执业药师考试药物分析讲义Word格式文档下载.docx
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4.办法验证
药物检查基本程序
取样：
3件、300件、三公式、3次用
性状、鉴别、检查、含量测定
记录和报告
记录与报告内容：
检核对象、检查根据、检查项目与办法、数据、成果和结论、检查人（复核人）、负责人
原则：
真实、完整、简要、详细、清晰
涂改方式
计量器具使用与校正
计量器具：
分析天平、紫外与红外分光光度计、pH计、旋光计、
容量瓶、滴定管和移液管
分析天平
用途：
含量测定、对照品、滴定液标定等“精密称定”
感量：
0.1mg0.01mg，0.001mg
选用：
不同称量范畴选用不同感量天平（原理与例子）
校正项目
办法
旋光计
精确度
原则石英旋光管
pH计
精确度（定位、斜率）
两种原则缓冲液
紫外-可见分光光度计
波长、吸光度、杂散光
汞灯、氘灯波长用；
重铬酸钾吸光度；
杂散光需用二钠盐：
碘化钠、亚硝酸钠
红外分光光度计
波数、辨别率
聚苯乙烯薄膜
玻璃仪器校正
原理：
V=W/d
容量瓶：
允差为1/1000，校正时，瓶内干净、干燥、不挂水珠
移液管：
100ml允差：
1/1000；
25ml：
2/1000
滴定管：
分段校正；
允差：
10ml如下2/1000，20ml以上1/1000
数据解决
误差概念
绝对误差和相对误差
系统误差与偶尔误差
系统误差特点：
方向、大小固定，重复浮现，来自办法、试剂、操作、仪器；
消除因素可消除
偶尔误差特点：
方向、大小不固定，大误差概率小，小误差概率大，正负误差几率相等；
重复测定平均可减少
有效数字（所有计量数据）
精确数字+最后一位不精确数
位数
修约：
四舍六入五留双
运算法则：
加减传递绝对误差；
乘除传递相对误差（例子）
分析办法验证
验证内容：
精确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范畴和耐用性
精确度：
回收率（%）及其公式
精密度：
同一均匀样品，偏差或原则偏差（SD）或相对原则偏差（RSD）及其公式；
精密度与精确度关系
精密度评估三层次：
重复性（同一人多次）、中间精密度（同实验室不同人多次）、重现性（不同实验室不同人）
专属性
检测限：
能检出最低浓度或量
目视法
信噪比法S/N
定量限：
能准拟定量最低浓度或量
信噪比10/1
线性:
测定成果与样品浓度正比关系
最小二乘法回归，有关系数r
范畴：
在达到精确度、精密度和线性规定下，合用高低限浓度区间
耐用性：
测定条件变动对办法成果影响限度
分析办法
定性分析（如鉴别）：
检测限、专属性、耐用性
定量分析
常量定量：
精确度、精密度、线性、范畴、专属性、耐用性
微量定量：
精确度、精密度、定量限、线性、范畴、专属性、耐用性
附表 检查项目和验证内容
鉴别
杂质测定
含量测定及溶出量测定
定量
限度
精密度
重复性
中间精密度
专属性
检测限
定量限
线性
范畴
耐用性
－
＋
第三章 物理常数测定法
物理常数测定意义
物理常数：
熔点、凝点、相对密度、比旋度、黏度、碘值、皂化值、酸值、吸取系数、馏程、折光率（二点三度三值一数一馏率）
本章内容：
熔点、旋光度和pH值
熔点测定法
熔点、熔程、初熔、全熔、熔融同步分解
测定法：
三法
考试要素：
105℃或五氧化二磷干燥；
3mm，2.5cm，样品于汞球中部，升温速率，重复三次平均；
b形管；
通过校正0.5℃刻度分浸型温度计；
内径0.9-1.1mm，壁厚0.1mm中性硬质玻璃毛细管；
传温液
旋光度测定法：
平面偏振光，顺右逆左
比旋度概念
应用：
鉴别、检查、含量测定，记住测定比旋度或用旋光法进行检查和含量测定药物
测试办法：
0.01°
，无气泡澄清溶液，溶剂空白校正，中华人民共和国药典20℃、钠光谱D线（589.3nm）
pH值测定
氢离子活度负对数
pH值测定系统（原电池）：
批示电极、参比电极、待测液
测定办法
原则缓冲溶液选取
定位和斜率调节
高pH值碱误差：
锂玻璃电极
新沸放冷纯化水、电极清洗
第二某些分析办法
第四章 滴定分析法
原则液（滴定液）（A）
待测物（B）+批示剂
A+B=C
滴定分析概念：
滴定液与待测物定量反映；
批示剂
滴定特点：
精确可靠，简便迅速，原料药分析首选
滴定类型及其原理
批示剂选用及终点现象
滴定液配制与标定（基准物、有特点办法）
应用
酸碱滴定
类型
原理特点
滴定剂
应用
强酸、强碱滴定
突越大，计量点为7
0.05mol/L硫酸、0.1mol/L盐酸、氢氧化钠
酚酞、甲基红、甲基橙
滴定液标定
强酸滴定弱碱
CKb≥10-8；
突越在酸侧，计量点为5.27
0.05mol/L硫酸、0.1mol/L盐酸
甲基红、甲基橙
弱碱性药物
强碱滴定弱酸
CKa≥10-8；
突越在碱侧，计量点为8.73
0.1mol/LNaOH
酚酞
弱酸性药物
非水滴定
非水碱量法：
Kb≥10-10冰醋酸或醋酐为溶剂；
非水酸量法：
乙二胺或二甲基甲酰胺为溶剂
0.1mol/LHClO4
0.1mol/LNaOCH3
碱量法：
电位法或结晶紫；
酸量法：
麝香草酚蓝、溴酚蓝
弱碱性药物、有机碱无机酸盐、有机碱有机酸盐、有机酸碱金属盐
滴定剂标定
配制要点
基准物
标定要点
0.1mol/L盐酸、硫酸
基准无水碳酸钠
甲基红-溴甲酚绿
270-300℃干燥基准物除去水和碳酸氢钠；
紫红色时煮沸2min，除去CO2；
暗紫色终点
0.1mol/L氢氧化钠
饱和氢氧化钠溶液去除碳酸钠；
新沸过冷水去除水中CO2
邻苯二甲酸氢钾
105℃干燥基准物；
粉红色终点
0.1mol/L高氯酸
无水冰醋酸溶剂，醋酐除去冰醋酸和高氯酸中水分
结晶紫
蓝色终点，空白实验校正
0.1mol/L甲醇钠
无水甲醇、金属钠，无水苯
基准苯甲酸
麝香草酚蓝
五氧化二磷干燥至恒重，蓝色终点
标定计算公式
氧化还原滴定
注意事项与应用
碘量法
1.直接、剩余碘量法：
以碘作氧化剂，滴定还原性物质；
2.置换碘量法：
以碘化钾作还原剂，滴定氧化性物质
1.直接碘量法：
0.05mol/LI2；
2.剩余碘量法：
0.1mol/L硫代硫酸钠、碘滴定液
3.置换碘量法：
0.1mol/L硫代硫酸钠
淀粉批示液2-10ml；
直接法直接加入；
剩余和置换法近终点加入，直接法变蓝，间接法蓝消失
1.酸性至弱碱性溶液中滴定；
2.剩余法和置换法碘瓶中进行
3.VC、咖啡因、硫代硫酸钠标定
亚硝酸钠法
芳伯氨基重氮化
0.1mol/L亚硝酸钠滴定液
永停法、內批示剂、外批示剂
1.溴化钾加快反映，多用盐酸；
2.液面下2/3，先快后慢；
3.电流指针不再回零；
4.磺胺类药物含测
铈量法
酸性条件下测定还原性物质
0.1mol/L硫酸铈滴定液
邻二氮菲，红变蓝
亚铁类药物，不受淀粉等糖类干扰；
生育酚检查；
硝苯地平含量测定
0.05mol/L碘滴定液
碘+碘化钾+盐酸：
增长溶解度，去除碘酸盐，防止自身氧化还原
淀粉，近终点加入，至蓝色消失
用已标定硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）标定
硫代硫酸钠+无水碳酸钠+新沸过冷水：
抑制细菌，防止分解除去水中二氧化碳和氧气
120℃干燥恒重基准重铬酸钾
淀粉3ml，蓝色消失呈亮绿色
碘化钾，碘瓶，暗处放置10min，1mol硫代硫酸钠相称于1/2mol碘，相称于1/6重铬酸钾
0.1mol/L硫酸铈
硫酸铈+硫酸
105℃干燥恒重基准三氧化二砷
邻二氮菲
红色变淡绿色；
一氯化碘催化，氢氧化钠促溶解，盐酸滴定液中和
0.1mol/L亚硝酸钠
亚硝酸钠+无水碳酸钠
120℃干燥恒重基准对氨基苯磺酸
永停批示法
溴化钾，温度，液面下2/3，先快后慢
第五章 分光光度法
紫外-可见分光光度法、红外分光光度法，掌握：
1.原理
2.仪器基本构造
3.应用
紫外-可见分光光度法
原理
价电子能级跃迁，200-760nm光吸取
定量：
单色光，
比吸取系数、摩尔吸取系数，A值范畴0.3-0.7
仪器构造
光源：
氢灯、氘灯和钨灯
单色器：
光栅+狭缝
吸取池：
玻璃、石英
检测器：
光电倍增管
二极管阵列（同一时间得到全波长光谱）
规定
1.溶剂：
溶解药物、不挥发、无化学作用、吸光度符合规定
2.空白对照：
溶剂
3.测定波长：
偏差不大于±
2nm
4.供试液浓度：
使A值在0.3-0.7
5.狭缝宽度（保证单色光和敏捷度）：
狭缝再小，吸光度不再大
类型
1.鉴别：
核对光谱特性参数（
）
比较光谱、比较A比值
2.杂质检查：
如肾上腺素酮体检查
3.含量测定：
对照品比较法
吸取系数法
计算分光光度法
比色法
红外分光光度法
分子振动、转动能级跃迁，偶极矩大峰强度大，4000-400cm-1
能斯特灯和硅碳棒
气、液、固均可，固体为KBr、氯化钾压片或糊法、薄膜；
液体溶剂为CHCl3或CS2，盐片有：
KBr、氯化钾、氯化钠盐片
光栅或尼克尔干涉仪
真空热电偶、高来池
红外吸取与构造关系
官能团区4000-1300cm-1与指纹区1300-400cm-1及其特点
重要官能团吸取特性
官能团
振动形式
峰位
O-H，N-H
νOHνNH
3750-3000强
≡C-H，=C-H，Ar-H
ν≡CHν=CHνAr
3300-3000弱
-C-H
ν-CH
3000-2700
C=O
νC=O
1900-1650
C=C，C=N
νC=C
1650-1500
C-O
νC-O
1300-1000
药物红外光谱集
甲苯咪唑低效晶型
第六章 色谱法
色谱概念与分析特点
色谱理论
色谱分类
色谱仪器基本构造（检测器）
色谱分析应用
色谱基本知识
1.色谱分析特点：
高敏捷度、高效能、高选取性、迅速度
2.色谱峰三参数：
峰面积（定量）、峰位（定性）、峰宽（柱效）
分派系数、容量因子：
k=K×
（Vs/Vm）=（Cs/Cm）×
（Vs/Vm）；
容量因子差别是色谱分离先决条件；
分派系数差别是物质分离前提。
两个理论
速率理论：
涡流扩散（小粒度均匀颗粒匀浆装柱）；
传质阻抗（小粒度、低粘度、恰当高温）；
纵向扩散（限气相色谱）
塔板理论：
n=5.54（tR/Wh/2）2
H=L/n
色谱分离原理分类
吸附色谱：
如薄层色谱
分派色谱：
固定相为液体液相、气相色谱，最普遍
离子互换色谱：
离子型物质分离
分子排阻色谱：
大分子物质可运用分子大小不同而分离
薄层色谱
运用A、B两种物质KA≠KB而分离
固定相：
硅胶（活化、G、H、F254）、硅藻土、氧化铝、纤维素等
薄层板制备：
1份固定相+3份水，同一方向研磨
点样：
距底边2.0cm，样点直径2-4mm；
检视：
显色、荧光
色谱系统合用性：
敏捷度、比移值、分离度
比较Rf值与否一致
杂质检查：
杂质对照法、自身稀释对照法
高效液相色谱法
分派色谱、分子排阻色谱、离子互换…
分派色谱分类：
反相色谱（流动相极性不不大于固定相；
极性强先出柱；
分离非极性和中档极性有机分子；
固定相多为C18（ODS）和C8柱；
流动相多为甲醇-水或乙腈-水；
最广泛）；
正相色谱（流动相极性不大于固定相；
极性弱先出柱；
分离极性和中档极性有机分子）
高压泵
色谱柱（固定相：
C18烷基键合硅胶，流动相：
甲醇-水或乙腈-水）
进样阀
检测器
浓度型：
紫外检测器、光电二极管阵列检测器、荧光检测器、电化学检测器、质谱检测器
质量型：
蒸发光散射检测器、示差折光检测器
色谱系统合用性
四参数：
理论板数、分离度、重复性和拖尾因子
理论板数、分离度（R＞1.5）、重复性（RSD≤2.0%）、拖尾因子（0.95-1.05）计算公式
原则色谱分析办法中固定因素：
固定相种类、流动相构成、检测器类型
比较tR
2.杂质检查
内标法（公式）
外标法（公式）
加校正因子（需有杂质对照品）和不加校正因子主成分自身对照
面积归一化
3.含量测定
内标法
外标法
气相色谱法
分派色谱，分离热稳定蒸汽压大物质
气源：
氮、氦、氢
进样：
顶空进样、直接进样
色谱柱：
填充柱和毛细管柱（开管型（涂壁WCOT或涂层SCOT）；
填充型）;
SCOT应用最多；
色谱柱用前需老化
固定液与载体
固定液：
烃类（角鲨烷，非极性）、硅氧烷（弱极性，应用最广）、醇类（氢键型，聚乙二醇，药物分析惯用）
载体：
硅藻土、多孔微球
火焰离子化检测器（FID）、电子捕获检测器（ECD，用于含卤素、硫、氧、等电负性强基团）、质谱检测器（MS）、热导检测器（TCD）
应用（同液相色谱）
原则加入法（消除样本基质影响）
面积归一化法
电泳法
带电荷物质在电场下趟度差别而分离
影响因素：
pH值和离子强度（缓冲液）、电场强度、样品浓度1%
类型：
平板电泳、毛细管电泳
肝素钠乳膏鉴别：
琼脂糖凝胶电泳
分子量测定：
注射用重组人促红素:
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
纯度检查：
冻干人血白蛋白纯度：
醋酸纤维素薄膜电泳；
肉毒抗毒素纯度：
等电点测定：
注射用重组人白介素-2等电点：
等电聚胶电泳
分子组分比测定：
尿激酶分子组分比：
第七章 体内药物分析
体内样品种类
血液：
血浆、血清、全血制备与存储
尿液：
药物代谢物
随时尿、晨尿、白天尿、夜间尿及时间尿
唾液：
游离药物浓度
体内样品解决
血浆或血清除蛋白
1.蛋白沉淀法：
有机溶剂（甲醇、乙腈、丙酮）、强酸（三氯醋酸、高氯酸）、无机盐（硫酸钠、镁盐）
2.蛋白分解法
缀合物水解（代谢物分析）
1.酸水解：
盐酸或磷酸
2.酶水解：
葡糖醛酸苷酶或硫酸酯酶
纯化和浓集
液液萃取：
与水不相溶有机溶剂：
三氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷；
水相pH（pKa差别3pH）；
固相萃取：
活化（先甲醇后水）、加样、洗涤（低比例甲醇水）、洗脱（高比例甲醇水）
测定
免疫分析和色谱分析
第八章 药物杂质检查
杂质来源
杂质分类
杂质限量概念、计算（例子）
常用普通杂质检查
杂质来源：
依法生产和贮存；
原料、中间体、副产物、溶剂、试剂、来自于器皿管道金属、水解氧化异构化晶型变化
杂质分类：
普通杂质、特殊杂质
杂质限量：
概念、计算（例子）
普通杂质检查
氯化物
硝酸条件下，氯化钠对照，硝酸银，生成氯化银，检查Cl-
稀硝酸、硝酸银、原则氯化钠0.01mg/ml，暗处放置5min，黑色背景下观测白色沉淀
注解：
每50ml中含50-80μgCl为宜；
硝酸避免碳酸银、磷酸银等干扰；
不澄清可过滤，滤纸先用硝酸洗净Cl-；
供试液如有色，采用内消色法；
高锰酸钾加乙醇褪色。
硫酸盐
盐酸条件下，硫酸钾对照，氯化钡，生成硫酸钡，检查SO42-
稀盐酸、25%氯化钡、原则硫酸钾100μg/ml，黑色背景下观测白色沉淀
每50ml中0.1-0.5mgSO42-为宜；
盐酸作用：
避免碳酸钡、磷酸钡等干扰；
供试液不澄清可过滤，滤纸先用盐酸洗净硫酸盐；
供试液如有色，采用内消色法。
铁盐（硫氰酸盐法）
盐酸条件下，硫酸铁铵对照，硫氰酸铵，生成硫氰酸铁，检查Fe3+、Fe2+
稀盐酸、过硫酸铵、硫氰酸铵溶液、原则铁溶液10μg/ml，比较颜色深浅
每50ml中含10-50μgFe3+最佳色泽梯度；
避免Fe3+水解；
过硫酸铵可氧Fe2+成Fe3+，防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。
供试液如有色，采用正丁醇或异戊醇，取醇层比色。
重金属
概念与原理：
与硫代乙酰胺或硫化钠显色一类金属总称；
限度用铅离子表达。
三个
硫代乙酰胺法：
pH3-3.5醋酸盐缓冲液中，甲、乙、丙三管，甲为对照，乙为供试液，丙为对照+供试液，则：
乙＜甲≤丙为合格；
原则液为硝酸铅，10μg/mlPb，原则铅溶液1-2ml。
甲＞丙，则第二法。
炽灼后硫代乙酰胺法：
用于难溶、易于重金属离子形成配位化合物有机药物；
炽灼温度500-600℃
硫化钠法：
用于只溶解于碱性水溶液药物，如磺胺、巴比妥类；
硫化钠显色剂。
砷盐：
两个办法
古蔡氏法
砷盐与氢生成砷化氢，遇溴化汞，生成黄色至棕色砷斑
1.盐酸+Zn+碘化钾+酸性氯化亚锡；
醋酸铅棉花60-80mm/60mg；
溴化汞试纸；
2.原则砷溶液：
三氧化二砷配储备液，临用稀释（1μg/ml），用量：
2ml
二乙基二硫代氨基甲酸银法
显色：
砷化氢与Ag（DDC）成红色胶态银；
目视或510nm处检测
碘化钾与酸性氯化亚锡作用：
五价砷至三价
干燥失重：
水分或有机溶剂
常压干燥
常压恒温干燥：
恒重扁称量瓶，细粉，厚度
常压室温干燥：
不耐热药物；
硅胶、硫酸和五氧化二磷
减压干燥
减压恒温干燥：
熔点低、热不稳定药物，水分难除
减压室温干燥：
熔点低，不能加热药物
热重分析：
瓷坩埚、微量分析天平；
结晶水测定、贵重药物或空气易被氧化药物
炽灼残渣
有机药物无机金属氧化物或盐等杂质
恒重坩埚，硫酸，700-800℃炽灼
易炭化物
遇硫酸易炭化或氧化微量有机杂质
硫酸，原则比色液比较
残留溶剂
有机溶剂分类：
四类（一类：
苯、四氯化碳；
二类：
乙腈、甲醇、三氯甲烷）
气相色谱法
极性聚乙二醇类；
中档极性硅氧烷类
载气：
氮气
FID，ECD
理论板数（填充柱不低于1000）、分离度（不不大于1.5）
溶液颜色
办法
与原则比色液比较：
重铬酸钾、氯化钴、硫酸铜，五种色调储备液，10个色号原则比色液
分光光度法
色差计法（目视法不易鉴别时）
澄清度
注射剂原料不溶性杂质
浊度原则液：
硫酸肼+乌洛托品；
伞棚灯；
1000lx水平观测。
典型药物分析
药物分析考试重点：
50%
复习办法
熟悉药物所在章节，有助于回忆起其内容
药物构性关系是分析办法基本
在药物，注意有特点鉴别、检查和含量测定各项中反映（项目）名称、试剂、办法和现象归纳、比较和总结
重点是普通性规律、特色项目（如药物专属反映）（办法）总结
第九章 芳酸及其酯类药物分析
本章药物及特点
阿司匹林：
酯、酚羟基、羧基、苯环
布洛芬：
羧基、苯环
丙磺舒：
卞酸基
鉴别
阿司匹林原料
三氯化铁反映（酚羟基）：
煮沸+三氯化铁试液—紫堇色
水解反映：
碳酸钠+煮沸+稀硫酸—白色沉淀+醋酸臭气
红外：
-OH，C=O，C-O，C=C
丙磺舒
三氯化铁反映（芳酸）：
中性溶液，三氯化铁—米黄色沉淀
杂质检查
阿司匹林
溶液澄清度：
碳酸钠试液，应澄清，控制无羧基杂质（苯酚
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