心腔；血管段；颚弓和舌弓；前肠发育；嗅觉纤毛；耳囊壁增厚
孵化期
长胸鳍
48
EL=3.1mm；HTA=45°；OVL=1/2；PF（H/W）=2；背上位静息；YE开始变细，PF突出；背腹侧条纹汇于尾部；侧带约6个黑素细胞；视网膜上虹膜色素细胞丰富；头部显著黄色；NO：
循环见于2-4大动脉弓及血管段；嗅觉纤毛摆动；半规管（semicircularcanal）；神经丘（neuromast）
胸鳍
60
EL=3.3mm；HTA=35°；运动迅速难以分辨；YR变细融入YB；侧带约10个黑素细胞；PF变平成鳍形，有明显的循环；视网膜虹膜色素细胞环加深；虹膜色素细胞出现于背侧；NO：
PF软骨和角质鳍条（actinotrichia）；肠道；耳囊分2腔；早期颌软骨；循环于5-6大动脉弓；口仍小，开于腹侧眼中线
突口
72
EL=3.5mm；HTA=25°；宽口突出于眼前方；虹膜色素细胞出现于卵黄带；虹膜色素细胞覆盖眼部一半；背部黄色与头部色调同；NO：
腮裂和腮丝芽基；腮弓1-5软骨；鳃盖覆住1-2腮弓；匙骨（cleithrum）
aEL：
胚体长度；PF：
胸鳍；HB：
Hisaoka和Battle（1958）斑马鱼分期大致序列（一直到HB分期20大致准确）；HD：
背侧观头部直径；NO：
Nomarskioptics；H/W：
高/宽；YB：
卵黄球；YE：
卵黄延伸部；YSL：
卵黄合胞体层；HTA：
头-肢角；OVL：
耳囊长度
为从更广的视角观察发育过程，我们将数个分期归为一组，形成更长的时间段称为时期（表1），并在文中总结了发生在这些时期内的主要事件。
术语表中定义了一些特定的术语，文中黑体字强调的术语在分期中是重要的。
表2对各个分期作了简要的描述，而图1则展示了相应的草图。
我们可以利用这些资料大致定位我们所感兴趣的一个分期，然后尽可能在文中和其他图中找到更多细节。
步骤
分期
我们可以通过使用立体显微镜观察活体胚胎来大致确定发育分期，通常用透射光（而非反射或入射光）以及高放大倍数（约50×）。
在体节期尾部伸长，如果胚胎仍处于绒膜（chorion）内，尾部最终将环绕驱干和头部，以致不易观察。
此时，我们必须将胚胎移出绒膜，可以使用5号镊子（forceps）手工移去，也可用蛋白溶解酶（proteolyticenzyme）处理。
咽囊晚期，一旦受到触碰，胚胎（如已去除绒膜）会反射性游走，这种情况下，可用0.003%三卡因（tricaine）以麻醉之。
反复麻醉和冲洗会严重阻滞随后的发育，虽然看起来似乎轻微。
Nomarski光学系统
装有Nomarski微分干涉相差光学系统和倍率15至40的物镜的组合显微镜能揭示活体标本更多的细节，利于精确分期。
例如，Nomarski光学系统可在囊胚期和体节期实现最精确的细胞和体节计数。
此外，“原基”期（”prim”stages）指后侧线原基（primordiumoftheposteriorlateralline）这一结构的位置，我们必须利用Nomarski光学系统以准确确定大部分咽囊期的一些分期。
将胚胎麻醉、去除绒膜，并置于桥接盖玻片之间以利于观察和随后的恢复。
图1.斑马鱼胚胎发育各分期显微扫描图。
早期动物极位于顶端，后来前缘成为顶端，例外的是原肠胚的胚环和胚盾期在其侧面观的图片下显示了相应的动物极（AP）观图片。
卵裂期和囊胚期图片为正面观。
胚盾期后为胚胎左侧观，但在胚盾出现前并不能确切地分辨哪一面是左侧。
这里忽略色素沉着。
箭头指示了以下分期判定的一些关键特征：
1k-细胞期：
YSL细胞核；穹顶期：
隆起的卵黄合胞体；胚环期：
胚环；胚盾期：
胚盾；75%外包期：
Brachet裂缝；90%外包期：
胚层外围包裹卵黄；尾芽期：
小膨出；3-：
第3体节；6-：
眼原基（上方箭头）、Kuperffer囊（下方箭头）；10-：
耳基板；21-：
晶状体原基；原基-6期：
后侧线原基（背侧观）、孵化腺（卵黄球上）；原基-16期：
心脏；高胸鳍期：
胸鳍芽。
比例尺=250μm
对活体胚胎进行分期总是比将其致死和固定后再分期要好。
例如在伸直和孵化期间的分期需要对头部大小和卵黄质量进行对比，而固定期间会造成不同程度的收缩而破坏了正常的关系。
然而，如果保存良好，我们可以利用其他标准相对可靠地对固定或完全包埋的胚胎进行分期，但切割后则不易分期。
成像
所附图片均为活体胚胎，后期为麻醉处理。
原始图片被制作为彩色幻灯片（柯达Ektachrome160TDX），而黑白插图由中间底片复制而成。
彩色幻灯片可付费向作者索取。
显示整个胚胎的低倍图像由ZeissSTEMI立体显微镜获得：
将胚胎置于凹槽载片的标准介质中，而不需要盖玻片，介质中含有1.5-3%甲基纤维素（methylcellulose）以利于预期定位。
显示部分胚胎的高倍图像由Nomarski光学系统（通常配合Zeiss40×浸水物镜）摄得，使用ZeissUEM组合显微镜。
将胚胎包埋于盖玻片之间，有时加1%琼脂以固定。
温度与标准发育时间
我们将分期信息转换为“标准发育时间”，用字母h表示，定义为在28.5℃这一适宜温度孵育下受精后的小时数。
孵育在其它温度下会改变发育速度，而这在特定研究中可能会有用。
例如，使两个胚胎在某一时间达到不同的分期以作异时移植。
对孵育于不同温度下的胚胎进行对比须谨慎进行，因为不能保证当温度变化时胚胎所有特性均随发育速度作同步变化。
然而，若是将胚胎保存在25-33℃范围内，其发育似乎正常，超出这一范围温度作长时间孵育将出现异常。
图2显示了在极值点的发育速率，图右侧的说明提供了一个简单的公式可用以估算出这一范围内的任一温度下胚胎发育所能达到的某一分期。
图2.孵育于25℃和33℃的胚胎孵育速度。
A：
尾芽期，B：
突口期。
纵轴为28.5℃标准温度下孵育的分期。
可以想象，28.5℃下的发育曲线为通过原点的直线，斜率1.0。
注意到25℃和33℃下的发育曲线均为直线，且斜率在两图中几乎相同。
因此发育速度随孵育温度而变化，可用以下公式估算任一温度下达到某分期所需发育时间：
HT=h/（0.055T-0.57）.HT为T温度下的发育时间，h是在28.5℃下达到某分期所需时间（见表1）。
分期缩写：
c:
cell,d:
dome,s:
shield,b:
bud;s:
somite,p:
prim,hp:
high-pec,lp:
long-pec,pf:
pec-fin,pm:
protruding-mouth.方法：
对自然产卵形成的胚胎进行观察，分3组，每组20-30个胚胎，孵育于150ml大烧杯。
用多项指标确定分期，并确保取出观察的胚胎与保留在烧瓶中的无发育差异。
因为吹打、去绒膜、麻醉等处理会显著阻滞发育，如此处理的胚胎比长胸鳍期的对照组晚2-6小时。
合子期（0-0.75h）
新受精的卵子直至其第一次卵裂发生，称合子期（图3），约受精后40分钟。
受精时形成的合子直径约0.7mm。
合子期只含有一个分期，但其间也发生很多变化，可以很容易划分这一时期（见HisaokaandBattle,1958）。
合子期的分期
1-细胞期（0h）.绒膜膨胀并脱离新受精的卵子（图3A）。
受精同时也活化胞质运动，约10分钟内很容易看到。
非卵黄胞质开始向动物极流动，促使胚盘和卵黄颗粒丰富的植物极胞质分离（图3B）。
这一分离在卵裂早期仍在继续。
图3.合子期。
A：
受精后数分钟，绒膜膨胀。
B：
受精后约10分钟，动物极朝上的去绒膜合子。
非卵黄胞质开始分离进入动物极。
比例尺=250μm
卵裂期（0.75-2.25h）
首次卵裂形成的两个细胞，或称卵裂球在间隔15分钟后分开（图4，5）。
胞质分裂为部分分裂，只是在胚盘底部不完全切开，卵裂球仍通过胞质桥结构相连。
这一时期的6次卵裂通常按规则的方向方向发生，因而我们可以通过卵裂球的排列知道其数目，而不必一一计数。
这一时期和下一时期的早期都可用Nomarski光镜划分每细胞周期以实现精确分期。
胚盘中所有细胞都同时或近似同时地完成细胞周期。
约在细胞周期的前半部分，即细胞间期，细胞核存在且可见，核形态也发生系统性变化（见下，图10）。
每个早间期细胞核都是球形的，晚间期为类球体，其后随细胞进入有丝分裂，核逐渐变为椭球体，直至有丝分裂前期消失。
椭球体的长轴指示了随后卵裂的取向。
有丝分裂期的染色体很难看到。
近有丝分裂晚期，在胞质分裂之前，卵裂球形状变得更圆。
卵裂期的分期
2-细胞期（3/4h）.结束第一个合子细胞周期的首次卵裂形成的卵裂沟是垂直的，一直到32-细胞期都是如此。
卵裂沟在近动物极形成，迅速向植物极伸长，只经过胚盘区域而不经过卵黄区域（图4A）。
在近于胚盘底部，卵裂沟变为水平方向，以Wilson（1889）最早描述的黑鲈（seabass）那种方式切割胚盘，但仍只是部分与底下的卵黄区域分开。
形成的两个卵裂球体积相同，似乎不易相互区分。
随后的几次分裂严格按第一次分裂的方向进行，然而最终的身体对称轴（即背腹轴和前后轴）似乎并不能完全由卵裂方向决定（KimmelandWarga,1987;Abdelilah等,1994;Helde等,1994），而有些报道则认为可以（StrehlowandGilbert,1993;Strehlow等,1994）。
4-细胞期（1h）.两个卵裂球不完全裂开（图4B），裂平面以合适角度穿过动物极和第一次卵裂面。
因而第三细胞周期开始于2×2排列的4个卵裂球。
从动物极看（见图6）胚盘呈椭球体，而第二次卵裂面是沿长轴方向的。
图4.卵裂期胚胎。
除B外均为正面观，B显示的是胚胎在动-植物极的扭曲，约偏离正面45°。
A:
2-细胞期（0.75h）；B：
4-细胞期（1h）；C：
8-细胞期（1.25h）；D：
16-细胞期（1.5h）；E：
32-细胞期（1.75h）；F：
64-细胞期（2h）。
比例尺=250μm
8-细胞期（1.25h）.卵裂发生于第3细胞周期结束，仍为不完全卵裂。
两个独立的卵裂面与第1次卵裂面平行，将胚盘切割为2×4排列的卵裂球。
由于去绒膜胚胎通常侧躺于培养皿，其4-细胞面（而非2-细胞面）正对观察者。
此“正面”观（KimmelandLaw,1985a）沿奇数卵裂面（卵裂沟1和3可见，图7）。
一直到囊胚晚期去绒膜胚胎总倾向于以此方向平展开，图1第一部分（到高囊胚期）、图4（4B除外）和图7均为此“正面”观所得。
16-细胞期（1.5h）.第4组卵裂同样沿两个面进行，均与第2次卵裂面平行，产生4×4排列的细胞，须小心与8-细胞期鉴别，因为其正面观很相似（图4C,D）。
第一次出现部分细胞完全与其他细胞分离，这些细胞是位于最中心处的4个卵裂球。
此四分体在图6E中完全被其他细胞包绕。
全分裂发生于近16-细胞期末，因为此次卵裂沟先从胚盘中心底部切开，再向外围延伸。
实际上，作底部切开的卵裂沟并未到达外围，包围此四细胞的12个细胞（称外围卵裂球）仍与卵黄细胞通过胞质桥相连（KimmelandLaw,1985a）。
此分期之后直到囊胚中期，每次卵裂均能完全或大部分分离非外围卵裂细胞，仍不能完全分离外围卵裂细胞。
图7.卵裂期正面观显微扫描示意图，显示从4-细胞期一直到64-细胞期卵裂球的世系关系。
各卵裂球根据期世系标号，同时也指出其位置。
每一标号代表胚胎中的两个细胞，其中一个在图中可见，而另一个须将胚胎沿动-植物极轴旋转180°才可看到（比如，此处在4-细胞期只显示2个细胞）。
在4-细胞期，细胞L处于第1次卵裂面左侧，细胞R处于右侧（因此，这里的标号L和R并非指未来胚体的左右侧；见正文）。
细胞L分裂产生L1（更靠近动物极）和L2。
L1分裂产生L11（更靠近动物极）和L12，如此等等。
对于64-细胞期，深层细胞没有绘出。
引自KimmelandLaw（1985a），经由AcademicPress惠允。
32-细胞期（1.75h）.第5细胞周期结束时的卵裂通常发生于四个平行面，而不是位于第1和3卵裂面之间两个平面。
然而此时，斜向卵裂沟很明显。
通常32细胞呈4×8排列，但除规则排列之外，不规则排列也很常见。
侧面观，在外围和动物极之间常可见双层细胞。
这是因为胚盘平面弯曲，外围细胞更近于植物极，其中的部分细胞排到了靠近动物极的非外围细胞之前。
64-细胞期（2h）.第6次细胞周期结束时的卵裂是水平的，所以从动物极看细胞排列和32-细胞期很相似，只是正进入第7次细胞周期的卵裂球体积较小。
侧面观，细胞堆叠明显变高（图1，4F，7）。
第一次出现部分细胞完全覆盖其他细胞。
被覆盖的细胞（或称深层细胞）都是由32-细胞期的4个中心细胞中每个分裂产生的两个子细胞中的一个构成；而另一个则仍处于表面，形成胚盘的最上层此时称包被层（theenvelopinglayer,EVL）。
与此同时，每个外围细胞的水平卵裂也产生两个EVL细胞，所以64-细胞期正面观似有三层EVL细胞（图7）。
囊胚期（2.25-5.25h）
囊胚期指从128-细胞期或第8次合子细胞分裂开始形成球形胚盘直到第14次卵裂开始原肠期为止这一段时期。
此期有很多重要事件发生：
胚胎进入囊胚中期转变（midblastulatransition,MBT）、卵黄合胞体层（theyolksyncytiallayer,YSL）形成、外包（epiboly）开始。
外包将一直持续到原肠期。
此期用“实囊胚”（“stereoblastula”）称之可能更准确，因为这一术语意味着胚胎还没有形成囊胚腔（blastocoele），而事实正是如此（图8），仅在胚盘深层细胞之间存在不规则的间隙。
卵裂取向不确定，比卵裂期亦更不规则。
此后卵裂产生的子细胞从整齐的细胞面伸出，不论从侧面还是从顶面观都是如此，因而确定此期分期用细胞大小判断比用细胞位置判断更为有效。
从动物极观，胚盘呈轻度椭球形（尤在早期）。
图8.囊胚期胚胎正面观。
A：
256-细胞期（2.5h）；B：
高囊胚期（3.3h）；C：
高囊胚期和椭形期之间的转变（3.5h）；D：
椭形期和球形期之间的转变（3.8h）；E：
穹顶期（4.3h）；F：
30%-外包期（4.7h）。
比例尺=250μm
囊胚早期细胞继续同步分裂，和之前节奏相同（图5，9）。
更准确的说，囊胚早期的分裂为间时同步，因为有丝分裂并不完全同时发生，相反，在每个细胞周期末期，一条波线穿过胚盘，近动物极细胞最先进入波线，外围细胞最后进入。
波线一般斜穿胚盘，以致从正面观可见波线沿胚盘长轴穿过细胞野。
图9.囊胚中期转变过程中细胞周期的延长和同步性的减弱，开始于第10合子周期（512-细胞期）。
A中不同的标点表示从三种不同的胚胎
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