临床酶学检验技术PPT课件.ppt

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精选ppt课件最新,1,临床酶学检验技术,临床生物化学检验,精选ppt课件最新,2,第一节酶学基本知识,酶的本质-绝大部分的酶是蛋白质，有些酶是核酸和酶蛋白组成的复合体，极少数酶的本质是核酸。

酶的特性-极高的催化效率、高度的特异性（specificity）以及催化作用的可调节性酶的结构与功能单纯酶酶蛋白（apoenzyme）结合酶辅酶（coenzyme）辅因子（cofactor）辅基（prostheticgroup）,精选ppt课件最新,3,酶是蛋白质，具有一、二、三级结构，有些酶还具有四级结构。

单体酶（monomericenzyme）-只由一条多肽链构成寡聚酶（oligomericenzyme）-由多个相同或不同亚基以非共价键连接的酶多酶体系（multienzymesystem）-由几种不同功能的酶彼此聚合而成的多酶复合物酶的必需基团（essentialgroup）-与酶的活性密切相关的基团酶的活性中心（activecenter）-组成具有能与底物结合并起催化反应的特定空间结构区域,精选ppt课件最新,4,酶的命名、分类与编号,酶的命名-习惯命名法、系统命名法酶的分类-可分为六大类氧化还原酶（oxido-reductases）、转移酶（transferases）、水解酶（hydrolases）、裂解酶（或裂合酶）（lyases）、异构酶（isomerases）、合成酶（或连接酶）（synthetases或ligases）酶的编号-用4个数字加以系统编号第一个数字表示酶的类别，第二个表示亚类，第三个表示亚-亚类，第四个表示酶的编号序数。

精选ppt课件最新,5,习惯用名英文缩写EC编号系统名乳酸脱氢酶LD（LDH）1.1.1.27L乳酸：

NAD+氧化还原酶单胺氧化酶MAO1.4.3.4单胺：

氧化还原酶-谷氨酰转移酶-GT/GGT2.3.2.2-谷氨酰肽：

氨基酸-谷氨酰转移酶门冬氨酸氨基转移酶AST2.6.1.1L-门冬氨酸：

-酮戊二酸氨基转移酶（谷草转氨酶）（GOT）丙氨酸氨基转移酶ALT2.6.1.2L-丙氨酸：

-酮戊二酸氨基转移酶（谷丙转氨酶）（GPT）肌酸激酶CK2.7.3.2三磷酸腺苷：

肌酸转磷酸酶碱性磷酸酶ALP（AKP）3.1.3.1正磷酸单酯磷酸水解酶,临床酶学分析中常用酶的名称与编号,精选ppt课件最新,6,精选ppt课件最新,7,三、酶促反应动力学,

（一）酶促反应方程,精选ppt课件最新,8,

（二）酶促反应进程,精选ppt课件最新,9,（三）酶动力学参数,1反应速度2米氏常数,

（1）初速度指在反应最初阶段底物的消耗量很小（一般在50%以内）时的反应速度

（2）最大反应速度指当酶的结合位点与底物结合饱和时的反应速度,精选ppt课件最新,10,（四）酶偶联反应,ABCD,酶学分析中作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶,Ei指示酶,Ea辅助酶,Ex,Ei,Ea,工具酶,精选ppt课件最新,11,精选ppt课件最新,12,第二节血清酶变化的生理病理机制,一、血清酶的来源与去路

（一）血清酶的来源1血浆固有酶2非血浆固有酶外分泌酶细胞酶

（二）血清酶的去路1肾小球滤过从尿液中排出2网状内皮系统清除3血管内失活或灭活,精选ppt课件最新,13,二、血清酶变化的生理病理机制,

（一）血清酶的生理差异1性别2年龄3饮食4运动5妊娠

（二）血清酶变化的病理机制1酶合成异常2细胞内酶的渗漏3酶进入血液的方式4其他血管内的抑制作用、清除速度,精选ppt课件最新,14,

（一）酶活性单位1惯用单位2国际单位-在特定的条件下，一分钟内使底物转变一微摩尔的酶量为一个国际单位。

3Katal单位-在规定条件下，每秒钟催化转化一摩尔底物的酶量。

1katal60106U,第三节酶含量的表示方法,一、酶活性浓度表示法,精选ppt课件最新,15,

（二）酶活性浓度指单位体积样品中的酶活性单位（三）正常上限升高倍数（ULN）是指用测得的酶活性结果除以参考范围上限,精选ppt课件最新,16,精选ppt课件最新,17,二、酶蛋白质量浓度表示法,测定酶蛋白质量浓度优点：

灵敏度高特异性高可测定无活性的酶与酶活性测定一起，计算免疫比活性在同工酶测定中更有价值,精选ppt课件最新,18,第四节酶催化活性浓度测定的理论基础,一、定时法二、连续监测法,精选ppt课件最新,19,（三）连续监测法的方法设计,1以人工合成色素原做底物的连续监测2NAD（P）H的连续监测3以Trinder反应做指示反应的连续监测4特殊反应类型的连续监测,精选ppt课件最新,20,第五节酶活性测定的影响因素与最适条件的确定,一、方法因素的影响,

（一）正向反应与逆向反应

（二）检测底物或检测产物（三）底物启动模式与样品启动模式,精选ppt课件最新,21,二、测定条件的影响与最适条件的确定,

（一）底物种类和浓度

（二）缓冲液种类、pH和离子强度（三）反应温度（四）辅助因子和激活剂（五）抑制剂（六）酶偶联法中的辅助酶和指示酶（七）延滞期与线性期的确定（八）样品与试剂比例,精选ppt课件最新,22,三、其他因素对测定结果的影响,

（一）仪器

（二）校准物（三）实验参数（四）副反应,精选ppt课件最新,23,第六节同工酶检测技术,一、电泳法二、抑制法三、其他方法

（一）热变性

（二）亲和层析法,精选ppt课件最新,24,免疫抑制法利用同工酶的一种亚基与相应的抗体结合后，酶活性受到抑制，测定加与不加抗体前后样品中酶活性的变化，可以计算出该型同工酶的活性。

不加抗CK-MM血清时样品的CK活性：

CK-MM和CK-MB活性；加入抗CK-MM血清时样品的CK活性：

50CK-MB的活性；加入抗CK-MM血清时样品的CK活性2：

CK-MB活性；所测CK-MM和CK-MB之总活性CK-MB活性CK-MM活性。

精选ppt课件最新,25,第七节目前常用诊断酶的酶活性测定,一、丙氨酸氨基转移酶与门冬氨酸氨基转移酶的测定,精选ppt课件最新,26,L-丙氨酸-酮戊二酸-丙酮酸L-谷氨酸,丙酮酸NADHH+乳酸NAD+,ALT（样品）,LD（试剂）,酶耦联法测定ALT,340nmA/min,-酮酸标本中,GLDH标本中,试剂1,试剂2,精选ppt课件最新,27,精选ppt课件最新,28,二、肌酸激酶的测定,三、碱性磷酸酶的测定,精选ppt课件最新,29,四、-谷氨酰基转移酶的测定,五、乳酸脱氢酶及其同工酶的测定,精选ppt课件最新,30,六、淀粉酶的测定,七、胆碱酯酶的测定,此课件下载可自行编辑修改，供参考！

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