实验针灸学实验Word文档下载推荐.doc

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（粗细：

迷走神经—交感神经—减压神经）

要点：

①分离颈神经时用左手托起颈部，使颈部组织充分暴露。

②用止血钳、玻璃分针轻轻剥离组织，然后用四根线分别将颈总动脉、迷走神经、交感神经、减压神经作以标记。

（4）于剑突下3～4cm纵行切口，剥离空肠。

（5）于下肢股内侧纵行切口，剥离股动脉，坐骨神经。

（6）观察子宫（雌兔）。

4.处死：

于耳缘静脉注射空气，造成气体栓塞致死。

【思考题】

1.在麻醉动物时应注意哪些问题？

2.家兔耳缘静脉注射时应注意哪些问题？

实验二针刺（灸）“素髎”穴对失血性休克家兔血压的调整作用

本实验旨在通过观察针刺（灸）“素髎”穴对失血性休克家兔血压的调整作用，进而理解“素髎”穴用于急救的部分机理，并掌握动物血压测量的实验方法。

2.0～2.5kg健康家兔1只，雌雄不拘。

Digitallab生物医学信号采集处理系统、血压换能器、动脉插管、静脉套管、动脉夹、常用手术器械1套、20ml和5ml注射器、5号注射针头、艾条、兔台、量筒（100ml）、烧杯（500ml）、三通管、生理盐水、20％氨基甲酸乙酯、5％枸椽酸钠、纱布、棉球、缝线。

1.调整生理记录仪及血压换能器至正常工作状态。

动脉插管通过一段胶管（不宜过长）与血压换能器相联，换能器另一开口与三通管联结牢固。

经三通管向血压换能器压力仓及胶管和动脉插管中注人5％枸椽酸钠，勿使其中有气泡。

2.取家兔1只称重，用20％氨基甲酸乙酯溶液，按5ml／kg剂量于腹腔注射麻醉。

将家兔仰卧固定于兔台上，颈部及腹股沟部剪毛备皮。

3.分离出一侧颈总动脉，长约2.0～3.0cm，穿入双股缝线，先于远心端结扎，用动脉夹夹住动脉的近心端，用眼科剪在动脉中部剪开一小口，用注射器注入少许5％枸椽酸钠，插入动脉插管，结扎固定。

4.切开腹股沟处皮肤，切口2.0～3.0cm，分开肌肉，在股静脉下方找出较细、颜色淡红的股动脉，分离出股动脉2.0～2.5cm，穿双股结扎线，结扎其远心端，用动脉夹夹住其近心端，在其上用眼科剪剪一小口，注射入少许5％枸椽酸钠，插入动脉插管，结扎固定，以备放血。

5.为防止实验过程中凝血，在耳缘静脉注入5％枸椽酸钠适量（1ml／kg）。

约3分钟后，打开颈部动脉夹，记录一段正常血压为对照值。

兔正常血压通常在13.3kPa（100mmHg）左右。

6.待血压稳定后，迅速于股动脉处放血，使血压下降至6.6kPa（50mmHg）左右，立即停止放血，并量出其放血量，放血量约为体重的2％左右。

7.待血压稳定在某一较低水平后，针刺（灸）“素髎”穴，观察并记录血压的变化。

8.停针刺（灸）后观察血压变化情况15～20分钟。

9.比较针刺（灸）后血压变化程度及持续时间，写出实验报告。

【注意事项】

1.注射麻醉药时，前1／2量可较快注入，待动物较安静后，后1／2剂量应缓慢注入。

同时注意兔的呼吸情况，出现异常情况立即停止注射。

2.在分离颈总动脉时，小心勿损伤其附近的神经（迷走神经、交感神经及减压神经），勿损伤通向甲状腺的血管。

3.注意动脉插管与颈动脉的位置，勿使其扭转而影响血压测量。

4.气候较冷时，要有手术灯照射动物以保温。

【实验结果】

记录家兔颈动脉血压值（mmHg）

正常值：

股动脉放血后血压值：

灸后血压上升的时间及幅度：

灸5分钟后血压的变化：

分别刺激交感神经、迷走神经后血压的变化：

停灸5分钟后血压变化：

1.若欲验证针刺（灸）对失血性休克家兔血压的调整作用需注意哪些实验环节？

2.请设计一个验证穴位功能相对特异性和补泻手法效应差异性的针灸升压抗休克实验。

实验三针刺对家兔心肌缺血性心电图的影响

熟悉动物心电图描记方法，学会一种心肌缺血动物模型的复制，验证针刺“内关”穴对家兔心肌缺血的治疗作用。

2.0～2.5kg健康家兔2只，雌雄不拘。

Digitallab生物医学信号采集处理系统、20%氨基甲酸乙酯，毫针，G—6805电针，兔台，手术器械一套。

【实验方法】

1.两只家兔一只作实验兔，一只对照，分别称重。

2.将两只家兔以20%氨基甲酸已酯5ml／kg于腹腔麻醉后仰卧固定于兔台上。

3.于家兔胸骨处剪毛。

4.将黑色检测电极联于右下肢、白色检测电极联于左上肢、红色检测电极联于胸骨柄左侧1cm处。

5.将检测电极与微机连接，记录心电图（程序：

开机→输入信号→选择通道3→心电图→描记心电图，增益选择、显速、参数设置视实验情况而定）。

6.将实验家兔电针“内关”处理20分钟，于耳缘静脉注射垂体后叶素（2.5u／kg），于注射后1’、3’、5’、10’各记录数据一次，对照兔除不做针刺外，其他处理与实验兔相同。

7.比较二者心电图变化之异同。

1.垂体后叶素导致心肌缺血的特点是什么？

2.为什么“内关”穴可治疗心肌缺血？

实验四针刺对实验性肺水肿家兔呼吸状态的影响

本实验在于了解哮喘动物模型制作方法及针刺对其呼吸状态的影响。

Digitallab生物医学信号采集处理系统、兔台、手术器械1套、气管套管、5ml和1ml注射器、20%氨基甲酸乙酯、50%葡萄糖注射液、生理盐水、15mm毫针、缝线、棉球、纱布。

1.家兔称重后，按5ml／kg由耳缘静脉注入20%氨基甲酸乙酯麻醉家兔。

2.将家兔仰卧位固定于兔台上，并在颈部、剑突下剪毛备用。

3.作气管切开后插入气管插管；

剑突下切皮，连接膈肌放电测量装置（注意：

连结膈肌的针灸针互相不能接触）。

4.由呼吸和膈肌放电测量装置记录家兔呼吸运动正常值。

5.由气管沿管壁缓慢注入50%葡萄糖注射液0.5ml／kg，分别记录注入葡萄糖后即刻，5分钟，10分钟时呼吸波形，观察其呼吸频率、幅度的变化；

膈肌放电情况变化。

6.针刺家兔的足三里穴，加电针5分钟后出针。

分别记录行针时，取针后5分钟，10分钟的呼吸波形。

7.再次按半量注入50%葡萄糖注射液，记录数据变化。

针刺家兔的合谷穴，持续运针5分钟后出针。

8.对比二穴对哮喘模型的治疗效果。

实验过程中呼吸波形如接近正常状态时，可向气管内补注50%葡萄糖注射液0.5ml。

实验五针刺不同穴位对小白鼠耐缺氧时间的影响

针刺对能量代谢有明显影响。

本实验在于观察针刺对健康小白鼠耐缺氧时间的影响以及不同穴位是否存在功能相对特异性。

20克左右小白鼠9只，雌雄不拘。

50ml广口瓶9只、15mm毫针6支、秒表9只、钠石灰、胶布若干。

1.小白鼠禁食12h。

2.在广口瓶内分别装入钠石灰2g，盖上盖子备用。

3.9只小白鼠随机分为A、B、C三组，做好标记。

4.实验时，分别将每只小白鼠用胶布固定在木制实验板上，A组小白鼠针刺双侧足三里穴，B组小白鼠针刺双侧环跳穴，手法以捻转为主，平补平泻，行针5分钟后拔针。

C组为对照组，除不给予针刺外，余同针刺组。

5.将上述处理后的每只小白鼠分别装入盛有钠石灰的广口瓶内，迅速盖紧盖子，立即用秒表开始计时。

6.随时观察瓶内小白鼠情况，发现小白鼠呼吸停止，立即按下秒表，记录死亡时间。

7.从小白鼠开始装入瓶内至呼吸停止为小白鼠耐缺氧时间，比较各组小白鼠耐缺氧时间有无差异。

或将全班同学的实验结果按上述实验分组后分别整理，以对小白鼠耐缺氧时间进行统计学的显著性检验。

1.小白鼠装入瓶内后，瓶盖要塞紧，必要时用蜡烛熔化封住瓶塞四周，防止漏气。

2.钠石灰要新鲜干燥。

3.每只小白鼠体重尽量相近，差异保持在±

1g范围内。

针刺对小白鼠耐缺氧时间影响的可能机制是什么？

实验六针刺对家兔奥狄括约肌肌电的影响

胆石症是常见急腹症之一，发病率较高。

针刺“日月”、“期门”穴有明显的治疗作用，能促进胆汁分泌，调节胆囊、胆管运动和奥狄括约肌活动。

本实验以奥狄括约肌肌电活动为指标，观察针刺对其调整作用。

1.掌握奥狄括约肌肌电的记录方法。

2.观察针刺“日月”、“期门”穴对家兔奥狄括约肌肌电的调整作用并进行比较。

Digitallab生物医学信号采集处理系统、兔台、30号1寸毫针、手术器械1套、20％氨基甲酸乙酯溶液、浓盐酸、液体石蜡。

1.家兔禁食18～20小时。

2.兔称重，麻醉（20％氨基甲酸乙酯溶液5ml／kg）后，仰卧位固定于兔台上，颈部、上腹部剪毛备用。

3.做气管插管手术，接人工呼吸机。

4.在剑突下正中做8cm切口，暴露奥狄括约肌。

用直径200μm铜漆包线2根，两端分别用细砂纸刮去漆膜约lcm长，端面用剪刀剪成斜面，横向穿过奥狄括约肌表面的浆膜层，反转后套人预先套在铜线上的塑料管内，向下推动塑料管接触组织，弯曲铜线以防止脱落。

周围用消毒干棉球封盖，并滴加适量的37℃～38℃石蜡油。

术后30～40分钟开始实验。

肌电信号输人生物信号处理系统记录，定标电压1Omm／1mV，纸速1mm／s，时标为10秒。

5.标记正常奥狄括约肌肌电活动。

6.针刺“日月”、“期门”穴（手法运针，平补平泻，每秒捻转1次）5分钟，观察肌电活动变化。

1.导电极铜丝一定要处理好，两电极越近越好。

地线置于切口皮下。

2.注意防止动物挣扎导致电极脱落，一旦电极脱落，要重新安放电极，重新实验。

3.如果奥狄括约肌损伤可影响实验结果。

1.正常家兔奥狄括约肌肌电有何特点？

2.针刺“日月”、“期门”穴后家兔奥狄括约肌肌电发生哪些改变，为什么？

实验七针刺对家兔小肠蠕动的调整作用

观察针刺“足三里”对家兔小肠蠕动的调整作用。

2.0～2.5kg健康成年家兔1只，雌雄不拘。

Digitallab生物医学信号采集处理系统、张力换能器、25mm毫针4支、万能支架、竹夹、双凹夹、兔台、手术器械1套、喇叭型玻璃管、20%氨基甲酸乙酯。

1.取家兔1只，称重，耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯（5ml／kg），仰卧固定于兔台。

2.于剑突下2cm处向下切开皮肤肌肉3～4cm，暴露腹腔即可见小肠。

选取蠕动状态好的一段小肠按下法固定。

（1）在此段小肠的两端（相距2cm左右）穿线，在两端中间，用小号手术带线缝合针穿过空肠浆膜及肠壁，留线一段。

（2）取喇叭管先把小肠一端丝线穿管缘孔结扎，再把小肠另一端丝线穿管缘孔结扎。

同时将穿起空肠肠壁的留线悬于管中央，上接张力换能器。

（3）将喇叭管用木夹固定于万能支架上，调整好位置，使线垂直并避免碰在喇叭管壁上，保持一定紧张度。

（4）用纱布覆盖局部，同时用侧灯照射以保持体温。

3.打开记录仪，记录正常肠蠕动曲线。

待记录曲线较稳定后，进行下步实验。

4.针刺双侧“足三里”穴，直刺1.5～2.5mm。

加电针，强度以下肢微动为度，留针10分钟后，记录肠蠕动曲线。

5.停针10分钟。

6.针刺双侧“合谷”穴，直刺2.5～3.0mm，强度以上肢微动为度，留针10分钟，记录肠蠕动曲线。

波型

幅度

频度

正常值

针刺“足三里”穴值

针刺“合谷”穴值

影响针灸对小肠蠕动调整作用的因素是什么？

还有哪些穴位可调节，如何设计实验？

实验八艾灸“至阴”穴对兔子宫收缩的影响

艾灸“至阴”穴可矫正胎位，这在历代针灸文献中均有记载。

本实验旨在观察艾灸“至阴”穴对家兔子宫活动的影响。

2.0～2.5kg健康成年雌性家兔1只。

【实验器材】

Digitallab生物医学信号采集处理系统、手术器械1套（刀、剪、止血钳大小各2、缝合针（圆针、皮针个1）、缝扎线、纱布线）、兔台、艾条、火柴、侧灯、20%氨基甲酸乙酯、10毫升注射器、生理盐水。

【实验方法及步骤】

1.将雌兔以20%氨基甲酸乙酯按5ml／kg于耳缘静脉注射、麻醉，并仰卧位固定于兔台上，于下腹部备皮。

2.从耻骨联合上沿正中向上做下腹正中切口长约3～5cm，逐层切开打开腹腔（有出血点时应及时止血结扎之），在膀胱后上可见羊角状子宫（双角子宫），找到一侧子宫角，分离周围组织使之游离，在子宫角的阴道端和卵巢端穿线，并在此段子宫体中央穿一缝扎线，将此线与张力传感器相连。

为防止开腹后温度和水分丧失，可用温盐水纱布覆盖切口周围，并用侧灯适当照射以保温。

3.调试三道生理记录仪及传感装置，记录正常状态下的子宫收缩活动曲线。

4.艾灸“至阴”穴（用清艾条点燃后，正对穴位，距皮肤1.5～2.0cm，双侧同时施灸20～30分钟，观察记录其子宫收缩活动有无变化。

对各种不同处理引起子宫收缩变化及其差异的原因、临床实用价值进行探讨分析。

实验九针刺得气时的穴位肌电变化

学会一种肌电引导记录方法，并通过观察针刺得气时的穴位肌电变化与施针者的手下感觉的关系探讨得气的组织学和生理学定义。

健康人（同学间互测）。

示波器或JD-2型肌电图机、电极板、消毒针灸针（针刺涂绝缘漆）、酒精棉球、生理盐水、触压角计、检查床、血压计。

1.受试者安静、仰卧于检查床上，要求体位舒适持久，全身尽量放松。

2.测量血压，测后将气带暂留上臂备用。

3.调试记录装置及准备记录。

（1）将仪器组装连接，并进行调试。

（2）开启电源，预热3～5分钟后调节总灵敏度在20μV／cm，放大器时间常数为0.035左右，示波器扫描速度为0.7s／cm；

标准电压调至50μV／cm。

4.用酒精棉球消毒合谷、阳溪、三阴交部皮肤，将垫有生理盐水棉球的电极板置于三阴交穴部固定并与放大输入的接地相连，无关电极接放大输入的正极并与刺入阳溪穴的针灸针体相连，放大输入的负极与准备刺入合谷穴的针灸针体相连。

5.针合谷，行针催气并细心体会手下感觉强弱，待有手感时（记住强、中、弱程度），将手放开立即记录肌电，并观察其幅度大小（肌电幅度有：

强者≥50μV，小者＜50μ），有无及其密集程度和持续时间。

比较手感强弱与肌电幅度大小及有无是否呈现一致关系。

6.再次行针，比较手下感最强时和手下感最弱时的肌电差异。

并与受试者得气感的强弱进行对照比较（受试者主述针感强弱差异）。

7.找到针下手感最强、肌电发放最明显的部位后，给止血带充气至超过肱动脉压40mmHg以上阻断血流后，每2分钟再行针1次，观察手感和肌电变化及触压觉变化，直至肌电活动停止。

比较触压觉和穴位肌电消失的时间。

1.针刺得气时术者手下感觉强弱有无与穴位下肌电幅度大小、密集程度和持续时间之间有无一致关系？

2.得气的组织学和生理学含义是什么？

3.阻断血流后，从触压角和肌电与针下手感消失时间的先后说明了什么问题？

实验十针刺抗惊厥作用

针刺对惊厥具有良好的缓解作用。

本实验以小白鼠惊厥程度、次数、持续总时间及死亡时间为指标，观察针刺小白鼠水沟穴对胰岛素过量而致惊厥的缓解效应及针刺的急救效果。

20～22克同性别的健康小白鼠9只。

天平、秒表6只、1ml和2ml注射器、5号针头2个、50ml烧杯2个、25mm毫针4支、40u／ml胰岛素注射液、生理盐水（pH调至2.5～3.5）、胶布若干。

1.小白鼠禁食14～16h（不禁水）。

2.取40u／ml胰岛素注射液1ml，用pH2.5～3.5的酸性生理盐水配制成4u／ml胰岛素注射液10ml备用。

3.取小白鼠9只，称重，编号，随机分成针刺组2组与对照组一组，每组3只。

4.按1u／10g比例给小白鼠腹腔注射胰岛素，注射时要掌握好进针的位置、角度、深度，注意避开肝、脾、膀胱。

回抽无血及液体时再注射，注射后轻揉小鼠腹部促进吸收。

继而观察小白鼠活动情况。

5.当小白鼠发生惊厥时，迅速取出该小鼠，予以针刺“水沟”、“足三里”穴，平补平泻（以捻转手法为主，手法轻柔）。

行针3分钟后出针，观察并记录小鼠惊厥程度、次数、惊厥持续总时间及死亡时间。

6.惊厥程度评价标准

（1）强阳性：

角弓反张，四肢伸直和抽搐反应强烈者，或身体呈直线性滚动者，以（++）表示。

（2）弱阳性：

轻微的角弓反张，或伴有四肢伸直，或伴有四肢抽搐者，以（＋）表示。

（3）阴性：

无角弓反张，仅表现为四肢伸直，或四肢微微抽动者，以（－）表示。

7.对照组除不针刺外，其他同针刺组。

实验过程中避免各种因素对小白鼠的刺激，以尽量减少实验误差。

针刺抗惊厥作用的可能机制是什么？

实验十一针刺退热作用

电针家兔大椎穴以观察针刺对实验性发热的退热效应。

健康成年家兔2只，性别、体重均相同。

肛温计2支、兔台2个、脱脂牛乳若干，5ml注射器2支、注射用针头2个、G-6805治疗仪2台、25mm毫针4支、凡士林适量、胶布若干。

1.称重。

2.兔耳缘静脉麻醉。

3.将家兔仰卧固定于兔台上。

4.反复测肛温3次（记录均值），每次间隔2分钟，描记温度曲线。

5.于耳缘静脉注射脱脂牛乳1.3ml／kg。

6.15分钟后反复测肛温3次，每次间隔2分钟，描记温度曲线。

7.30分钟后电针刺激1只家兔“大椎”穴、“合谷”穴5分钟。

8.再测肛温3次，每次间隔2分钟，描记温度曲线。

9.将针刺组与非针刺组肛温曲线进行比较。

实验十二针刺镇痛实验

学会一种痛阈测定方法，练习痛阈测定仪的使用，验证针刺镇痛作用。

健康人群（同学间互测）。

痛阈测定仪、生理多用仪（或G-6805治疗机）、针灸针、饱和KCl溶液、生理盐水、棉球、检查床等。

1.受试者安静平卧，将痛阈测定仪调试到5mA量程测试档，并将其阳极（K+刺激点）固定于耳垂部，参考电极握于受试者左手，并瞩其感到痛时关闭手控开关。

2.先将痛阈测定仪开到小阶梯档，然后打开刺激开关，于是测定仪的电流强度开始逐步升级，至受试者觉痛，关闭手控开关时，指针即停于此位置，这时指针指示的电流强度即是引起疼痛的电流强度阈值，也即基础痛阈。

记录数值后，关闭刺激开关，于是电流指示回到零位。

又可进行下次测定。

如是测3次，取其均值为基础痛阈。

（注意：

受试者必须在刚感觉刺痛时关闭手控开关，而且每次关闭手控开关时的痛感觉程度尽可能相同；

受试者打开手控开关后才能进行下次测定，但操纵机器的人不可让受试者知道打开刺激开关的时机，以防条件反射干扰）

3.针合谷（双侧）得气后行针，留针30分钟，加G-6805电针仪刺激。

4.于针刺开始后20分钟，30分钟各测3次痛阈（间隔2分钟），取均值，与针前进行比较。

对全班或全组15个受试者在针刺前后之痛阈变化进行统计学处理，比较其差异性，并对本实验结果进行讨论分析，对针刺镇痛效果的作用机理及影响因素进行讨论。

实验十三针麻下动物阑尾切除术实验

了解针麻基本方法、步骤和取穴规律，掌握针麻下动物阑尾切除术的实验方法。