大豆中磷含量的测定化本用Word格式文档下载.docx

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2014年7月

大豆中磷含量的测定

一、 前言

大豆（soybean）,是豆类中营养价值最高的品种。

在百种天然的食品中，它名列榜首，含有大量的不饱和脂肪酸、多种微量元素、维生素及优质蛋白质。

大豆内含40%蛋白质，脂肪含量丰富高达25%o并且其含蛋白质比牛肉多，钙含量比牛奶高。

卵磷脂含量比鸡蛋高，还含有丰富的矿物质、维生素。

磷是体内许多重要物质（如核酸、磷蛋白、磷脂等）的组成成分，它主要以磷酸根的形式在体内发挥生理作用。

大豆中磷含量丰富，对人体有许多好处。

本实验采用分光光度法测定大豆中磷的含量。

二、 实验目的

1、 掌握钼蓝分光光度法测定磷含量的方法

2、 熟练分光光度计的使用。

3、 掌握马弗炉灰化的基本方法。

三、 实验原理

大豆中的有机物经酸氧化，使磷在酸性条件下与钥酸铉结合生成磷钥酸铉。

此化合物被对苯二酚、亚硫酸钠还原成蓝色化合物——钥蓝。

用分光光度计在波长660皿处测定钥蓝的吸光度值，以定量分析磷含量。

四、 实验材料

1、 仪器

托盘天平、分析天平、电磁炉、容量瓶（50mL,100mL,lOOOmL）、721分光光度计及一些实验室的常用仪器等

2、 主要试剂

①盐酸

②氧化锌，氢氧化钠

③15%硫酸溶液：

取15mL浓硫酸徐徐加入到80mL水中混匀。

冷却后用水稀释至lOOmLo

④对苯二酚溶液：

称取0.5g对苯二酚于100mL水中，使其溶解，并加人一

滴浓硫酸（减缓氧化作用）。

⑤钥酸铉溶液：

称取0.5g钥酸铉［（NH4）6MO7皈・4艮0］用15%硫酸稀释至

100mL

⑥亚硫酸钠溶液配制:

称取20g无水亚硫酸钠于100mL的水中，使其溶解（此溶液需于实验前临时配制，否则可使钥蓝溶液发生混浊）。

⑦磷标准储备液（100ug/mL）:

精确称取在105摄氏度下干燥的磷酸二氢钾（优级纯）0.4394g,置于lOOOmL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度。

此溶液每毫升含lOOug磷。

⑧磷标准使用液（10ug/mL）：

吸取磷标准储备液10ml,加水稀释至100mlo

五、 实验步骤

1、 样品的制备

先将大豆用粉碎机粉碎后待用。

取三个坦蜗放在马弗炉（温度约600摄氏度）中进行恒重，两次相差在0.2mg-0.4mg之间，用分析天平称取试样约6g放入恒重的堪蜗中，再在堪蜗中加入氧化锌0.5g,先在电炉上炭化，然后放入550摄氏度的马弗炉中灼烧至灰白，灼烧时间约2小时，取出塔蜗放在干燥器中冷却至室温,，用热盐酸（1：

1）10mL溶解灰分，并加热微沸5,分钟，将溶解液过滤，注入100mL容量瓶中，用热水冲洗塔蜗和滤纸，待滤液冷却至室温后，用50%的氢氧化钠溶液中和至出现浑浊，缓慢滴加盐酸使氢氧化锌沉淀全部溶解后，再滴2滴，最后用水稀释至刻度，摇匀。

2、 标准曲线的绘制

准确吸取磷标准使用液0、2、4、6、8、10mL,分别置于50niL容量瓶中，加入lOmLffl酸溶液摇匀，静置几秒钟。

加入5mL亚硫酸钠溶液，5mL对苯二酚溶液，摇匀。

加水至刻度，混匀。

静置0.5h以后，在分光光度计660nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线。

3、 样品的测定

准确吸取试样测定液5ml及同量的空白溶液，分别置于50mL容量瓶中，以下操作步骤同第二步“标准曲线的绘制”，以测出的吸光度在标准曲线上查得试样液中的磷含量。

六、 数据记录及处理

1、堪蜗的恒重

2、 加入大豆质量

3、 标准溶液的吸光度

序号

1

2

3

4

5

6

磷标液浓

度（ug/mL）

吸光度

4、未知液的吸光度

5、 磷测定标准曲线

6、 计算大豆中磷的含量：

七、 实验结果讨论

八、 注意事项

1、 该实验所接触的试剂均为腐蚀性强或具有一定的毒性，因此在实验过程中要注意安全。

2、 亚硫酸钠溶液一定要现配现用，不然会影响实验的进行。

3、 亚硫酸钠一定要是干燥、未过期的。

九、 实验心得