6培养基

9、从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织，大致经历___ACD__三个时期。

A诱导期；B潜伏期；C分化期；D分裂期

10、植物组织培养的特点是_ABCD__：

A培养条件可人为控制；B生长周期短，繁殖率高；C管理方便；D取材少

11、高温易被破坏分解的植物激素是___ABD___。

AIAA；BGA；CNAA；DZt

12、同一植株下列___B___部位病毒的含量最低。

A叶片细胞；B茎尖生长点细胞；C茎节细胞；D根尖生长点细胞

13、在原生质体的培养中，渗透稳定剂的作用是--A---：

A稳定原生质体的形态而不使其被破坏B支持作用

C提供营养               D调节PH值

14、下列实验中不可能获得单倍体植株的是__AC_____。

A水稻茎尖培养；B草莓花药培养；C玉米叶片培养；D棉花胚乳培养

15、适合花粉培养的最适时期是---B--：

A单核早期B单核靠边期C二核期D三核期

16、IAA需要用___C____法灭菌。

A灼烧灭菌；B干热灭菌；C过滤灭菌D高压湿热灭菌

17、能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是---AB----：

AGA；BIAA；CNAA；DZT

18、下列实验中可能获得单倍体植株的是__BCD____。

A小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养

19、下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是__ABCD____。

A细胞分裂加快                   B正在分裂的细胞体积小，内无液泡

C细胞的核和核仁增至最大D细胞中的RNA含量减少，而DNA含量保持不变

20、赤霉素（GA）需要用____C_____法灭菌。

A灼烧灭菌；B干热灭菌；C过滤灭菌D高压湿热灭菌

21、第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是___B_____：

AMorel；BHaberland；CSchleiden；DWhite

22下列那种方法不能脱除感染植株体内的病毒AC

①茎段培养；②微茎尖培养；③愈伤组织的继代培养；④珠心胚培养

23．适合外植体材料表面消毒的方法是B

①高压蒸汽；②适宜浓度的消毒剂浸泡；③紫外线消毒；④熏蒸消毒

24、经高温灭菌后。

培养基的pH会A

A降低B升高C不变D不能确定

25、在植物组织培养中，培养基的PH值一般为B

A低于5.0B5.5—5.8C6.0—7.0D高于7.0

26、下列有关细胞全能性的含义，正确的是C

A每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能

B生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能

C生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能

D生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程

27、下列那种方法不能脱除感染植株体内的病毒（AC）

A茎段培养；B微茎尖培养。

C愈伤组织的继代培养；D珠心胚培养。

28、下列不属于生长素类的植物激素是___A______。

A6-BA；BIAA；CNAA；DIBA

三、填空题（每空1分，共20分）

1、去除植物病毒的主要方法是_组培法___和_理化法___两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。

2、原生质体的融合可实现__体细胞___的杂交，其融合的方式分为_自然融合__和_人工诱导融合_两类。

3、在组织培养中，非洲菊是靠__丛生芽____的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以__原球茎增殖_的方式进行快繁的。

4、单细胞培养的方法主要有--看护培养--、---微室培养---及---平板培养----。

5、在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以

__0.3—0.5___mm、带__1—2__个叶原基为好。

6、植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为___光___培养和___暗__培养。

7、细胞的再分化有----器官发生---和---体胚发生----两种形式。

8、连续培养有----浊度恒定法----和----化学恒定法----两种方法。

9、通过茎尖培养脱毒苗的过程中，切取茎尖的大小与其成活率成__正比__，而与脱毒效果成_反比__。

10、一个已停止分裂的成熟细胞转变为_____未分化_____状态，并形成__未分化的愈伤组织___的现象称为"脱分化"。

11、植物的胚胎培养，包括____胚__培养、___胚乳____培养、____胚珠___培养、子房培养以及离体授粉的。

12、在组织培养中，IAA、ZT和GA必须用____过滤灭菌__法灭菌，而接种室空间采用___紫外线照射_或__甲醛熏蒸__法灭菌。

13、幼胚培养时，其发育过程有____早熟萌发__、__呸性发育____、___形成愈伤___三种方式。

14、原生质体的分离有___机械法___和__酶降解法____两种方法。

15、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为_普通茎尖培养__培养和__茎尖分生组织__培养两种类型。

16、花药培养是___器官__培养，花粉培养属于__细胞___培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成_单倍体植株_。

17、不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生

___ClO-_______来杀菌的；升汞是靠__重金属________来达到灭菌目的。

18、一个已停止分裂的成熟细胞转变为__分生__状态，并形成_未分化的愈伤组织__的现象称为"脱分化"。

19、White培养基___无机盐____浓度低，适合生根培养。

20、在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成_____正比_____，而与脱毒效果成____反比_____。

21、由胚乳培养可以获得___单___倍体植株，经秋水仙素处理可以获得___二_倍体植株。

22、使单倍体植株染色体加倍的途径主要有---自然加倍--、----人工加倍----和---通过愈伤组织再生加倍。

。

23、细胞悬浮培养有----成批培养---和----连续培养------两种类型。

24、通过植物组织培养获得无病毒苗的方法主要有----茎尖分生组织培养---、---愈伤组织培养-----、---珠心胚培养----及----花药培养----。

25、植物组织培养按培养对象分为-----器官培养----、---组织或愈伤组织培养-----、----细胞培养-----、------植株培养----_等几种类型。

26、1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物细胞全能性的理论概念；1943

年White提出植物细胞“__全能性___”学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植

物组织培养成为一门新兴的学科。

27、细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的---全部遗传信息-----_和---发育成完整植株---的潜在的能力。

28、6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进___根____的生长，这

时___脱分化____占主导地位；比值高促进____芽____的生长，这时___再分化_____占主导地位。

29、在组织培养中，不耐热的物质用___过滤灭菌__法灭菌，而培养基常用_湿热灭菌_法灭菌。

30、组织培养中有三大不易解决的问题，它们分别是__污染____、____褐变____、__玻璃化_。

31、愈伤组织的形态发生有_器官形态建成_和_胚形态建成__两种情况。

33、在组织培养中，IAA和GA必须用____过滤____法灭菌，而接种室空间采用_70%的酒精_或_2%新洁尔灭喷雾或甲醛熏蒸__法灭菌。

36、根据培养的材料，植物组织培养分：

___愈伤组织培养__、  ___器官培养__、  __细胞培养___、 __原生质培养___ 等类型。

37、组织培养植株再生的途径：

__直接产生不定芽___和_通过愈伤组织形成不定芽____。

38、植物组织培养的发展分为三个阶段：

___萌芽阶段__、__奠基阶段___和_快速发展和应用阶段____阶段。

40、外植体污染原因从病源分面主要有     真菌    和     细菌    两大类

41、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的    碳源     ，而且还能维持   培养基渗透压      

42、外植体灭菌一般先用    酒精     ，再用     升汞    浸泡

43、由愈伤组织后成大致经历诱导期、分裂期、分化期、三个时期。

由愈伤组织再生植株有两条途径         和         

45、常用的生长素有    IAA    、 2，4-D   、IBANAA 等，常用的细胞分裂素   KT       、     ZT     、   6-BA      

46、防褐变的措施：

  选取适宜的外植体和培养条件  、  剪切时尽量减少伤口面积  、     剪切口尽量平整    、   连续转移（继代培养）       、    加入抗氧化剂     

47、植物常用脱毒方法：

    热处理脱毒原理     、    茎尖培养脱毒原理      、    化学药剂处理     、   冷处理原理       、   原生质体，愈伤组织培养法、花药培养、株心胚培养脱毒     

48、实验室必须满足三个基本的需要：

___试验准备__、___无菌操作__、__控制培养___。

49植物组织培养的难题是褐变、玻璃化和污染及变异现象

50植物组培获得单倍体植株的方法是进行,而获得三倍体的方法是进行

52、生长素与细胞分裂素比值高有利根生长，比值低有利芽生长，比例合适诱导愈伤组织

53、植物组织培养按培养基的物理状态分为__固体_____培养和____液体___培养半固体培养基

四、判断题（对的画“√”；错题画“×”。

每题1分，共5分）

１、2，4—D可用0．1mol／L的HCl助溶，再加蒸馏水定容。

                        （x）

２、幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易。

                                 （√）

３、在MS的培养基成分中，MgSO4·7HO属于微量元素。

                             （x）

4、一般来说，光照强度较强，幼苗容易徒长，光照强度较弱幼苗生长粗壮。

（x）

５、由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。

（x）

6、一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过。

                       （√）

7、由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。

（x）

8、用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好越好。

（x）

9、经过花药培养所获得的植株都是单倍体。

（x）

10、幼嫩的组织比成熟的老组织脱分化难。

（x）

11、通过子房的培养，即可能等到单倍体植株，也有可能得到二倍体植株。

（√）

12、兰花可以通过芽丛分离的组培途径快繁，非洲菊通过原球茎增殖的途径快繁。

（x）

13、单细胞培养可以采用发酵罐进行培养。

（x）

１4、6-BA可用0.1mol／L的HCl助溶，再加蒸馏水定容。

                     （√）

15、环境的相对湿度过低易使培养基丧失大量水分，湿度过高时，则易造成污染。

（√）

16、一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过程。

（√）

17、环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一般要求80％-90％的相对湿度。

（√）

18、通过花药培养，即可能等到单倍体植株，也有可能得到二倍体、三倍体甚至更多倍体植株。

（√）

19、单体细胞比二倍倍体细胞容易诱导愈伤组织。

（x）

20、固体培养基可加进活性炭来增加通气度，以利于发根。

（x）

21、2，4-D可用0．1mol／L的NaOH或KOH助溶，而后加无菌水定容。

（√）

22．某些植物通过愈伤组织培养可以获得无病毒苗（√）

23．细胞分裂素/生长素的比值较高时，利于愈伤组织和芽的诱导X

24．细胞的全能性，可以通过成熟细胞的脱分化和再分化过程体现√

25．铁盐，常用乙二胺四乙酸铁螯合物，以防被氧化为不溶的氢氧化铁.√

26.用茎尖分生组织脱毒培养时，茎尖外植体大小与脱毒效果成反比。

X

30对于含有琼脂糖的培养基而言，在pH值高于6.5时，培养基不能很好地凝固；低于5.0时，培养基会变硬.X

31由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚X

五、简答题（每题5分，共15分）

1、培养基一般包括哪些基本成分?

答：

培养基的成份有：

（1）无机营养：

包括：

氧（O）、碳（C）、氢（H）、氮（N）、钾（K）、磷（P）、镁（Mg）、硫（S）和钙（Ca）等大量元素；铁（Fe）、铜（Cu）、锌（Zn）、锰（Mn）、钼（Mo）、硼（B）、碘（I）、钴（Co）、氯（Cl）、钠（Na）等微量元素

（2）有机营养：

氨基酸、天然提取物、维生素、糖类（3）植物生长调节物质：

主要包括生长素类和细胞分裂素类。

（4）其他：

包括水、活性炭、琼脂等。

2、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?

答：

培养基一般采用湿热灭菌，如果培养基中的有些成分高温易分解，则可采用过滤灭菌.培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌。

植物材料一般采用药剂浸泡灭菌，具体操作如下：

（1）外植体的预处理，对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，并将外植体用流水冲洗干净。

（2）用70%的酒精浸润材料30s左右。

（3）用灭菌剂浸泡灭菌，灭菌时不时搅动，使植物材料与灭菌剂有良好的接触，若灭菌

过程中加入数滴吐温，则灭菌效果更好。

（4）植物材料用无菌水冲洗3--5次，以除去灭菌剂。

3、提高商品化生产效率：

1.节约能源2.减少劳务开支3.扩大生产规模4.节约生产材料补：

降低商业化生产成本提高经济效益：

4、针对试管苗生产所需的费用，应采取相应措施降低生产成本，增强产品竞争力，提高试管苗经济效益。

5、诱导体胚的条件:

1．外植体：

①产生部位：

尤其胚、下胚轴、幼根、花序轴组织、未成熟的子房等；②生理状态：

采用外植体增殖能力较强时候的状态；③基因型。

2.培养基：

特别重要的是培养基中的生长素和N源。

N源：

还原态氮/硝态氮适宜比值。

3.生长调节剂：

①生长素：

所有生长素中，2,4-D被证明是极有效的。

体胚发生2个阶段：

胚的分化，胚性细胞的形成（需2,4-D）；胚状体的发育（低或去除2,4-D）。

2,4-D会诱导乙烯的产生，导致纤维素酶等活性升高，引起胚性细胞团的破坏。

②细胞分裂素：

细胞分裂素与生长素配合促进诱导体胚形成。

③赤霉素和脱落酸：

GA、ABA抑制体胚形成，但ABA可促进胚状体的正常发育，防止畸形胚的产生，尤其是对体胚成熟特别重要。

细胞再分化：

是指脱分化的分生细胞重新恢复分省能力，沿着正常的发育途径形成具有特定结构和功能的细胞。

6、组培实验室的组成，基本设备和功能

答：

组织培养实验室基本组成：

（1）无菌操作室

（2）化学实验室（3）培养室（4）细胞学观察室（5）暗室（6）驯化移栽室；无菌操作室基本设备有超净工作台、紫外灯、小搁架。

无菌操作用的器具，主要进行无菌操作；化学实验室基本设备有干燥箱、电子天平、量筒、吸管、烧杯、高压灭菌装置等，主要用于配置好培养基；培养室设备有固定式培养架、旋转式培养架、转床、摇床、控温、控光设备，是将接种到试管等的培养材料进行培养生长的场所。

细胞学观察室有显微镜、解剖镜、及照相设备，用于观察，记录培养材料的生长情况及结果；暗室用于实验室材料的摄影