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终点是“个体”,而不是“组织器官”

3.下列有关生物技术实践的叙述错误的是

A.制作腐乳时,料酒的量超过50%时,腐乳成熟的时间将会缩短

B.发酵装置设置出料口便于取料及对发酵的情况进行及时的监测

C.采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除部分杂质

D.用移液管稀释菌液时,要轻压橡皮头,吹吸三次,使菌液与水充分混匀

【答案】A

【解析】制作腐乳时,料酒的量应为12%左右,超过50%时,腐乳成熟的时间将会延长,A项错误;

发酵装置设置出料口便于取料及对发酵的情况进行及时的监测,B项正确;

DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最大,而部分杂质在此浓度下溶解度较小,采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除部分杂质,C项正确;

用移液管稀释菌液时,轻压橡皮头,吹吸三次,可使菌液与水充分混匀,D项正确。

4.利用PCR技术扩增目的基因的过程中,需加入

A.耐高温的解旋酶以保证DNA双链完全解开

B.2种己知核苷酸序列的引物以保证核苷酸链的延伸

C.4种足量的核糖核苷酸以保证目的基因的扩增

D.—定量的盐酸和氢氧化钠溶液以维持pH的稳定

【答案】B

【解析】PCR技术中,采用高温使DNA解旋,并没有使用解旋酶,故A错误;

利用PCR技术扩增DNA的过程中,需要2种已知核苷酸序列的引物以保证核苷酸链的延伸,故B正确;

PCR技术的原理是DNA复制,需要4中足量的脱氧核糖核苷酸作为原料,故C错误;

利用PCR技术扩增DNA的过程中,需要一定量的缓冲溶液以维持pH的稳定,因为PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行,故D错误。

【点睛】解答A选项,关键要知道PCR的原理,利用的是热变性原理,不需要用到解旋酶。

5.下列有关病毒的说法正确的是()

A.一种病毒同时含有DNA和RNA

B.T2噬菌体寄生于酵母菌和大肠杆菌中

C.T2噬菌体感染菌体,不会导致菌体裂解

D.噬菌体利用宿主菌的氨基酸合成子代噬菌体的蛋白质

【答案】D

【解析】一种病毒要么有DNA要么有RNA,A错误;

T2噬菌体寄生于大肠杆菌中,B错误;

T2噬菌体感染菌体,会导致菌体裂解,C错误;

噬菌体利用宿主菌的氨基酸合成子代噬菌体的蛋白质,D正确。

【考点定位】噬菌体

6.下表是关于DNA粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用,表述正确的是

试剂

操作

作用

A

柠檬酸钠溶液

与鸡血混合

防止染色质螺旋缠绕

B

蒸馏水

与鸡血细胞混合

保持细胞正常的形状

C

加入溶解有DNA的NaCl中

析出DNA丝状物

D

冷却的酒精

过滤后的DNA加入其中

产生特定的颜色反应

 

A.AB.BC.CD.D

【解析】柠檬酸钠溶液是抗凝剂,与鸡血混合后可防止血液凝固,故A错误;

第一次使用蒸馏水是让蒸馏水与鸡血细胞混合,作用是让血细胞吸水膨胀,加速血细胞破裂,故B错误;

第二次使用蒸馏水是将蒸馏水加入到溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液中,作用是使NaCl溶液的浓度降低至0.14mol/L,此时DNA在NaCl溶液中的溶解度最小,从而使DNA析出,故C正确;

DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。

利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA,故D错误。

7.7.下列利用菜花进行“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()

A.采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除部分杂质

B.在切碎的菜花中加入一定量的洗涤剂和食盐,充分研磨,过滤后弃去滤液

C.用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L,用单层滤纸过滤获取析出物

D.将白色丝状物溶解在NaCl溶液中,加人二苯胺试剂后震荡,观察颜色变化

【解析】试题分析:

DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度变化而改变的,利用该原理可以进行DNA的粗提取,故A正确;

提取菜花的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液,故B错误;

随着NaCl溶液浓度降低,DNA析出,用多层纱布过滤,取纱布上DNA的黏稠物,故C错误;

将白色丝状物溶解在NaCl溶液中,加人二苯胺试剂后沸水溶中加热5min,观察颜色变化,故D错误。

本题考查DNA的粗提取与鉴定实验的有关知识,意在考查考生理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。

8.关于蛋白质提取的叙述中,不正确的是()

A.分离与纯化蛋白质之前首先要用适当的方法使蛋白质释放出来

B.抽提时要依据蛋白质的不同特性选择不同的溶剂

C.蛋白质的粗提取物离心可除去一些小分子杂质

D.蛋白质的粗制品可能是多种蛋白质的混合物

分离纯化蛋白质之前要先让细胞中的蛋白质释放出来,故A正确;

提取蛋白质时,要根据蛋白质的不同特性选用不同的溶剂,故B正确;

对蛋白质的粗提取物离心可以除去一些固体杂质,故C错误;

蛋白质的粗制品是多种蛋白质的混合物,故D正确。

本题考查蛋白质的提取的有关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。

9.下列关于“DNA的粗提取”实验的叙述中,正确的是

A.常温下香蕉匀浆中有些酶会影响DNA的提取

B.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度

C.向鸡血细胞悬液中加入蒸馏水后,用玻璃棒轻轻缓慢搅拌

D.使用鸡血细胞悬液为材料的操作中,两次加入2mol/L的NaCl溶液,目的不同

【解析】常温下香蕉匀浆中有些酶可破坏DNA而影响DNA的提取,A正确;

洗涤剂能瓦解细胞膜,但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度,B错误;

向鸡血细胞悬液中加入蒸馏水后,用玻璃棒快速搅拌,加速鸡血细胞的破裂,C错误;

使用鸡血细胞悬液为材料的操作中,两次加入2 

mol/L的NaCl溶液,目的相同,都是溶解DNA,D错误.。

【点睛】本题考查DNA的粗提取和鉴定,对于此类试题,需要考生注意的细节较多,如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等,需要考生在平时的学习过程中注意积累。

10.下列有关用鸡血进行DNA粗提取和鉴定实验的操作,错误的是

A.鸡血细胞中加入蒸馏水后,用玻棒搅拌

B.用蛋白酶纯化溶解于2mol/LNaCl溶液中的DNA

C.在溶有DNA的滤液中加入体积分数为95%的冷酒精后,用玻棒轻缓搅拌

D.将卷在玻棒上的丝状物加入到4mL二苯胺试剂中,沸水浴加热,冷却后观察

【解析】鸡血细胞中加入蒸馏水后,用玻棒搅拌,使细胞吸收胀破,A正确;

DNA在2mol/LNaCl溶液溶解度高,再结合酶的专一性原理,可用蛋白酶纯化溶解于2mol/LNaCl溶液中的DNA,B正确;

DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精,因此在溶有DNA的滤液中加入体积分数为95%的冷酒精后,用玻棒轻缓搅拌,这样可以进一步纯化DNA,C正确;

将卷在玻棒上的丝状物先溶于2mol/LNaCl溶液中,再向溶液中加入4mL二苯胺试剂,沸水浴加热,冷却后观察,D错误。

11.下列有关DNA粗提取与鉴定的实验叙述,正确的是()

A.酵母、菜花和猪的成熟红细胞都可作为提取DNA的材料

B.DNA在NaCl溶液中的溶解度随其溶液浓度增大而增大

C.在溶有DNA的滤液中加入嫩肉粉,可分解其中的杂质蛋白

D.鉴定DNA时,应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴

猪的成熟红细胞没有细胞核,也没有线粒体,不可作为提取DNA的材料,A错误;

DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最小,B错误;

在溶有DNA的滤液中加入嫩肉粉,嫩肉粉中含有的蛋白酶可分解其中的杂质蛋白,C正确;

鉴定DNA时,应将丝状物加入到2mol/L的NaCl溶液中让丝状物溶解,然后加入二苯胺试剂进行沸水浴,D错误。

本题考查DNA粗提取与鉴定的实验,意在考查考生能独立完成“知识内容及要求”所列的生物实验,包括实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。

12.下列各项中,实验操作与目的不一致的是()

【解析】质壁分离实验中,从盖玻片一侧滴入0.3g/mL的蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引,使细胞浸润在蔗糖溶液中,从而可以观察洋葱表皮细胞的质壁分离现象,A项正确;

DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低,所以在含有DNA的滤液中加入蒸馏水,使2mol/L 

NaCl溶液浓度降至0.14mol/L,可以析出DNA,去除可溶性杂质,B项正确;

使用显微镜观察洋葱根尖细胞有丝分裂的步骤为:

将洋葱根尖装片放在低倍镜下观察→找到根尖分生区细胞并移至视野中央→转换高倍物镜→调节细准焦螺旋,不能在高倍镜视野下找根尖分生区细胞,故C项错误;

液体石蜡密封液面的目的是为酵母菌提供无氧环境,让酵母菌进行无氧呼吸。

广口瓶中加入葡萄糖溶液的目的是为酵母菌提供呼吸作用的原料,D项正确。

【点睛】

本题考查课本上的几个常考实验的相关知识。

需要考生理解相关实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。

所以考生在平时的学习过程中一定要注意归纳和积累。

13.关于细胞的结构和功能,下列说法正确的是

A.鸡的红细胞不能用于DNA的提取

B.反射一定依赖反射弧完成,体现了结构是功能的基础

C.病毒只能寄生于活细胞,所以不能体现细胞是最基本的生命系统

D.基因工程能定向改变生物的遗传性状,这是通过改变基因结构实现的

【解析】A.鸡的红细胞中有细胞核,含DNA,可用于DNA的提取,A错误;

B.完整的反射弧结构是反射完成的基础,体现了结构是功能的基础,B正确;

C.病毒没有细胞结构,只能寄生于活细胞,体现了细胞是生命系统最基本层次,C错误;

D.基因工程是将外源基因导入到另一种生物的细胞中,属于基因重组,可定向改变生物的遗传性状,但没有改变基因结构,D错误;

答案选B。

14.甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置。

相关叙述正确的是

A.图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaCl溶液,但两者浓度不同

B.图乙中两支试管中的溶液均变蓝

C.图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使DNA成为絮状沉淀并缠绕在玻璃棒上

D.图乙操作中所用的二苯胺试剂需现配现用以达到较好的鉴定效果

【解析】图甲的烧杯中所用的溶液是体积分数为95%的冷却酒精,A错误;

图乙试管经沸水浴后即可观察到一支试管中的溶液(含有DNA)明显变蓝,另一支试管中的溶液(不含DNA)不变蓝,B错误;

图甲操作需用玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌卷起丝状DNA,C错误;

图乙操作中所用的二苯胺试剂需现配现用以达到较好的鉴定效果,D正确。

15.可以利用哺乳动物成熟的红细胞为实验材料进行的实验有

①制备较纯净的细胞膜

②运用差速离心法分离各种细胞器

③DNA的粗提取

④分离并纯化血红蛋白

⑤制成细胞悬浮液进行细胞培养

A.②③B.③⑤

C.①④D.④⑤

哺乳动物成熟的红细胞无细胞核、细胞器等结构,可用于制备较纯净的细胞膜,分离并纯化血红蛋白,C正确。

本题考查实验的相关操作。

16.在PCR扩增DNA的实验中,预计一分子DNA经过30次循环后,应该得到230个DNA分子,但是结果只有约210个DNA分子,那么不是出现该现象的原因是()

A.Taq酶的活力不够,或活性受到抑制

B.系统设计欠妥

C.循环次数不够

D.引物不能与亲链结合

【解析】PCR扩增没有得到应有的DNA分子数,有可能是Taq酶活性不够或活性受抑制,可能形成的DNA少,故A正确。

系统设计欠妥会导致达不到预期的结果,故B正确。

循环次数不够会出现子代DNA分子数少,故C正确。

引物与亲链不能结合的情况下不会出现子代,而不是少,故D错误。

17.下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验的叙述正确的是

A.前者选择鸡血细胞作为实验材料较好,后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好

B.样品预处理时,前者静置1天除去上清液;

后者需要加入清水,反复低速短时间离心洗涤,至上清液无黄色

C.可用蒸馏水涨破细胞的方法从猪的红细胞中提取到DNA和蛋白质

D.血红蛋白只能采用凝胶色谱法纯化,DNA可以采用电泳等方法纯化

【解析】鸡血细胞有细胞核,适于提取DNA,哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器,适用于提取血红蛋白,A正确;

提取血红蛋白的实验中,洗涤红细胞时,不能加清水,应该加入生理盐水,否则细胞会提早释放出血红蛋白与杂质混合,加大提取难度,B错误;

猪是哺乳动物,不适合作为提取DNA的材料,C错误;

蛋白质也可以采用电泳、盐析等方法纯化,D错误。

18.下列关于PCR技术叙述和微生物代谢的说法正确的是(  )。

A.PCR技术中模板母链指导的子链的延伸方向是5´

端向3´

B.PCR技术中所需要的DNA聚合酶来自微生物的提取或人工合成

C.不同微生物能生产的代谢产物不同的根本原因是基因选择性表达的结果

D.纤维素分解形成的纤维二糖是一分子葡萄糖和一分子果糖组成

PCR技术中链的延伸方向是5´

端,A正确。

PCR技术中所需要的DNA聚合酶是从耐高温的细菌Taq中分离得到的,B错误。

不同微生物能生产的代谢产物不同的根本原因是遗传物质不同,C错误。

纤维二糖分解产物为葡萄糖,故纤维二糖应该由两分子葡萄糖组成,D错误。

本题考查PCR技术和微生物代谢的相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络结构的能力。

19.19.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是

A.酵母和菜花均可作为提取DNA的材料

B.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水

C.向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物

D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝

【解析】理论上只要含有DNA的生物组织均可作为该实验的材料,因此酵母和菜花均可作为提取DNA的材料,A正确;

DNA既可溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水,B正确;

向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可使破裂细胞,释放DNA,但不会观察到玻棒上有白色絮状物,C错误;

DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝,D正确。

【考点定位】DNA的粗提取和鉴定

【名师点睛】DNA粗提取和鉴定的原理:

(1)DNA的溶解性:

DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;

DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精;

DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性;

(2)DNA的鉴定:

在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

20.在PCR扩增DNA的实验中,预计一分子DNA经过30次循环后,应该得到230个DNA分子,但是结果只有约210个DNA分子,那么不是出现该现象的原因是

A.TaqDNA聚合酶的活力不够,或活性受到抑制

C.循环次数不够

PCR扩增没有得到应有的DNA分子数,有可能是TaqDNA聚合酶活性不够或活性受抑制,可能形成的DNA少,故A正确。

本题考查DNA复制相关知识,意在考察考生对知识点的理解掌握程度。

21.下列关于PCR技术的叙述,错误的是

A.引物必须不断的加进每一次的扩增当中

B.所用的原料有dATP、dCTP、dGTP、dTTP

C.需要提供热稳定的DNA聚合酶和DNA连接酶

D.DNA高温变性的原理与蛋白质高温变性的原理不同

【解析】PCR技术需要两种不同的引物,必须不断的加进每一次的扩增当中,A正确;

PCR技术的实质是DNA的复制,原料是四种脱氧核苷酸,即所用的原料有dATP、dCTP、dGTP、dTTP,B正确;

PCR技术需要热稳定的DNA聚合酶,但是不需要DNA连接酶,C错误;

DNA高温变性的原理与蛋白质高温变性的原理不同,D正确。

22.以下方法不能达到实验目的的是

A.粗提取DNA分子时可利用不同浓度的NaCl溶液去除杂质

B.利用无水乙醇、碳酸钙和二氧化硅可分离绿叶中的色素

C.采用稀释涂布平板法接种可在固体培养基上获得单个菌落

D.制备单克隆抗体时可利用选择性培养基筛选杂交瘤细胞

DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的NaCl溶液浓度,就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,因此粗提取DNA分子时可利用不同浓度的NaCl溶液去除杂质,A项正确;

利用无水乙醇可提取绿叶中的色素、碳酸钙可防止研磨时绿叶中的色素遭到破坏、二氧化硅可使研磨充分,因此利用无水乙醇、碳酸钙和二氧化硅不能达到分离绿叶中色素的目的,B项错误;

采用稀释涂布平板法接种,可将聚集在一起的微生物分散成单个细胞,从而在固体培养基上获得单个菌落,C项正确;

制备单克隆抗体时,在人工诱导相关的动物细胞融合后,在特定的选择性培养基上只有杂交瘤细胞才能生长,从而将杂交瘤细胞筛选出来,D项正确。

本题考查DNA的粗提取与鉴定、绿叶中色素的提取和分离、微生物的培养与应用、单克隆抗体的相关知识,意在考查学生能理解相关实验的目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。

23.在DNA的粗提取和鉴定的实验中,提取鸡血细胞的核物质和析出含DNA的粘稠物的操作过程中均用到蒸馏水,其作用在于()

A.前者用来溶解血细胞,后者用来溶解DNA

B.前者使DNA从核中分离出来,后者使DNA析出

C.前者用来分离细胞核和细胞质,后者用来提取DNA

D.前者使血细胞吸水破裂,后者用来稀释NaCl溶液

【解析】在DNA粗提取的实验中,先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是使血细胞吸水涨破,释放DNA;

降低NaCl浓度,使DNA析出,故选D。

【点睛】解答本题关键要知道DNA在0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低,才能很好理解第二次加蒸馏水的作用。

24.可以利用哺乳动物成熟的红细胞为实验材料进行的实验有

A.分离各种细胞器B.DNA的粗提取

C.分离并纯化血红蛋白D.进行细胞培养

哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和众多的细胞器,不能用来分离各种细胞器,A项错误;

哺乳动物成熟的红细胞没有DNA,不能用于DNA的粗提取,B项错误;

哺乳动物成熟的红细胞含有血红蛋白,可以用来分离并纯化血红蛋白,C项正确;

哺乳动物成熟的红细胞没有分裂能力,不能制成细胞悬浮液进行细胞培养,D项错误。

本题考查哺乳动物成熟的红细胞的组成成分和结构、细胞增殖的相关知识,意在考查学生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,运用所学知识做出准确判断的能力。

25.25.下图是利用鸡血粗提取DNA的基本操作,下表中操作目的不能实现的是

【解析】向鸡血细胞液加蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破释放出DNA,A正确;

向含DNA的浓NaCl溶液加入蒸馏水,DNA溶解度降低会析出,从而去除溶于低浓度NaCl溶液中的杂质,B错误;

DNA和杂质分子在95%的冷酒精中溶解度存在差异,DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精,故可去除溶于酒精中的杂质,C正确;

DNA在2mol/LNaCl溶液溶解度高,故可去除不溶于2mol/LNaCl溶液中的杂质,D正确。

【点睛】解答本题关键能掌握该实验中使用到的各种化学物质的作用,特别要注意DNA在0.14mol·

L-1的NaCl溶液的溶解度最低,在2mol·

L-1的NaCl溶液的溶解度较高。

二、非选择题

26.稻瘟病是水稻最重要的病害之一,为达到防治目的,科研人员通过转基因技术培育出了抗稻瘟病水稻新品种。

请回答下列问题:

(1)DNA粗提取实验中,可使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出的方法有__________、__________。

(2)构建基因表达载体时,通常用不同种限制酶切割目的基因形成两个不同的黏性末端,其目的是_______。

(3)通过RT-PCR技术以抗稻瘟病基因的RNA为模板扩增出cDNA。

在PCR过程中,两个引物是__________酶的结合位点;

用cDNA单链与该抗性水稻植株的单链DNA进行分子杂交,可能出现游离的单链区,其原因是____________________。

(4)如果一个抗性基因整合到非抗性水稻的一条染色体上,得到的二倍体转基因抗性植株自交,子代中抗性与非抗性植株的数量比为_________________。

【答案】加蒸馏水使盐溶液稀释到0.14mol/L加95%冷酒精溶液后静置防止酶切产物自身环化(连接)热稳定DNA聚合酶DNA分子含有内含子、非编码区等序列,mRNA分子中没有相应互补的碱基序列;

(cDNA链和单链DNA存在没有互补配对的序列,仍然为两条游离的单链),所以出现游离的单链区3:

1

理清DNA的粗提取与鉴定的实验原理和流程、基因的结构及其基因工程操作的基本程序等相关知识,形成清晰的知识网络。

在此基础上,对各问题情境进行解答。

(1)根据DNA粗提取实验中析出DNA的原理可知,要使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出:

方法之一是加蒸馏水使盐溶液稀释到0.14mol/L,此时DNA的溶解度最低,从而沉淀

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