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P77~78习题参考答案

20

P121习题解答10:

P155作业订正

补充1:

指出用电泳技术分离下列物质,pH是多少最适合,并说明理由?

(6分)。

①血清清蛋白(pI=4.9)和血红蛋白(pI=6.8)

②肌红蛋白(pI=4.6)和胰凝乳蛋白酶(pI=9.5)

③卵清蛋白(pI=4.6)和脲酶(pI=5.0)。

解:

电泳分离技术中,被分离质点所带净电荷差异越大,分离效

果就越好,所以应取两者的pI的中间值,带正电的向负极移动,

带负电的向正极移动。

因此,

①最佳pH=5.8;②最佳pH=8.2;③最佳pH=4.9。

P194习题解答:

2

补充1:

某肽经BrCN水解得到三个肽段,这三个肽段的结构分别为Asn.Trp.Gly.Met,Gly.Ala.Leu,Ala.Arg.Tyr.Asn.Met;用胰凝乳蛋白酶水解也得到三个肽段,其中一个为四肽,用6mol/LHCl水解此四肽只得到(Asp)2和一个Met三个氨基酸,请推导出此肽的氨基酸序列。

解:

P249习题解答

5:

pH7.0时:

②polyIle③polyArg⑥polyThr⑦polyPro:

不能形成α-螺旋

∵②侧链的空间位阻大;③侧链带相同电荷;⑥侧链有OH;⑦亚氨基酸

①polyLeu:

能形成α-螺旋

④polyArg(pH13)):

能形成α-螺旋(侧链解离,不带电荷)

⑤polyGlu(pH1.5):

能形成α-螺旋(侧链不解离,不带电荷)

P348习题解答:

12

补充1:

某酶制剂的比活力为42U/mg酶蛋白,每毫升含12mg蛋白质,试计算当底物浓度达到饱和时,1mL反应液中含:

①20μL酶制剂时的反应初速度;②5μL酶制剂时的反应初速度(单位为国际活力单位);③该酶制剂在使用前是否需要稀释?

解:

由题意知:

每mL酶制剂含有42×12=504U

①20μL酶制剂含有20×10-3×504=10.08U

酶促反应的初速度为10.08μmol/mL.min

②5μL酶制剂含有5×10-3×504=2.52U,

酶促反应的初速度为2.52μmol/mL.min

③一般情况下,酶制剂都应当稀释,以便在适当的实验期间内底物不被过分消耗,如:

10分钟内,1mL反应液内含5μL酶制剂,消耗的底物为:

(2.52μmol/mL.min)×10min=2.52×10-2mol/L。

因此,为了保证底物的消耗低于5%,必须使[S]>0.5mol/L。

如此大的底物浓度是很难达到的,所以酶制剂在使用时应当稀释。

补充2:

己糖激酶催化葡萄糖磷酸化时,Km=0.15mmol/L,催化果糖磷酸化时,Km=1.5mmol/L。

假如两种反应的Vmax相同:

①写出己糖酶催化葡萄糖和果糖磷酸化的反应式;

②分别计算葡萄糖和果糖为底物时,[S]=0.15、1.5、15mmol/L时,酶催化反应的V0是多少?

解:

②根据米氏方程,计算结果如下:

[S],mmol/L0.151.515

葡萄糖,V00.5Vmax0.91Vmax0.99Vmax

果糖,V00.091Vmax0.5Vmax0.91Vmax

补充3:

乳酸脱氢酶(LDH)催化下列反应,已知NAD+在340nm处无光吸收,而NADH在340nm处有光吸收,请设计测定LDH活性的实验方法。

解:

由于NAD+在340nm处无吸收,而NADH在340nm处有吸收,因此根据一定时间内NADH的生成量(测A340的大小)的多少既知LDH活力的大小。

LDH的活力单位定义为:

在最适条件下,每分钟在340nm下的光吸收增加0.1个单位定为1个活力单位。

13:

设:

1U=1μgTyr/min

14:

1U=1g淀粉/h

P381习题解答

3

10:

由图可知:

①Km=5×10-4mol/L

②Vmax=6μmol/L.min

③Vmax=kcat.[ET],

kcat=Vmax/[ET]=6/10-3=6×103/minkcat/Km=6×103/5×10-4×60

=2×105L/mol

④kcat=6×103/min=6×103/60=100/S

13:

已知:

[I]=2×10-4mol/L,Km=Km`,Vmax`=75%Vmax,

又知:

V=Vmax[S]/(Km+[S])(1+[I]/Ki)

Vmax`=Vmax/(1+[I]/Ki)即

75%Vmax=Vmax/(1+2×10-4/Ki),Ki=6.66×10-5mol/L

 

P430习题解答

8

琥珀酸为底物的竞争物,与ATCase结合,可改变酶的构象,使之从T→R转化,在[Asp]低时,[琥珀酸]↑,平衡向右偏移程度↑,∴v↑。

但琥珀酸并不是酶的底物,当[琥珀酸]增至一定值后,T→R转变达到最大程度,同时终产物[CTP]也达到最大,从而对反应造成抑制,另底物Asp消耗完,也无CTP生成,∴v↓。

P500习题解答

下册P90习题解答

2

P112习题解答

4

P174习题解答:

1

P195习题解答:

1

7、缺脱枝酶

糖原磷酸化酶:

催化糖原α(1→4)糖苷键磷酸解

脱枝酶:

催化糖原α(1→6)糖苷键水解,产物是Glc。

P338习题解答:

6

P375习题解答

2、∵Glucose+2NAD++2ADP+2Pi

→2H++2NADH+2H2O+2ATP+2丙酮酸

丙酮酸经GPT催化生成Ala

∴Glucose合成Ala的总平衡式为:

4:

补充1:

Glu在体内的物质代谢中有什么主要作用?

请举例说明

解:

Glu在生物体内具有非常主要的作用,主要有以下几点:

①组成蛋白质的必需成分,是由基因编码的二十种氨基酸之一。

②脑中积累过量的游离氨会导致休克死亡,在正常情况下游离氨可与Glu结合生成Gln,通过血液运到肝脏,再通过尿素循环生成尿素排出体外。

③嘧啶核苷酸生物合成的第一步,就是由Gln和CO2、ATP在氨甲酰磷酸合成酶催化下,生成氨甲酰磷酸,为嘧啶环的构成提供N3。

④Glu脱羧生成γ-氨基丁酸,对神经有抑制作用。

⑤Glu在GDH催化下脱氨和氨的同化作用,在氨基酸的相互转化起重要作用。

⑥在氨基酸的分解代谢中,Pro、Arg、Gln和His都是先转化为Glu,再脱氨生成α-酮戊二酸进一步分解。

Pro在体内的合成是由Glu环化而成。

补充2:

利用纯酶制剂和必需因子催化乙酰辅酶A和丙二酸单酰辅酶A合成软脂肪:

①供给有氚标记的乙酰辅酶A和无标记但过量的丙二酸单酰辅酶A,生成的软脂酸分子中有多少氚标记?

②如果用氚标记过量的丙二酸单酰辅酶A,但不标记乙酰辅酶A,生成的软脂酸分子中有多少氚标记?

③供给有14C标记的乙酰辅酶A和无标记但过量的丙二酸单酰辅酶A,生成的软脂酸分子中被标记的C原子是C1还是C16或C15?

为什么?

解:

①有3个氚原子。

因为每个乙酰辅酶A分子中,有3个氢原子被标记,在足够量的丙二酸单酰辅酶A存在时,除脂肪酸合成的第一步外,不再有乙酰辅酶A参与,所以只有3个氚原子。

②有14个。

因为丙二酸单酰辅酶A分子中有2个氢被标记,合成软脂酸需要7分子的丙二酸单酰辅酶A分子,所以有14个氚标记。

③在脂酸合成中,除第一步是乙酰-ACP和丙二酸单酰-ACP缩合外,以后的循环合成步骤中,在足量的丙二酸单酰辅酶A存在下,乙酰辅酶A不再参与脂肪酸的合成,所以以14C标记的乙酰辅酶A和无标记但过量的丙二酸单酰辅酶A,合成的软脂酸分子中14C标记出现在C16和C15。

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