一例犬金黄色葡萄球菌病的诊断及药敏试验.pdf

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中国畜牧兽医2O1O年第37卷第9期兽医临床225一例犬金黄色葡萄球菌病的诊断及药敏试验赵永达。

黄显会（华南农业大学兽医学院兽医药理实验室，广州510642）中图分类号：

$858292文献标识码：

B文章编号：

1671-7236（2010）09022502金黄色葡萄球菌是引起化脓性感染的重要致病菌，广泛分布于自然界中。

2009年12月，一只宠物犬因腿部被咬伤，发生脓性感染。

采集宠物犬咬伤肿胀关节处脓液进行病原分离鉴定，分离的细菌为革兰氏阳性，单个、成对或成堆排列的球菌，生化试验鉴定为金黄色葡萄球菌。

通过药敏试验筛选出敏感药物，为金黄色葡萄球菌病的治疗提供科学依据。

1临床症状病犬主要表现为精神委顿，食欲减退，腿部关节肿胀，步态不稳，摇摆转圈，喜卧，皮肤触摸有粗糙感，局部有皮痂。

2实验室诊断21材料与方法211主要仪器设备生化培养箱、CO培养箱、收稿日期：

20100330普通显微镜、干烤箱、自动灭菌器、酒精灯、接种环、载玻片等。

212试剂血平板、麦康凯琼脂、MH琼脂、普通肉汤培养基、葡萄球菌生化鉴定管（TH一16S）、药敏试纸均购自杭州天和微生物试剂有限公司。

本试验所选药敏试纸共20种：

舒普深、利福平、万古霉素、甲氧苄啶、安灭菌、特美汀、氧氟沙星、强力霉素、氟哌酸、痢特灵、萘啶酸、氨苄青霉素、红霉素、克林霉素、罗红霉素、庆大霉素、头孢吡肟、四环素、阿奇霉素、环丙沙星。

3过氧化氢自制。

22细菌的分离培养按无菌操作要求，用接种环采取肿胀关节处脓液，划线接种到血平板，置37。

C培养24h；然后从培养好的血平板上挑取2个明显的单菌落接人装有5mL营养肉汤的试管中培养，18h后用革兰氏染色镜检。

EJ药物生物技术，2001a，8（3）：

16316662王鹤尧，郑文婕，h凤荣，等血液替代品基质聚合牛血红蛋白制备方法的研究J中国药学杂志，2001b，36（6）：

41641973吴红，吴道澄，李晓晔，等血液替代品一血红蛋白修饰物的研究进展J中国输血杂志，2001，14

（2）：

11611884吴宝平，王凡，罗超，等猪血红蛋白及戊二醛聚合猪血红蛋白氧载体的研究J西北大学学报，2008，38（4）：

61361695季守平，刘泽澎甲氧基聚乙二醇遮蔽红细胞表面抗原制备通用型血液的初步研究J中国输血杂志，2000，13（4）：

223226洪民，宋文俊，李士云，等聚乙二醇大分子化猪血红蛋白对其携氧特性的影响J生物工程学报，2001，16

（1）：

2226贾杏林，段柳春，陈琳静，等兔失_【舡性休克模型的复制及异源性输血的疗效观察J动物医学进展，2009，30（10）：

3539常宏宇，檀英霞，张成林，等去除aGal抗原的猪红细胞输入猕猴体内的初步研究EJ中国输血杂志，2008，21

（2）：

110113KanP，LeeCJApplicationofaqueoustwophasesysteminseparationpurificationofstromafreehemoglobinfromanimalbloodArtifCells，BloodSubslmmobilBiotech，1994，22（3）：

641649HeterologousTransfusionofDogbyPolymerizedHemoglobinofPigJIAXinglin，CHENLinjing，DINGWei，YANGFeng，ZHAOJun（HunanAgriculturalUniversityVeterinaryFaculty，Changsha410128，China）Abstract：

TheobjectiveofthispaperwastostudytheeffectofthepighemoglobinassubstituteThehemoglobinwasextractedfromthepigSbloodandpolymerizedbyPEGandpurifiedbycentrifuged，thentransferredtOdogsBoththeclinicalindicatorsandbloodandurineindexweredetectedcontinuouslybeforeandaftertransfusionThedoghadntoccurredcoagulationandhemolyticreactionItshowedthathemoglobinpolymerizationcouldexistinthedogSbloodfor7daysbydetectingUrineTherewerenoadverseclinicaIreactionsoccuraftersecondtransfusionThepolymerizationofhemoglobinwillbebelierprospectsforclinicalapplicationinbloodsubstitutesKeywords：

polymerizedhemoglobin；dog；heterologoustransfusion；bloodsubstitute226兽医临床中国畜牧兽医2010年第37卷第9期23生化鉴定生化鉴定管试验：

挑取分离株纯培养物接种于精氨酸水解酶、磷酸酶、果糖、半乳糖等生化管内，37培养，12h后观察结果，随后持续观察1周。

凝固酶试验：

取未稀释的兔血浆及生理盐水各1滴，分别放于玻片上，挑取待检菌株的单个菌落，分别混于血浆和生理盐水中，立即观察结果。

如果与血浆混合后凝集成块，而与对照生理盐水混合后没有任何变化者，则判断为阳性。

过氧化氢酶试验：

将一待检菌落置于干净的玻片上，把浓度为3的过氧化氢滴到菌落上，如有气泡产生者则为阳性。

24药敏试验药敏试验按KB纸片扩散法操作，将分离纯化后的菌株经普通肉汤培养后，稀释至标准麦氏比浊管，用灭菌棉签蘸取稀释过的菌液，在普通琼脂平板上均匀涂布，盖上平板，置室温数分钟至培养基表面无明显液体，用无菌小镊子夹取药敏纸片平贴于琼脂平板表面，然后倒置于3恒温箱培养24h，测量抑菌环直径。

3结果与分析31细菌形态特征分离菌在血平板上均形成一致的金黄色，圆形，直径约为15mrn的菌落；油镜下观察到的细菌均为葡萄串状，也有少量单个或成对存在的革兰氏阳性球菌（图1）。

图1分离菌株菌落形态32生化鉴定结果生化鉴定结果见表l。

由表1可知，该分离菌为金黄色葡萄球菌。

表1细菌生化鉴定结果注：

+表示阳性，其中糖类均产酸不产气；一表示阴性，其中糖类不产酸不产气。

33药敏试验结果药敏试验结果见表2。

根据CLSI（2009）对结果进行判定，该菌株对舒普深、利福平、万古霉素、痢特灵、安灭菌、特美汀、氧氟沙星、强力霉素敏感；对氟哌酸、甲氧苄啶不敏感；对萘啶酸、氨苄青霉素、红霉素、环丙沙星、罗红霉素、庆大霉素、头孢吡肟、四环素、阿奇霉素、克林霉素具有耐药性。

表2药敏试验结果4讨论与小结从分离到的细菌菌落形态、细菌形态、生化鉴定结果来看，分离菌株为金黄色葡萄球菌。

根据药敏试验结果，建议使用舒普深或利福平来控制金黄色葡萄球菌病。

近年来，随着抗菌药物种类的不断增加及广泛应用，金黄色葡萄球菌的耐药性不断增加，给临床治疗造成了极大的困难。

本试验中金黄色葡萄球菌对萘啶酸、氨苄青霉素、氟哌酸、甲氧苄啶等十种药物有耐药性。

用药前应进行药敏试验，可避免抗生素的滥用，减少细菌耐药性的发生。

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。

日常生活中，人之间的接触或打喷嚏，被猫、狗咬伤等，都可感染金黄色葡萄球菌；此外，耐药菌可能通过食物、水源、毛发（尤其是猫、狗）和其他接触方式传递给人（于振清等，2006），给公共健康造成了严重威胁，因此，宠物动物携带的细菌及细菌的耐药性不容忽视。

宠物狗感染金黄色葡萄球菌的报道较少，而有研究结果表明，猫、狗等宠物身上的金黄色葡萄球菌可能传染给犬主，犬主也可能将细菌传染给宠物。

目前，随着生活水平的提高，宠物越来越多，越来越受到人们的重视，宠物犬本来携带或感染的疾病，也对人产生了新的威胁。

因此，应加强金黄色葡萄球菌的监测，提高人们对该菌的认识，并采取相应措施减少或延缓该种细菌耐药性的产生，为该病的防控和治疗提供参考。