植物生理学实验讲义最新.docx

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植物生理学实验讲义最新

实验一植物组织渗透势的测定（质壁分离法）

一、实验目的

植物细胞的渗透势主要取决于溶液的溶质浓度，因此又称溶质势。

渗透势与植物水分代谢、生长及抗性密切相关。

在干旱、盐渍等条件下，一些植物常在细胞内主动积累溶质，以降低其渗透势，增加吸水能力，在一定程度上保持膨压，保持细胞的生长和气孔的开放，这种现象称为渗透调节作用。

渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞的渗透势的降低值来表示，在水分生理与抗性生理研究中经常需要测定。

掌握质壁分离法测定植物细胞渗透势的原理和方法。

二、实验原理

当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势，该溶液的浓度称为等渗浓度。

当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。

带入公式即可计算出其渗透势。

三、实验材料、仪器设备和试剂

1.实验材料洋葱鳞茎（最好是紫色洋葱）

2.仪器设备

光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、干净的小培养皿、滴瓶、吸水纸。

3.试剂

（1）1mol/L蔗糖溶液，

（2）蔗糖系列标准液以1mol/L蔗糖溶液作为母液，配置梯度溶液:

0.20、0.30、0.35、0.40、0.45、0.5、0.55、0.60、0.65、0.70mol/L的蔗糖溶液。

四、实验步骤

1.取10套干燥洁净的小培养皿，编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培养皿中使成一薄层，盖好皿盖。

2.用刀片在洋葱鳞片外表皮或其它带有色素的组织表皮上纵横划成0.5cm2左右的小块，用镊子将表皮小块轻轻撕下，依次迅速投入各浓度蔗糖溶液中，每个培养皿中放材料3个左右，使其完全浸没，并立即盖好皿盖。

浸泡10～15分钟。

3.从0.70mol/L蔗糖溶液开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上载玻片，于显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的表皮做制片，进行同样观察，并记录质壁分离的相对程度。

4.在实验中确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度C1，和不引起质壁分离的最高浓度C2。

这两个浓度的平均值为其等渗浓度。

五、结果计算

可按公式计算在常压下该细胞的渗透势：

Ψs＝﹣RTiC

Ψs──细胞渗透势

R──摩尔气体常数，0.083×105L·Pa/（mol·K）

T──热力学温度，单位是K；即273+t,t为实验温度，单位是℃。

i──解离常数，蔗糖等于1

C──等渗透溶液的浓度，单位是mol/L，等于（C1+C2）/2

六、注意事项

洋葱表皮年龄一致，即在实验中采用同一表皮。

实验二硝酸还原酶活性的测定

一、实验目的

掌握测定硝酸还原酶的原理和方法。

二、实验原理

植物生长所需的氮源主要是无机氮化物，铵盐在土壤中可直接被利用合成氨基酸，硝酸盐经过代谢还原成铵盐才能被利用。

硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键性酶，与作物吸收和利用氮肥有关。

它作用于NO3ˉ使其还原为NO2ˉ：

NO3ˉ+NADH+H+→NO2ˉ+NAD++H2O

产生的NO2ˉ可以从组织内渗透到外界溶液中，并积累在溶液中，测定反应溶液中NO2ˉ含量的增加，即可表现该酶活性的大小。

NO2ˉ含量的测定采用磺胺（对氨基苯磺酸）比色法。

在酸性溶液中磺胺与NO2ˉ形成重氮盐，再与α-萘胺偶联形成紫红色的偶氮染料，520nm比色测之。

三、实验材料、仪器设备、试剂

1.实验材料新鲜的植物叶片（如豌豆、王米、小麦、大豆等）。

2.仪器设备

50mL三角瓶或50mL小烧杯、打孔器（直径1cm）、真空泵、温箱、分光光度计、移液管（5mL、1mL、2mL个）、试管、天平、吸水纸。

3.试剂

（1）0.1mol/LpH7.5磷酸缓冲液。

（2）0.2mol/LKNO3：

称取KNO320.02g，用蒸馏水溶解，移入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。

（3）1%磺胺：

1g磺胺溶于100mL3mol/LHCl中（25mL浓盐酸加水定容至100mL，即为3mol/LHCl）。

（4）α-萘胺试剂：

称取0.2gα-萘胺，用含1mL浓盐酸的蒸馏水溶解，再用蒸馏水稀释至100mL。

（5）NaNO2标准液：

称取0.1gNaNO2，用蒸馏水溶解后定容至100mL。

吸取其中5mL，用蒸馏水稀释至1000mL。

此溶液每毫升含有5μgNaNO2，即5μg/mlNaNO2。

用时再根据不同需要稀释。

四、实验步骤

1.将新鲜取回的叶片洗净，用吸水纸吸干，再用钻孔器钻成直径约1cm的圆片，最后称取等重的叶圆片两份，每份约0.3～0.4g（或每份取50个圆片），分别置于含有下列溶液的50mL三角瓶或小烧杯中：

（1）0.1mol/L磷酸缓冲溶液（pH7.5）5mL+蒸馏水5mL（对照组）；

（2）0.1mol/L磷酸缓冲溶液（pH7.5）5mL+0.2mol/LKNO35mL（实验组）。

将三角瓶置于真空干燥器中，接上真空泵抽气，放气后，圆片即沉于溶液中。

如果没有真空泵，也可以用20mL注射器代替：

将反应液及叶子圆片一起倒入注射器中，用手指堵住注射器出口小孔，然后用力拉注射器使其真空，如此抽气放气反复进行多次，即可使圆片中的空气抽去而沉于溶液中。

将三角烧瓶置于30℃温箱中，暗中保温30min后，分别吸取反应溶液1mL，用于测定NO2ˉ含量。

2.NO2ˉ含量测定

   保温结束后，从三角瓶中各吸取反应液1mL，分别放入2支试管中，然后各加磺胺试剂2mL及α-萘胺试剂2mL，混合摇匀，静置30min，立即用分光光度计测定520nm处的吸光度（OD）值。

3.绘制标准曲线

   分别吸取不同浓度的NaNO2溶液（例如5、4、3、2、1、0.5μg/mL）各1mL于试管中，加入磺胺试剂2mL及α-萘胺试剂2mL，混合摇匀，静置30min，立即520nm处的OD值。

然后，以OD值为纵坐标，NaNO2浓度为横坐标绘制OD值-浓度标准曲线，或者根据浓度与OD值关系直接计算回归方程。

五、结果计算

从标准曲线上查得实验组与对照组反应液中的NaNO2含量，并计算硝酸还原酶活性：

   酶活性（μgNaNO2/gFW·h）=（C2-C1）×V/（t×W）

   式中：

   C1——1号三角瓶（对照组）里NaNO2浓度（μg/mL）。

   C2——2号三角瓶（实验组）里NaNO2浓度（μg/mL）。

   V——反应液总体积（mL）。

   t——反应时间（h）。

   W——植物鲜重（g）。

六、注意事项

1.硝酸盐还原过程应在黑暗中进行，以防亚硝酸盐还原为氨。

2.从显色到比色时间要一致，显色时间过长或过短对颜色都有影响。

实验三吲哚乙酸氧化酶活性的测定

一、实验目的

掌握比色法测定吲哚乙酸氧化酶的方法。

二、实验原理

植物体内生长素的种类很多，其中吲哚乙酸（IAA）是植物体内普遍存在的一种生长素。

植物体内IAA的含量，对于植物的生长、发育、衰老、脱落等均有重要意义。

植物体内存在吲哚乙酸氧化酶，吲哚乙酸氧化酶氧化IAA使其失去活性，从而调节体内IAA的水平，影响植物的生长。

酶活力的大小可以其破坏IAA的速度亦即溶液中IAA减少的速度表示。

在无机酸存在下，IAA能与FeCl3作用，生成红色的螯合物。

该物质在530nm有最大吸收峰，由此引出IAA的定量测定法，此法可测出μg级的IAA。

三、实验材料、仪器设备、试剂

1.实验材料大豆或绿豆幼苗的下胚轴。

2.仪器设备

    分光光度计、离心机、恒温水浴锅、温箱、天平、研钵、离心管、试管，移液管（5mL、2mL、1mL），烧杯1个。

3.试剂

（1）20mmol/L磷酸缓冲液，pH6.0。

（2）1mmol/L2,4-二氯酚：

称取16.3mg2,4-二氯酚用蒸馏水溶解并定容至100mL。

（3）1mmol/L氯化锰：

称取19.8mgMnCl2·4H2O用蒸馏水溶解并定容至100mL。

（4）1mmol/L吲哚乙酸：

称取17.5mgIAA用少量乙醇溶解，然后将其倒入盛有约90mL蒸馏水的容量瓶中（100mL），稀释至刻度。

（5）吲哚乙酸试剂B：

    试剂B：

10mL0.5mol/LFeCl3，500mL35%过氯酸，使用前混合即成，避光保存。

用时于1mL样品中加入试剂B2mL。

试剂B较比较灵敏。

（6）25μg/mL吲哚乙酸溶液

四、实验步骤

1.吲哚乙酸氧化酶的制备：

（1）将大豆或绿豆种子于30℃温箱中暗中萌发3～4天，选取生长一致的幼苗，除去子叶和根，留下胚轴作材料。

（2）取1～2根下胚轴，称得重量，置研钵中，加入预冷的磷酸缓冲液（pH6.0）5mL，石英砂少许，置冰浴中研磨成匀浆。

再按每100mg鲜重材料加入1mL提取液的比例，用磷酸缓冲液稀释匀浆液。

离心（4000rpm）20min，所得上清液即为粗酶液。

2.吲哚乙酸氧化酶的活性测定：

（1）取2支试管并编号，于1号试管中加入MnCl21mL、2,4-二氯酚1mL，IAA2mL、酶液1mL和磷酸缓冲液5mL，混合均匀；2号试管中，除酶液用1mL磷酸缓冲液代替外，其余成分相同。

将2支试管置于30℃恒温水浴中保温30min。

（2）另取2支试管并分别编号1’、2’，先于每支试管中加入4mL试剂B，然后分别取

（1）中反应混合液各2mL加入到有试剂B的相应标记的试管中，小心地混匀，于30℃的温箱中（黑暗中）保温30min，使反应混合液呈红色。

（3）于530nm处测定OD值，根据OD值从标准曲线上查出相应的IAA浓度或从直线方程计算反应液中IAA的残留量。

（4）用对照管中吲哚乙酸的量减去实验管中吲哚乙酸的残留量，即得被酶分解的吲哚乙酸的量。

3.标准曲线的制作：

（1）配制吲哚乙酸的系列标准溶液，其浓度分别为0、0.5、1.0、2.5、5、10、15、20、25μg/mL。

（2）取干洁的试管9支，每支加入4mL试剂B，再分别加入不同浓度的IAA溶液各2mL，摇匀，于30℃（黑暗）条件下保温30min，使反应混合液呈红色。

（3）取反应液在530nm处测定OD值。

以IAA浓度（μg/mL）为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线或直接计算直线回归方程。

五、结果计算

    以1mL酶液在1小时内氧化的吲哚乙酸量（mg）表示酶活力大小。

   吲哚乙酸氧化酶活性（μgIAA/gFW·h）=（C1-C2）×Ｖ×VT/（W×t×V1）

    式中：

C1——对照管在标准曲线上查得IAA（μg）。

C2——测定管在标准曲线上查得IAA（μg）。

VT——酶液稀释后总体积（mL）。

V1——酶液反应时用体积（mL）。

V——

（1）、

（2）所得反应混合液体积（mL）。

W——样品鲜重（g）。

t——酶反应时间（h）。

六、注意事项

取材时去除子叶与胚根，取下胚轴。

实验四植物呼吸速率的测定

呼吸作用是一切生活细胞所共有的生命运动，是新陈代谢的重要组成部分，是植物所有生理活动所需能量的来源，对植物有着十分重要的意义。

呼吸作用的强弱即呼吸速率的大小是植物生命活动最重要的指标之一。

一般地说，呼吸速率大表示新陈代谢旺盛，呼吸速率小则说明代谢活动弱，植物呼吸速率的大小因植物类型、组织种类、生育期的差异而不同，也受着外界环境的影响。

测定植物呼吸速率，就可以研究内外因素对生命活动的效应。

因此，在植物生理研究及生产实践等方面都有测定的必要。

测定呼吸速率的方法很多，如红外线CO2分析法、氧电极法、小篮子法、呼吸瓶法等。

本实验采用小篮子法测定呼吸速率的方法。

一、实验目的

掌握小篮子法（广口瓶法）测定植物的呼吸速率。

二、实验原理

植物进行呼吸时吸收O2，放出CO2，计算一定的植物样品在单位时间内放出CO2的数量，即为该样品的呼吸速率。

植物材料呼吸过程中释放的CO2可用氢氧化钡溶液吸收。

实验结束后，用草酸溶液滴定剩余碱量，由空白和样品二者消耗草酸溶液的之差即可计算出呼吸过程中释放的CO2量。

三、实验材料、仪器设备、试剂

1.实验材料萌发的小麦种子。

2.仪器设备

广口瓶测呼吸装置（如下图）、酸式滴定管、移液管、天平、大烧杯。

广口瓶测呼吸装置

1.干燥管（盛有碱石灰 ）2.温度计 3.小橡皮塞 4.尼龙网筐 5.碱液

3.试剂

（1）0.05mol/L左右的Ba（OH）2：

称取8.6gBa（OH）2溶于1000mL蒸馏水中。

（2）1/44mol/L草酸溶液：

准确称取2.8651g重结晶的H2C2O2·2H2O溶于蒸馏水中并定容至1000mL。

（3）酚酞指示剂：

称取1g酚酞溶于100mL95％乙醇中，并贮于滴瓶中。

四、实验步骤

1.取500ml广口瓶一个，瓶口瓶用打有三孔的橡皮塞塞紧，一孔插一盛碱石灰的干燥管，使呼吸过程中能进入无CO2的空气，一孔插温度计，另一孔直径约1cm，供滴定用，平时用一小橡皮塞塞紧，瓶塞下面挂一铁丝纱小篮（或尼龙网小篮），以便装植物样品，整个装置即谓“广口瓶呼吸测定装置”。

2.称取2份萌发的小麦种子10g，其中一份用沸水煮死，分别装于小篮内，将小篮挂在广口瓶内，同时加0.05mol/LBa（OH）2溶液20mL于广口瓶内，立即塞紧瓶塞。

每10min左右，轻轻地摇动广口瓶，破坏溶液表面的BaCO3薄膜，以利于对CO2的吸收。

3.1h后，小心打开瓶塞，迅速取出小篮，在每个广口瓶中加入2滴酚酞试剂，立即重新塞紧瓶塞。

充分摇动后拔出小橡皮塞，将滴定管插入小孔中，用草酸滴定，直到红色转变为无色为止。

分别记录滴定所耗用的草酸溶液体积（mL）。

4.以沸水煮死的种子为对照进行胡须速率的计算。

五、结果计算

呼吸速率[mgCO2/（gFW·h）]＝（V0-V1）/（W×t）

   V0——装煮死的种子的广口瓶中，所耗用的草酸体积（mL）；

   V1——装煮死的种子的广口瓶中，所耗用的草酸体积（mL）；

   W——样品鲜重（g）；

   t——测定时间（h）。

   注：

1mL1/44mol/L的草酸相当于1mgCO2。

六、注意事项

1.操作时，不要使自己呼出的CO2进入广口瓶。

2.迅速取下小篮子，加入酚酞。

立即重新塞紧，充分摇动，草酸标定，先滴定发芽种子。

3.注意最后滴定时，放慢速度。

实验五植物光合速率的测定

光合速率通常是指单位时间、单位叶面积的CO2吸收量或O2的释放量或干物质的积累量。

光合速率测定是植物生理学的基本研究方法之一，在作物生理、作物生态、新品种选育、以及光合作用基本理论研究等方面都有着广泛的用途。

目前测定光合速率常用的方法有：

改良半叶法，便携式光合测定仪法，氧电极法。

测定CO2吸收量可用便携式光合测定仪；O2的释放量用氧电极测氧装置测定；干物质的积累可用改良半叶法测定。

实验目的

了解测定光合速率的几种方法；掌握半叶法测定光合强度的原理及其要点；了解光合速率测定在选育良种、合理施肥、抗性品种筛选等方面的现实意义。

ⅠTPS-2便携式光合测定仪

一、实验原理

TPS便携式光合作用测定系统是一个同时可以测定植物叶片的CO2同化作用（光合或呼吸）和蒸腾作用的系统，为开放式线路。

叶片夹入叶室后，给予适当光照，稳定的CO2和H2O以固定气体流量进入叶室，通过主机的红外分析仪测定出参比气CO2和H2O与流出叶室气体中的分析气CO2和H2O浓度，得到CO2和H2O的浓度差。

根据叶室中气体的流量和CO2/H2O浓度差计算出被测叶片的CO2同化速率和蒸腾速率，计算出气孔导度、细胞间隙的CO2浓度。

二、实验材料、仪器设备、试剂

1.实验材料植物叶片。

2.仪器设备TPS-2便携式光合测定仪

三、实验步骤

1.连接叶室

开放式气路对气路的连接非常严格，不能反接。

PLCA是分析气路的出气口，叶室管子上标有“A”。

PLCR是叶室气体供应进气口，叶室管子上标有“R”。

将叶室的气路管R与A分别连接到主机上的PLCR接口和PLCA接口上。

叶室电信号插头连接到TPS前面板上标有PLC的15针D型插口上。

2．

（1）打开主机电源，显示主菜单

1REC2CAL3DMP

4CLR5CLK6DIAG

1REC测定与记录2CAL校正

3DMP数据输出4CLR清除内存

5CLK时钟校正6DIAG诊断

（2）按1进入测定模式显示以下菜单

SETPLC1:

BROAD

2:

UNIVERSAL

如果使用标准叶室（Broad），选择1，如果使用通用叶室（Universal），选择2。

（3）选择叶室后显示设置菜单1

1REC:

A/M2INT:

001

FLO:

300

1REC记录类型按1键可以在A（自动记录）和M（手动记录）之间转换。

2INT设置自动记录的时间间隔

FLO气体流量，固定值，不需要设定。

（4）按Y键显示设置菜单2

1:

LIGHT=SUN（orLAMP）

2:

LEAFAREA=05.0

1:

LIGHT设置SUN为自然光，LAMP为人工光源光。

2:

LEAFAREA输入夹入叶室内的实际叶面积，以cm2为单位。

按1键选择光源类型；按2键选择叶面积；

（5）按Y键显示设置菜单3

1P:

01R:

01

FREERECORDSnnn

1P是小区号,由用户输入，用于识别不同处理的测定记录。

R是记录号，如果改变小区号，记录号重新设置为01。

FREERECORDS是在存储器充满以前能够记录测定结果的数量

按1键可以改变小区号，输入区号范围01-89。

（6）按Y键，然后机器进入预热状态，屏幕显示：

WARMUPDELAY

TPSTEMP＝40

当完成预热后（5S），显示测定菜单

Cnnnn+/-nnnQnnnn

Hnn.n+/-nn.nTnn.n

C为参比CO2浓度，以ppm为单位；

+/-nnn为分析气与参比气CO2浓度差值，以ppm为单位；

Q为量子通量密度，以μmol·m-2·s-1为单位；

H为参比水蒸气压，以毫巴为单位（00.0~75.0）；

+/-nn.n为分析气与参比气水蒸气压之间的差值，以毫巴为单位；

T为叶室温度，以℃为单位。

如果TPS与叶室连接使用，按转换键（X）可以使测定数据和计算结果的数据交替显示：

Enn.nnGnnnnTnn

A+/-nn.nCInnn

E为蒸腾速率，以mmol·m-2·s-1为单位；

G为气孔导度，以mmol·m-2·s-1为单位；

T为叶片温度，以℃为单位；

A光合/呼吸速率，单位：

μmol·m-2·s-1；正值为光合速率，负值为呼吸速率。

CI为细胞间隙CO2浓度，以ppm为单位。

3.光合速率的测定

选择待测叶片夹入叶室，给以适当的光照，观察△CO2值和水分差值变化，待△CO2值稳定后按X转换键观察结果，或按[0/R]键存储测定结果。

一个叶片的测定结束，进行另一叶片的测定。

4.测定完毕后，当TPS处于测量状态时，按N键返回到主菜单，然后再关机。

当TPS处于测量状态时，不要关机，因为这有可能导致数据库指示器被破坏。

5.测定后数据可贮存在仪器中，通过连线与计算机连接进行各种数据的统计处理

Ⅱ改良半叶法

一、实验原理

改良半叶法系将植物对称叶片的一部分遮光或取下置于暗处，另一部分则留在光下进行光合作用，过一定时间后，在这两部分叶片的对应部位取同等面积，分别烘干称重。

因为对称叶片的两对应部位的等面积的干重，开始时被视为相等，照光后叶片重量超过暗中的叶重，超过部分即为光合作用产物的产量，并通过一定的计算可得到光合作用速率。

二、实验材料、仪器设备、试剂

1.实验材料植物叶片。

2.仪器设备

分析天平、烘箱、剪刀、培养皿、剪刀、打孔器、纱布。

3.试剂：

5%三氯乙酸

三、实验步骤

1.选择测定样品：

在丁香树上选择有代表性叶片（如叶片在植株上的部位、叶龄、受光条件等）10张，用小纸牌编号。

2.叶子基部处理

为了不使选定叶片中光合作用产物往外运，而影响测定结果的准确性，可采用下列方法进行处理：

选用适当浓度的三氯乙酸，点涂叶柄以阻止光合产物的输出。

三氯乙酸是一种强烈的蛋白质沉淀剂，渗入叶柄后可将筛管生活细胞杀死，而起到阻止有机养料运输的作用。

三氯乙酸的浓度，视叶的幼嫩程度而异。

以能明显灼伤叶柄，而又不影响水分供应，不改变叶片角度为宜。

一般使用5%三氯乙酸。

3.剪取样品

叶基部处理完毕后，即可剪取样品，记录时间，开始光合作用测定。

一般按编号次序分别剪下对称叶片的一半（主脉不剪下），按编号顺序夹于湿润的纱布中，贮于暗处。

过4～5小时后，再依次剪下另外一半叶片，同样按编号夹于湿润纱布中，两次剪叶的速度应尽量保持一致，使各叶片经历相等的照光时数。

4.称重比较

将各同号叶片之两半按对应部位叠在一起，在无粗叶脉用打孔器（量一下所用打孔器的直径，计算小圆片的面积）打孔，分别将打好的叶圆片置于光及暗中的两个培养皿中。

80～90℃下烘至恒重（约5小时），在分析天平上称重比较。

四、结果计算

叶片干重差之总和（mg）除以叶面积（换算成dm2,1dm2=100cm2）及照光时数，即得光合作用强度，以干物质计，mg/（dm2·h）表示之。

计算公式如下：

光合作用速率﹦干重增加总数（mg）/[切取叶面积总和（dm2）×照光时数（h）]六、注意事项

1.选择有代表性的功能叶（无病虫害，对称性良好，叶龄、叶位、叶片大小、厚度、受光   方向要尽量一致。

）

2.前后两次采样的叶片切割叶面积应在相对应部位。

实验六过氧化氢酶活性的测定

过氧化氢酶普遍存在于植物的所有组织中，其活性与植物的代谢强度及抗旱、抗寒、抗病能力等有一定关系，故常加以测定。

过氧化氢酶活性的测定有紫外吸收法、高锰酸钾滴定法、氧电极法。

一、实验目的

掌握高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶活性。

二、实验原理

　过氧化氢酶属于血红蛋白酶，含有铁，它能催化过氧化氢分解为水和分子氧，在此过程中起传递电子的作用，过氧化氢则既是氧化剂又是还原剂。

据此，可根据H2O2的消耗量或O2的生成量测定该酶活力大小。

在反应系统中加入一定量（反应过量）的H2O2溶液，经过酶促反应后，用标准高锰酸钾溶液（在酸性条件下）滴定多余的H2O2。

　　5H2O2+2KMnO4+4H2SO45O2+2KHSO4+8H2O+2MnSO4

三、实验材料、仪器设备、试剂

1.实验材