希森美康凝血功能CA500标准SOP文件.docx
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希森美康凝血功能CA500标准SOP文件
SysmexCA500系列
全自动血凝仪标准操作规程
1.概述3
2.仪器运行条件6
3.样本检测程序17
4.质控检测程序23
5.标准曲线制作29
6.维护及耗材置换35
7.附录49
第一部分
概述
1.使用目的
CA-500系列全自动血凝分析仪用于凝血、抗凝、纤维蛋白溶解系统功能的检测,为出血性和血栓性疾病的诊断与鉴别诊断、溶栓及抗凝治疗的监测与疗效观察提供有价值的指标。
2．检测原理
全自动血凝分析仪CA-500系列用于凝血、抗凝、纤维蛋白溶解系统因子的检测，其中CA510采用凝固法；CA530采用凝固法，发色底物法两种检测原理：
CA550采用凝固法，发色底物法和免疫分析法三种检测原理。
2．1凝固法（散射光比浊法加百分比终点法）
2．1．1散射光比浊法
CA-500系列采用光学检测法，将血液凝固过程中的混浊度变化转换成散射光的变化后进行检测。
光源（卤素灯）发出的660nm光照射到标本，光电二极管接收90°直角方向散射光信号并转换为电信号，仪器内微机据此绘制出凝固曲线，用百分比检测法来确定凝固时间。
图1-1：
光学检测系统
2．1．2百分比检测法
仪器把加入试剂后最初的散射光量设为0%，把反应结束后不再变化的散射光量设为100%。
将与50%散射光量相对应的时间作为凝固终点报告，因为50%的部位单位时间内散射光量的变化最为显着，纤维蛋白单体的聚合速度最快。
我们把这种方法称为“百分比终点法”。
图1-2：
凝固时间的测定
2．2发色底物法
首先人工合成含某种活性酶裂解位点的化合物，且化合物连接上产色物质，该修饰后的化合物称作产色底物。
待检样品中含有活性酶或往样品中加入活性酶（被测物质含量同酶活性呈一定的数量关系），酶作用于裂解位点使产色物质被解离下来，在被检样品中产生颜色变化，检测透射光的变化。
根据酶活性同吸光度的变化、酶活性同所需检测物质含量间均存在一定的数量关系，由吸光度变化推算出所检测物质含量。
产色物质一般选用连接对硝基苯胺（PNA）。
仪器采用透射光检测系统进行检测。
光源发出的光经过三种滤光片可以分隔成405nm,575nm和800nm的光．选用405nm波长的光照射样本，光电二级管接收到透射光并转换成电信号，通过微计记录每分钟吸光度变化。
利用吸光度变化和浓度（或百分比活性）的关系来检测相对应的待测物浓度（或百分比活性）。
图1-3：
透射光检测系统
2．3免疫分析法
将待测物质相对应的抗体包被在大小均一，直径为15-60nm的胶乳颗粒上。
包被后的抗体与抗原结合后形成的复合物体积增大,引起透射光的变化，由吸光度变化推算出所检测物质含量。
仪器采用发色底物单元的透射光检测系统。
3．检测参数
3．1凝固法：
PT,APTT,Fbg,TT,外源凝血因子（II，V，VII，X），内源凝血因子（VIII，IX，XI，XII）等
3．2发色底物法：
ATIII，α2PI，Plg，PC等
3．3免疫分析法：
D-Dimer,P-FDP,vWF
4．检测性能
PT:
.≤2%
APTT:
.≤2%
Fbg:
.≤4%
TT:
.≤10%
外源凝血因子（II，V，VII，X）:
.≤5%
内源凝血因子（VIII，IX，XI，XII）:
.≤5%
ATIII:
.≤5%
α2PI:
.≤5%
Plg:
.≤5%
PC:
.≤10%
D-Dimer:
.≤5%
第二部分
仪器运行条件
安装环境
安装及位置移动
CA-500的安装必须在Sysmex业务代表的知道下进行。
当位置必须移动时，应该与Sysmex业务代表联系。
应该注意由于拥护执行的位置移动所导致的故障，将使担保无效，即使设备仍然在担保期内。
地基
每台设备的电缆均使用3P插头，当供应电源的插座是3P时，可以很容易地将插头插入到插座中。
所供应的电缆和插头的类型决定于系统的电源电压。
警告：
合适地应用适当的电源电缆，确保系统适当的接地，未能适当地将设备放置在地面，或未能设置旁路重要的安全性，可导致点危险。
注意：
所要求的电源供应插座是一个。
安装空间
为了保证设置执行其全部功能，应该将其安装在合适的位置。
选择紧邻电源供应的地方。
在收集废弃物的过程中，总是使用用完的废物瓶。
为设备的维护和服务保留足够的空间。
应该充分考虑到设备的散热。
边缘、后部以及顶部与墙壁的距离至
少留出50厘米的距离。
设备的尺寸显示如下，电缆1.8m长。
宽度（mm）
深度（mm）
高度（mm）
重量（kg）
主要单元
540
470
487
大约45
小心
在设备被放置位置的低部，确信放置了洗涤瓶和废物瓶。
不要将它们放置在设备上或有可能将设备压倒或不能产生正确的结果。
开、关机条件
打开电源前的检查
1．检查洗涤瓶
当发现洗涤液的水平较低时，用蒸馏水更换瓶中的洗涤液。
小心
当分析在卸下洗涤瓶的条件下进行，有可能导致不能获得正确的分析结果。
明确洗涤瓶直立。
2.检查废物瓶
当废弃液被收集在废物瓶中的时候，抛弃内容物。
关于如何处置废弃液，
警告
当处置废弃液时，要一直戴上橡皮手套。
工作结束后，在消毒液中洗手。
如果手被血液或其他物品污染，有可能导致病原微生物的感染。
除此之外，应该充分考虑到医疗或无用垃圾的危险问题。
小心
当分析在卸下废物瓶的状态下进行，废弃物将流回真空泵，导致泵的工作障碍。
确信废物引流瓶直立。
2．检查电源电缆
检查电源电缆的插头是否正确地插入到插座中。
3．检查连接电缆
当设备与主机连接时，检查连接电缆是否被正确地连接。
4．检查废弃管处置抽屉
当使用过的反应管依然留置在废弃管处置抽屉中时，应将它们丢弃。
5．检查打印纸
检查内部打印机是否有足够数量的打印纸以便在未来的一天中打印所处理的许多标本的结果。
6．检查光屏蔽罩
打开屏蔽罩，检查是否有分析的障碍。
2打开电源
（1）在设备的左边打开电源开关
系统将执行大致10秒的自身检测，根菜单展示屏出现。
（2）当探测器达到允许分析的温度，根菜单屏展示“Ready”（准备就绪）。
注意：
探测器达到允许进行分析的温度在打开电源后，大约需要5-30分钟的时间。
CA-530和CA-540监视试剂制冷也需要这样的时间。
在系统等待允许分析温度的时间，“NotReady”（未准备就绪）键的信息展示，不展示“Start”键。
工作前准备
试剂准备
准备试剂
准备分析所需要的凝集试剂。
Owren’sVeronal缓冲液，洗涤溶液。
更详细的信息参照每种试剂的登载内容。
消耗试剂
参数
试剂
每次测试消耗量
PT
PT试剂
100?
l
APTT
APTT试剂
50?
l
氯化钙溶液
50?
l
Fbg
凝血酶试剂
50?
l
Owren’sVeronal缓冲液
90?
l
TT
凝血酶时间试剂
50?
l
TTO
凝血酶活度测定试剂
125?
l
Owren’sVeronal缓冲液
30?
l
NT
肝促凝血酶原激酶试剂
125?
l
Owren’sVeronal缓冲液
40?
l
AT3
Dade?
抗凝血酶III试剂盒
凝血酶试剂
底物
100?
l
100?
l
Owren’sVeronal缓冲液
130?
l
D-Dimer
D-Dimer加速剂
25?
l
D-Dimer乳胶试剂
150?
l
洗涤溶液
蒸馏水（洗涤瓶）
每次测试最多24mm
CACLEANI
与待分析标本所需试剂的量相同。
每次测试所需要的Owren’sVeronal缓冲液的量包括对每个分析参数使用在分析液中的数量。
每次洗涤操作所需要蒸馏水的量大约是8mm，对两种试剂分析每次测试约需24mm。
在两种试剂分析过程中，在分析过程中需要执行3次洗涤操作；在样本分装后，以及两种试剂分装后。
小心
对每种试剂的准备要考虑到分析参数，以及本分析样本的数量。
除分析所必须的体积外，多余要准备的体积列举如下：
每种凝集试剂：
大约0.6mm
蒸馏水：
大约500mm
Owren’sVeronal缓冲液：
大约0.9mm
CACLEANI：
大约0.9mm
在分析开始后，用于清洁的试剂的数量：
蒸馏水：
大约20mm
CACLEANI：
大约125?
l
根据所使用的容器不同所要求的额外试剂。
圆锥形样品杯（2mm或4mm）：
大约0.15mm
Dade4mm小瓶：
大约0.6mm
TTO，NT3mm小瓶：
大约0.6mm
推进式小瓶PV-10（20mmODx40mm高）：
大约0.9mm
（1）准备试剂
每次按照文献完成每种试剂的准备
小心
严格按照伴随包装的说明书中的说明准备每种试剂，否则，你就不能获得正确的分析结果。
（2）将试剂放置在试管架上。
试剂瓶（每个20mmODx40mm高），或任意的试剂固定器以及样本杯可以被放置在试剂架上。
样本杯
试剂固定器固定器
小心
永远将试剂放置在指定的位置，才能获得正确的结果。
确信CACLEANI被放置在11号固定器的位置上（如上述右上角区域所示）。
放置反应管
在反应试管架上，为进行分析放置反应管。
在分析台上，放置指定位置的反应试管架。
反应管
反应试管架
当心
当把反应管放置到反应试管架上的时候，应该小心不要将水分和唾液滴落到反应管中。
这将改变分析结果。
当心：
反应管架的放置应该安全，以防止试管解封或升高，探针可能被损伤。
反应管应该从开始（从右上角开始）按顺序连续放置。
因此，不要留有空位置。
除了分析所必需数量的反应管外，应该准备一些额外的反应管。
务必使用供应的反应管（SU-40）。
为CA-6000所应用的反应管，也就是（SUA-400A）不能使用。
确认标准曲线
确信在执行分析之前，标准曲线应该被正确地设置。
当心
除非标准曲线被适当地设置，PT比、PT-INR以及其他计算参数不能被报告。
（1）在根菜单屏幕上按[StandardCure]（标准曲线）键。
标准曲线屏将被展示。
（2）在标准曲线展示屏上按[SelectTest]（选择测试）键。
选择测试屏将出现。
（3）按要被确认的分析参数键。
所选择参数的标准曲线数据将出现在标准曲线屏上。
（4）按[MainMenu]（主要菜单）键。
标准曲线的设置程序目前就完成了。
重复上述
（2）-（3）确认每个分析参数的标准曲线。
关于更详细的内容，
实行质量控制
为了保证分析结果的可靠性，必须进行有效的质量控制。
对CA-500而言，当QC文件编号（QC01-QC12）为ID编号注册，QC样本（控制血浆、共享血浆等）就被分析，接着分析数据被保留在QC文件中。
利用设备内部稳定的QC程序对这些分析数据的处理，监控也就随之发生一次又一次的变化。
对CA-500，两个QC程序可用：
均数控制：
使用两次连续分析的平均数据。
既然平均值被用做控制数据，这种控制对实际上对数据的重复性无影响。
L-J控制：
使用来源于对控制材料的单一分析所得到的数据。
与均数控制比较，因此，这种控制对分析的重复性影响很敏感。
1.执行质量控制
（1）在样本架上放置质量控制样本。
（2）注册QC样本编号。
在根菜单屏上按[IDNoEntry]键，并使用数字键，为质量控制输入ID编号（[QC][0][1]–[QC][1][2]）。
（3）注册分析参数
在根菜单屏上使用[?
]和[?
]键指定样本及分析参数键，已经展示“O”即是所指定的分析参数。
（4）在屏幕的右上角按[Start]键。
分析数据即自动地被保存在QC文件中。
（5）确认QC图。
设备执行QC程序，证实QC图，更详细的信息，
.样本准备
在样本架上放置样本试管或分装的样本杯。
（1）血浆的准备
1）添加1份%的或%的柠檬酸钠作为抗凝剂到9份的静脉血中，将内容物充分混合。
2）混合物3000rpm离心15分钟，从血液成分中分离血浆成分。
3）放置，用提供的样本架，离心后的血液标本试管的本身或已经被移走的血浆放置到另外一个测试管中。
4）把测试管安全地插入到试管架的低部。
抗凝剂
%柠檬酸钠
%柠檬酸钠
可用的试管
OD：
10mm
HT：
65mm-100mm
OD：
13mm
HT：
75mm-100mm
OD：
15mm
HT：
65mm-100mm
（小于8mmID的试管不能使用）
样本体积（最小）
（仅仅为血浆）
（离心后）
当心
在处理血浆的过程中当心：
作为其容器，使用塑料或硅酸盐包被的玻璃试管。
作为抗凝剂，使用%或%的柠檬酸钠溶液。
当其他任何抗凝剂，而不是本抗凝剂被使用时，将有白色的沉淀的发生，而导致分析的结果不正确。
血液和柠檬酸钠的混合液的体积比分别为9份对1份。
在混合比值发生变化时，凝集时间也会发生变化，偶尔也会导致不正确的分析结果。
样本必须在收集后的4小时内进行分析，如果储存，则需冷藏。
那些收集后超过4小时，而又在不适当的条件下被保存的标本，将给出不正确的分析结果。
血浆层
血浆
或更多或更多或更多
或更多或更多或更多血液层
或更多或更多
或更多或更多
只有血浆的标本所需要的最小体积
离心后的标本所需要的最小体积
*内部直径为-14mm的试管包括：
外部直径?
长度
血液体积
13mm?
75mm
，，，4.5mm
13.2mm?
78mm
，，4.5mm
12.8mm?
75mm
，，3.6mm
12.7mm?
75mm
2.3mm
当心
上述所显示的血液体积，是按最小体积定义。
对一个待分析的参数来说，应准备额外的体积。
当使用外部直径为15mm的测试管时，从预先准备的试管架上移走提供的13mm试管调节器。
当所使用的试管外部直径是10mm时，从样本架上移走提供的调节器，并防止在预先所选择的固定器编号113（直径10mm测试管调节器）。
当使用样本杯时，避免放置低于血液体积的样本。
这样的样本将导致“样本探针破坏”的错误。
就血浆体积而言，准备所要求的体积外加100?
l。
（3）粘贴条形码标记（可选）
为了保证正确地阅读一个条形码，条形码标记必须粘贴在适当的位置。
参照下图粘贴条形码。
（4）拉出取样器。
取样器
（5）在取样器内放置样本架
只能放置一个（10个样本）样本架。
当心
除非样本架被正确地放置，否则将导致设备故障。
在放置之前将样本架左下的棘爪推进。
.设置样本编号及分析参数
利用CA-500，所有的样本被按照一个分析顺序分析。
对10个样本的分析信息（1满架）可被设置一次分析。
有四种方法设置ID编号及分析参数：
1）用数字键和分析参数键手动设置
2）从主机获得所搜集的ID编号及分析参数
3）手工输入ID编号，以便从主机自动接收分析的顺序
4）使用已经从条形码扫描仪上读出的ID编号，以便分析顺序信息自动地从主机接收。
第三部分
样本检测程序
样本分析
常规样本分析
开始分析
本节说明整个分析过程的操作。
随着分析准备工作以及注册分析信息的完成，设备目前开始准备分析。
（1）检查设备的系统展示状态
确认根菜单屏幕展示“Ready”（准备就绪）。
（2）按[Start]键。
在屏幕上确认第一测试管初始位置出现。
（3）按[continue]键或[FirstTube]键。
[continue]键：
开始一个管的反应，紧随在先前分析的最后没应用的测试管。
[FirstTube]键：
开始在右边的反应管架上的上部最右边的测试管分析。
当分析开始时，如果从分析开始已经运行里4小时，以下信息将展示，而且洗涤程序将自动启动并替换清洗液和液压管中的缓冲溶液
接着，屏幕将展示“Analyzing”（分析进行中），而且在工作装载清单中的光标位置移向下一个反应架。
光标位置移向下一个反应架
当心：
当你意外地按压[FirstTube]键时，导致设备错误地终止，接着反应管继续反应的信息丧失。
在这种情况下，再次设置反应管在最初的位置，然后按[Start]键。
注意：
在电源打开后第一次开始分析，[Continue]键不展示。
（4）分析完成
在所有的分析结束后，响起“叽叽，叽叽，唧唧”警报声。
如果你想继续分析，当信息“Racknotreplaceable”（试管架未更换）转换成“replaceRack?
YES!
”（更换试管架？
是！
），接着下一个样本可被放置。
甚至在分析过程中，当[INTERR]转换成[Start]键，将有可能分析下一个试管架上的样本。
警告
在分析过程中，不要打开光屏蔽罩或放入手或手指。
这可以避免受到损伤。
如果在操作过程中打开光屏蔽罩，警报声将响起，设备终止运行。
当心：
在操作过程中，取样器不能被拉出，因为锁定机制处于激活状态以避免损伤或损害到设备。
在操作过程中，当电源被关闭，设备将终止运行。
明确分析已经被完成，在关闭电源开关之前，设备展示状态是“Ready”。
注意：
操作过程中的限制
只有在根菜单上的[StoreData]，[?
]，[?
]，[Repeat]，[IDNo.Entry]，[HC]，[Prev]，[Next]键在操作过程中可被使用。
一旦注册，分析信息不能被改变。
分析状态展示（根菜单屏幕）
每个标本的分析状态展示在根菜单屏幕上。
样本的鉴别是通过ID序列号和反应架上的位置。
（1）样本搜索
按[Prev]，[Next]，[?
]或[?
]键搜索一个样本你所期望检查的分析状态。
（2）每个可以应用样本的当前分析状态被展示：
分析状态符号的含义：
—：
分析不是按照参数的顺序。
○：
所期望的分析。
◎：
分析进行中。
●：
分析完成。
╳：
由于中断或错误，分析没有完成。
展示和打印输出样本数据
详细的内容参照第四章：
展示及处理结果。
（1）在根菜单展示屏幕按[StoredData]键。
分析数据将被以清单格式展示。
（2）为展示凝集曲线，按[Graph]键。
将光标移动到已经有凝集曲线被展示的标本，按Graph]键。
添加到分析数据之中的标志的含义：
*：
一些错误；不相等的复制；一个数据超出了Fbg分析范围
+：
超过标记的上限
-：
低于标记的下限
！
：
按照不同的稀释放大倍数执行的分析
m：
平均值
>：
超过报告的上限
<：
低于报告的下限
分析的中断
分析过程可在任何时间内被中断。
（1）按[INTERR]键。
在分析被执行的过程中，在屏幕右上角的[Start]键被[INTERR]键代替。
（2）按[INTERR]键，[Start]键，或[Cancel]键。
[INTERR]键：
中断过程开始，没有新的分析执行。
[Start]键：
处理过程转向STAT样本的处理。
参照本章中的第13部分：
STAT样本的的分析。
[Cancel]键：
屏幕转向最初的一个。
注意：
当中断信息屏幕打开时，设备在执行分析。
当本屏所有的分析被完成后，根菜单屏幕回复到“Ready”（准备就绪）展示状态。
（3）当分析中断过程完成后，[Resume]键展示在屏幕的右上角。
当你想进行中断分析时，不要按[Resume]键。
当[Resume]键被按压：
分析重新启动。
当[Resume]键没有被按压：
当分析分装的样本结束后，确认分析持续的屏幕被展示。
（4）当你想中断分析，按[Cancel]键。
[Start]键：
分析重新开始。
[Cancel]键：
分析被取消，屏幕恢复到根菜单。
注意：
其分析已经被取消的样本，有“x”展示在工作清单上。
STAT样本的分析
（1）按[INTERR]?
键。
中断确认信息屏将出现。
（2）按[STAT]键。
新标本的分析将被中断。
当中断过程被开始，对STAT样本分析的顺序可被注册。
（3）“ReplaceRack?
YES!
”被展示。
当分析中断过程结束后，“ReplaceRack?
YES!
”（更换分析试管架？
是！
）被展示，取样器可以被拉出。
（4）在STAT样本架中放置一个STAT样本。
（5）按[StartSTAT]键。
对一个STAT样本的分析开始。
注意：
当[StartSTAT]键被按压而没有拉出取样器，“ReplaceSTATSample.OK?
”（更换STAT样本？
是！
）信息将出现。
按[Cancel]键，STAT样本顺序设置屏幕恢复而没有开始STAT样本分析。
（6）分析完成
当STAT样本分析被完成，对最初的样本架的分析继续。
注意：
样本架编号01-00，02-00，03-00，以及99-00的STAT样本被展示，99-00后接01-00。
为了取消一个STAT样本，按[CancelSTAT]键。
对最初样本架的分析被恢复。
注意：
在STAT样本被分装时，[INTERR]键没有被展示。
紧急状态下的终止
通过拉下机器停止开关，分析操作可以立即被终止。
（1）拉下机器停止开关（红色开关）。
分析操作将被立即被终止。
机器停止开关
图1-14-1：
机器停止开关
（2）在测光过程中机器停止开关被拉下，确认是否停止测光的屏幕出现。
（3）为了终止光测定，按[Yes]键。
当光测定过程没有开始或被中断，以下屏幕出现：
当心
当测光过程被停止，丢弃/清洗操作开始，被分析的样本数据被丢弃。
重新分析的样本数据在工作清单中带有“x”号。
如果取样器被拉出，当样本被证实跌落在样本管中，该样本将被证明永久习惯内损坏。
（4）为了开始丢弃/清洗操作，按[Yes]键。
屏幕将展示“Discard/Rinseinprogress.Pleasewait”（丢弃/清洗操作进行中，请稍候）。
丢弃/清洗操作将被执行。
（5）当恢复操作不能被影响，按[No]键。
注意：
什么情况下恢复操作不能被进行？
例如：
是操作开始可能损坏样本探针的停止状态。
（6）当一个未分析的顺序保留时，是否继续分
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