3、隔离环境:
隔离环境设施采用无菌隔离器以保证无菌或无外来污染物.隔离器内的空气、饲料、水、垫料和设备均是无菌的,为了保证这种无菌状态,人不能和动物直接接触,工作人员通过附着于隔离器上的橡胶手套进行操作.隔离器的空气进入要经过超高效过滤0.5um微粒,滤除率99.97%〕,一切物品包装灭菌后通过灭菌传递舱移入,动物来自无菌动物、或其哺育的剖腹产动物后代.该系统的设施适用于饲育无菌们级与SPF级实验动物.
四、填空题
l、在清洁级实验动物的管理中,饲育室环境指标是:
温度18-29℃,日温差≤3℃,相对湿度40-70%.
2、在清洁级实验动物的管理中,饲育室环境指标是:
换气量10-20次/h,气流速度≤0.18m/s,,梯度压差20-50Pa.
3、在清洁级实验动物的管理中,饲育室环境指标是:
空气洁净度十万级,落下菌数12.2个/皿,氨浓度14mg/m3.
4、在清洁级实验动物的管理中,饲育室环境指标是:
噪声≤60dB,工作照度150-300lx,昼夜明暗交替时间12/12h或10/14h.
5、屏障设施外发放SPF级动物,动物应在屏障区内包装.
6、屏障设施实验动物饲育室为了保持空气的洁净与送风量,注意定期更换风机的空气过滤器.
五、问答题
1、从广义上实验动物的环境因素如何分类?
答:
分成1〕气候因素:
如温度、湿度、气流、风速等.2〕物理、化学因素:
如氧、二氧化碳、粉尘、臭味、噪音、照明、杀虫剂、消毒剂、有害化学物质等.3〕居住因素:
如房屋、饲养笼具、垫料、给食器、供水器等.4〕营养因素:
如饲料、水.5〕生物因素:
其中同种动物因素如社会地位、势力范围、咬斗,饲养密度等.异种生物因素如微生物、人、其他动物等.
2、实验动物设施选址时,其外环境的要求是什么?
答:
1〕实验动物繁育、生产与实验场所应避开自然疫源地.2〕应选在通风、绿化、自然环境条件好,空气质量优良的区域.3〕远离铁路、码头、飞机场、交通要道以与散发大量粉尘和有害气体的工厂、贮仓、堆场等有严重空气污染、振动或噪声干扰的区域.4〕实验动物繁育、生产与实验场所应与居民区保持不小于50m的卫生防护距离.
第三章 实验动物遗传
一、名词解释
1、近交系:
经连续20代或20代以上的全同胞兄妹或亲子交配培育而成,品系内所有个体都能追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先的动物群体.
2、杂交一代动物〔F1代〕:
两个不同近交系动物杂交所生的第一代动物,称之为杂交一代动物〔F1代〕
3、亚系:
近交系内各个分支动物群之间,已经发现或确信可能存在遗传上的差异,则这些近交系的分支称之为原近交系的亚系.
4、支系:
由于饲养的环境或人为的技术处理,可能影响动物群的某些特征,这个动物群体并未发现真正的或可能存在的遗传上的差异,相对于原来的近交系或亚系,它称之为支系.
5、封闭群:
在不从外部引入新个体的条件下,以非近亲交配方式进行繁殖、生产的实验动物种群,且至少连续繁殖4代以上,这群动物才可称之为封闭群.
四、填空题
l、分离定律与自由组合定律〔独立分配定律〕是孟德尔以豌豆为材料进行杂交试验后提示的两条基本的遗传规律.
2、美国遗传学家摩尔根以果蝇为试验材料,经过六年的研究,在1915年提出了遗传学的第三条基本定律?
连锁和交换定律.
3、由于基因存在于染色体上,同一条染色体上的一系列连锁基因就组成了一个连锁群.
4、遗传作图是以重组率来表示基因间的连锁关系,和相对之间的遗传距离.
5、染色体畸变是染色体结构或染色体数目发生变化,在光学显微镜下可观察到.
6、目前获得遗传工程小鼠的主要生物技术手段是基因转移,基因定位突变和基因化学和放射性诱变三种技术.
7、近交系动物发生遗传变化的主要原因有遗传污染、遗传漂变和遗传突变.
8、免疫学标记基因监测的主要方法是皮肤移植试验,它是检测组织相容性表面抗原的一种方法.
9、个体表现出的性状称为表型,亲本杂交后F1表现的性状叫显性性状,F1不表现的性状叫隐性性状,当F1杂交产生F2时,又出现不表现性状的个体,F2中表现性状与不表现性状个体的比例为3:
1
10、F1从其一个亲本接受R基因,从另一亲本接受Y基因,因此其基因型由不同的两个基因RY组成称为杂合体.
11、F1互交〔Rr*Rr〕,F2中有三种基因型是RR、Rr和rr,三种基因型比较为1:
2:
l.
12、F1〔Rr〕与显性亲本〔RR〕回交,后代应全部表现显性性状F1与隐性亲本〔rr〕回交,后代应一半为显性性状基因型Rr,一半为隐性性状基因型rr.
五、问答题
1、近交系动物的引种原则是什么?
答:
近交系动物引种的原则是遗传背景明确,来源清楚,有较完整的资料,如:
品系名称、近交代数、遗传基因特点与主要生物学特征,引种动物应来自近交系的基础群,近交系动物的引种的数量以3对为好.引种近交系动物应从国家种子中心引种.
2、近交系动物有什么特征,动物实验选择近交系的意义是什么?
答:
近交系动物具有基因位点的纯合性,任何一个纯系动物,任何一个基因位点纯合子的概率在99%以上;遗传组成的同源性,品系内所有动物都可追溯到一对共同祖先;具有表型一致性、长期遗传的稳定性,每个近交系都有自己的遗传组成和遗传概貌,从而每个近交系都具有遗传组成的独特性和特征的可分辨性,以与分布的广泛性和背景资料的完整性.由于具有以上特征,选用近交系动物作实验,结果的一致性和可重复性好,动物使用量少;近交系动物组织相容性抗原一致,是组织细胞和肿瘤移植的理想材料;近交系动物也是生物医学研究、人类疾病的动物模型研究、转基因动物研究必备的材料.
3、杂交一代动物有何特征,动物实验选择杂交一代动物的意义是什么?
答:
杂交一代动物基因型和表型相同实验反应高度均一,杂交一代动物具有较强的生命力和对疾病的抵抗力,杂交一代动物具有两个亲本的基因,可以接受两个亲本的组织、器官、细胞和肿瘤的移植.
所以杂交一代动物更适合于营养、药物、病原体和激素的生物评估、与作移植研究、免疫学和发育生物学研究,杂交一代动物也是很多疾病的动物模型.
4、封闭群动物有何特征,动物实验选择封闭群的意义是什么?
答:
封闭群动物是处于封闭状态繁殖的动物群体,封闭群必须保持较大的基础群,采用随机交配每代的近交系数增长必须小于1%,从而使群内基因频率能保持稳定不变;封闭群动物能隐藏大量的突变基因于纯合或杂合状态,从而保证了生物的多态性.封闭群动物遗传组成更接近于自然状态下的动物群体,采用封闭群动物做实验,基因处于杂合状态和表型的多态性,更适合于用作药品的安全评价如:
三致试验、致畸胎试验、急毒和长毒试验、微生物学试验等.
第四章实验动物繁殖
一、名词解释
1、发情周期:
动物性成熟后,雌性动物的生殖道会出现一系列重复性、循环性的变化,这个变化于怀孕、哺乳或生殖器官异常时停止,这个变化称为发情周期.
2、自发性排卵:
在每一个发情周期里,雌性动物不论交配与否总会自然排卵,这种排卵称之为自发性排卵.
3、假孕:
雌性动物与一个无繁殖能力的雄性动物交配、或受精卵未着床、或怀孕不是由交配而引起的,所显现的怀孕现象称为假孕.
四、填空题
l、近交系基础群的维持方法有单线法、平行线法和选优法.最常用的是选优法.
2、封闭群动物的繁殖方法有最佳避免近交法、循环交配法和随机交配法.
3、近交系的繁育体系应包括基础群、血缘扩大群和生产群.
五、问答题
l、近交系的基础群与生产群有何不同?
答:
近交系的基础群采用全同胞兄妹进行交配,基础群的动物应有繁殖系谱,每一代有限定的留种对数;有个体记录卡〔包括品系名称、近交代数、动物编号、出生日期、双亲编号、离乳日期、交配日期、生育记录等〕;基础群动物不超过5-7代都应能追溯到一对共同的祖先.而生产群动物来自基础群或血缘扩大群,通常选用红绿灯生产体系,采用随机交配方式进行繁殖,繁殖代数一般不超过四代,四代以后的动物不再留种.
2、封闭群动物引种、繁殖的原则是什么?
答:
封闭群动物的繁殖是尽量保持封闭群的动物的基因异质性与多态性,避免随繁殖代数增加,导致近交系数的过快上升.具体的说:
引种原则:
1〕作为原种的封闭群动物必须遗传背景明确,来源清楚,有较完整的资料〔包括种群名称、来源、遗传基因特点与主要生物学特性等〕.2〕为保持封闭群动物的遗传异质性与基因多态性,引种动物数量要足够多,小型啮齿类封闭群动物引种数目一般不能少于25对.
繁殖原则:
为保持封闭群动物的遗传基因的稳定,封闭群动物数量应足够大,并尽量避免近亲交配.根据封闭群的大小,选用循环交配法等方法进行繁殖.
第五章营养与饲育管理
一、名词解释
1、全价营养配合饲料:
营养物质均衡全面,能够完全满足实验动物的各种营养需要,不需再添加任何其他营养成分,即可直接饲喂动物并获得较好饲养效果的饲料
2、混合饲料:
由能量饲料、蛋自质饲料、矿物质饲料等按一定比例配合而成.基本上能满足动物的营养需要.但营养不够全面,还需补充适量的其他营养物质.
3、垫料的基本要求:
1〕容易获得,易于运输,便于储存;2〕价格便宜;3〕无污染,无芳香烃类气味;4〕没有营养,不被动物食用;5〕干燥,有良好的吸湿性;6〕对人和动物无害:
7〕舒适,具有良好的保温性;8〕容易清理并处置.
四、填空题
1、实验动物的营养要素应包括蛋白质、脂肪、碳水化合物、水份、矿物质和维生素六大类.
2、在考虑实验动物饲料营养配比时主要考虑生长、维持、繁殖三种营养配比.
3、实验动物成品料存贮的原则是定期清扫存贮罐、严格执行成品料先进先出的原则:
注意存贮罐〔仓〕的温、湿度,防止成品料霉变;防止野鼠、昆虫与有毒物质的污染;分类堆放,标志清楚,严防与原料混贮;保存货物出库必须登记.
4、豚鼠体内不能合成维生素C,对其缺乏十分敏感,是研究实验性坏血病的极好动物模型.
5、国家实验动物饲料营养标准中,营养成分常规检测指标是水、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分,钙和磷七种成分.
6、动物体内水的来源有代谢水、饲料中的水分、饮水三种途径.
五、问答题
l、根据GB14924?
94合格的商品化实验动物颗粒饲料应包括哪些内容?
答:
根据GB14924?
94合格的商品化实验动物颗粒饲料应包括1〕感官指标:
饲料应混合均匀、新鲜、无杂质、无异味、无霉变、无发酵.无虫蛀与鼠咬、颗粒料应光滑、硬度适中.2〕添加成分:
不得渗入抗生素.驱虫剂、防腐剂、色素、促生长剂以与激素等3〕营养成分与有害残留物的量应符合国家有关指标.
2、在实验动物体内水具有哪些生理功能?
答:
l〕水和亲水胶体相结合,直接参与构成活的细胞与组织.这种结合水能使组织具有一定的形态、硬度与弹性.
2〕水是一种重要的溶剂,营养物质的吸收和运输,代谢产物的排出均须溶解在水中后才能进行.
3〕水对调节体温起重要作用,动物体代谢过程中产生的热通过体液交换和血液循环带至体表皮肤或肺部散发.
4〕参与体内的化学反应,水不仅参加体内的水解反应,还参与氧化还原反应、有机物合成以与细胞呼吸过程.
5〕润滑功能,关节腔内的润滑液能使关节转动时减少摩擦.唾液能使饲料容易吞咽.
3、垫料是实验动物最直接的生活环境,应如何保证垫料的卫生?
答:
1〕使用前要除尘灭菌.2〕勤清除污秽的垫料更换新垫料,如发现水瓶漏水、垫料浸湿,或饲养盒内有死鼠,必须与时更换垫料,以保持动物的清洁、干爽.3〕日常更换的频度视动物的大、小密度、粪尿排出量;垫料的被沾污程度而定,一般每周更换两次,在有些情况下,垫料更换不应过度频繁,例如怀孕后期、与哺乳初期等阶段.4〕清理垫料应在污物走廊或处理间进行,防止粉尘飞扬,清理出来的垫料必须与时焚烧处理.
4、实验动物的记录包括哪些内容,记录管理的目的意义何在?
答:
记录的内容包括实验动物的品种品系、引种情况、繁殖情况、生长发育情况、供应使用情况、卫生防疫情况、异常情况、生产报表、环境控制以与质量监测等.记录管理的目的在于:
①总结经验:
通过各种记录资料的积累、统计、整理与分析,总结吸取有益的经验,克服管理工作中的不足.②保持品系特性:
完整的记录资料是保证近交系不被污染、封闭群避免近交、突变系保持突变特点所不可缺少的.③有利于提高科学饲养管理水平:
记录是数据分析和总结的基础,长期积累,可以上升为理论,有利于管理水平的提高.④这些总结分析报告有利于开展学术交流和科研合作.
第六章常用实验动物
四、填空题
1、任意填写四个常用实验小鼠品系ICR、C57BL/6、BALB/C、KM.
2、任意填写四个常用实验大鼠品系SD、Wistar、F344、SHR
五、问答题
1、请举例说明生物医学研究中小鼠主要用于哪些领域?
答:
生物医学研究中小鼠主要用于药物评价和毒性实验,如药物筛选、三致实验、肿瘤学研究.许多近交系小鼠有高的肿瘤发病率如AKR、C3H等,也广泛用于化学诱癌、或移植瘤研究,特别是免疫缺陷小鼠,常用作人癌移植的载体;传染性疾病研究,小鼠对多种病毒和细菌都很敏感,是微生物接种、传代和传染病诊断不可缺少的材料;遗传学和遗传性疾病研究,小鼠的毛色基因是遗传学研究的好材料,重组近交系用于基因定位和连锁关系的研究,同源近交系用于研究多态性位点基因的多效应与发现新的等位基因,小鼠更是制作转基因小鼠研究基因功能的必备材料,具有遗传性疾病的小鼠又是宝贵的人类疾病的动物模型.老年病学研究,小鼠寿命短,老年时一些生理变化与人相似,所以小鼠很适合老年病的研究.计划生育研究,小鼠是抗生育、抗着床、抗旱孕.抗排卵的首选动物.免疫学研究,如BALB/C小鼠用于研究单克隆抗体,免疫缺陷小鼠用于免疫机制的研究等.
2、请举例说明小鼠的饲养管理需注意些什么?
答:
l〕环境:
实验小鼠的最适温度是22士2℃,相对湿度为40-60%,氨浓度≤14mg/m3,噪声≤60DB.2〕笼具和垫料:
合格的笼具、饮水瓶,并定时洗涤、灭菌、更换;无毒、无刺鼻气味、无粉尘、不可食的垫料.3〕饲料与饮水:
全价营养、稳定供给的饲料,不低于城市饮水标准的饮水,清洁级以上动物饲料、饮水要灭菌.4〕生产繁殖:
选择长期同居法或定期同居法,母鼠怀孕21天,带仔10只以下为宜,21天断奶.5〕日常管理:
遵守操作规程,做好工作记录.
3、请举例说明生物医学研究中大鼠主要用于哪些领域?
答:
生物医学研究中大鼠主要用于1〕生理学研究,如内分泌、行为学和消化功能的研究.2〕营养学研究,大鼠是营养学研究的首选动物主要用于蛋白质缺乏、氨基酸、维生素、和无机离子代谢等的研究.3〕药理学和毒理学研究,如心血管、抗炎、神经病药物的药理研究和药物筛选;急毒、长毒、生殖毒和药物依赖性等毒理学实验.4〕肿瘤学研究:
ACI、F344、LEW等品系可作移植瘤.诱发瘤实验.5〕遗传性疾病研究:
有些品系有自发性遗传疾病,如白内障、尿崩症、肥胖、高血压、癫痛等,是良好的研究模型.6〕传染性疾病的研究:
如慢性支气管炎、病毒性肝炎、血吸虫病等的研究.7〕环境污染与人类健康的研究:
大鼠对空气污染非常敏感,常造成肺的损害和肾病.8〕口腔医学研究:
用变形链球菌诱发的大鼠的蛀齿与人相似,是良好的动物模型.9〕心血管疾病的研究:
如高血压、心肌缺血、动脉粥样硬化
4、请举例说明生物医学研究中狗主要用于哪些领域?
答:
l〕实验外科学,如:
血管、心、脑外科,断肢再植、脏器和组织移植.2〕基础医学研究,如生理、病理、神经、血液循环、内分泌、消化等研究.3〕药理、毒理研究,如药物代谢、新药的毒性实验.4〕疾病研究:
可以用狗做很多人类疾病的动物模型,如:
蛋白质营养不良、高胆固醇血症、动脉粥样硬化等,狗也有很多遗传性疾病,如先天性淋巴水肿、家族性骨质疏松、红斑狼疮等.5〕其它研究如行为学、肿瘤学研究、核辐射研究等.
5、请举例说明生物医学研究中非人灵长类动物主要用于哪些领域?
答:
l〕生理学研究,如脑功能、血型、生殖生理、老年学等;2〕传染病研究,如脊髓灰质炎、麻疹、结核等:
疫苗实验如脊髓灰质炎疫苗实验;3〕疾病研究,如动脉粥样硬化、慢性气管炎、酒精中毒性胰腺炎等模型的复制;4〕药理、毒理研究如人类的避孕药、镇菌剂的研究和药代研究等;5〕器官移植研究,猕猴的主要组织相容性抗原RHLA与人的HLA相近、解剖结构也有很多类似性.是研究人器官移植的良好的动物模型.
第七章 实验动物微生物学、寄生虫学质量控制
一、名词解释
1、病毒的基本特征:
①病毒只含有一种核酸,DNA或RNA.②严格的细胞内寄生,没有完整的酶系统,不能独立进行生长和繁殖.③无合成蛋白质所必需的酶,必须利用宿主细胞的酶与其他物质.④对一般抗生素不敏感,但对干扰素敏感.
2、致病菌:
引起动物疾病,严重危害动物健康的细菌,如沙门氏菌、志贺氏菌、巴氏杆菌、鼠棒状杆菌等.
3、条件致病菌:
一般不引起动物发病,但在应激条件下,机体免疫力降低时,可引起动物的疾病的细菌,如绿脓杆菌、金黄色葡萄球茵引发动物的菌血症和体表脓肿等.
4、正常菌群:
对动物无致病作用,在一般情况下对机体产生有益的生理作用的细菌,如普通大肠杆菌、乳酸杆茵等.
5、寄生虫的传播媒介:
指在脊椎动物宿主间传播寄生虫的一种低等动物,如传播血液原虫的吸血节肢动物.
6、普通动物〔CV〕:
是在微生物学控制上要求最低的动物,它要求不携带人畜共患病和动物烈性传染病的病原.该种动物饲养于普通环境中.
7、清洁