病毒学复习资料doc.docx
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第一章绪论
一,病毒学研究的对象及任务
病毒(virus)是指那些在化学组成和增殖方式上独具特点的,只能在宿主细胞内进行复制的微生物或遗传单位。
病毒性质的两重性
1.生命形式的两重性:
存在形式:
化学分子与细胞内寄生、结晶体与非结晶体、颗粒体形式与基因形式。
2结构和功能的两重性:
标准病毒与缺陷病毒
缺陷病毒:
装配不完全的病毒(缺损病毒,defectivevirus,Di颗粒);
标准病毒:
产生缺陷病毒的原亲代病毒)。
假病毒与真病毒
假型病毒:
一种病毒的核酸被另一病毒外壳包裹;假病毒:
细胞DNA被病毒外壳包裹;
真病毒:
一种病毒的外壳包裹自己的核酸)。
杂种病毒与纯种病毒
杂种病毒:
在混合感染中,病毒外壳包裹两种病毒的核酸
3病理学两重性:
致病性与非致病性;急性感染与慢性感染
过客病毒:
某一病毒对宿主无致病性,则该病毒称为此宿主的过客病毒
病原病毒:
某一病毒对宿主有致病性,则该病毒称为此宿主的病原病毒
亚病毒
1卫星病毒与卫星核酸
satellitevirus需辅助病毒才能复制核酸(卫星病毒),或由辅助病毒提供外壳蛋白来包被核酸(卫星核酸)
2拟病毒virusoid比卫星病毒核酸还要小,仅200—400bp,最大不过1kb环状RNA。
需辅助病毒才能复制,与辅助病毒同包一个外壳中。
属植物病毒,目前归于环状卫星RNA。
3类病毒viroid240—375bp单链、环状RNA;独立侵染、自立复制、无外壳,多二级结构,不编码任何蛋白,为植物病毒
4朊病毒prion很小的具侵染性的蛋白颗粒
病毒学研究的任务
1.防治和控制疾病
2.基础理论研究:
生命起源与进化、认识生命本质
3.利用病毒造福人类:
生物防治、病毒基因工程
病毒学发展趋势
一、病毒功能基因组学和蛋白质组学研究
1.从核酸及蛋白质水平认识病毒,了解它们的致病机理与诊断防治。
2.系统生物学理论的建立:
系统生物学是研究一个生物系统中所有组成成分(基因、mRNA、蛋白质等)的构成,以及在特定条件下这些组分间的相互关系的学科。
也就是说,系统生物学不同于以往的实验生物学——仅关心个别的基因和蛋白质,它要研究所有的基因、所有的蛋白质、组分间的所有相互关系。
显然,系统生物学是以整体性研究为特征的一种大科学。
3.新的诊断/预防/药物的发展与利用
二、新出现或再现的病原微生物的特性与诊断、防治
近年新出现或再现病毒的特点
1.多数为人畜共患病的病原,可能由动物传给人
2.可能由昆虫或节肢动物为中间媒介
3.随交通旅行或工作生活习性改变、环境气候变化而传播
4.所致疾病的诊断需作病原学确证
三、病毒分子病理学研究
1.生命起源、变异、毒力改变、进化
2.病毒与宿主的相互作用
3.肿瘤病毒学
第二章病毒的分类与命名
病毒“种”是指构成一个复制谱系(replicatinglineage)、占据一个特定小生境(ecologicalniche)、具有多个分类特征的病毒。
病毒属是一群具有某些共同特征的种。
其属名的词尾“virus”,但在设立一个新的病毒属时必需有一个同时被承认的代表种(typespecies)。
病毒科是一群具有某些共同特征的属,科名的词尾为“viridae”。
病毒目:
是目前最高的分类阶元。
病毒目是一群具有某些共同特征的科,目名的词尾为“virales”。
病毒分类原理及其依据
原理:
强调其分类和命名的稳定性、实用性、认可性和灵活性。
稳定性是指病毒名称及其隶属关系一旦确定下来,就应该尽可能的保留。
实用性是指病毒分类体制应该对病毒学研究领域是有用的。
认可性是指病毒分类阶元和名称应该为病毒学研究者乐意接受和使用,所以,认可性也是实用性的必然结果。
灵活性是指病毒分类阶元可以依据某些新发现而进行重新修订和再确定。
依据:
主要以病毒粒子特性、抗原性质和病毒生物学特性等作为依据。
病毒粒子特性:
①病毒形态:
如大小、形状、包膜和包膜突起的有无,衣壳结构及其对称性
②病毒生理生化和物理性质:
如分子量,沉降系数,浮力密度,病毒粒子在不同pH、温度、Mg2+、Mn2+、变性剂、辐射中的稳定性
③病毒基因组:
如基因组大小、核酸类型、单双链、线状或环状,正负链,G+C所占的比例、核苷酸序列等
④病毒蛋白:
如结构蛋白和非结构蛋白的数量,大小以及功能和活性,氨基酸序列等;
⑤病毒脂类含量和特性;
⑥碳水化合物含量和特性;
⑦病毒基因组组成和复制:
基因组结构、复制策略、开放阅读框数量和位置、转录转译特性、转译后加工、病毒蛋白聚集和病毒组装的位置,病毒成熟与释放的部位和特性
第三章病毒学的研究方法
一、病毒学研究常用方法
离心技术:
差速离心法:
采用逐渐增加离心速度或低速和高速交替进行离心,使沉降速度不同的颗粒,在不同的离心速度及不同离心时间下分批分离的方法。
密度梯度离心:
采用甘油,蔗糖,氯化铯配制成抗对流干扰连续密度梯度介质,把病毒粒子和杂质沉淀或浓缩到与它自身密度相等的位置。
电子显微镜技术:
负染色法;超薄切片技术;免疫电镜技术;冷冻电镜技术
组织和细胞培养技术:
组织培养法(tissueculture)或细胞培养(cellculture)法,是将离体活组织块或分散的组织细胞加以培养的技术总称,为病毒分离鉴定中的最常用的基本方法。
群体培养:
将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中,让细胞贴壁生长,汇合后形成均匀的单细胞层。
克隆培养:
将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中,各个细胞贴壁后,彼此距离较远,经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落,称为克隆。
一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。
原代和次代细胞培养:
分离病毒最为敏感。
二倍体细胞:
用于病毒分离和疫苗制备
传代细胞系:
用于病毒的分离鉴定和抗病毒药物筛选研究。
常用的细胞系有人宫颈癌细胞(Hela)、传代地鼠肾细胞(BHK21)、人喉上皮癌细胞(Hep-2)、传代非洲绿猴肾细胞(Vero)。
病毒基因转染细胞系:
用于病毒基因调控和抗病毒药物的研究。
细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE):
由病毒增殖引起的细胞改变,称细胞病变效应。
不同种类病毒可引起
①细胞圆缩、分散、溶解,如肠道病毒、鼻病毒、披膜病毒、痘病毒等;
②细胞融合成多核巨细胞,如疱疹病毒、副粘病毒、呼吸道合胞病毒;
③细胞肿胀、颗粒增多、病变细胞聚集成葡萄状,如腺病毒;
④胞质出现空泡,如SV40细胞;
⑤细胞浆或核内出现嗜酸性或嗜碱性包涵体,一至数个不等,如狂犬病毒和巨细胞病毒;
⑥轻微病变,如正粘病毒、狂犬病毒、冠状病毒和逆转录病毒等;⑦培养液pH的变化。
细胞培养特点:
1.细胞的变化
1有些病毒在细胞内增殖时可引起特有的细胞病变,称为细胞病变效应(CPE)。
常见的变化有细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等。
2有些病毒如麻疹病毒、CMV、RSV等作用于细胞膜,可使邻近的细胞相互融合,形成多核巨细胞或称融合细胞。
3有些病毒(如狂犬病病毒、麻疹病毒等)可在培养细胞中形成胞浆或核内的包涵体。
2.红细胞吸附(hemadsorption,HAd):
流感或副流感病毒等感染细胞后,由于细胞膜上出现了血凝素(haemagglutinin,HA),具有吸附脊椎动物(豚鼠、鸡、猴等)红细胞的能力,这一现象称红细胞吸附,常用来测定具有HA的粘病毒与副粘病毒的增殖。
若有相应的抗血清,则能中和细胞膜上的HA,HAd不再发生,称红细胞吸附抑制试验。
3.干扰现象(interference):
某些病毒感染细胞时不出现CPE或其他易于测出的变化(如HAd),但能干扰在其后感染的另一病毒的增殖。
如风疹病毒感染Vero细胞时CPE不明显,但它能干扰后感染的埃可病毒(ECHOV)的增殖,从而阻抑后者所特有的CPE
4.细胞代谢的改变:
病毒感染细胞的结果可使培养液的pH值改变,说明细胞的代谢在病毒感染后发生了变化。
这种培养环境的生化改变也可作为判断病毒增殖的指标。
1.蚀斑测定是一种检查和准确滴定病毒感染性的方法。
将稀释的病毒悬液加入单层细胞培养瓶中。
病毒吸附后,再覆盖一层融化的半固体营养琼脂,使病毒在单层细胞培养中有限扩散。
结果是每一个有感染性的病毒在单层细胞中可产生一个局限性的感染灶。
用活性染料(如中性红)染色,则活细胞着色,受病毒感染而破坏的细胞不着色,形成肉眼可见的蚀斑(plaque)。
每个蚀斑是由一个感染性病毒颗粒形成的,称作蚀斑形成单位(plaqueformingunit,PFU)。
病毒悬液中的感染性病毒量的滴度可用PFU/ml表示。
2.50%组织细胞感染量(TCID50)测定法该方法是测定病毒能使50%的组织培养细胞发生感染的最小量。
一般是将病毒悬液作10倍的系列稀释,分别接种细胞,经一定时间后观察CPE、血细胞吸附等指标,以最高稀释度能感染50%细胞的量为终点。
最后用统计方法计算出50%组织细胞感染量(50%tissuecultureinfectiousdose,TCID50)。
血清学方法
中和试验:
适用于病毒鉴定,机体中抗体的检测,分析病毒抗原的性质,疫苗接种效果评估等。
补体结合试验。
血凝抑制试验:
常用于正粘病毒和副粘病毒感染的诊断和病毒亚型鉴定及抗原变异的监测,如流感病毒的分型。
酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)。
放射免疫试验(radioimmunolassay,RIA)。
免疫荧光检测(immunofluorescenceassay,IFA)。
凝胶扩散法(gel-diffusiontest)
分子生物学方法
聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)。
转印杂交:
Southernblot、Nouthernblot和Westhernblot。
蛋白质组学:
肽图谱。
基因组学:
核酸序列测定及基因功能。
基因工程:
抗病毒疫苗或抗病毒的大分子多肽、病毒载体。
病毒的鉴定:
病毒的纯化:
离心。
病毒的大小和形态:
电镜。
细胞培养核酸类型鉴别和序列测定:
PCR。
乙醚敏感试验:
是否具有脂类包膜。
血清学反应:
免疫荧光抗体技术
(三)病毒感染的快速诊断
快速诊断主要是指从含有病毒标本及感染机体的血清中检测病毒颗粒、蛋白抗原、IgM抗体和核酸等,往往在数小时内即可得出结果。
形态学检查:
光学显微镜检查:
包涵体电子显微镜检查
病毒抗原检测:
ELISA
病毒核酸检测:
核酸杂交、凝胶电泳技术、PCR
血清学诊断:
病毒蛋白抗原检查
用荧光素、放射性同位素、过氧化物酶等标记抗体,采用免疫学和分子生物学技术,检测标本中的病毒蛋白抗原,具有敏感、特异、快速等优点。
1.免疫荧光技术(immunofluorescence,IF)
2.固相放射免疫测定(solid-phaseradioimmunoassay,SPRIA)
3.酶免疫技术(enzymeimmunoassay,EIA)此法可检测多种病毒及其抗体,主要是酶免疫组化法和酶联免疫吸附试验法(ELISA)。
特异性IgM抗体的检测
检测病毒特异性IgM抗体可诊断急性感染,特别是对证实孕妇感染风疹病毒尤为重要,但应注意类风湿因子(IgM)的干扰。
另外,检测早期抗原的抗体是快速诊断的另一途径。
如检测针对EBV的早期抗原(EA)、核心抗原(EANA)和衣壳抗原(VCA)等的抗体,可以区别急性或慢性EBV感染。
此外,分子生物学检测技术、气相色谱技术等,均可用来分析和鉴定病毒感染。
检测病毒核酸
1.核酸杂交技术用于病毒检测的有斑点杂交、细胞内原位杂交、DNA印迹杂交、RNA印迹杂交等。
2.核酸扩增法目前多数病毒基因已通过分子克隆技术被明确了核苷酸序列,使得DNA扩增技术逐步发展为常规诊断技术之一。
3.基因芯片技术又称DNA芯片、生物芯片(biochip)。
其原理是:
将已知的生物分子探针或基因探针,大规模或有序排布于小块硅片等载体上,与待测样品中的生物分子或基因序列相互作用和并行反应,在激光的激发下,产生的荧光谱信号被接受器收集,计算机自动分析处理数据并报告结果。
其优点是:
可以一次性完成大量样品DNA序列的检测和分析,解决了传统核酸杂交技术的许多不足。
芯片技术在病毒等微生物学诊断和流行病学调查方面有着广阔的应用前景。
第四章病毒的结构
一、病毒的大小表示形式:
分子量:
核蛋白分子(核酸与蛋白质以一定方式组合),3~800×106道尔顿
密度:
浮力密度(ρ)→采用密度梯度离心方法测定,需注明介质沉降系数:
单位离心力作用下的沉降速率(s)
壳体:
由蛋白质组成,包围病毒核酸的蛋白质结构。
颗粒→蛋白质亚基(不同的蛋白质)以次级键形式形成。
核衣壳:
由核酸与蛋白质壳体组成的核心成分
包膜:
围绕或包围核衣壳的双分子层,来源于宿主,不同的病毒感染同一宿主包膜成分相同。
包膜突起→钉状物→糖蛋白组成复杂的病毒成分
二、病毒的结构与功能
病毒的结构有二种,一是基本结构,为所有病毒所必备;一是辅助结构,为某些病毒所特有。
它们各有特殊的生物学功能。
基本结构:
病毒核酸、病毒蛋白质
辅助结构:
包膜、突起(脂质、糖类等)
病毒的化学组成:
核酸、蛋白质、脂类、碳水化合物、无机盐
病毒基因组的结构特点
1.病毒基因组大小相差较大。
2.病毒基因组可以由DNA组成,也可以由RNA组成。
3.多数RNA病毒的基因组是由连续的核糖核酸链组成,还没有发现有节段性的DNA分子构成的病毒基因组。
4.基因重叠
5.病毒基因组的大部分是用来编码蛋白质的。
6.病毒基因组DNA序列中功能上相关的蛋白质的基因或rRNA的基因往往丛集在基因组的一个或几个特定的部位,形成一个功能单位或转录单元。
7.除了反转录病毒以外,一切病毒基因组都是单倍体,每个基因在病毒颗粒中只出现一次。
8.噬菌体(细胞病毒)的基因是连续的;而真核细胞病毒的基因是不连续的,具有内含子。
病毒核酸的结构特征
(1)粘性末端
(2)末端冗余
(3)循环排列
(4)回文序列
(5)倒转末端重复序列是指存在于病毒基因组两端的反向互补重复序列,这样的基因组经过变性、退火处理,可以形成有部分双链区的线状环;或者产生锅柄样的结构。
(6)重叠基因
(7)分段基因组:
单分体病毒:
多个核酸节段包装在同一病毒粒子中
多分体病毒:
多个核酸节段分别包装在不同的病毒粒子中,这类病毒实际上是由几个不同的病毒粒子所组成的复合体。
含分段基因组的病毒具有以下三个特点:
侵染效率低;容易产生变异;具有较高的重组率。
多分体现象为植物病毒所特有,并仅存在于+ssRNA病毒中,是指病毒的基因组分布在不同的核酸链上,分别包装在不同的病毒粒体里。
双分体病毒指遗传信息为双组分基因组包被在两种粒体里的病毒,如烟草脆裂病毒属(Tobravirus)和蠕传病毒属(Nepovirus)。
三分体病毒指核酸包被在三种粒体中的病毒。
(8)帽子和ploy(A)结构真核病毒的正链RNA基因组、双链RNA基因组的正链RNA和病毒的mRNA通常有类似于真核生物mRNA5’端的帽子结构和3’的poly(A)结构尾。
而原核生物mRNA和相应的噬菌体基因组RNA均缺少这样的结构。
病毒基因组RNA5’端的帽子结构有着真核生物5’端的帽子结构的相似功能,它对病毒基因组正链RNA具有保护作用,可以使病毒正链RNA或mRNA免受宿主细胞中的外切核酸酶的降解;病毒基因组RNA的帽子结构还与感染性有关,缺少它几乎完全丧失感染性。
病毒基因组的3’的poly(A)结构尾有多方面的功能。
保持和提高病毒基因组RNA在宿主细胞中的稳定性;3’的poly(A)结构尾也与病毒的侵染性有关。
(9)其它特征一些真核DNA病毒基因组还含有复制原点序列以及转录调控序列如启动子和增强子序列。
某些真核病毒的基因组也含有内含子
转染:
从病毒中提取核酸,来进行遗传物质的传递,感染细胞。
转染可分核酸为
1侵染性核酸
②非侵染性核酸。
具有RNA功能活性,进入细胞以后直接作为翻译的模板,合成大分子蛋白质,叫侵染性核酸。
核酸的组成、含量与类型
组成:
ATCG;A+G=T+C
类型:
DSDNA:
SSDNA;DSRNA;SSRNA
含量:
不同病毒含量差异较大(P50)
核酸的极性将mRNA的碱基排列顺序规定为(+RNA)链,其相应的模板链则为负链(-DNA),因此只有负链DNA才能被转录并产生mRNA。
也就是说凡碱基排列顺序与mRNA相同的单链DNA或RNA,称(+)DNA链或(+)RNA链,凡碱基排列顺序与mRNA链互补的单链DNA和RNA,称(-)DNA链或(-)RNA链
结构蛋白质:
要形成完整,成熟,有感染性病毒粒子的蛋白质成分,包括:
壳体蛋白、包膜蛋白、酶
非结构蛋白质:
是由病毒基因编码,并不存在于病毒中,主要在病毒复制过程中发挥作用
非结构蛋白:
病毒本身基因组所形成,与病毒核酸复制有关,病毒感染宿主后,形成的前体蛋白或早期蛋白。
结构蛋白的几种成分
1.衣壳蛋白:
构成病毒壳体的蛋白质,由一条或多条多肽链折叠形成的蛋白质亚基,是构成壳体蛋白的最小单位。
单一:
一种亚基
复杂:
几种亚基
功能:
①构成病毒的壳体,保护病毒的核酸。
②无包膜病毒的壳体蛋白参与病毒的吸附、进入,决定病毒的宿主嗜性,同时还是病毒的表面抗原。
抗原性质:
有些可凝聚血细胞(血细胞凝聚特性)
2.包膜蛋白:
构成病毒包膜结构的病毒蛋白质,包括包膜糖蛋白和基质蛋白两类。
包膜糖蛋白类似于壳体蛋白(无包膜)的功能与病毒吸附侵入,抗原性,血细胞凝聚特性。
基质蛋白:
非糖基化蛋白,主要识别病毒核壳,在病毒核壳与包膜间起桥梁作用
3.酶:
来源于病毒本身基因组功能表达的蛋白质分子,在病毒复制起作用
4.病毒的脂质:
许多病毒包膜内存在有脂类化合物,如磷脂、脂肪酸、甘油三酸脂和胆固醇等。
这些脂类几乎都是由病毒粒子在细胞内成熟,在细胞膜处以芽生方式释放,直接从寄主细胞膜上得到。
病毒脂类存在与病毒的吸附和侵入有关。
囊膜(Envelope):
某些病毒,如虫媒病毒、人类免疫缺陷病毒、疱疹病毒等,在核衣壳外包绕着一层含脂蛋白的外膜,称为“囊膜”。
囊膜中含有双层脂质、多糖和蛋白质,其中蛋白质具有病毒特异性,常与多糖构成糖蛋白亚单位,嵌合在脂质层,表面呈棘状突起,称“剌突(Spike)或囊微粒(Peplomer)”。
它们位于病毒体的表面,有高度的抗原性,并能选择性地与宿主细胞受体结合,促使病毒囊膜与宿主细胞膜融合,感染性核衣壳进入胞内而导致感染。
囊膜中的脂质与宿主细胞膜或核膜成分相似,证明病毒是以“出芽”方式,从宿主细胞内释放过程中获得了细胞膜或核膜成分。
有囊膜病毒对脂溶剂和其他有机溶剂敏感,失去囊膜后便丧失了感染性。
5.病毒的糖类:
除病毒的核酸中所含戊糖外,有的病毒还含有少量的其他糖类,为核糖或脱氧核糖和磷酸组成的核酸骨架。
有包膜病毒中碳水化合物以寡糖侧链的形式与蛋白质结合形成包膜糖蛋白。
6.其它组成:
在某些动物、植物病毒中存在多胺类有机阳离子,包括丁二胺、亚精胺、精胺等,它们大都结合于病毒核酸,对核酸的构型有一定影响。
在某些病毒的病毒体中,还发现有其它的小分子量组份,如ATP,对噬菌体尾鞘收缩提供能量。
病毒蛋白质衣壳的功能
(1)致密稳定的衣壳结构除赋予病毒固有的形状外,还可保护内部核酸免遭外环境(如血流)中核酸酶的破坏;
(2)衣壳蛋白质是病毒基因产物,具有病毒特异的抗原性,可刺激机体产生抗原病毒免疫应答;
(3)具有辅助感染作用,病毒表面特异性受体边连结蛋白与细胞表面相应受体有特殊的亲和力,是病毒选择性吸附宿主细胞并建立感染灶的首要步骤。
三、病毒粒子的对称性
病毒的壳体结构→决定了整个病毒体的结构形状
衣壳是由许多“壳微粒(Capsomere)”按一定几何构型集结而成,壳微粒在电镜下可见,是病毒衣壳的形态学亚单位,它由一至数条结构多肽能成。
①立体对称②螺旋对称③复合对称
第五章病毒的感染性繁殖
一、研究病毒复制的一般性方法
1、建立病毒复制的实验研究系统
无论是哪种培养系统,都要考虑:
①宿主细胞的敏感性与生理状态
②注意感染复数病毒感染宿主细胞后,会导致宿主细胞出现裂缝,胞内的物质渗漏,使宿主细胞死亡。
要尽可能做到感染复数为1,即一个对一个。
感染复数(multiplicityofinfection,m.o.i):
用以起始病毒感染的每个细胞所需的病毒颗粒数目。
单位(PFU/cell)
2、一步生长实验
取样,分别测定溶液的感染效价,以培养时间为横坐标,感染效价为纵坐标,画出一步生长曲线,体现3个特征:
①潜伏期②增长期③稳定期
潜伏期中包含有隐蔽期,隐蔽期是有感染性的病毒粒子从消失到出现这段时期。
3、成熟前的裂解
病毒如何体现生命特征:
病毒吸附寄主细胞后,核酸进入胞内,病毒的基因组利用宿主细胞的大分子合成装置,进行核酸的复制和基因组的表达。
二、病毒的增殖
病毒复制周期
1.吸附(Adsorption)指病毒附着于敏感细胞的表面,它是感染的起始期。
细胞与病毒相互作用最初是偶然碰撞和静电作用,这是可逆的联结。
随后的特异性吸附是非常重要的,根据这一点可确定许多病毒的宿主范围,不吸附就不能引起感染。
接触→结合→特异性吸附(病毒配体位点与细胞膜特异受体结合).
能否吸附成功取决于:
环境因子、病毒吸附蛋白VAP、细胞受体
2.侵入(Penetration):
注射式侵入、细胞内吞、膜融合以及其他特殊的侵入方式。
注射:
有尾噬菌体的侵入方式。
吸附→尾钉固着→尾鞘收缩→尾管穿入→DNA注入。
3.脱壳(uncoating)
4.生物合成(biosynthesis)
转录的调节
1可利用宿主的转录酶进行转录,某些噬菌体本身携带转录酶,当转录酶与DNA进入细胞后,转录即刻开始,小的DNA噬菌体完全依赖宿主的转录酶。
2某些噬菌体线形DNA以极性的方式进入胞内,由于固定一端的部分侵入,可以导致不同的基因依次被转录。
3在同一转录单位的基因相继转录,靠近启动子的基因优先转录。
4宿主转录酶的修饰,可以改变它与调节亚基的相互作用。
5噬菌体因子与宿主转录酶的结合可以改变转录起始与终止的特异性。
6噬菌体DNA出现单链的缺口或间隙可以改变它的模板性质。
7不同噬菌体的mRNA的功能活性持续的时间有别。
8噬菌体的多顺反子的mRNA切割成小mRNA。
DNA噬菌体的大分子物质的调节:
mRNA的5’端无帽子结构,3’端无聚腺苷酸,并且能够形成部分双链区域,还可直接进行翻译,转录与翻译是互相偶联的。
5.装配与释放(assemblyandrelease)在宿主细胞内,有一个前体池,合成的蛋白质等累积在前体池,等达到一定浓度以后,就会以一定方式形成有感染性的病毒粒子的生物学过程称为病毒的装配。
形成的有感染性的病毒粒子通过一定方式离开宿主细胞称为病毒的释放。
释放:
裂解、出芽。
绝大多数无包膜病毒释放时被感染的细胞崩解,释放出病毒颗粒,宿主细胞膜破坏,细胞迅即死亡。
绝大多数有包膜病毒通过细胞内的内质网、空泡,或包上细胞核膜或细胞膜以出芽方式释放而成为成熟病毒,在一段时间内逐个释出,对细胞膜破坏轻,宿主细胞死亡慢。
从单个病毒吸附开始至所有病毒释放,此过程称